荔枝、龙眼果肉及荔枝、龙眼多糖清除活性氧自由基的研究

利用过硫酸铵N,N,N',N'-一四甲基乙二胺体系检测O2-·氧自由基的方法(AP-TEMED法),研究荔枝果肉、龙眼果肉对活性氧自由基O2-·的清除作用以及对龙眼多糖、荔枝多糖的抗脂质过氧化物的作用进行了测定。实验结果表明,两种水果果肉对活性氧具有较强的清除能力,而且龙眼果肉的清除作用比荔枝强,而荔枝多糖在清除自由基的作用呈正相关系,龙眼多糖在这方面能力比荔枝弱。

龙眼多糖、荔枝多糖的分离提取及其抗氧化作用的探讨

目的 :从龙眼、荔枝肉中分离提取多糖 ,并探讨其抗氧化作用。方法 :建立热水提取—乙醇沉淀—酶法结合 sevag法除去蛋白 ,H2 O2 脱色工艺制备龙眼多糖与荔枝多糖 ,对多糖总糖含量进行测定 ,并对其抗氧化作用性质进行研究。结果 :龙眼总糖含量为 6 4 .2 7% ,荔枝总糖含量为 6 2 .77%。龙眼粗多糖得率为 3.6 4 % ,荔枝粗多糖得率为 3.30 %。龙眼多糖与荔枝多糖均具有清除活性氧自由基的作用 ,荔枝多糖抗脂质过氧化物 L PO的作用能力与其剂量呈正相关关系。结论

龙眼多糖通过下调氧自由基水平的抗疲劳作用研究

为了探讨龙眼多糖抗运动性疲劳的作用及其抗氧化调节机制,本文以小鼠作为实验对象,观察小鼠负重力竭游泳时龙眼多糖抗疲劳作用。通过紫外分光光度法,检测龙眼多糖对超氧阴离子(O-2·)和羟自由基(·OH)的清除作用;测定小鼠游泳后血液中丙二醛(MDA)含量、尿素氮(BUN)含量、乳酸脱氢酶(LDH)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、乳酸变化等。结果表明:龙眼多糖能明显延长小鼠负重游泳时间(P<0.05),减少小鼠尿素氮的产生(P<0.05)以及乳酸含量(P<0.05)和丙二醛(MDA)含量(P<0.05),增加乳酸脱氢酶(LDH)(P<0.05)和超氧化物歧化酶(SOD)(P<0.05)的活性。龙眼多糖对羟自由基(·OH)有较强的清除作用,对超氧阴离子自由基(O-2·)的清除作用较小,可见,龙眼多糖具有良好的抗疲劳作用。

响应面法优化龙眼多糖热水浸提的工艺

采用响应面法对龙眼多糖热水浸提工艺进行了优化。采用3因素3水平的响应面分析法,3因素分别为液料比、提取时间和转速。建立了一个龙眼多糖得率与影响因子的多元二次回归方程,得到龙眼多糖的最佳提取工艺条件:液料比45,提取时间4.5h,转速191r/min,实际测得的龙眼多糖得率为(0.413±0.013)%。

龙眼多糖结构和性质的研究

对龙眼多糖的结构、理化性质、生物活性进行了研究,采用水浸提、酶法结合Sevag法脱蛋白、乙醇醇析提取、后经DEAE-52纤维素柱和SephadexG-100柱层析分离纯化得到一纯净的龙眼多糖组分LP。通过红外光谱分析,发现LP具有多糖的典型结构;通过气相色谱分析结合纸层析(PC)实验发现,龙眼多糖LP是由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖等单糖组成的杂多糖,其组成比例为31:46:23;采用超氧阴离子自由基体系、羟自由基体系对龙眼多糖抗氧化能力进行了研究,结果表明:龙眼多糖对2种自由基均有不同程度的清除作用,但对超氧阴离子自由基的清除作用不太明显,对羟自由基当多糖浓度大于100μg/mL时清除能力与浓度有一定的量效关系。

龙眼多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的探讨龙眼多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注组、高剂量龙眼多糖组(60 g.kg-1.d-1)、低剂量龙眼多糖组(30 g.kg-1.d-1)、尼莫地平阳性对照组(10 mg.kg-1.d-1)。给药组术前连续灌胃7 d,末次给药60 min后,采用大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血2 h再灌注4 h后对大鼠神经功能进行评分,并测定脑梗塞面积、脑含水量、脑组织中NO的含量。结果与脑缺血再灌注模型组相比,龙眼多糖能够改善大鼠的神经功能障碍,降低脑梗塞面积和脑含水量,降低脑组织中的NO含量。结论龙眼多糖对大鼠急性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与降低脑组织中的NO含量有关。

龙眼多糖对大鼠游泳运动能力的影响

[目的]观察龙眼多糖对大鼠游泳运动能力的影响。[方法]80只雄性Wistar大鼠随机分为4组:对照组和龙眼多糖低、中、高剂量组(50、100、200mg/kg),连续给药7d后,每组取10只进行负重游泳试验,观察龙眼多糖对大鼠力竭游泳时间的影响;剩余大鼠负重游泳90min后观察血清尿素氮(BUN)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸、组织肝糖原和肌糖原的变化。[结果]大鼠给药7d后,与对照组相比,龙眼多糖能显著延长大鼠负重游泳时间,提高血清中超氧化物歧化酶水平,降低MDA的含量,降低运动后血清BUN和乳酸水平,同时显著增加大鼠肝糖原和肌糖原含量。[结论]龙眼多糖可能通过改善组织糖原储备及抗氧化作用提高大鼠游泳运动能力。

龙眼多糖抗肿瘤及免疫增强活性的实验研究

目的:探讨龙眼多糖对小鼠移植性肿瘤抑制作用及免疫增强作用。方法:观察龙眼多糖对小鼠肉瘤(S180)抑制作用;ConA刺激T淋巴细胞增殖转化法;小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞(CRBC)实验;迟发型变态反应(DTH);观察分析LP免疫增强作用。结果:S180小鼠口服龙眼多糖200、400mg/kg剂量组可明显抑制肿瘤生长;可提高T淋巴细胞介导的细胞免疫;增强B淋巴细胞介导的体液免疫;提高了小鼠巨噬细胞吞噬能力。结论:龙眼多糖对小鼠肉瘤有明显抑制作用,其体内抑制肿瘤的生长可能与提升小鼠机体免疫力有关。

不同提取方法对龙眼多糖性质的影响

以龙眼为原料,利用水提法、酶提法、碱提法、酸提法、超声法五种方法来提取龙眼多糖,研究不同提取方法下龙眼多糖的提取率、还原力、DPPH.清除率、单糖组成等的区别,比较五种提取工艺的优缺点。实验结果表明,五种提取方法相比较,酶提法得率最高,达到6.78%,碱提法得率最低,为1.84%。酶提法得到的龙眼多糖抗氧化性最好,超声法所得多糖的活性次之,而碱提多糖的抗氧化活性最差。

龙眼多糖与燕麦多糖的结构特征及其益生活性比较

目的:比较龙眼多糖和燕麦多糖的益生活性与结构差异,分析其构效关系,为以龙眼和燕麦为原料开发健康食品提供科学依据。方法:以龙眼干、燕麦麦麸为原料,采用热水浸提Sevag脱蛋白方法得到龙眼多糖和燕麦多糖,分别以2种多糖为碳源,加入无碳源的MRS培养基,测定活菌数、pH值变化,比较两者的益生效果;分别测定2种多糖的总糖、糖醛酸、还原糖和蛋白质含量,采用凝胶渗透色谱法测定分子质量,GC/MS面积归一化法测定单糖组成,HPLC-FLD法测定氨基酸组成,扫描电镜观察表观形貌,流变仪测定流变性,解析2种多糖益生活性差异的结构基础。结果:龙眼多糖和燕麦多糖作为唯一碳源,均能促进干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌增殖、植物乳杆菌、粪肠球菌增殖,然而两者的促增殖作用明显不同;龙眼多糖对干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌亚种的促增殖作用显著优于菊粉(P<0.05),对植物乳杆菌、粪肠球菌的增殖作用与菊粉相似;燕麦多糖对干酪乳杆菌的增殖作用与菊粉相似,对嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌亚种和粪肠球菌的增殖作用略高于空白组。其理化性质、结构特征测定结果是:龙眼多糖和燕麦多糖的总糖含量分别为61.2%,68.3%,糖醛酸含量分别为10.1%,5.9%,还原糖含量16.0%,5.4%,蛋白质含量2.2%,2.9%。采用凝胶渗透色谱法测定龙眼多糖分子质量(Mw)为6.38×106 u,燕麦多糖分子质量(Mw)分为2部分5.42×103 u和2.45×106 u。龙眼多糖的单糖组成为葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖等,燕麦多糖的单糖组成主要为葡萄糖,2种多糖的水解氨基酸总量和组成差异不大。扫面电镜结果表明:2种多糖均呈无规则片状,龙眼多糖表面光滑排列较紧密,燕麦多糖表面粗糙排列松散。此外,2种多糖溶液的黏度具有质量分数依赖性,黏度均随温度的增加而下降,其中燕麦多糖溶液的黏度对温度变化更为敏感。结论:与燕麦多糖相比,龙眼多糖因单糖组成复杂、黏度低等结构特点,促益生菌增殖的作用更明显。

一种龙眼多糖分离纯化与结构解析

提取、分离水溶性龙眼多糖,经过DEAE-纤维素、Sephacryl S-400 HR柱纯化得到均一龙眼多糖LPB-2-M,采用高效凝胶渗透色谱法进行纯度鉴定和分子量测定,IR、1H-NMR定性分析。结果表明:龙眼多糖LPB-2-M总糖含量为84.32%,重均分子量Mw为80217Da,分散系数D=1.0348;含有较多β-型异构碳和吡喃环;热稳定较好,在230℃以下不易热分解。

龙眼多糖通过降低肝匀浆氧自由基水平的抗疲劳作用研究

目的探讨龙眼多糖对小鼠负重游泳实验中肝匀浆氧自由基水平的影响。方法雄性昆明小鼠24只,随机分为3组:对照组和龙眼多糖低、高剂量组(13、26mg/kg),连续灌胃给药7d后,经3min负重游泳试验,观察龙眼多糖对小鼠肝组织匀浆一氧化氮合酶(NOS)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量变化的影响。结果与对照组相比,龙眼多糖能显著提高肝组织匀浆中SOD、NOS活性,降低MDA含量(P均<0.05)。结论龙眼多糖可能通过增强抗氧化酶活性、清除氧自由基的作用,达到抗疲劳的作用。

丁酸梭菌-龙眼多糖发酵液对小鼠溃疡性结肠炎的防治作用

试验旨在观察丁酸梭菌-龙眼多糖发酵液预防给药对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型小鼠的防治作用。30只SPF级雄性BALB/c小鼠随机分成空白组、模型组和发酵液组,10只/组。按10 mL/kg体重的剂量标准,空白组和模型组灌胃无菌去离子水,发酵液组灌胃丁酸梭菌-龙眼多糖发酵液,灌胃持续7 d。第8天开始,模型组和发酵液组连续7 d自由饮用5%葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)溶液诱导UC模型,空白组自由饮用无菌水。试验第14天,称量所有小鼠体重,进行疾病活动指数(disease activity index,DAL)评分、临床评分,摘眼球采血后处死并解剖小鼠,取结肠肠段测量长度并进行组织学损伤评分,同时用甲醛固定后制作切片。ELISA检测血清中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-10及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量。结果表明,UC模型造模成功,模型组发病症状明显。与模型组相比,发酵液组小鼠体重下降程度显著降低(P<0.05),DAL评分、临床评分、结肠缩短程度及组织学损伤评分均极显著下降(P<0.01)。发酵液组小鼠结肠组织表现出相对完整的上皮层结构及隐窝,仅有部分炎症细胞侵入上皮组织。ELISA检测结果显示,发酵液组IL-6和TNF-α含量显著低于模型组(P<0.05),IL-10的含量显著高于模型组(P<0.05)。说明丁酸梭菌-龙眼多糖发酵液对DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎具有一定的防治作用,其作用机制可能与降低促炎因子IL-6和TNF-α含量、提升抗炎因子IL-10含量抑制炎症有关。

丁酸梭菌发酵龙眼多糖的工艺优化及多糖含量变化

本试验旨在探究丁酸梭菌液体发酵龙眼多糖的最佳发酵工艺,并确定发酵前后多糖变化情况。单因素试验初步评价龙眼多糖添加量(5%、10%、20%、30%、40%)、发酵时间(10、12、14、16、18 h)、接种量(1%、2%、3%、4%、5%)和初始pH(5.0、6.0、7.0、8.0、9.0)对丁酸梭菌活菌量的影响,通过L9(34)正交试验进一步优化,并利用苯酚-硫酸法测定发酵前后的多糖含量。结果表明:最佳发酵工艺参数为龙眼多糖含量20%、接种量3%、发酵时间16 h、初始pH为7.0;影响顺序为发酵时间>初始pH>龙眼多糖添加量>接种量;添加龙眼多糖发酵的丁酸梭菌活菌量较不添加龙眼多糖增长了2.8倍(P<0.01),总多糖含量比发酵前提高了464.65 mg/mL(P<0.01),说明添加龙眼多糖对丁酸梭菌发酵的活菌数有促进作用,发酵后产生了新的多糖。

龙眼肉多糖对Aβ诱导耐受的小胶质细胞吞噬功能的影响及其机制

目的探究龙眼肉多糖(LAPs)对Aβ诱导耐受的小胶质细胞(BV2)吞噬功能的影响及其机制。方法采用4μmol·L^(-1)Aβ处理(48+24)h诱导细胞成为耐受模型,使用LAPs 0.8、1.6 mg·mL^(-1)进行干预。MTT法检测细胞增殖,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,倒置荧光显微镜观察细胞吞噬功能及mTOR抑制剂(Rapa)和HIF-1α抑制剂(BAY)对LAPs作用的影响,Western blot检测PI3K、Akt、p-Akt及HIF-1α蛋白表达。结果经Aβ处理的BV2细胞增殖率和目的蛋白表达提高,线粒体膜电位和细胞吞噬能力降低(P<0.05,P<0.01);LAPs能逆转上述指标变化,并且其提高吞噬功能的作用可被抑制剂阻断(P<0.05,P<0.01)。结论LAPs能提高Aβ诱导耐受的BV2细胞吞噬功能,作用途径可能与其促进耐受BV2细胞的增殖、提高其线粒体膜电位水平有关,并涉及PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α信号通路的激活。

龙眼多糖对S180肉瘤的抑制作用研究

自50年代发现酵母多糖具有抗癌效应以来,多糖药物的抗肿瘤研究受到极大重视[1-6],探究和挖掘抗肿瘤的植物天然活性成分成为人们战胜肿瘤的新途径。2004年以来,

龙眼、枸杞和红枣多糖的理化性质及其协同益生活性

为了比较龙眼多糖(LP)、枸杞多糖(GP)和红枣多糖(JP)的理化特性及其益生活性差异,探究其是否具有协同增效作用,本文分析了三种多糖的基本成分、分子量分布、单糖组成、显微结构、溶解性、粒径、溶液电位等理化特性,以及三种多糖单独作用或复合作用对益生菌增殖的影响。结果表明LP、GP和JP主要含有中性糖、少量糖醛酸和蛋白质,其中中性糖含量分别为86.25%、72.36%、82.98%;LP和JP的Mw分别是70.73 ku、185.93 ku;GP的Mw为120.61 ku、4.53 ku;LP和GP主要由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖组成,其摩尔比分别为22.49:56.81:10.18和16.84:62.05:11.08,JP主要由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖醛酸组成,其摩尔比为10.63:70.05:10.88;三种多糖的微观结构有较大差异,LP为碎片化聚集体,GP呈片状,JP为网状结构;三种多糖的粒径、粒度分散系数、溶液电位均不同;三种多糖均能显著促进益生菌增殖,并呈现剂量依赖效应,在浓度为30 mg/mL时,三者的益生活性为JP>GP>LP;当LP、GP和JP以质量比2:3:1复配时,其益生活性最强,且远好于相同浓度下三种多糖单独作用的益生效果。由此表明,龙眼、枸杞和红枣三种多糖复配后,对益生菌的增殖具有协同增效作用。