龙脑樟根际土壤理化性质及细菌群落结构分析

选取4处长期采收龙脑樟的林地,基于土壤成分分析与高通量测序技术,比较不同品质龙脑樟根际土壤的理化性质和细菌群落组成、分布等特点。结果表明,龙脑樟生长指标最好的林地,虽然根际土壤有机质和大量元素含量不高,但是硼、锰、铜、锌、钼等微量元素含量均普遍高于其它样地,并且细菌群落丰富度和多样性指数最高,f_Koribacteracea、Candidatus_Koribacter、Candidatus_Solibacter等酸杆菌门细菌丰度最高。

不同基质对龙脑樟大田扦插育苗的影响

为解决龙脑樟苗木繁育过程中生产工序多、成本高、生产上难以推广等问题,笔者于2019年开始采用多种基质进行龙脑樟大田扦插育苗试验,以便寻找替代蛭石的廉价扦插基质,并探索扦插当年出圃的可能性。结果表明:红壤土和紫色冲积土是两种非常适合龙脑樟扦插育苗的优良基质,大田扦插成活率可达到70%以上,且这两种基质资源丰富、价格低廉,可以使龙脑樟扦插育苗成本大幅降低;大田扦插育苗当年即可出圃,省时、省工,平均合格苗率可达到70%以上。

龙脑樟叶粉对10~19周龄湘东鸡生长性能、屠宰性能、血清生化指标、免疫指标及抗氧化性能的影响

试验旨在研究龙脑樟叶粉对10~19周龄湘东鸡生长性能、屠宰性能、肉品质、血清生化、免疫指标和抗氧化性能的影响。选取同一批出雏、体重相近的240只10周龄健康湘东鸡(公母各半)随机分为4组,每组6个重复,每个重复10只。对照组饲喂基础日粮,试验组分别在基础日粮中添加2%、3%、4%龙脑樟叶粉,预试期7d,正试期63d。结果显示:与对照组相比,4%龙脑樟叶粉组末重和平均日增重显著提高(P<0.05);2%、3%和4%龙脑樟叶粉组屠宰率显著提高(P<0.05);3%和4%龙脑樟叶粉组血清中总蛋白(TP)和球蛋白(GLB)含量、3%龙脑樟叶粉组白蛋白(ALB)及4%龙脑樟叶粉组低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量显著降低(P<0.05);4%龙脑樟叶粉组血清IgA含量显著提高(P<0.05),2%、3%和4%龙脑樟叶粉组IgM和IgG含量显著提高(P<0.05),且含量随添加量增加而升高。综上所述,饲粮中添加龙脑樟叶粉可提高湘东鸡平均日增重、屠宰率,促进脂质代谢,增强机体免疫力,建议添加量为4%。

不同产地龙脑樟枝叶化学成分分析及体外抑菌研究

龙脑樟为目前国内提取天然冰片效益最高的植物,为助力其道地产区的确定,本研究根据龙脑樟的习性,拟选取国内8个产地的龙脑樟枝叶为材料,采用水蒸汽蒸馏法分别提取天然冰片;通过气质联用法(GC-MS)测定其中化学成分的相对含量;通过纸片法测定其对大肠杆菌、伤寒沙门氏菌以及肠炎沙门氏菌的抑菌圈直径;运用96微量孔板测定最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:各个产地龙脑樟枝叶提取的天然冰片中化合物含量具有差异性,其中以右旋龙脑、樟脑、d-柠檬烯、α-葎草烯、4-萜烯醇、桉叶油醇、莰烯以及d-α-蒎烯等为共有成分,且以右旋龙脑含量最高,樟脑次之,各产地中以湖北远安的右旋龙脑含量最高(82.47%),以广东乳源的右旋龙脑含量最低(41.63%);各个产地提取的天然冰片对3个供试菌种均有一定抑菌作用,且抑菌圈直径范围为14.60~27.95 mm;最低抑菌浓度(MIC)范围为250~1250μg/mL;最低杀菌浓度(MBC)范围为0~1000μg/mL,总体以湖北远安和江西吉水的综合抑菌效果最佳,广东乳源最差。由此可见,右旋龙脑含量最高的产地抑菌效果最佳,反之抑菌效果欠佳,因此,龙脑樟枝叶提取物的抑菌活性与其主要成分含量有一定相关性,本研究为龙脑樟枝叶提取物的品质评价及天然冰片的资源开发提供依据。

龙脑樟萜类的转录和代谢差异分析

樟具有多种化学型,以其所含的主要成分(萜类)作为划分依据。为探讨龙脑型和樟脑型樟所含萜类的关键基因和代谢通路,对龙脑型樟和樟脑型樟叶片进行转录组和代谢组测序。转录组分析发现,两组样本间存在差异表达基因2345个,其中上调表达的有882个,下调的有1553个。代谢组共鉴定了468种差异代谢物,上、下调的差异代谢物分别为249种和219种。在单萜的生物合成途径中,发现差异基因9个,差异代谢物8个。在萜类骨架合成中,MEP和MVA均可合成单萜通用底物。其中,龙脑樟在MEP途径高通量表达且限速酶DXS基因表达量显著上升。结合转录组和代谢组可知,龙脑樟趋向于通过MEP途径合成单萜通用底物并进一步生成各类单萜。

龙脑樟挥发油及天然冰片成分分析

目的:天然冰片新资源龙脑樟挥发油成分的组成和最终产品的质量分析评价。方法:采用水蒸汽蒸馏法分离龙脑樟的挥发油,应用GC/MS技术分离鉴定;应用气相色谱法对天然冰片及市售冰片质量进行评价。结果:鉴定出龙脑樟挥发油中的28种化合物,占出峰总面积的97.31%,其中龙脑樟含量18.51%;龙脑与异龙脑的分离度达到6.5。本方法简便、快捷、专属性高、重复性好。结论:龙脑樟富含龙脑,所产天然冰片与市售天然冰片质量一致。

龙脑樟鲜叶挥发油成分及其抗菌活性的研究

目的:研究龙脑樟鲜叶中挥发油的化学成分和抗菌活性。方法:采用水蒸汽蒸馏法提取龙脑樟叶中挥发油;通过气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术分析挥发油化学成分;采用K-B纸片琼脂扩散法和微量肉汤稀释法分别测其对细菌、酵母菌和霉菌的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC值),以评估挥发油的抑菌性能。结果:GC-MS结果表明该挥发油有27种组成成分,占整个挥发油的98.14%,其中以右旋龙脑(81.58%)、樟脑油(2.96%)和α-蒎烯(2.03%)为主要成分;该挥发油及其主要成分右旋龙脑对实验所选的细菌、酵母菌和霉菌三类微生物均表现出一定的抗菌效果。其中,挥发油对所测菌的抑菌直径范围为(9.21±0.6)～(22.12±1.30)mm,而右旋龙脑组分对所测菌的抑菌直径范围为(7.32±0.5)～(20.42±1.40)mm;对应两种物质对所测菌的最低抑菌浓度(MIC值)范围分别为(31.25～125)μg/mL和(62.5～125)μg/mL。结论:该研究为龙脑樟叶的综合利用及天然右旋龙脑药用资源的研究开发提供参考依据。

龙脑樟有性繁殖后代叶油分析

目的分析龙脑樟有性繁殖后代变异情况。方法以龙脑樟有性繁殖后代的3个月和12个月实生苗为材料,对其叶片的挥发油进行GC和GC-MS分析,以主要的9个成分的相对百分含量为指标对样本进行聚类,并对主要成分进行相关性分析。结果栽培3个月的幼苗产生2种化学型,即黄樟油素型和丁香酚甲醚型;栽培12个月的幼苗成分较栽培3个月的幼苗成分复杂,形成了龙脑型,同时形成了樟脑型、桉油素型、异橙花叔醇型。结论龙脑樟有性繁殖后代会发生化学变异,其中只有60%保持了母本特性。

龙脑樟果实挥发油成分气相色谱-质谱分析

目的对龙脑樟果实挥发油成分进行分析鉴定。方法采用水蒸气蒸馏法提取龙脑樟果实的挥发油成分,通过气相色谱-质谱法对该挥发油进行成分析鉴定。结果共分离出50种化学成分,确认其中的42种,占总峰面积的99.536%;右旋龙脑的相对含量最高,占总峰面积的50.684%。结论龙脑樟果实部位挥发油中天然右旋龙脑的含量较高,可以作为工业化生产提取天然冰片的原料进行综合利用。

龙脑樟枝叶中挥发油化学成分GC-MS分析

目的:研究龙脑樟Cinnamomum caraphora(L.)Presl枝叶中挥发油的化学成分。方法:采用水蒸气蒸馏法提取龙脑樟枝叶挥发油,用气相色谱-质谱联用技术分析提取物,利用峰面积归一化法确定挥发性组分的相对含量。结果:首次从挥发油中鉴定出了34个化学成分,占挥发油总量的98.53%,其中龙脑的含量最高,达到67.17%。结论:新鲜龙脑樟枝叶中龙脑含量很高,可以作为提取天然冰片的良好资源。

江西吉安龙脑樟资源开发与利用前景

龙脑樟是江西省吉安市20世纪80年代发现并发展起来的一个特有的樟树新化学类型,到目前为止,在吉安市青原山区及临近各县已经栽培了360hm2。着重介绍了龙脑樟树的繁育、天然d-龙脑的提取及其应用等问题。龙脑樟作为一种珍贵的药材和香料原料,具有广阔的开发利用前景。

GC-MS结合保留指数研究龙脑樟不同部位精油成分

采用水蒸气蒸馏法提取5年生龙脑樟叶、干、根3个部位精油,利用GC-MS检测方法,结合保留指数(RI)分析法,对精油化学成分组成进行鉴定。结果表明:龙脑叶精油含固体粗龙脑和液体龙脑油2种物质,粗龙脑共鉴定出8种化合物,占挥发油总含量的99.97%,其中含量>1.00%的化合物共2种;龙脑油共鉴定出28种化合物,占挥发油总含量的99.73%,其中含量>1.00%的化合物共16种。干精油共鉴定出27种化合物,占挥发油总含量的98.97%,其中含量>1.00%的化合物共14种。根精油共鉴定出26种化合物,占挥发油总含量的99.89%,其中含量>1.00%的化合物共14种。3个部位精油中所共有的化合物有20种,叶精油、干精油主要成分是龙脑,根精油中主要成分是黄樟油素,但龙脑含量极低。

龙脑樟枝叶的龙脑组成特点研究

利用GC-MS法检测干燥龙脑樟枝叶中的龙脑组成特点。龙脑樟的树叶与末端细枝直接用索氏提取法提取,粗枝分解成粗枝枝皮和粗枝木质部后进行提取,提取溶剂为乙醇,粗枝枝皮、粗枝木质部、末端枝条与树叶四种部位的乙醇粗提物得率分别为6.13%、4.00%、4.96%和7.08%。四种粗提物分别配制成1mg·m L^(-1)甲醇溶液进行GC-MS检测,检出组分数分别为:22,33,30,31,其中龙脑的质量分数分别为50.62%、24.65%、48.65%和70.17%。结果表明,龙脑樟叶片中龙脑含量最高,粗枝枝皮次之,末端枝条第三,粗枝木质部最低,工业生产宜选取树叶为原料。

龙脑樟去油枝叶中总多酚的酶解-超声辅助提取及抗氧化活性

为探讨龙脑樟去油枝叶中总多酚的酶解-超声辅助提取工艺,在单因素实验的基础上,通过Box-Behnken设计-响应面法研究纤维素酶用量(X_1)、乙醇浓度(X_2)、液料比(X_3)对龙脑樟去油枝叶中总多酚提取率的影响;同时,以清除DPPH自由基和羟基自由基的能力为评价指标,对总多酚提取物的抗氧化活性进行测定。结果表明,各因素对总多酚提取率的影响顺序为液料比(X_3)>乙醇浓度(X_2)>酶用量(X_1);酶解-超声辅助提取龙脑樟去油枝叶中总多酚的最优工艺条件为:酶用量1.9%,乙醇浓度54%,液料比34 m L/g,酶解温度50℃,酶解时间1.5 h,超声时间30 min,超声频率45 k Hz,超声功率360 W,超声温度70℃;在此条件下,总多酚提取率的平均值为22.08 mg/g,与预测值相近,二次回归模型预测性良好。总多酚提取物对DPPH自由基和羟基自由基的清除作用均呈现量效关系,半数抑制浓度(IC_(50))值分别为0.36和0.15 mg/m L,表明总多酚提取物具有较强的抗氧化能力。

龙脑樟扦插繁殖技术研究

龙脑樟树叶是天然冰片提取的最佳植物资源,为加快龙脑樟苗木的培育,补充完善龙脑樟扦插繁殖技术,采用正交设计的试验方法对龙脑樟插穗规格的选取进行了研究,并对正交试验的结果进行了验证,探讨了不同基质消毒剂处理下龙脑樟扦插生根情况。研究结果表明,龙脑樟插穗规格对扦插生根率有着极显著的影响,影响龙脑樟扦插生根的各因素排序为:插穗长度>插穗直径>插穗选取部位。龙脑樟插穗选择最优方案为:选取部位为母树基部,插穗长度为12 cm,插穗直径为0.5 cm。验证试验证实,按插穗选择最优方案制取的插穗扦插生根率为97.6667%,较其它处理组的扦插生根率都要高。采用消毒剂对扦插基质进行消毒处理可显著提升龙脑樟扦插的生根效果,提升龙脑樟扦插苗品质。而使用消毒剂时,采用0.3%KMnO_4溶液效果最好,多菌灵次之,再次是甲基托布津和代森锰锌。

龙脑樟叶脱脑油成分分析

对用挥发油提取器提取得到的龙脑樟叶油进行真空抽滤,获得其脱脑油,再利用气相色谱-质谱联用仪和气相色谱仪对晶体及脱脑油进行了定性和定量分析。试验结果表明,真空抽滤是纯化龙脑樟叶油的可用方法之一;脱脑油中单萜类物质占总量的85.467%(相对质量分数),主要成分为为龙脑(23.813%)、D-苧烯(15.627%)、α-蒎烯(12.593%)、莰烯(6.309%)、β-月桂烯(6.213%)、乙酸龙脑酯(6.153%)和β-蒎烯(4.336%)等,可通过分馏对其加以利用。

龙脑樟龙脑含量变化及新梢生长规律

[目的]探寻清龙脑樟鲜叶龙脑含量的变化规律与新枝生长节律,确定龙脑樟枝叶的最佳采收季节。[方法]对龙脑樟鲜叶龙脑含量、新梢长、新梢基径、新梢一级枝数等生长性指标进行持续性测定和调查。[结果]鲜叶龙脑含量与鲜叶叶绿素指标测定数据的月变化规律呈"M"型;新梢长、新梢基径、新梢一级枝数的季节变化规律为四段式,3—7月、9—11月表现为快速生长,在其余时间段生长缓慢或停滞。[结论]生产实践中,在7月对龙脑樟的当年生枝叶进行采收可取得较高的龙脑产量;或7月采收后,11月再对新抽的枝叶进行采收,达到1年采收2次目的。

龙脑樟法呢基焦磷酸合酶基因克隆及表达模式分析

法呢基焦磷酸合酶(farnesyl pyrophosphate synthetase,FPS)是萜类及其衍生物合成的关键限速酶。本研究以龙脑樟为材料,基于转录组测序,克隆CcFPS基因,利用生物信息学软件分析该基因编码的氨基酸序列特征,并采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测CcFPS基因的表达,分析龙脑樟根、茎、叶中该基因的表达与总萜含量的关系。结果表明:CcFPS基因的开放阅读框为1053bp,编码350个氨基酸,分子量为40.4kDa,等电点pI为5.25,亲水性平均值(GRAVY)为-0.299。氨基酸同源性与沉水樟最高(98.86%),含有7个相同的保守结构域和2个富含天冬氨酸的基序[DDXX(XX)D]。二级结构α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲的比例分别为61.14%、6.57%、2.86%和29.43%,三级结构预测与沉水樟极其相似。系统发育树(NJ树)结果显示,CcFPS蛋白与同为樟科的沉水樟、山苍子的FPS处于同一个分支上。CcFPS基因在龙脑樟的根、茎、叶中均有表达,且表达具有组织特异性,在叶中的相对表达量最高,根中次之,茎中最低。在CcFPS蛋白调控的萜类物质代谢通路中,茎中的总萜含量最高,根中次之,叶中最低。龙脑樟FPS基因表达与总萜含量具有相关性,为进一步解析FPS基因在龙脑樟萜类化合物合成过程中的作用提供参考。

龙脑樟容器扦插育苗技术研究

介绍龙脑樟容器扦插育苗技术,以黄心土为基质,选择较大容量的容器和合适的扦插季节,生根率可达63%,可以实现工厂化育苗。

龙脑樟冬季硬枝扦插繁育技术研究

从圃地选择、插穗选取和处理、扦插床内保温保湿技术措施及苗期管理等几方面总结了龙脑樟冬季硬枝扦插技术要点。通过不同插穗来源和不同时间扦插结果对比,表明冬插使用一年生播种实生苗穗条效果最好,扦插生根率随着时间的后移而显著提高。龙脑樟冬季扦插最佳技术措施组合其生根率可达91%,可在生产中应用。