大蝎子草总多酚提取工艺优化及抗氧化活性

本试验采用超声辅助乙醇提取大蝎子草地上部分总多酚,通过单因素试验结果设计Box-Behnken模型,优化大蝎子草地上部分总多酚最佳工艺条件,用DPPH自由基清除率、FRAP法评价大蝎子草地上部分总多酚的抗氧化性。结果显示,乙醇浓度、液固比、超声时间、超声温度的最佳工艺参数分别为75%、50 mL/g、35min、40℃时,总多酚提取率为2.81%,与Box-Behnken模型的预测值相符。抗氧化性试验表明,0.15 mg/mL大蝎子草总多酚提取液DPPH清除率可达75.8%,半数抑制浓度IC_(50)值为0.057 mg/mL,具有一定的抗氧化性,为大蝎子草野生资源的研究和利用提供相应的理论支撑,为新型饲料添加剂的开发提供理论基础。

红火麻化学成分的分离与鉴定

目的研究蝎子草属植物红火麻的化学成分。方法利用各种色谱法进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据分析进行结构鉴定。结果从红火麻中分离并鉴定了10个化合物,分别为金色酰胺醇乙酸酯（aurantiamide acetate,1）、齐墩果酸（oleanolic acid,2）、2α,3α,19α-三羟基-12-烯-28-乌苏酸（2α,3α,19α-trihydroxyurs-12-en-28-oic,3）、东莨菪素（scopoletin,4）、3-甲氧基-4-羟基苯甲酸（3-methoxy-4-hydroxybenzoic acid,5）、对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid,6）、β-谷甾醇（β-si-tosterol,7）、胡萝卜苷（daucosterol,8）、5-羟甲基糠醛（5-hydroxymethyl furaldehyde,9）、甘露糖（mannose,10）。结论化合物1~10均为首次从红火麻中分离得到,化合物1~6、8~10为首次从蝎子草属植物中分离得到。

蝎子草浸膏的抗炎、抗痛风及镇静作用研究

制备蝎子草浸膏,采用二甲苯致小鼠耳肿胀法和角叉菜胶致小鼠足肿胀法,并测定小鼠炎足中PGE2、MDA、SOD含量及高尿酸血症模型小鼠血尿酸含量,研究蝎子草浸膏的抗炎和抗痛风作用;采用自主活动测定法、转杆法和高架十字迷宫法,研究蝎子草浸膏对小鼠中枢神经兴奋性系统的影响.结果表明:蝎子草浸膏能降低二甲苯致小鼠耳肿胀效果,并降低小鼠炎足中MDA、PGE2含量,具有抗炎作用;能降低血尿酸,具有抗痛风作用;减少小鼠自主活动次数,降低运动协调性,具有镇静作用.

蝎子草醇提浸膏对金黄色葡萄球菌抗菌机制的研究

目的:研究蝎子草醇提浸膏(Girardinia suborbiculata C.J.Chen ethanol extract,GSEE)对金黄色葡萄球菌的抗菌机制.方法:测定蝎子草醇提浸膏对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC),通过GSEE对菌体生长曲线、菌体可溶性蛋白的表达和菌体核酸合成等的影响来对GSEE的抗菌机制进行研究.结果:GSEE对金黄色葡萄球菌的MIC为100 mg/mL,可明显抑制金黄色葡萄球菌对数生长期的菌体分裂;SDS-PAGE电泳表明,金黄色葡萄球菌的可溶性蛋白含量在GSEE作用后的条带明显少于对照组;同时,通过DAPI染色显示,GSEE对菌体的核酸合成具有显著抑制作用.结论:GSEE对金黄色葡萄球菌具有较强的抗菌作用,其抗菌机制可能通过抑制菌体可溶性蛋白的表达和菌体核酸的合成等方面来实现抑制金黄色葡萄球菌的生长.

掌叶蝎子草多糖降血糖活性及其体内外抗氧化能力研究

目的:研究掌叶蝎子草Girardinia diversifolia(Link)Friis多糖对糖尿病小鼠的降糖效果及体内外抗氧化活性.方法:在体外化学模拟条件下,测定掌叶蝎子草粗多糖对超氧阴离子(O2-·)、羟基自由基(.OH)的清除活性;采用四氧嘧啶诱导建立糖尿病小鼠模型,糖尿病小鼠分别灌胃盐酸二甲双胍、掌叶蝎子草多糖低剂量(200mg/kg)、高剂量(400mg/kg),给药后测定小鼠的空腹血糖值,血清MDA体积分数和SOD的活性.结果:掌叶蝎子草粗多糖清除·OH的IC50值≥2mg/mL,清除O2-·的IC50值≥5mg/mL,掌叶蝎子草粗多糖清除自由基活性与其体积质量分数成正比.掌叶蝎子草高剂量多糖能降低糖尿病小鼠的血糖值、采食量和饮水量,提高了小鼠胸腺指数和脾脏指数,升高血清SOD水平,降低血清MDA水平,抑制糖尿病小鼠体质量减轻,但治疗效果略低于阳性药物盐酸二甲双胍片;掌叶蝎子草多糖低剂量降血糖效果不明显.结论:掌叶蝎子草多糖具有降血糖作用,这为蝎子草多糖有可能成为新的天然降糖药物或保健品提供了科学依据.

大蝎子草干、鲜品水提物的抗炎镇痛作用实验研究

目的:研究大蝎子草干、鲜品水提物的抗炎及镇痛作用。方法:取健康昆明种小鼠随机分为模型组(蒸馏水),阳性对照组(阿司匹林,0.3 g/kg),大蝎子草干品水提物高、中、低剂量组及大蝎子草鲜品水提物高、中、低剂量组共8组;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀及皮肤毛细血管通透性实验,评价大蝎子草干、鲜品水提物的抗炎作用;采用醋酸致小鼠扭体反应与小鼠热板致痛实验动物模型评价其镇痛作用。结果:与模型组比较,大蝎子草干、鲜品水提物均能显著减轻小鼠耳廓肿胀度(P<0.01),提高小鼠的痛阈值(P<0.01)及减少醋酸致小鼠扭体反应的次数(P<0.01),大蝎子草鲜品水提物还能明显抑制二甲苯致小鼠皮肤毛细血管通透性(P<0.01,P<0.05),且大蝎子草鲜品水提物抗炎、镇痛效果优于干品水提物。结论:大蝎子草干、鲜品水提物均具有抗炎及镇痛作用,且大蝎子草鲜品水提物作用优于大蝎子草干品水提物。

三种活麻水煎液药理作用探索

目的 :研究活麻的抗炎、镇痛作用。方法 :小鼠耳郭肿胀实验 ,大鼠足跖肿胀实验及小鼠热板法。结果 :三种活麻水煎液均可明显抑制二甲苯所致小鼠耳郭肿胀 ,角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀以及热板法所致小鼠疼痛。结论 :三种活麻水煎液均见有抗炎。

正交试验法优选大蝎子草总黄酮提取工艺

目的:优选大蝎子草(HGD)总黄酮最佳提取工艺。方法:以加水量(A),提取次数(B),提取时间(C)为影响因素,采用正交试验方案L9(34)进行HGD总黄酮的提取,紫外分光光度法在波长269 nm处测定吸光度,以浸膏收率、总黄酮含量为考察指标,进行综合加权评分,确定HGD总黄酮最佳提取工艺。结果:最佳水提取工艺为A2B3C3,即18倍加水量、提取3次、每次提取3 h时可获得较高的浸膏收率及总黄酮含量;加权评分方差分析结果表明:因素B及因素C对总黄酮提取量有显著影响。结论:利用正交试验设计方法对HGB总黄酮提取工艺进行优化,为该药材的深入研发提供一定的参考。

大蝎子草地上部分化学成分研究

目的:研究大蝎子草地上部分的化学成分。方法:采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶层析及MCI柱层析及结晶、重结晶方法分离纯化大蝎子草地上部分化合物,并运用波谱及化学方法对所分得的化合物进行结构鉴定。结果:从大蝎子草地上部分分离纯化得到5个化合物,经波谱解析鉴定为尿嘧啶、儿茶酚、5-硝基愈创木酚、β-谷甾醇及草酸,除化合物β-谷甾醇外均为首次从大蝎子草地上部分分离得到。结论:大蝎子草地上部分成分有尿嘧啶、儿茶酚、5-硝基愈创木酚、β-谷甾醇及草酸。

大蝎子草提取物抗风湿活性的初步研究

本研究以抗炎镇痛为指标,探讨大蝎子草提取物的抗风湿作用。用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对大蝎子草95%乙醇提取物进行分段萃取,再用小鼠急性耳廓肿法、棉球肉芽肿法考察各萃取部位的抗炎活性;小鼠热板法、醋酸扭体法考察各萃取部位的镇痛活性。结果表明,乙酸乙酯萃取部位具有显著的抗炎和镇痛活性,能明显抑制二甲苯所致的小鼠急性耳廓肿胀、小鼠棉球肉芽肿;可使醋酸所致的扭体次数明显减少,并使小鼠热板法痛阈明显提高。

蝎子草属植物的分类

在对我国１３个省区的蝎子草属植物进行调查、采集、鉴定大量植物标本的基础上，比较分析了国内外有关资料和模式标本，研究了其系统发育的规律性，提出蝎子草属４种２亚种的新观点。

蝎子草属3种植物叶腹面微形态研究

蝎子草属３种植物叶腹面的微形态电镜扫描结果显示：３种植物叶腹面钟乳体和螫毛在形态及数量上差异明显，可以作为种的划分依据。

蝎子草属植物的分布及生态适应性

对蝎子草属（Ｇｉｒａｒｄｉｎｉａ）植物的分布及生态适应性进行了研究，首次揭示了该属植物的世界分布及中国分布的规律性，界定了植物的生活型，阐述了植物的生态特征。

大蝎子草质量标准及指纹图谱研究

目的建立大蝎子草的质量标准及指纹图谱。方法TLC法定性鉴别大蝎子草中的东莨菪内酯,根据2020年版《中国药典》及《国家药品标准工作手册》相关方法测定其水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物。采用HPLC法建立指纹图谱,该药物的分析采用Agilent C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量1.2 mL/min;柱温30℃;检测波长290 nm。采用主成分分析、聚类分析对指纹图谱进行评价,HPLC法测定对羟基肉桂酸、东莨菪内酯、紫云英苷含量。结果TLC显示清晰斑点,分离度好。大蝎子草的水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物含量分别为9.39%~14.63%、15.13%~19.00%、0.87%~4.80%、15.59%~23.85%。共筛选出9个共有色谱峰,13批样品相似度均在0.900以上,主成分分析和聚类分析结果一致。对羟基肉桂酸、东莨菪内酯、紫云英苷的平均含量分别为0.0605、0.0216、0.1243 mg/g。结论含量测定方法稳定、准确性好;指纹图谱方法分离度良好,稳定可靠,可为完善大蝎子草的质量控制方法提供参考。建议大蝎子草水分不得过13.0%,总灰分不得过21.0%,酸不溶性灰分不得过5.0%,水溶性浸出物(热浸法)含量不得少于14.0%,紫云英苷含量不得少于0.010%。

苗药大蝎子草药材与标准汤剂指纹图谱对比及药材化学模式识别分析

目的建立苗药大蝎子草药材和标准汤剂的HPLC指纹图谱,并对15批大蝎子草药材进行化学模式识别分析。方法根据《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》建立黔产苗药大蝎子草15批药材及标准汤剂的指纹图谱并对两者中的对羟基肉桂酸进行含量测定;采用SPSS26.0统计学软件进行聚类分析、主成分分析;采用SIMCA 14.1统计软件进行偏最小二乘判别分析。结果15批大蝎子草药材指纹图谱确立了11个共有峰,标准汤剂确认了8个共有峰,指认出峰9为对羟基肉桂酸。聚类分析结果显示,15批大蝎子草药材可聚为两类。主成分分析结果显示,前3个主成分的累计方差贡献率为83.385%。偏最小二乘判别分析筛选出造成不同产地差异的6个色谱峰。结论大蝎子草药材和标准汤剂指纹图谱、主要成分基本一致,该方法可用于大蝎子草药材质量控制的研究。

苗药蝎子草醇提物抗菌活性研究

为探明蝎子草乙醇提取物体外抑菌活性,通过超声波辅助乙醇提取法提取高海拔地区蝎子草的生物活性成分,采用琼脂打孔扩散法进行抑菌活性检测,以抑菌圈直径为指标,评价蝎子草醇提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑菌效果。结果表明,蝎子草提取液的抑菌效果随着海拔高度的升高而增强,其醇提取物对上述三种菌均具有抑菌效果,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌效果最强,对枯草芽孢杆菌抑制最弱。

基于HPLC的蝎子草三种有效成分含量测定

以蝎子草为原料,采用HPLC比较索氏提取法和超声波提取法对蝎子草中β-谷甾醇、山萘素、东茛菪内酯三种主要药效成分的提取效果,并进一步考察洗脱剂种类和上样量对三种成分含量检测的影响。结果表明:索氏法和超声法对β-谷甾醇提取的色谱图面积无显著性差异,索氏法对山萘素提取的色谱图面积显著大于超声法,而超声法对东茛菪内酯提取的色谱图面积显著大于索氏法;β-谷甾醇的最佳洗脱剂为99%甲醇,山萘素和东茛菪内酯的最佳洗脱剂为乙腈-0.1%磷酸(65∶35),三种成分的适宜上样量均为40μL。通过HPLC法测定蝎子草中β-谷甾醇、山萘素、东茛菪内酯的含量分别为0.422 5 mg/g、0.099 3 mg/g、0.021 2 mg/g。

响应面法优化大蝎子草水溶性总黄酮提取工艺及其水提液抗氧化活性分析

目的:优化大蝎子草水溶性总黄酮提取工艺,并对其水提液抗氧化活性进行分析。方法:以浸泡时间、料液比和提取时间为影响因素,大蝎子草水溶性总黄酮含量为评定指标,设计响应面实验。通过DPPH和ABTS自由基清除实验,对大蝎子草水提液的抗氧化活性进行分析。结果:大蝎子草水溶性总黄酮的最佳提取工艺为浸泡时间65 min、料液比1∶19、提取时间70 min,水溶性总黄酮含量为6.42±0.026 mg/g。大蝎子草水提液和VC溶液对DPPH自由基的最大清除率分别为73.38%和97.34%,IC_(50)值分别为59.616μg/mL和0.018μg/mL,大蝎子草水提液和VC溶液对ABTS自由基的最大清除率分别为99.38%和99.47%,IC_(50)值分别为12.086μg/mL和13μg/mL。结论:该方法简便、稳定、可行,可用于大蝎子草水溶性总黄酮的提取,且其水提液具有一定的抗氧化作用。

大蝎子草的化学成分研究

目的:研究大蝎子草Girardinia diversifolia(Link)Friis的化学成分。方法:利用硅胶柱色谱、薄层色谱等对大蝎子草的化学成分进行分离纯化,并通过波谱数据及理化性质鉴定化合物结构。结果:从大蝎子草中分离得到20个化合物,分别鉴定为:委陵菜酸(1)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、蔗糖(4)、β-谷甾醇(5)、邻苯二甲酸二戊酯(6)、秦皮素(7)、东莨菪内酯(8)、对羟基肉桂酸(9)、水杨酸(10)、香草醛(11)、丁二酸(12)、trans-3-dodecenedioic acid(13)、壬二酸(14)、6,9,10-trihydroxy-octadec-7-enoic acid(15)、(E,E)-9-oxooctadeca-10,12-dienoic acid(16)、1-hexadecanoyl propan-2,3-diol(17)、1-亚油酸甘油酯(18)、n-hexacos-5,8,11-trienoic acid(19)、二十六烷(20)。结论:除化合物5、8外,其余化合物均为首次从大蝎子草中分离得到。

大蝎子草乙酸乙酯部位对脂多糖诱导巨噬细胞炎症介质表达的影响

目的:研究大蝎子草乙酸乙酯部位对脂多糖(LPS)诱导大鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达、炎性因子一氧化氮(NO)与肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌的影响。方法:建立体外培养大鼠腹腔巨噬细胞,以LPS为致炎刺激剂,免疫细胞化学法研究大蝎子草乙酸乙酯部位对LPS诱导大鼠腹腔巨噬细胞iNOS表达的影响,Griess法分析培养液NO含量,间接MTT法检测培养液TNF-α含量。结果:LPS刺激大鼠腹腔巨噬细胞后,其iNOS表达显著增加,培养液中NO和TNF-α含量显著增加,大蝎子草乙酸乙酯部位对上述炎症介质的增加具有显著的抑制作用。结论:大蝎子草乙酸乙酯部位能抑制LPS诱导NO和TNF-α的产生,减少iNOS的表达,为其进一步研究开发奠定了实验基础。