长叶榧(Torreya jackii Chun)遗传多样性分析

利用RAPD技术分析了长叶榧(TorreyajackiiChun)的遗传结构,用18个引物对来自福建省泰宁县的3个不同居群的66个长叶榧样本进行分析。结果显示,长叶榧群体水平的多态位点百分率达87%,居群水平的多态位点百分率分别为83%、68%和80%。群体水平上的Nei基因多样性指数为0 2479,居群水平上分别为0 2182、0 1684和0 1881。群体水平上的平均杂合度达到0 2447,居群水平上分别为0 2215、0 1729和0 1950。30 35%的遗传变异存在于居群间,69 65%的遗传变异存在于居群内。长叶榧居群的基因流量为1.6899,显示长叶榧仍具有通过群体间的基因交流来防止遗传漂变造成的群体分化的能力。

浙江仙居长叶榧自然居群遗传多样性的ISSR分析

采用ISSR分子标记技术,对中国特有树种长叶榧的遗传多样性和遗传分化进行分析.用10个引物对浙江省仙居县的5个长叶榧居群共100个样品进行扩增,共测到136个位点,其中多态位点72个,多态位点百分率(P)为52.97%.长叶榧总的Shannon信息指数(I)为0.269 1,Nei指数(h)为0.175 8,表明种水平的遗传多样性较高,而居群水平的遗传多样性较低,P平均为28.09%,I平均为0.138 9,h平均为0.091 2.AMOVA分子差异分析表明长叶榧居群间遗传分化程度高,45.72%的变异存在于居群间,54.28%的变异存在于居群内,居群间的基因分化系数(Gst)为0.489 1.长叶榧居群间的基因流很低,为0.522 4.瓶颈效应、居群隔离和遗传漂变可能是造成长叶榧居群低遗传多样性和居群间较高遗传分化的主要原因.5个居群间的平均遗传距离为0.128 0.利用算术加权平均数法(UPGMA)对长叶榧居群进行聚类,结果可分为两大类群:下辽和龙潭坑2个居群组成一个类群;石舍与石长坑居群先聚在一起,再与夹坟坑居群组成另一个类群.

长叶榧叶挥发油成分分析及其抗菌作用研究

目的：分析长叶榧叶挥发油成分，并观察其抗菌作用。方法：用ＧＣ－ＭＳ法进行挥发油成分分析，用其挥发油对４种细菌和３种真菌进行体外抗菌作用研究。结果：长叶榧叶挥发油中分离到６４个ＧＣ峰，已鉴定了５４个成分。该挥发油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、淋病奈瑟菌、白色念珠菌、热带假丝酵母和酿酒酵母均有明显的抑制作用，其最低抑菌质量浓度分别为１．２５，１．２５，２．５０，０．６３，５．００，２．５０和５．００ｇ／Ｌ。

濒危植物长叶榧的光合生理生态特性

利用Li-6400 XT便携式光合作用仪对林窗、林缘、林下3种生境中的长叶榧(Torreya ackii)在春、夏、秋、冬4个季节里的光合生理生态指标进行测定,探讨3种生境中长叶榧光合能力的季节变化及其对不同光环境的响应,分析其濒危机制,为长叶榧的迁地保护和种群的繁衍复壮提供理论依据。结果显示:(1)林窗、林缘的长叶榧净光合速率(Pn)日变化在夏季呈"双峰"曲线,其它3个季节均呈"单峰"曲线;林下的Pn日变化在4个季节均呈"单峰"曲线。(2)3种生境中最大净光合速率(Pnmax)、光饱和点(LSP)、表观量子效率(AQY)、最大羧化速率(Vcmax)、最大电子传递速率(Jmax)、磷酸丙糖利用率(TPU)均为夏季最高,使得夏季有较强的光合作用能力,但夏季林窗、林缘的长叶榧出现光合"午休"现象,光补偿点(LCP)、暗呼吸速率(Rd)也较高,使得夏季林窗生境的长叶榧日均Pn明显低于于秋季,林缘的日均Pn与秋季差异不显著。(3)4个季节的日均Pn、Pnmax、LSP、Vcmax、Jma、TPU均为林窗最高,林窗与林下差异显著,表明长叶榧具有阳性植物的特点,适宜生长在光照较强的林窗生境。(4)在生长旺盛的夏、秋季,长叶榧的LSP比伴生物种低,LCP比伴生物种高,对光适应的生态幅度较窄;与伴生物种相比,长叶榧的Pn较低,光合能力较弱,在激烈的种间竞争中处于不利地位,可能成为其濒危的一个重要原因。

濒危植物长叶榧群体遗传多样性的RAPD分析

借助随机扩增多态DNA方法,分析了中国特有的濒危植物长叶榧的遗传多样性和遗传分化.结果表明:12个随机引物在9个长叶榧自然群体180个样品中可检测到180个可重复位点,其中多态位点119个.长叶榧物种水平的遗传多样性较高,多态位点百分率(P)为66.11%,Shannon信息指数(I)为0.3087,Nei指数(h)为0.2015;而群体水平的遗传多样性较低,P、I和h分别平均为23.76%、0.1221和0.0813.AMOVA分子变异显示,42.57%变异来源于群体内,57.43%变异来源于群体间,群体间的遗传分化系数(Gst)为0.5965,群体间的遗传分化程度高.长叶榧群体间的基因流很低,为0.3382.瓶颈效应、群体隔离和群体间基因流低等因素都加剧了长叶榧群体间的遗传分化.9个长叶榧群体间的平均遗传距离为0.1630.通过UPGMA进行聚类,可将9个长叶榧群体分为浙江和福建两大类群.建议在迁地保护时应尽量避免在群体之间实施种质迁移.

濒危植物长叶榧群体不同年龄级遗传多样性的RAPD和ISSR分析

按胸径将浙江省桐庐县白云源森林公园长叶榧群体划分为成体、小树、幼苗3个年龄级,利用RAPD和ISSR分子标记对不同年龄级的遗传多样性及遗传分化进行分析.12个RAPD引物和12个ISSR引物分别扩增出199和180个条带,总多态位点百分率分别为44.72%和56.11%.RAPD和ISSR分析均显示3个年龄级的多态位点百分率、Shannon信息指数、Nei指数以成体最高,小树次之,幼苗最低,表明长叶榧群体遗传变异呈衰退趋势.分子方差分析(AMOVA)表明长叶榧群体不同年龄级内、年龄级间均存在遗传变异,但遗传变异主要存在于年龄级内.RAPD和ISSR分析显示,长叶榧群体不同年龄级间的遗传分化系数(Gst)分别为0.2869、0.3077,基因流(Nm)分别为1.2412、1.1231.长叶榧群体不同年龄级间的遗传相似度以幼苗与小树最高,遗传距离以幼苗与小树间最小.在长叶榧群体不同年龄级中,ISSR能检测到比RAPD更多的遗传变异,经Mantel检验,两种分子标记的分析结果相关性极显著.

濒危植物长叶榧种子化学成分分析

对濒危植物长叶榧不同产地、不同质量大小的种子中可溶性糖、粗脂肪、总蛋白质、总黄酮、总绿原酸、总鞣质等6种化学成分的含量进行了测定与分析。结果表明:不同产地、不同质量大小的长叶榧种子中6种化学成分的含量均存在差异。不同产地长叶榧种子中可溶性糖、总黄酮的含量以浦江地区最高,粗脂肪、总绿原酸、总鞣质的含量以桐庐地区最高,总蛋白质的含量以富阳地区最高。桐庐地区不同质量大小的长叶榧种子中,除总绿原酸外,种子质量越大,可溶性糖、总黄酮、总鞣质的含量越高,但粗脂肪、总蛋白质的含量却越低。长叶榧种子可溶性糖的含量与粗脂肪的含量呈显著负相关。

长叶榧黄酮类化合物含量及成分分析

对长叶榧不同营养器官和不同居群的3种营养器官黄酮类化合物含量进行测定,并利用聚酰胺薄层层析法对黄酮类化合物的成分进行分析。结果表明:(1)长叶榧各个营养器官均含有黄酮类化合物,其含量高低顺序依次是一年生叶>一年生枝>幼根>老根>树皮>老枝>茎;(2)长叶榧不同营养器官其黄酮类化合物的种类有很大的差异,以一年生叶、一年生枝最多,幼根次之,老根、老枝第三,树皮、茎最少;(3)不同长叶榧居群3种营养器官黄酮类化合物含量各不相同,但均以一年生叶最高,一年生枝次之,老枝最低;(4)不同长叶榧居群一年生叶黄酮类化合物含量差异不显著,一年生枝、老枝差异较大;(5)不同长叶榧居群3种营养器官其黄酮类化合物的种类在一年生叶中没有差异,一年生枝中差异较小,老枝中差异较大。

浙江省长叶榧资源及群落学特征

对浙江省 2 6个样方和 1 5个调查点的实地调查表明 ,长叶榧在浙江的分布面积为2 5 81 6hm2 ,总量达 6 3 4万株 (丛 ) ,主要分布于桐庐、建德、富阳、仙居等县 (市 ) ,所处的主要群落有青冈栎 木荷林、紫楠林、乌冈栎矮林、红楠林、甜槠林、马尾松 青冈栎林、柳杉 枫香林、杉木林、柳杉 杉木林及被采伐后萌生的长叶榧灌丛等。长叶榧是我国特有的珍稀树种 ,浙江不仅是其模式产地 ,同时也是全世界的分布中心 ,加强长叶榧资源的保护对开展科学研究 ,保护生物多样性等具有重要意义。参 1

长叶榧叶片次生代谢产物含量分析

对分布在浙江省境内的桐庐、松阳、浦江、仙居等4个样地的长叶榧(Torreya jackii)1年生叶片中的鞣质、生物碱、黄酮、游离蒽醌、绿原酸、皂甙、总酚等7种次生代谢产物的含量进行测定分析。结果显示,不同样地长叶榧1年生叶片7种次生代谢产物总量以松阳的最高,仙居最低,其顺序为松阳>浦江>桐庐>仙居。不同样地长叶榧叶片的7种次生代谢产物的含量差异较大,总鞣质、总生物碱、总皂甙、总酚的含量以松阳的最高,总黄酮、游离蒽醌的含量以仙居的最高,总绿原酸的含量以浦江的最高。不同样地7种次生代谢产物含量的相关性不高。系统聚类分析显示,桐庐和浦江样地的地理位置最近,它们先聚在一起,再与其他样地相聚。

宽坝林区珍稀濒危植物资源的初步研究

通过对宽坝林区珍稀濒危植物的区系分析，得出该林区珍稀濒危植物区系具有种类较丰富，起源古老，区系复杂等特征。并探讨了该区珍稀濒危植物的致濒原因，提出了系列保护对策。

长叶榧不同营养器官次生代谢产物含量分析

对长叶榧不同营养器官的鞣质、黄酮、生物碱、游离蒽醌、绿原酸、皂甙、总酚等7种次生代谢产物的含量进行测定和分析。结果显示:长叶榧不同营养器官7种次生代谢产物总量以叶片最高,不同器官的高低顺序依次为叶>幼根>树皮>1年生枝>根>老枝>茎,其中叶的总含量为茎的7.2倍。不同营养器官7种次生代谢产物的含量也以叶片最高,除鞣质含量叶与幼根差异不显著外,其余次生代谢产物含量叶与其它器官的差异均极显著,表明叶可能是次生代谢产物的主要产生器官。幼根的次生代谢产物含量也比较高,幼根也可能合成和积累部分次生代谢产物。

濒危植物长叶榧ISSR-PCR反应体系的建立

以国家2级保护植物长叶榧为材料,对ISSR反应体系中的各个主要影响因子进行了优化筛选,建立了长叶榧ISSR-PCR的反应体系,其较适宜的扩增条件为:10μL PCR反应体积,1×T aq酶配套缓冲液(10 mm o l/L T ris.HC l pH 9.0,50 mm o l/L KC l,0.1%T riton X-100),1.5mm o l/L M gC l2,1U T aq酶(上海华美公司),10 ng模板DNA,6 pm o l引物(上海Sangon公司);dATP、dCTP、dGTP、dTTP各0.2 mm o l/L,合适的退火温度为52.4℃。PCR反应体系的建立为ISSR技术分析长叶榧遗传多样性奠定了良好的基础。

浙江省桐庐县长叶榧居群遗传结构的ISSR分析

采用ISSR分子标记技术,对浙江省桐庐县白云源森林公园的6个长叶榧(Torreya jackii)亚居群进行分析,阐明长叶榧在小地理范围内的遗传结构。12个引物对6个长叶榧亚居群的120个个体进行扩增,共得到194个位点,其中多态位点87个,总多态位点百分率(P)为44.85%,平均为29.21%。长叶榧总Shannon信息指数(I)为0.166 3,平均为0.119 9;总Nei指数(h)为0.1035,平均为0.075 5。P、I、h均表明长叶榧总体水平的遗传多样性较高,亚居群水平的遗传多样性较低。AMOVA分子变异分析显示,21.45%的变异存在于亚居群间,78.55%的变异存在于亚居群内。长叶榧亚居群间的遗传分化系数(Gst)为0.270 5,基因流为1.347 8。6个长叶榧亚居群的平均遗传距离为0.037 0,根据亚居群间的遗传距离进行UPGMA聚类,结果为生境相似的亚居群聚在一起。

浙江省野生长叶榧资源现状及保护对策

论述了我国特有珍贵树种长叶榧在浙江省的自然分布、种群数量、生长环境、生物学特性及保护价值等 ,提出了具体保护对策。

长叶榧RAPD反应条件的研究

以长叶榧为材料 ,研究了RAPD的各种影响因素。确定了长叶榧的最佳的RAPD反应体系为 :15 μl反应体系中含5 0mmol·l-1KCl、10mmol·l-1Tris-HCl(pH9.0 )、0 1%Triton - 10 0、2nmol·μl-1MgCl2 、0 6nmol·μl-1dNTPs、0 .75UTaq酶、30ng引物以及 10 0ng左右的长叶榧DNA。

湖南榧树属新纪录种—长叶榧树

记述了湖南红豆杉科榧树属的新记录种——长叶榧树。该新记录种的标本于2015年1月7日采集于湖南省新化县吉庆镇陡峭的岩石灌木林中,并保存于湖南省森林植物园标本馆。

长叶榧叶精油化学成份的初步研究

关于长叶榧(Torreya jackii chun)叶油的化学成份,至今尚未见报导。由水蒸汽蒸馏法而获得的长叶榧叶油,用气相色谱——质谱法分离分析,确定了24个组分。该精油是一种萜类芳香油,主要成分为α-罗勒烯(63.265％),β-罗勒烯(3.590％),a-蒎烯(1.439％),β-蒎烯(4.496％),β-月桂烯(5.289％),葎草烯(1.502％)和榄香烯(1.381％)。

濒危植物长叶榧种子形态变异研究

长叶榧(Torreya jackii)为中国特有的濒危保护植物。以长度、宽度作为种子大小的指标,长宽比作为种子形状的指标,对长叶榧自然种群间以及种群内个体间的种子形态变异进行研究,并分析了种子形态特征与环境因子的相关性。结果表明:长叶榧种子形态特征在种群内和种群间均存在一定程度的变异,长度、宽度在种群间差异极显著,长宽比在种群间显著差异;长叶榧种子形态变异最大的是长度,其次为宽度,长宽比的变异相对较小;长叶榧种子形态特征与环境因子的相关性不显著。

中国亚热带地区3种榧属植物叶绿体微卫星特征分析

为获取更多榧属(Torreya)植物叶绿体基因组数据并开发叶绿体通用微卫星引物,对长叶榧(T.jackii)和榧树(T.grandis)进行叶绿体全基因组测序,并与已公布的的巴山榧(T.fargesii)进行比较,同时应用生物信息学软件对三者的叶绿体微卫星分布特征和规律进行全面分析。结果表明,长叶榧、榧树和巴山榧叶绿体基因组均为环状双链DNA,总长度在136720~137075bp之间。3种榧属植物的叶绿体微卫星数量以榧树中最多,为42个,其次为长叶榧(36个),巴山榧中最少(34个)。3种榧属植物叶绿体微卫星重复类型均以单碱基重复最多,其次为四碱基重复。3种榧属植物单碱基重复类型均以(A)n和(T)n为主,重复次数分别以10次和11次最多。该结果可为后续开发榧属植物叶绿体通用微卫星引物提供重要信息。