家蚕龙角突变基因RAPD分子标记筛选及其克隆

以家蚕龙角 (K)近等基因系第 1 1代龙角个体 (K/ +)和同蛾区正常个体 ( +K/ +K)为材料 ,用 1 77个随机引物进行PCR扩增 ,筛选出长度为 70 0bp的与龙角基因有关的特异性片段 (OPV 1 0 70 0 ) ,用另外 2个带龙角蚕品种和 2个非龙角蚕品种进行PCR扩增验证 ,进一步确认OPV 1 0 70 0 是与K基因有关的RAPD分子标记。回收纯化所获得的分子标记片段 ,以 pBluescriptⅡSK 质粒作载体 ,用T A互补法克隆 ,然后对重组子进行PCR和EcoRⅠ +HindⅢ双酶切鉴定 。