New alkaloid isolated from Fritillaria pallidiflora

目的 确证从伊贝母中分离得到一种新的生物碱的结构。方法 IR,MS及 NMR。结果 其结构被鉴定为N- ( 1′,4′-二羟基 - 1′,2′,3′,4′-四氢化萘基 ) -丙基 - N-二苯基甲基 - N- 3 ,3 -二甲基丁胺。结论 这种生物碱为首次从植物中分离得到 ,它在骨架结构上与已知的贝母生物碱截然不同。

Effects of Different Seedling Raising Methods on Seedling Growth of Two Kinds of Fritillaria

[Objectives] To reveal the effects of film mulching and open ground seedling raising on the differences between Fritillaria przewalskii Maxim. and Fritillaria pallidiflora Schrenkf., find the optimal seedling raising method, and provide scientific basis for standard seedling raising technique and protecting wild resources of Fritillaria. [Methods] This experiment counted the seedling emergence number and calculated the seedling emergence indicator and the yield. [Results] The results showed that under the condition of film mulching and open ground seedling raising, the changes of Fritillaria seedlings showed an "S" curve, conforming to the Logistic equation, and the rapid growth period appeared 5-13 d after seedling emergence. Compared with the open ground seedling raising, the seedlings of F. przewalskii Maxim. and F. pallidiflora Schrenkf. raised through film mulching emerged 2-4 d earlier, and the yield increased by 56.8% and 21.71%, respectively, and the individual quality was excellent. [Conclusions] The film mulching of F. przewalskii Maxim. and F. pallidiflora Schrenkf. has great significance to protect the wild resources of Fritillaria in Eryin Mountain Area. It is recommended to adopt the film mulching method for Fritillaria seedling raising, to reduce the yield decline due to lodging, and adopt sun-shading net covering after sowing.

伊犁贝母总生物碱的药效学研究

目的 :研究伊犁贝母总生物碱的镇咳、祛痰和平喘作用。方法 :以小鼠氨水引咳法、豚鼠枸橼酸引咳法和猫喉上神经刺激引咳法观察其镇咳作用 ;以小鼠酚红排泌法、大鼠毛细管排痰法观察其祛痰作用 ;以豚鼠乙酰胆碱 组胺引喘法观察其平喘作用。结果 :在 10mg/kg剂量下 ,十二指肠给药对电刺激猫喉上神经引咳具有显著的镇咳作用。连续灌胃给药 5d ,伊犁贝母总生物碱在 4 0 ,2 0 ,10mg/kg的剂量下对小鼠氨水引咳具有显著的镇咳作用 ;在 2 0 ,10mg/kg的剂量下对豚鼠枸橼酸引咳具有显著的镇咳作用 ,能显著增加大鼠毛细管排痰量 ;在 4 0 ,2 0mg/kg的剂量下具有显著增加小鼠酚红排泌量的作用 ,对乙酰胆碱 组胺所致的豚鼠哮喘具有显著的平喘作用。结论 :伊犁贝母总生物碱对实验动物具有显著的镇咳、祛痰及平喘作用。

伊犁贝母总生物碱对豚鼠的平喘作用及其机理

目的 :研究伊犁贝母总生物碱 (FPA)对豚鼠的平喘作用及其作用机理。方法 :以乙酰胆碱 组胺引喘法观察FPA对豚鼠的平喘作用 ;制备豚鼠气管螺旋条标本 ,通过观察其张力变化研究FPA对离体气管平滑肌基础张力的影响及其组胺和卡巴胆碱对气管收缩的抑制作用。结果 :FPA在 10 ,2 0 ,4 0mg/kg剂量下连续灌胃给药 5d ,对乙酰胆碱 组胺所致的豚鼠哮喘具有显著的延长引喘潜伏期的作用 ;对豚鼠离体气管平滑肌的基础张力无显著影响 ,对组胺引起的收缩也无显著的抑制作用 ,对卡巴胆碱引起的收缩 ,FPA在 10mg/L浓度时开始呈现非常显著的抑制作用 (P <0 .0 1) ,对 6 μmol/L卡巴胆碱的IC50 为 14 7mg/L。FPA可浓度依赖性地使卡巴胆碱量效曲线向右平移 ,最大收缩张力无显著变化。结论 :FPA对豚鼠具有平喘作用 。

伊贝碱甙B的分离和结构测定

本文报道自吉林栽培的伊贝母(Fritillaria pallidiflora Schrenk)中分得一种新的C-去甲-D-异甾体生物碱甙,命名为伊贝碱甙B(yibeinoside B)。根据红外、质谱、氢谱和碳谱确定了结构。

伊贝母根际有益微生物对栽培产量的影响

本文利用PBY培养基从药用植物伊贝母根际土壤中分离纯化出一株微生物菌种,通过个体形态、培养特征和主要理化特性等试验,依据伯杰细菌鉴定手册将菌种鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis Cohn。制备其液体菌剂,在贝母的不同生长发育期灌根和喷叶后,进行伊贝母产量的测定,结果表明,使用该菌剂后,可以提高16.8%的贝母产量。

伊贝母种子发芽率影响因素的研究

目的探讨导致伊贝母种子在自然环境下发芽率低的关键影响因素。方法运用去皮、高温刺激,切除胚乳,流水冲洗等物理方法或GA3,硫脲,KT等化学试剂处理种子。结果发现去皮与切除胚乳的方法均能有效提高种子发芽率,达到90.0%左右,外源激素和高温刺激效果也较大,均超过50.0%。结论贝母种子属于种皮休眠和胚休眠的双重类型,物理方法和化学试剂对其破除休眠作用明显。

遥感技术在伊犁贝母调查中的应用

以种植伊犁贝母为研究对象,通过实地调查其物候特性、生长状况及分布特点,基于Worldview-2影像采用多种方法提取伊犁贝母信息,探讨遥感技术在伊犁贝母调查中的可行性。调查显示伊犁贝母多在4月中下旬开花且花期短,5月地面部分停止生长并陆续倒苗;不同年份的贝母形态各异,与其他作物无规则穿插种植,分布零散,大部分区块呈细长条状分布,面积不大,部分贝母植株低矮,种植稀疏且不均匀,也存在不同年份贝母混生现象。利用遥感影像的信息提取结果表明,受其分布及生长特点影响,常用的最大似然、支持向量机、决策树、面向对象等计算机分类法对伊犁贝母的提取存在一定局限性,无法获得有效结果,仅目视解译能有效提取。本研究为遥感技术在伊犁贝母调查中的应用提供了参考。

离体培养条件下伊犁贝母四倍体诱导及筛选

目的选育四倍体伊犁贝母Fritillaria pallidifloraSchrenk新种质,为高产、高生物碱含量的伊犁贝母育种打下基础。方法以鳞茎诱导出的不定芽为材料,将其接入含有2%二甲基亚砜、不同浓度秋水仙素的液体MS培养基诱导四倍体,利用处理后不定芽表型变化及染色体计数筛选鉴定四倍体伊犁贝母。结果成功获得了染色体加倍的伊犁贝母新材料,其中以含秋水仙素400 mg/L浸泡24 h效果最佳,四倍体诱导率达到33.3%,四倍体植株与二倍体对照相比,二者在表型性状、显微结构上有明显区别。结论四倍体植株体型大、生长优势明显,离体条件下利用不定芽诱导多倍体是伊犁贝母倍性育种的一条有效途径。

伊犁贝母鳞茎中非生物碱化学成分的研究

目的研究伊犁贝母鳞茎的非生物碱类化学成分。方法对伊犁贝母鳞茎的乙醇提取物采用正、反相硅胶柱层析及Sephadex LH-20层析等方法进行分离纯化,通过理化及光谱学方法鉴定化合物的结构。结果分离得到7个非生物碱成分,分别为蛇床子素（1）、佛手柑内酯（2）、花椒毒内酯（3）、6,9,10-三羟基-7-十八烯酸（4）、5α,6β-二羟基胡萝卜苷（5）、胡萝卜苷（6）和β-谷甾醇（7）。结论化合物1~4为首次从贝母属植物中分离得到,化合物5~7为首次从该植物中分离得到,这也是首次从该属植物中分离得到香豆素类成分。

贝母愈伤组织的诱导及植株再生

通过对三种野生贝母的离体培养,研究了贝母基因型、温光条件、激素配比对贝母愈伤及不定芽的影响。结果表明,在对贝母鳞茎外植体适当的低温暗处理后,再转入光下培养,可明显减轻外植体的褐化;不同基因型对贝母愈伤组织所诱导差异不大,进一步证明贝母愈伤组织的诱导,不依赖于基因型;贝母愈伤组织和不定芽的诱导需要不同的激素配比,诱导贝母愈伤组织的最佳培养基为(MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L),诱导不定芽的最佳培养基为(MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.1mg/L),平均每个外植体均产生2～3个不定芽,且粗壮、移栽成活率高。建立了完整的不依赖于基因型的贝母植株再生体系。

伊犁贝母和梭砂贝母生理活性的初步比较

目的 :对伊犁贝母总生物碱 (FPA)、梭砂贝母总生物碱 (FDA)生物活性进行初步比较。方法 :采用小鼠二甲苯耳水肿、SO2 引发小鼠咳嗽、酚红法祛痰实验及细菌体外培养等方法。结果 :伊犁贝母和梭砂贝母的总生物碱以 40 0mg·kg-1,2 0 0mg·kg-1剂量一次性灌胃给药 ,具有明显的抗炎、镇咳、祛痰作用 ,伊犁贝母的作用效果在某些方面略强于梭砂贝母 ;在相同生药量下同样表现出前者强于后者的作用效果。伊犁贝母对流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎球菌等多种细菌有不同程度的抑菌作用 ,梭砂贝母与之相比抑菌作用较弱。结论 :伊犁贝母抗炎、镇咳、祛痰、抑菌作用略强于梭砂贝母。

伊贝母组织培养中次生代谢产物的研究

以组织培养和细胞液印迹直接荧光观察法相结合，建立了伊贝母组织培养生物合成高含量贝母碱的技术，并通过薄层层析和薄层扫描对贝母生物碱的组成进行了比较分析。结果表明，不论是组织培养物还是栽培贝母中都含有贝母碱的主要成分——西贝素。但根中贝母碱的成分要比其它组织或器官中更为复杂，含量和活性也较高。继代培养８代的不定芽和不定根中贝母碱的含量分别高于栽培５年贝母根的０．０１％和０．０２％。

柱前衍生化高效液相色谱法测定伊贝母中西贝素的含量

目的：采用柱前衍生化反相高效液相色谱法测定中药伊贝母中西贝素的含量。方法：色谱柱为ＯＤＳ柱，流动相为甲醇水（９０∶１０），内含４ｍｌ·Ｌ－１的三乙胺，检测波长２２７ｎｍ。结果：西贝素苯甲酸酯的峰面积与该生物碱的重量在０．４～３．５μｇ范围内呈良好的线性关系，回归方程为Ｙ＝－２．０４×１０３＋６．０６×１０４Ｘ，ｒ＝０．９９９６；平均回收率为１０１．０％（ｎ＝５，ＲＳＤ＝２．８％）。结论：西贝素为伊贝母中主要生物碱成分。

不同苗龄伊贝母根系分泌物GC-MS分析

以不同苗龄伊贝母幼苗为试验材料,采用连续收集法收集伊贝母不同苗龄根系分泌物,并采用气相色谱质谱联用技术(GC-MS)分析了根系分泌物的组分和含量.结果表明:一、二、三、四年苗龄伊贝母幼苗根系分泌物化合物在含量上存在较大差异,醛酮类化合物含量最多,分别为57.90%、74.15%、59.66%、59.32%.脲类、苯酚类、醇类含量较小,均在0.5%以下.但不同苗龄根系分泌物在种类和组成上相似,连续捕获系统获得的根系分泌物种类丰富,主要为有机物,包括烷烃类、酯类、醚类、烯烃类、苯酚类等有机物质.

不同施肥方式对伊贝母生长及土壤养分的影响

【目的】研究新疆伊犁地区伊贝母的最佳施肥技术模式。【方法】通过采用四因素三水平正交试验设计,设计微生物菌肥、磷肥,生物有机肥+有机物料腐熟剂,精制有机肥+有机物料腐熟剂4因素,在优化施肥(2水平)基础上,设计1水平(2水平×0.5)、3水平(2水平×1.5),正交处理共9个,对伊贝母生长及土壤进行了测定。【结果】不同施肥量处理下的伊贝母植株高度、伊贝母植株鲜重、鳞茎鲜重、土壤有机质、土壤全氮含量和土壤p H值均不同;随着伊贝母生育进程的推进,各个处理下的土壤p H均表现为萌芽期显著高于现蕾期和始花期,而土壤有机质和土壤全氮含量规律并不明显;不同施肥量处理下,伊贝母每667 m^2株数没有明显差异;在同一微生物菌肥施用量下,伊贝母产量的变化趋势无明显规律,处理8即微生物菌肥为6 kg/667m^2,磷肥为18 kg/667 m^2,生物有机肥+有机物料腐剂为16 kg/667 m^2,精制有机肥+有机物料腐剂为60 kg/667 m^2时,伊贝母产量最高为381.14 kg/667 m^2;在单一微生物菌肥施用量下,伊贝母产量的变化趋势无明显规律。【结论】以微生物菌肥、磷肥基施为主,配施生物有机肥、有机物料腐熟剂,生育期开沟追施微生物菌肥,可获得伊贝母高产。

关于伊贝母微体繁殖植株再生途径的研究

本实验用组织培养方法，分别以伊贝母种胚切段、鳞瓣切块、幼茎切段为外植体，进行愈伤组织、鳞茎和胚状体诱导，并通过三种途径即①器官发生型途径；②器官型途径；③类胚体途径得到再生植株。

伊贝母根系分泌物自毒作用研究

采用生物测定的方法,研究了伊贝母(Fritillaria pallidifloraSchvek)根系分泌物及其主要成分1,3,5-三烯丙基-1,3,5-三嗪-2,4,6(1H,3H,5H)三酮、苯酚和二者的混合液对伊贝母生长的影响。结果表明,伊贝母根系分泌物对其种子萌发及胚根胚轴的生长有明显抑制作用,各浓度处理液对种子萌发及发芽势的影响多表现为抑制作用,随浓度升高而增强,但当超过一定浓度以后抑制作用有所下降。各浓度处理液对胚根胚轴生长的抑制作用表现为随浓度升高而增强,在较低浓度时对胚轴的生长表现为一定的促进作用。

伊贝母总生物碱和总黄酮组分复方的止咳祛痰平喘作用研究

目的探讨伊贝母总生物碱和总黄酮组分复方的止咳和平喘作用,筛选组分复方的最优配比。方法基线等比增减设计法重组总生物碱和总黄酮的配比,分别采用豚鼠枸橼酸引咳法和整体动物引喘法比较各配伍组的止咳和平喘活性,优选复方的最佳配比;进而采用卵清蛋白诱导的豚鼠CVA病理咳嗽模型对优选配比进行药效验证。结果除了总黄酮组外,总生物碱和各复方配伍组均显示出止咳和平喘药效,其中总生物碱和总黄酮的等比例配伍组药效最高;在豚鼠CVA模型中,等比例配伍组具有显著的镇咳、抗气道高反应性和抗炎作用,且优于总生物碱和总黄酮组(P<0.05)。结论伊贝母中的总黄酮对于总生物碱有协同增效作用,两者的1∶1配伍组为复方最佳配比组。

伊犁贝母中西贝素和西贝素苷的高效液相色谱蒸发光散射检测法

目的 建立伊犁贝母中无紫外吸收的活性异甾体生物碱西贝素和西贝素苷的HPLC测定方法。方法HPLC 蒸发光散射检测器法。结果 西贝素苷和西贝素的线性范围分别为 48 72 - 194 88μg·mL-1和 6 0 72 -16 1 92 μg·mL-1;RSD日内 0 7%和 0 9% ,日间 1 0 %和 1 5 % ;低、中、高浓度回收率分别为 95 8% ,96 9% ,96 0 %和 97 1% ,96 7% ,96 8% ;最低检测限分别为 1 5 3和 2 43μg·mL-1。结论 本法快速、简便、灵敏和分离度好 ,适用于伊贝母中活性生物碱的测定。