Chemical derivatization strategies for enhancing the HPLC analytical performance of natural active triterpenoids

Triterpenoids widely exist in nature,displaying a variety of pharmacological activities.Determining triterpenoids in different matrices,especially in biological samples holds great significance.High-performance liquid chromatography(HPLC)has become the predominant method for triterpenoids analysis due to its exceptional analytical performance.However,due to the structural similarities among botanical samples,achieving effective separation of each triterpenoid proves challenging,necessitating significant improvements in analytical methods.Additionally,triterpenoids are characterized by a lack of ultraviolet(UV)absorption groups and chromophores,along with low ionization efficiency in mass spectrometry.Consequently,routine HPLC analysis suffers from poor sensitivity.Chemical derivatization emerges as an indispensable technique in HPLC analysis to enhance its performance.Considering the structural characteristics of triterpenoids,various derivatization reagents such as acid chlorides,rhodamines,isocyanates,sulfonic esters,and amines have been employed for the derivatization analysis of triterpenoids.This review comprehensively summarized the research progress made in derivatization strategies for HPLC detection of triterpenoids.Moreover,the limitations and challenges encountered in previous studies are discussed,and future research directions are proposed to develop more effective derivatization methods.

Four new lanostane triterpenoids featuring extendedπ-conjugated systems from the stems of Kadsura coccinea

Four new 14(13→12)-abeolanostane triterpenoids featuring extendedπ-conjugated systems,kadcoccitanes E-H(1-4),were obtained from the stems of Kadsura coccinea through using a HPLC−UV-guided approach.Their structural and configurational determination was accomplished through extensive spectroscopic analysis coupled with quantum chemical calculations.Kadcoccitanes E-H were tested for their cytotoxic activities against five human tumor cell lines(HL-60,A-549,SMMC-7721,MDA-MB-231,SW-480)but none of them exhibited activities at the concentration 40μM.

商陆提取物药理作用研究进展

商陆是我国传统峻下逐水中药,收载于历版《中华人民共和国药典》,入药部位为根部,具有利尿泻下、抗炎、抗肿瘤、祛痰镇咳平喘等药理活性。临床多用于治疗肾炎、肝硬化腹水、乳腺增生、银屑病等疾病。通过对商陆提取物和化学成分药理作用进行总结,为今后商陆深入研究及合理开发利用提供支持和参考依据。

脂肪酸对牛樟芝液态发酵产三萜的影响

为提高牛樟芝菌丝体产三萜类化合物的能力,以5种常见的脂肪酸为外源添加物,筛选出促进牛樟芝菌丝体生长和提高总三萜得率的最优培养基及培养方法,并对比分析空白对照组和添加脂肪酸的实验组所得菌丝体形态、发酵液颜色及黏度的差异。研究结果表明:不同脂肪酸的添加对牛樟芝菌丝体产三萜均有促进作用,其中亚麻酸对三萜生产的促进效果最强,其他脂肪酸的促进效果排序为亚油酸>油酸>硬脂酸>软脂酸;在添加亚麻酸的最优条件下(添加2.0 g/L亚麻酸、培养8 d)获得最大三萜得率为(5.0±0.1)%,是空白对照组的2.1倍。该研究方法操作容易,成本较低,效果显著,是促进牛樟芝菌丝体生长和三萜合成的有效策略,为牛樟芝三萜的规模化发酵提供参考和借鉴。

红小豆提取物对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的抑制作用

采用体积分数70%乙醇对红小豆进行提取,提取物经水混旋,然后依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇溶剂萃取。正丁醇萃取相浓缩干燥后经AB-8大孔树脂吸附,以不同体积分数乙醇洗脱,测定洗脱相浓缩液中总三萜皂苷和总黄酮的含量,并探究洗脱相浓缩液对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的抑制作用。结果显示:体积分数70%和95%乙醇洗脱组分中的总三萜皂苷含量高于其他组分,且体积分数70%乙醇洗脱组分的总黄酮含量最高,为(181.83±3.09)mg/g;体积分数95%、70%、50%乙醇洗脱组分对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶均具有较好的抑制活性;体积分数95%乙醇洗脱组分对2种酶的抑制类型均为混合型抑制。

固态发酵三七渣产灵芝三萜的工艺条件优化

该研究通过单因素试验考察发酵温度、接种量、发酵时间对固态发酵三七渣生产灵芝三萜的影响,并采用响应面法对其发酵工艺条件进行优化。结果表明,发酵温度、接种量、发酵时间对灵芝三萜含量影响均极显著(P<0.01),这3个因素对于发酵培养物中灵芝三萜含量影响程度排序为:接种量>发酵时间>发酵温度。发酵温度和接种量之间的交互作用对灵芝三萜含量的影响极显著(P<0.01);而接种量和发酵时间、发酵时间和发酵温度之间的交互作用对灵芝三萜含量的影响不显著(P>0.05)。在实验室小试条件下最佳发酵工艺条件为:发酵温度30℃,发酵时间16 d,接种量为11%。在此优化条件下,灵芝三萜含量为(4.110±0.186)mg/g,比优化前提高了12.0%。

鲜卑花的化学成分研究

目的:本研究对鲜卑花Sibiraea laevigata的干燥叶的化学成分进行研究。方法:采用两相溶剂萃取法得到醋酸乙酯层,将醋酸乙酯层经硅胶、凝胶柱色谱法及重结晶法等方法,进行分离纯化,运用^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、MS等光谱学方法对化合物的结构进行鉴定。结果:从鲜卑花Sibiraea laevigata的干燥叶中,分离纯化出6个化合物,分别为6β-羟基豆甾-4-烯-3-酮(1)、豆甾-4-烯-3β-醇(2)、麦角甾-7,22-二烯-3β-醇(3)、3β,6β,23-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸(4)、2α,3α-二羟基-12-烯-28-齐墩果酸(5)、齐墩果酸(6)。结论:其中,除化合物6以外,其余化合物均为从鲜卑花属植物中首次分离得到。

基于CNKI数据库分析升麻及相关化学成分的研究现状

为深入了解我国升麻的研究现状及发展趋势,本文通过中国知网(CNKI)检索了2003年-2023年与升麻研究有关的文献,利用数据库自带的可视化分析功能并结合excel等软件,对检索到的文献进行分析。结果表明:升麻及其相关化学成分的研究成果丰富。从发文量年度分布来看,升麻及其相关化学成分的研究文献呈现上升的趋势,研究人员对升麻的关注越来越多。从研究热点来看,目前的研究者的关注点主要集中在升麻化学成分的分离提取及其药理作用的研究,比如抗肿瘤、抗病毒、抗骨质疏松等。本研究为升麻未来的研究方向提供科学依据,并为其在医学领域的应用提供有利的参考。

鬼箭羽化学成分和药理作用的研究进展及其质量标志物预测

鬼箭羽始载于《神农本草经》,列为中品,具有通经、破血、杀虫和散瘀止痛等功效。现代药理学研究表明其具有降血糖、抗肿瘤、抗炎镇痛、抗菌、抗氧化、抗病毒等药理作用,其活性成分以黄酮类和萜类成分为主。本文通过对鬼箭羽的化学成分、药理作用、毒理等方面进行综述,并基于此,从植物亲缘关系、化学成分有效性、化学成分可测性等方面对鬼箭羽的质量标志物进行推测分析,初步预测芦丁、槲皮素、香橙素、儿茶素、β-谷甾醇、鬼箭羽二萜A和11-羰基-β-乳香酸等成分可作为鬼箭羽潜在的质量标志物,以期为鬼箭羽的质量控制和临床用药规范提供科学依据。

高产三萜灵芝新菌株‘沪农灵芝5号’的选育

为选育高产三萜灵芝(Ganoderma lucidum)新品种,以抗杂菌能力强、生物学效率高的‘沪农灵芝1号’(H 1)和三萜含量高、抗杂菌能力弱的‘灵芝G 8’(G 8)为亲本,将原生质体单核菌株进行杂交,从130个杂交组合中筛选出菌丝长势较好的25个杂交菌株,并对其进行栽培试验,考察菌包成品率、生物学效率等农艺性状及子实体三萜含量,从中筛选出杂交菌株Z18。与亲本G8相比,Z18菌包成品率提高66.67%、生物学效率提高22.54%;与亲本H1相比,Z18子实体中三萜含量提高51.26%。ERIC-PCR分析结果显示,Z18与亲本存在遗传差异。Z18达到新品种审定标准,已通过上海市非主要农作物品种认定,定名为‘沪农灵芝5号’。

油茶果壳中齐墩果烷三萜皂苷抗炎活性及作用机制研究

该研究以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞RAW 264.7细胞为炎症模型,采用Griess实验、酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、Western blotting和免疫荧光等技术,评价油茶果壳3-O-β-D-葡萄糖苷(1″→6′)α-L-鼠李糖基27-羟基齐墩果酸-28-O-β-D-葡萄糖苷(3-O-β-D-glucopyranosyl(1″→6′)α-L-rhamnosyl 27-hydroxy oleanolic acid-28-O-β-D-glucopyranoside,OA)的抗炎活性。实验设置对照组、LPS组和OA组(5、10、20和40μmol/L)。结果显示,不同浓度OA处理对脂多糖诱导的一氧化氮(nitric oxide,NO)、前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)分泌具有一定的抑制活性,当浓度为20或40μmol/L时,OA对脂多糖诱导的炎症小体nod样受体家族,含pyrin结构域3(NOD-like receptor family,pyrin domain containing 3,NLRP3)和半胱天冬酶1(cysteine aspartate protease 1,Caspase 1)蛋白表达的抑制活性较好;当药物处理1 h和6 h时,OA显著下调了胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)和p38蛋白(p38 protein,p38)磷酸化水平,当药物处理2 h时,OA对p38和Jun氨基端激酶(Jun N-terminal kinase,JNK)磷酸化水平具有抑制活性;而且药物处理6 h时,不同浓度OA对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)核转位具有明显的阻滞作用。这些结果揭示了OA的抗炎活性,为针对性开发油茶果壳资源和以OA为基础的活性产品提供了科学依据。

文冠果花中具有抗AD活性三萜的定性与定量分析

目的建立UPLC-QTOF-MS法对文冠果花中8种三萜类化合物进行定性定量分析。方法采用ACQUITY UPLC HSS T3 C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以体积分数0.1%甲酸水为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),电喷雾离子源(ESI),在正、负离子模式下进行分析。结果通过与对照品的色谱和质谱数据进行比较,在文冠果花中共鉴定了8个三萜类化合物的结构;在同一实验条件下,可以完成8个组分的定量分析,方法学验证均符合要求,定量测定结果表明,与花(330.6μg·g^(-1))相比,花苞中三萜类化合物的含量较高(384.5μg·g^(-1))。结论所建立的UPLC-QTOF-MS方法适用于文冠果花中三萜类化合物的定性与定量分析,为文冠果花的合理应用和质量控制提供了理论依据。

醋乳香现代研究进展及质量标志物的预测

醋乳香是乳香Olibanum经醋炙法加工后的炮制品,炮制后可除去部分挥发油成分,消除其对胃黏膜的刺激性,同时能引药入经增强活血止痛、收敛生肌等功效。通过总结文献报道,从醋炙后化学成分与功效变化,刺激性研究,成分特有性、有效性、可测性,配伍环境及体内过程相关性等方面对醋乳香的质量标志物(Q-marker)进行预测分析,初步确定3-乙酰基-9,11-去氢-β-乳香酸、3-乙酰基-α-乳香酸、3-乙酰基-β-乳香酸、11-羰基-β-乳香酸、11-羰基-β-乙酰乳香酸5个三萜类成分和挥发油类成分乙酸辛酯为其可能的Q-marker,以期为醋乳香的全程质量评价、临床应用研究提供理论依据。

山楂叶中黄酮和三萜类成分定量分析

山楂叶作为一种中药材,有着多种活性成分。探讨了以水和不同比例乙醇溶液作为溶剂提取山楂叶的黄酮类和三萜类成分的得率。使用回流提取法,利用不同溶剂对山楂叶进行提取,利用紫外-分光光度计分别对两种溶剂下山楂叶的提取物中的黄酮和三萜类进行含量测定。结果表明:无论是黄酮类还是三萜类,在体积分数为50%乙醇溶液中的提取率最高,且黄酮含量总是大于三萜含量,水提浸膏中的三萜含量较少,推测山楂叶中的三萜类多为苷元结构。通过对山楂叶中黄酮类和三萜类进行含量测定,优化了溶剂选择,为山楂叶活性成分的提取分离提供理论支持。

短药蒲桃叶子的化学成分研究

利用正反相硅胶柱色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱等分离技术对短药蒲桃(Syzygium brachyantherum)叶子部分化学成分进行研究,运用NMR波谱技术和文献对照鉴定其结构,从中分离鉴定了10个化合物,分别为3β,23-O-isopropylidenyl-2a,19a-dihydroxy-urs-12-en-28-oic acid(1)、hyptaic acid B(2)、科罗索酸(3)、软木三萜酮(4)、表木栓醇(5)、粘霉烯醇(6)、daucosterol(7)、(7R,8S)-3,5'-dimethoxy-4',7-epoxy-8,3'-neolignane-5,9,9'-triol(8)、没食子酸甲酯(9)和β-芹子烯(10).其中,化合物1为新化合物,可能是在分离过程中由化合物2与丙酮形成的3β,23-缩酮,所有化合物均首次从短药蒲桃中分离得到.

甘草中三萜皂苷类成分抗肿瘤及联合抗肿瘤机制研究进展

甘草中三萜皂苷包括甘草酸、甘草次酸、乌拉尔甘草皂苷等,是甘草的主要活性成分之一。近年来,甘草三萜皂苷在抗肝癌、乳腺癌、肺癌等肿瘤及联合抗肿瘤方面的研究取得了一定进展。其可通过诱导肿瘤细胞凋亡、自噬、调控信息通路等机制抑制肿瘤细胞的增殖,在肿瘤的治疗上具有药用价值。

胶束毛细管电泳分离分析积雪草及其制剂中的4种三萜类有效成分

以pH=9.72的40%甲醇-16 mmol/L SDS-20 mmol/L硼砂溶液作为隐运行电解质,在分离电压25 kV,进样时间7 s,进样压力3447.38 Pa(0.5 psi),柱温25℃,PDA检测波长214 nm的仪器条件下,建立了一种胶束毛细管电泳法,能同时分离分析积雪草及其制剂中的羟基积雪草苷、积雪草苷、羟基积雪草酸和积雪草酸4种三萜类有效成分.运用此方法分析测定积雪草及其制剂中的4种三萜类有效成分的含量,加标回收率90%~110%,相对标准偏差均不超过5%.

密花美登木化学成分及抗肿瘤活性研究

目的:研究卫矛科美登木属植物密花美登木Maytenus confertiflora J.Y.Luo et X.X.Chen茎叶的化学成分及其体外抗肿瘤活性。方法:采用正相硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、MCI以及Semi-Prep HPLC对密花美登木醇提物进行分离纯化,并采用MTT法对三萜化合物进行体外抗肿瘤活性评价。结果:从密花美登木中分离得到17个化合物,分别鉴定为:tridec-1-ene(1)、bis(2-ethylhexyl)phthalate(2)、二十五烷(3)、β-amyrenone(4)、3-hydroxyfriedel-3-en-2-one(5)、β-谷甾醇(6)、28,29-dihydroxyfriedelan-3-one(7)、friedelin(8)、3α-hydroxyfriedel-2-one(9)、3-oxofriedelan-28-oic acid(10)、canophyllol(11)、3-oxo-29-hydroxyfiedelane(12)、pentadecanoic acid(13)、华中冬青素(14)、lingueresinol(15)、飞龙掌血内酯(16)、橙黄胡椒酰胺乙酸酯(17)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。化合物7对Eca-109、EJ细胞具有较强抑制作用,其IC_(50)分别为27.67、30.09μmol/L;化合物12对HepG_(2)、PANC-1细胞均具有较好的抑制作用,其IC_(50)分别为49.42、51.87μmol/L。

土牛膝总皂苷的提取、成分鉴定及抗炎活性研究

目的对土牛膝总皂苷进行体内外抗炎活性与分离鉴定研究,为其治疗炎症提供实验依据。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶-AQ柱色谱法(ODS-AQ)纯化制备土牛膝总皂苷;建立氨水诱导的急性咽炎大鼠模型,灌胃给药评价粗毛牛膝提取物及总皂苷抗炎活性;采用柱层析、核磁共振谱、质谱等技术对土牛膝总皂苷中的主要化合物进行分离、纯化和结构鉴定;建立脂多糖诱导的巨噬细胞炎症模型,评价各皂苷单体化合物的抗炎活性。结果制备的粗毛牛膝总皂苷含量达到81.8%;在急性咽炎大鼠模型中,粗毛牛膝总皂苷及水煎液具有良好抗炎疗效,能显著降低血清IL-6、IL-1β、TNF-α细胞因子水平;总皂苷中鉴定出6个齐墩果烷型三萜皂苷,分别为竹节参皂苷Ⅳa(1)、竹节参皂苷Ⅳa丁酯(2)、金盏花皂苷E(3)、金盏花皂苷E丁酯(4)、竹节参皂苷I(5)、竹节参皂苷Ⅴ(6);体外炎症模型表明,分离得到的三萜皂苷类单体化合物均有不同程度的抗炎作用。结论首次系统证明了皂苷类成分是粗毛牛膝发挥抗炎活性的药效物质基础;从牛膝属植物中首次分离得到化合物2和4,并证实其具有抗炎作用。

基于GC-MS和UPLC-QTOF/MS的灵芝不同生长阶段的成分分析

[目的]探究灵芝(Ganoderma lucidum)不同生长阶段的成分差异。[方法]使用气相色谱-质谱检测法(gas chromatographymass spectrometry,GC-MS)和超高效液相串联四极杆飞行时间质谱法(ultra performance liquid chromatography-quadrupole time-offlight mass spectrometry,UPLC-QTOF/MS)技术,选用ACQUITY超高效液相色谱仪HSS T3色谱柱在Waters超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)系统上对灵芝原基、产孢前和产孢后的子实体进行成分分析与鉴定。[结果]GC-MS共检测到24种成分,其中醛类8种、酯类4种、烃类1种、酸类1种、醇类1种、酮类2种、胺类2种、吡嗪类1种、咪唑类1种、吡咯类1种、呋喃类1种、酚类1种。UPLC-QTOF/MS共检测90种成分,最主要的成分三萜类共有67种,此外还包括脂肪酸类8种、氨基酸及其衍生物类3种、苷类2种、维生素1种、生物碱类2种、有机酸类2种、糖类2种、萜1种、杂萜1种、甾体1种。共有73种成分在原基中检出,其中三萜类成分54种;72种成分在产孢前子实体中检出,其中三萜类成分57种;52种成分在产孢后子实体中检出,其中三萜类成分有42种。[结论]灵芝不同生长阶段成分存在明显差异,本研究结果为灵芝不同时期的化学成分的分析与鉴定,以及化学物谱图的完善提供了基础数据,为相关药理、药效分析提供了有效参考。