柚(Citrus grandis Osbeck cv.)MADS box基因的表达分析

以De novo转录组学方法分析柚(Citrus grandis Osbeck cv.)MADS box基因家族的基因.以特早熟龙柚(变异型)和琯溪蜜柚(参照型)嫩果(不超过5天)和新叶为材料,经过RNA提取、反转录、测序、组装得到Unigene序列.Unigene序列在Nr、Swiss-Prot、KEGG和COG四大数据库中进行比对,获得MADS box转录因子家族基因注释结果.采用数字基因表达标签(digital gene expression tag,DGE)技术,对样本中基因转录丰度以RPKM值表示,比较处理组和对照组的RPKM值,以倍性变化≥2确定差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs).从特早熟龙柚和琯溪蜜柚嫩果和叶片中,总共注释到28个MADS box基因家族基因.在龙柚嫩果(FE)和蜜柚嫩果(FL)中表达的有25个,其中有6个属于差异表达基因.在龙柚叶片(LE)和蜜柚叶片(LL)中表达的有27个,其中有7个属于差异表达基因.注释到的28个MADS box基因家族基因在克莱门特柚(Citrus clementina)和中国甜橙(Citrus sinensis)报道过的分别有18个和20个,其中有5个基因既在中国甜橙和克莱门特柚都没有报道过,也没有发现在其它Citrus物种报道过.

龙安柚果皮果胶超声波辅助复合酶法提取工艺优化

以龙安柚果皮为原料,采用超声波辅助复合酶法提取果胶,在单因素试验基础上利用Plackett-Burman试验设计筛选影响果胶得率的关键因素,再采用Box-Behnken试验设计对果胶提取工艺进行优化。结果表明,在料液比、提取液pH值、复合酶比例、酶解温度、酶解时间、超声功率、超声提取温度、超声提取时间等8个因素中,影响果胶得率的关键因素为提取液pH值、酶解时间、超声功率和超声提取温度,且影响程度为超声提取温度>超声功率>酶解时间>提取液pH值。优化最佳提取工艺为料液比[m_(干柚皮粉)(g)∶V_(蒸馏水)(mL)]1∶40、提取液pH值5.0、复合酶(酶添加总量为柚皮粉质量的2%,m_(纤维素酶)∶m_(木瓜蛋白酶))比例1∶3、酶解温度50℃、酶解时间59 min、超声功率70 W、超声提取温度51℃、超声提取时间30 min,果胶得率平均值为27.43%。

不同施肥方式对龙安柚养分吸收·果实品质的影响

以广安区龙安乡文林村的龙安柚为研究对象,设置无肥区(CK)、常规施肥区(T_(1))、有机肥+无机肥区(T_(2))3种处理,通过对比其收获期叶片、果实矿质养分与品质指标,研究有机无机肥配施对龙安柚养分吸收、果实品质的影响,利用主成分分析法对其进行综合评价。结果表明,对比T_(1),T_(2)能显著提高叶片铁含量与果实钾含量;对比T_(1),T_(2)可能通过调控叶片对钙、铜、锰、锌的吸收来提升果实蔗糖、葡萄糖、果糖的累积以保障果实品质;综合分析发现,还原糖、葡萄糖和果糖为影响龙安柚品质的主要因素,T_(2)较T_(1)的综合得分更高,有机无机肥配施更有利于龙安柚品质提升。

树形对龙安柚叶片生理状况及果实品质的影响

以自然圆头形、开心形和Y字形的5年生龙安柚为试材,测定了营养枝和结果枝叶片的水分、营养元素的质量分数和光合特性等生理指标及果实品质,并分析了各项生理指标与果实品质的相关性.结果表明:(1)3种树形营养枝叶片的干物质的质量分数、叶面积、水分利用效率和净光合速率均高于结果枝,且3种树形的这几项指标从大到小的顺序为:Y字形、开心形、自然圆头形.而且自然圆头形的蒸腾速率最大,为3.18 mmol/m^2·s.(2)开心形叶片的大量元素(N,P,Ca,Mg)的质量分数较其他两种树形高,且均表现为营养枝高于结果枝,其中营养枝叶片N,P,Ca,Mg的质量分数分别为2.45%,0.11%,6.54%,0.40%;Y字形和圆头形叶片微量元素(Fe,Mn,Zn,Cu,B)的质量分数高于开心形,其中Mn,Cu的质量分数为营养枝显著高于结果枝,但Fe,Zn,B的质量分数为营养枝显著低于结果枝.(3)Y字形和开心形的果实色泽、单果质量和果形指数均优于自然圆头形,其中开心形单果质量是自然圆头形的1.12倍;Y字形可溶性固形物的质量分数(10.33%)、Vc质量比(0.618 mg/g)、还原糖的质量分数(3.81%)、固酸比(16.78%)、糖酸比(13.54%)均显著高于其他树形,而可滴定酸、转化糖、蔗糖和总糖的质量分数差异不具有统计学意义.(4)营养枝、结果枝叶片的含水量、叶片干物质质量比、光合特性、营养元素的质量分数对果实品质均有影响,其中营养枝和结果枝的净光合速率与可溶性固形物的质量分数、Vc质量比、总糖的质量分数、固酸比、糖酸比均呈正相关.

不同施肥处理对龙安柚果实产量和品质的影响

测定12年生龙安柚果实产量、单果重、果实色泽、果实硬度和内在品质等,进行果实色泽与内在品质间的相关性分析,探讨施肥处理对龙安柚产量和品质的影响,以期为在龙安柚生产栽培中施肥管理提供理论依据。结果表明:(1)2017年,T1、T2和T3单株产量分别比2016年增加了60.10%、19.11%、46.17%,而T4比2016年降低了30.38%。T2单株产量2年均最高(95.40、113.63 kg/株)。说明施肥处理对单株产量有显著影响,其中T2效果显著。(2)施肥处理对果皮色泽的影响不显著,但显著影响了果肉色泽。各施肥处理的果肉颜色为橙红色,其中T2的颜色较其他深,而CK的果肉颜色为黄绿色。(3)施肥显著影响了龙安柚果实的果皮、囊瓣、果肉硬度,其中T2上、下层果实硬度均较大。(4)内在品质转化糖、总糖、糖酸比、Vc含量均是T2上层果实中最高,T3中可溶性固形物(13.07%、13.07%)、固酸比是最高的,且两者中可滴定酸含量较低,说明T2、T3有利于改善果实内在品质。(5)根据果实色泽与果实品质相关性分析发现,果实色泽各指标均与果肉糖含量关系密切,说明果肉糖含量可能影响了果实色泽。

龙安柚果实矿质元素含量的季节变化

研究了广安市龙安柚(Citrus grandis var longanyou)果实(果肉)矿质元素含量的季节变化,并对各元素与糖含量的关系进行了分析。结果表明:在幼果期,果实对元素有一个吸收高峰,之后,随着果实的膨大,由于稀释作用,元素含量开始下降,铁元素含量在七月以后一直呈上升趋势,钙元素含量先降后升。多元相关分析表明,元素间存在着复杂的互作关系,铁和铜与糖含量成正相关,其它元素与糖含量成负相关。

龙安柚不同施肥处理对叶片结构和光合特性的影响

对12年生龙安柚果园进行4种不同施肥处理,通过分析叶片质量、光合特征参数及其相关性,以揭示不同施肥处理下龙安柚光合能力对产量形成的影响规律,为龙安柚栽培中施肥管理提供理论依据。结果表明:1)不同物候期,处理2 (T2)营养枝和结果枝的叶厚、叶面积均较大,而CK最小,其中萌芽期和果实成熟期差异比较显著。此外,T2的比叶重、叶片干物质含量均较大,其中,果实成熟期的比叶重显著高于其他(P < 0.05),营养枝和结果枝分别达到18.92 mg·cm?2和16.56 mg·cm?2;但其他物候期各处理与对照间差异不显著。说明T2处理叶片厚,叶面积大,比叶重大和叶片干物质含量高,有利于有机养分的制造和贮藏,是产量提高的原因之一。2)不同物候期,施肥处理的营养枝和结果枝叶片中叶绿素a、b、(a+b)和类胡萝卜素含量均显著高于对照,但各施肥处理间差异不显著。说明施肥处理能显著提高叶片中光合色素的含量。3)不同物候期,施肥处理叶片的净光合速率(Pn)均大于对照,且不同物候期的变化多呈单峰曲线。其中,不同处理营养枝叶片的Pn最大值均出现在果实膨大期,且以T2最大(7.59 μmol·m?2·s?1);而结果枝叶片的Pn最大值出现在生理落果期。此外,不同处理的营养枝和结果枝叶片的Tr、Gs与Pn的变化规律类似,而Ci变化趋势则与Pn相反,呈现倒峰曲线。说明T2施肥方案有利于提高龙安柚叶片中碳水化合物的积累,从而保障树体营养生长和生殖生长。4)果实成熟期Pn与Chl a、Chl b、Car正相关达显著水平,且回归分析表明光合速率与叶绿素含量间存在良好的线性关系。综上,处理2有利于改善叶片性状,提高叶片净光合速率,为龙安柚产量形成奠定了良好的基础。

不同树形龙安柚冠层特性

以开心形、Y字形、双层分层形和自然圆头形的龙安柚为试验材料,比较不同树形的冠层特性、叶片结构和生理特征,以期为龙安柚果园小环境的调控提供理论基础。结果表明:(1)开心形间隙分数阈值最高,是自然圆头形的4.33倍。开心形与Y字形的冠层光合辐射与透射系数均显著高于其他树形,但二者无显著差异,表明开心形和Y字形的冠层通风透光特性较好。(2)开心形与Y字形叶片厚度增加,叶面积和气孔密度较大,栅栏/海绵组织厚度和组织紧密度较高,叶片组织疏密度较低,且二者无显著差异,表明开心形与Y字形利于提高叶片的光合作用,降低蒸腾作用。(3)Y字形和开心形净光合速率、水分利用率、最大表观电子传递速率、初始斜率和半饱和光强较高,而蒸腾速率较低,二者对强光的耐受能力较强;其中开心形蒸腾速率最低为2.43 mmol m^(-2)s^(-1),且其结果枝光抑制参数最小,为0.629。说明开心形为最佳的高光效树形。(4)冠层微环境因子、叶片结构及光合生理指标之间多呈极显著相关关系,但开心形叶片结构和生理的大部分指标与冠层环境因子之间相关性较低,说明开心形树形不同部位的营养枝和结果枝的叶片性状差异较小,其光渗透性好,整个冠层的光截获能力和有效光辐射的分布差异较小,笔者认为开心形是龙安柚栽培中的适宜高光效树形。

龙安柚花毒理学安全性评价

目的评估龙安柚花的食用安全性。方法按现行食品安全国家标准进行急性经口毒性试验、细菌回复突变(Ames)试验、哺乳动物红细胞微核试验、体外哺乳类细胞染色体畸变试验、90 d经口毒性试验和致畸试验,并进行统计分析。结果在本试验条件下,SD大鼠和KM小鼠摄入龙安柚花后均未表现出急性经口毒效应,急性经口半数致死量(lethaldose50,LD50)大于10g/(kg·BW),该花属实际无毒级;龙安柚花未引起TA97a、TA98、TA100、TA102、TA1535菌种发生回复突变;哺乳动物红细胞微核试验与体外哺乳类细胞染色体畸变试验结果均为阴性;90 d经口毒性试验中,与对照组相比,各剂量组各性别动物的体重、摄食量、食物利用率、血液学指标、血生化指标和组织病理学检查均未见特异的毒性改变,龙安柚花的未观察到有害作用剂量(no observed adverse effect level,NOAEL)为8 g/(kg·BW);未观察到致畸作用。结论龙安柚花属实际无毒级,本试验条件下龙安柚花无急性毒性、遗传毒性、致畸性和亚慢性毒性。

四种保鲜处理对龙安柚的品质和生理变化的研究

研究四种保鲜方法对地理标志农产品龙安柚贮藏品质及生理变化的影响。选用适宜浓度的壳聚糖、乳酸钙、丁香精油和肉桂精油对龙安柚进行保鲜处理,并置于阴凉通风、常温(25±1)℃的条件下贮藏,定期测定贮藏过程中的品质和生理指标。结果表明:与对照组相比,四种处理方法均不同程度减缓了龙安柚的贮藏品质的下降,且有效控制了生理变化速度。其中1.5%壳聚糖对保持龙安柚的贮藏品质和控制生理变化效果最好,较其他处理组具有显著性差异(p<0.05),1.5%乳酸钙可有效抑制贮藏期间的软化衰老。0.04%丁香精油和0.04%肉桂精油虽然有一定的保鲜作用,但效果不及乳酸钙和壳聚糖的好。

龙安柚果皮精油水蒸气蒸馏法提取工艺及抗氧化、抑菌活性研究

取市售龙安柚鲜果的外层果皮,采用水蒸气蒸馏法提取精油,通过单因素试验及正交试验考察料液比、提取液浓度(NaCl溶液质量分数)和提取(蒸馏)时间对精油得率的影响,对提取工艺进行优化,并测定精油抗氧化和抑菌活性。结果表明,当蒸馏时间为60min、NaCl溶液质量分数为2%、料液比为1∶1.5时,精油得率(以外层果皮鲜重计)最高,平均为1.37%;龙安柚果皮精油具有较强的还原能力和清除DPPH自由基的作用,对DPPH的半抑制浓度为3.22mg/mL;龙安柚果皮精油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有抑制作用,且随着精油浓度增加,抑菌效果增强。

龙安柚果皮β-环状糊精溶液浸泡脱苦除涩工艺研究

为解决采用龙安柚果皮加工食品过程中的脱苦除涩问题,以四川广安的龙安柚果皮为原料,通过清洗、切片、热烫、沥干等工艺后,以β-环状糊精溶液质量浓度、浸泡温度和浸泡时间作为试验因素,以感官评分作为评价指标,采用正交试验法确定β-环状糊精溶液浸泡法脱苦去涩的最佳工艺。结果表明,当β-环状糊精溶液质量浓度为2%、浸泡温度为45℃、浸泡时间为100 min时,感官评分最高,脱苦除涩效果最好。

柚优良品种——龙安柚

龙安柚是1986年在四川省广安县选出。母树为30年代从外地引进,现保留的为50年代从母树上高空压条获得的第二代母树。“八五”期间已推广发展到60余万株。龙安柚具有丰产稳产、无核或少核、质优的特点。1986年送南充地区鉴评,名列前矛。

不同树形对龙安柚光合特性和果实品质的影响

试验以龙安柚开心形、Y字形、双层分层形和自然圆头形4种树形为研究对象,测定各树形冠层不同部位的叶片光合特性及果实品质,并分析二者间的相关性。结果表明:1) 4种树形上部叶片的净光合速率(Pn)均高于下部叶片;一天中,Y字形不同部位叶片的Pn均高于其他树形,其次是开心形,说明Y字形和开心形光合能力较强。2) Y字形和开心形叶片的Chla、Chla/Chlb和SPAD含量均高于双层分层形与自然圆头形,而Chlb含量则相反;Car含量以开心形上部最高(0.61 mg?g?1),Y字形上部次之(0.54 mg?g?1),自然圆头形的叶片中含量最低。表明Y字形和开心形的捕光能力增强从而提高其光合效能。3) Y字形和开心形果实着色程度较好,单果重和可溶性固形物含量较高。开心形上下部Vc含量、总糖含量均较高,且可滴定酸(TA)较低。说明Y字形、开心形果实品质优于其他树形,且开心形冠层上部和下部的果实品质较为均一。4) Vc含量与Chla/Chlb (r = 0.838)和SPAD (r = 0.866)呈极显著正相关;Pn与果实转化糖及蔗糖含量、单果重、果形指数均呈极显著正相关,并与单果重的相关性系数最大(r = 0.712)。综上,龙安柚的Y字形、开心形冠层透光性好,叶绿素含量提高,树体叶片光合性能增强,有利于增加单果重,提高果实中糖和Vc含量,改善果皮色泽。

基于转录组测序筛选与柚裂果相关的基因

【目的】柑橘类果实生长季节内出现的裂果现象是一类生理失调病害,然而目前尚未完全揭示柑橘类果实裂果的分子机理。本研究通过对文旦柚抗裂和易裂品种果皮转录组的比较分析,筛选果实抗裂相关基因。【方法】以抗裂品种(‘度新1号文旦柚’)的正常果(此品种无裂果),以及易裂品种(‘度尾文旦柚’)的正常果和裂果为材料,果实均取自两个时期(时期A:2021年8月3日;时期B:2021年8月20日,裂果敏感期)。取果实果顶部位的果皮(以果顶为中心,30 mm半径范围内的果皮)用于转录组测序。【结果】将易裂品种裂果果皮与两品种正常果果皮转录组进行比较分析,在时期A共筛选到1660个差异基因,易裂品种裂果果皮与两品种正常果果皮间相同的差异基因104个;在时期B共筛选到1972个差异基因,易裂品种裂果果皮与两品种正常果果皮间相同的差异基因82个。对易裂品种裂果果皮与两品种正常果果皮间所有差异基因的GO富集分析结果显示:在生物学过程分类中,两个时期均富集到差异基因的主要亚类包括代谢过程、细胞过程、单生物过程、生物调控、刺激响应和信号。对易裂品种裂果果皮与两品种正常果果皮间所有差异基因的代谢通路分析结果显示:两个时期均富集到差异基因的主要代谢途径包括碳代谢、植物MAPK信号途径、植物激素信号转导和内质网蛋白过程,这些代谢途径富集的差异基因也最多。发现了一些与果实抗裂能力相关的重要基因:两品种正常果果皮扩张蛋白-A1基因表达量均显著高于易裂品种裂果果皮,两个时期结果一致;在时期A,两品种正常果果皮类钙调磷酸酶蛋白B亚基基因表达量显著高于易裂品种裂果果皮,但在时期B无显著差异;易裂品种裂果果皮热激转录因子、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶、生长素响应蛋白和脱水响应元件结合蛋白基因表达量显著高于两品种正常果果皮,两个时期结果一致。【结论】与果皮弹性、水分运动、高温和水分亏缺逆境响应相关的基因是调控文旦柚果实抗裂能力的关键基因。

龙安柚和白市柚选种方向及配套栽培技术

广安县柚类良种龙安柚和白市柚系六十年前从外地引进,具有适应性广,抗逆性强,早结丰产等特点。主栽于县境内渠江两岸,现有栽培面积3300hm^2,结果面积134hm^2,九五年产果50万枚,总产值500万元。同时,通过十多年对两个柚类良种的不断选育及开发研究,大大改善和提高了品种原有综合性状,历次送样参加全省、全国优质柚类评比,均名列前茅。1992—1994年双双荣获四川省优质果品称号,龙安柚在第二届全国农业博览会上获金质奖,白市柚荣获“’93中国优质农产品及科技成果设备展览会”金奖。

龙安柚优质栽培技术

介绍了龙安柚的特征特性,并从选地建园、树苗选择、整厢挖窝、定植、树体管理、肥水管理、病虫害防治等方面总结了其栽培技术,以期实现龙安柚的高产、优质。

施肥处理影响龙安柚产量和品质

据《中国农学通报》2020年第10期《不同施肥处理对龙安柚果实产量和品质的影响》(作者李荣飞等)报道,测定12年生龙安柚果实产量、单果质量、果实色泽、果实硬度和内在品质等,进行果实色泽与内在品质间的相关性分析,探讨施肥处理对龙安柚产量和品质的影响,以期为柚生产栽培、施肥管理提供理论依据。试验设置5个施肥方案,以生产上部分农户撂荒种植为对照。

龙安柚果实品质与土壤、叶片养分相关性研究

以四川省广安市26个龙安柚果园的土壤、叶片和果实为材料,通过相关性分析及多重线性回归分析,研究龙安柚果实品质与土壤肥力、叶片养分的关系。龙安柚土壤pH适宜,但42.31%的有机质和57.69%的碱解氮含量不足,61.54%的交换性钙和65.38%的有效铁过量;叶片氮、钾、锌含量不足分别占比80.77%、61.54%和76.92%,53.85%的叶片磷过量。相关性和回归分析表明,果实品质与土壤、叶片养分关系密切。可食率与叶片磷负相关,与叶片锰、锌正相关;可溶性固形物与土壤pH、土壤钙、叶片磷负相关,与叶片钙、锰正相关;维生素C与土壤磷钾、土壤铁、叶片氮负相关,与土壤氮、叶片磷正相关;还原糖、蔗糖、葡萄糖和果糖与土壤、叶片的关系一致,与土壤pH、叶片氮磷钾正相关,与土壤铁、叶片钙锰锌负相关。龙安柚果实品质主要受叶片氮、磷、钾、钙、锰、锌和土壤pH、氮、钾、铁的影响;果园管理可适当增施有机质和氮肥,减少钙、磷投入,并在叶面喷施钾肥和锌肥。

柚优良品种——广安龙安柚、广安白市柚

一、广安龙安柚广安龙安抽,产于广安县浓溪镇龙安办事处群策村一组,在广安有六十多年的栽培历史,30年代从外地引进一株母树,50年代从母树上高空压条,获三株幼苗为二代母树,留传至今,并逐步由果农自发繁殖推广,现已有30年生大树110株。1986年送南充地区鉴评,名列前矛,定为地优果品,1992年在全省柚类鉴评会上,获第二名,评为省优果品;1992年在全国柚类科研生产协作会上获优质柚称号。