龙胆紫染色法在显微捕获单细胞分离技术中的应用

目的建立用于显微捕获单细胞技术的龙胆紫染色法并评价其应用效果。方法制作20枚口腔拭子脱落细胞悬液,配制0.05g/mL龙胆紫染液。取100μL口腔细胞悬液加入0.15、0.25、0.5、1.0、2.0μL染色液,考察最佳染色浓度;分别染色5、10、30、60min,考察最佳染色时间;用最佳条件染色后抓捕3个细胞,采用联合LV-PCR技术扩增并进行DNA分型检测,进行重复试验20次,并对同一检材未经染色的抓捕细胞进行检测,用于比对STR分型成功率。将龙胆紫染色法用于案例检材的口腔上皮细胞分离检验。结果 100μL细胞悬液加入0.5μL 0.05g/mL龙胆紫染液,染色5min,胞核呈紫红色,与胞浆对比明显;染色时间延长不影响染色效果及细胞分离检验结果。优化后的龙胆紫染色法对低体积扩增无明显抑制(P>0.05)。应用此染色法于案例检材,胞核标识清晰,STR分型结果达同一认定标准。结论龙胆紫染色法利于细胞核的发现,有助于提高显微捕获单细胞技术的检测效能。

改良龙胆紫快速染色法检测阴道分泌物真菌的研究应用

目的研究一种简易快速染色法,提高阴道真菌的检出率,为临床提供诊断依据。方法改良龙胆紫快速染色法:于白带常规的试管中加入生理盐水约0.3mL,龙胆紫(革兰Ⅰ液)1滴,室温染2min,1滴悬液均匀涂于玻片中镜检。结果孢子无色而夹膜则呈亮黄绿色,真菌菌丝着色不均匀呈紫色或无色,上皮细胞、白细胞、球菌、加德纳菌、线索细胞染成紫色,滴虫、乳酸杆菌不上色,红细胞呈暗红色。孢子检出率高于革兰快速染色法和生理盐水悬液湿片法。结论改良龙胆紫快速染色法,融合了传统生理盐水悬液湿片法和革兰快速染色法的优点,快速、简单,易掌握,涂片色差大,孢子易于辨认,检测准确性高,实用性强,有临床应用价值。