苹果叶面附生微生物区系及其有益菌的研究 Ⅲ: 蜡芽B_(017)防病及促生的实验

室内测定表明：益菌Ｂ０１７可抑制褐斑病孢子的萌发；在ＰＤＢＡ平板上可抑制苹果轮纹病、炭疽病、霉心病病菌的菌丝生长，其无菌滤液对苹果轮纹病、炭疽病、霉心病的菌丝生长有抑制作用．在苹果生育前期，适时喷施Ｂ０１７于苹果表面，后期褐斑病发病率下降２０．９１％～２４．７３％，病情指数下降２１．６３％～３９．５６％；苹果轮纹病、炭疽病、霉心病的发病率分别下降２５．１５％～４３．０２％，３０．４９％～６８．４９％，２７．２７％～３６．８８％．苹果的一年生脱毒苗喷施Ｂ０１７后，能促使苗高增加，离嫁接口５ｃｍ处的径粗增大．

蜡质芽孢杆菌（Bacillus cereus）芽孢的形成及与PHB的关系

芽孢并非细菌生活史不可缺少的部分．它的形成受环境因素的影响．ＰＨＢ（聚β－羟基丁酸）是在营养丰富（尤其Ｃ／Ｎ比值高）时，在细胞内积累的一种贮藏物质．当营养缺乏，细菌细胞可以利用这些贮藏物质作为碳源和能源．Ｂａｃ．ｃｅｒｅｕｓ在以３％葡萄糖为碳源，０．６％蛋白胨为氮源的培养基中，菌体生长旺盛，ＰＨＢ积累多，芽孢形成晚．一定浓度磷酸盐和镁离子利于菌体生长和ＰＨＢ积累．离心洗涤的细胞悬浮在蒸馏水中，在５ｈ内补入葡萄糖，会使芽孢形成过程逆转，芽孢数减少．连续传代，可以降低芽孢形成能力．

降解黄曲霉毒素B_1芽孢杆菌的筛选与鉴定

本研究以香豆素为唯一碳源进行黄曲霉毒素B_1(AFB_1)降解菌的筛选,从花生地土壤中分离出高效降解AFB_1的菌株A3042。研究该菌的上清液、菌悬液、胞内液对AFB_1降解特性。结果表明,菌株A3042能高效降解AFB_1,其胞外上清液、菌悬液和胞内液分别降解91. 7%、11. 4%和7. 6%的AFB_1,表明起降解的活性物质主要位于胞外液。综合其形态学特征、生理生化特征和16S rRNA基因分析,鉴定菌株A3042为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),命名为Bacillus cereus A3042。本研究为食品和饲料中AFB_1的生物降解提供菌种资源。

蜡样芽孢杆菌B-02菌株培养基及培养条件的优化

为研究培养条件对蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)B-02菌株生长和对番茄灰霉病菌(Botrytis ci-nerea)抑菌活性的影响,分别采用分光光度计法、琼脂孔扩散法和杯碟法进行Bacillus cereusB-02菌株的菌体量和抑菌活性的测定。结果表明,B-02菌株的最佳培养条件为:装液量50 ml(250 ml三角瓶),接种量1%(V/V),转速140 r/min,温度32℃,初始pH值为9.0的NB培养基中培养36 h;在此条件下B-02菌株抑菌活性比初始条件提高16.22%。

应用PCR方法检测蜡样芽胞杆菌的研究

采用PCR技术,通过扩增蜡样芽胞杆菌的gyrB基因来实现对蜡样芽胞杆菌的快速检测。结果表明,以gyrB为目的基因设计引物建立的PCR检测方法能特异性地扩增出蜡样芽胞杆菌,且与其他芽胞杆菌菌株均无交叉反应,其检测敏感性可达9 cfu/mL,能够应用于蜡样芽胞杆菌的鉴定。

两种培养基应用于蜡样芽孢杆菌的计数效果比较

目的比较两种蜡样芽孢杆菌计数培养基的检测效果。方法分别使用甘露醇卵黄多黏菌素B(mannitol-yolk-polymyxin-B,MYP)培养基和蜡样芽孢杆菌显色培养基对于包括蜡样芽孢杆菌在内的10株芽孢杆菌的标准菌株、8株非芽孢杆菌标准菌株、30株食品中蜡样芽孢杆菌的分离株进行生长率、特异性及选择性比对,并应用两种培养基对737件实际食品样品进行计数效果对比。结果蜡样芽孢杆菌显色培养基与MYP培养基虽然在生长率和实际样品检出率差异无统计学意义,但特异性及选择性均优于MYP,特别是显色培养基的特异性在实际样品的检测中更具优势。结论蜡样芽孢杆菌显色培养基较传统的MYP培养基具有更好的特异性及选择性,建议在食品样品蜡样芽孢杆菌计数检测时增加显色培养基。

市售凉拌小菜蜡样芽孢杆菌污染调查报告

目的:通过对市售凉拌小菜蜡样芽孢杆菌污染调查,对该菌的繁殖情况、抵抗力、毒力、菌型分布进行了研究。方法:按照GB/T4789.14-2003《食品卫生微生物学检验蜡样芽孢杆菌检验》及卫生部《全国蜡样芽孢杆菌协作组南宁会议资料》。结果:从48份小菜中检出蜡样芽孢杆菌33份。分离细菌121株,能分型的113株,分布在6个型,各型菌对动物有较强毒力,小菜加工后存放时间与细菌繁殖数量高度正相关。该菌耐热性强,制售小菜所用原料在制作时必须充分加热。结论:市售凉拌小菜受该菌污染较为普遍,各型菌株对动物均有较强毒性,易引起食物中毒。