2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸的酶法合成及其应用研究进展

2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(2-O-D-glucopyranosyl-L-ascorbic acid,AA-2G)不仅稳定性强且保留了L-抗坏血酸(L-ascorbic acid,L-AA)的大部分生理活性,是L-AA最好的替代品。体外酶法合成AA-2G具有经济、快速、绿色和安全等显著优势,是规模化生产AA-2G的可行方法。该文综述体外酶法合成AA-2G的研究进展,重点梳理环糊精糖基转移酶和蔗糖磷酸化酶合成AA-2G的研究现状,并对AA-2G的功能及应用前景进行讨论和展望。

线性Poisson-Boltzmann方程的虚单元L^(2)误差估计

针对一类线性Poisson-Boltzmann方程的虚单元L^(2)误差估计进行分析.首先引入正则化的线性Poisson-Boltzmann方程,将原问题转化为非奇性Poisson-Boltzmann方程.然后给出L^(2)范数的误差估计.最后在四边形和五边形混合多边形网格上进行数值实验,数值结果验证了理论分析的正确性.

一类拟线性Schrodinger方程L^(2)约束解的多重性

通过一个新的形变引理,研究了如下拟线性Schrodinger方程在2<p<4时L^(2)约束解的多重性.-Δu+μu-Δu^(2)u=u^(p-2)u,x∈ℝ^(3),∫_(ℝ^(3))u^(2)d x=m;其中m>0是给定的常数,μ∈ℝ是Lagrange乘子.

干姜吴茱萸水煎液对大鼠结肠平滑肌细胞L型Ca^(2+)通道的影响

目的:探讨干姜吴茱萸水煎液对大鼠结肠平滑肌收缩及平滑肌细胞L型Ca^(2+)通道的影响机制。方法:采用0、0.01、0.1、1、10 g/L干姜吴茱萸(1∶1)水煎液依次作用于正常结肠平滑肌,10 g/L水煎液及L型Ca^(2+)通道激动剂BAY-K-8644依次作用于氯化乙酰胆碱(Ach)诱导后的正常平滑肌,检测平滑肌收缩张力、频率和振幅;全细胞膜片钳记录L型钙电流;Western blot检测各组细胞中L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基(α1c)和钙调蛋白(CaM)蛋白表达情况。结果:1、10 g/L水煎液组能显著降低离体结肠平滑肌的收缩张力(P<0.05),对频率及振幅并无显著影响(P>0.05);与0 g/L水煎液组相比,Ach促进平滑肌收缩张力、频率和振幅显著增加(P<0.05);与Ach组相比,10 g/L水煎液显著降低平滑肌的收缩张力、频率和振幅(P<0.05);与10 g/L水煎液组相比,BAY-K-8644显著增加平滑肌的收缩张力、频率和振幅(P<0.05);与0 g/L水煎液组相比,Ach可显著增加ICa-L峰值电流密度(P<0.05);与Ach组相比,10 g/L水煎液显著降低ICa-L峰值电流密度(P<0.05);与10 g/L水煎液组相比,BAY-K-8644可显著增加ICa-L峰值电流密度(P<0.05);与对照组相比,Ach组结肠平滑肌细胞Ca^(2+)相对荧光强度峰值、α1c、CaM表达显著增加(P<0.05);Ach组相比,10 g/L组Ca^(2+)相对荧光强度峰值、α1c和CaM表达水平显著降低(P<0.05);与10 g/L组相比,BAYK-8644组Ca^(2+)相对荧光强度峰值、α1c、CaM表达显著增加(P<0.05)。结论:干姜吴茱萸水煎液可抑制大鼠结肠平滑肌收缩,并阻滞L型Ca^(2+)通道。

过量表达甲酸脱氢酶提高大肠杆菌合成L-2-氨基丁酸的效率

为了实现L-2-氨基丁酸(L-ABA)的高效生物合成,借助pACYCDuet-1和pET28a共表达系统,构建了携带L-苏氨酸脱氨酶(L-TD)、L-亮氨酸脱氢酶(L-L-DH)和不同活性甲酸脱氢酶(FDH)编码基因的重组大肠杆菌,分别命名为:E.coli BL21(DE3)/pACYCDuet-1-Ec TD-Es LeuDH:pET28a-Cb FDH和E.coli BL21(DE3)/p ACYCDuet-1-Ec TD-Es Leu DH:p ET28a-Cb FDH^(M)。经诱导表达后,L-苏氨酸脱氨酶和L-亮氨酸脱氢酶在两个重组大肠杆菌中的表达水平基本一致,而后者的甲酸脱氢酶酶活表达水平为(342.00±9.40)IU/mL,显著高于前者的(196.00±6.20)IU/mL。在50 mL反应体系中,200 mmol/L L-苏氨酸经220 r/min、30℃下反应6 h时,前者L-ABA得率为71%,后者为85%。结果表明,提高甲酸脱氢酶的表达水平可以显著提高L-ABA的合成效率。此外,优化反应温度后,在35℃下反应6 h时,L-ABA的得率可达90%。

L-脯氨酸拆分1,1′-联-2-萘酚的实验设计

为了将手性化合物的包结拆分法引入有机化学实验教学,设计了有机化学综合实验“L-脯氨酸拆分1,1′-联-2-萘酚”:将L-脯氨酸和外消旋联萘酚研磨后,乙腈回流后析出L-脯氨酸和(S)-BINOL形成的包合物,(R)-BINOL留在溶液中。该综合实验实现了光学纯联萘酚的高效拆分,创新了教学体系。实践表明,该综合实验采用基于非共价键作用的包结拆分法进行手性拆分,激发了学生的学习兴趣;此外,该实验综合性强,有利于学生动手操作能力、分析和解决综合问题能力的培养。

乌菜BcVIL2基因克隆及春化响应表达分析

【目的】从乌菜(Brassica campestris L.)中克隆VIN3⁃LIKE 2(VIL2)基因并进行生物信息学与表达分析,为进一步研究BcVIL2基因功能奠定基础。【方法】以‘徽乌19’为试验材料,利用同源克隆等技术获得BcVIL2基因,对其序列进行蛋白分子量(MW)、糖基化位点、二级结构等生物信息学分析;利用荧光定量PCR等技术分析其应答春化表达模式。【结果】BcVIL2基因ORF(Open reading fragment)全长为1296 bp,共编码431个氨基酸,属于亲水性蛋白,预测含有1个潜在的糖基化位点和59个潜在的磷酸化位点,蛋白分子量为47.91 kDa,理论等电点(pI)为8.27;其二级结构主要由α⁃螺旋与无规则卷曲组成;亚细胞定位预测其可能在细胞核中发挥作用;同源序列比对分析显示该基因与芸薹属植物VIL2基因同源性较高;亲缘进化树分析也显示该基因与白菜(B.rapa,syn.B.campestris)和芥菜(B.juncea)VIL2基因亲缘关系很近;荧光定量PCR结果表明,盛花期时BcVIL2基因在根中表达量最低,在荚中表达量最高,而叶中表达量显著低于茎和花中表达量;一月苗龄植株春化后BcVIL2基因的表达量显著低于未春化时的表达量。【结论】乌菜VIL2基因响应春化负表达,与春化反应相关基因BraA01g032910.3C、BraA05g026410.3C与BraA10g016160.3C密切相关,可能存在互作关系,本研究结果为深入分析BcVIL2基因的功能提供了良好基础。

解木糖赖氨酸芽孢杆菌发酵和生物催化产生L-2-氨基己二酸

以解木糖赖氨酸芽孢杆菌XX-2为出发菌株,110 mmol/L L-赖氨酸单盐酸盐为发酵前体,144 h发酵后L-2-氨基己二酸浓度达到10.4 mmol/L,产率为9.5%.以解木糖赖氨酸芽孢杆菌XX-2全细胞为生物催化剂,利用共生的L-赖氨酸6-脱氢酶和?-1-哌啶啉-6-羧酸脱氢酶催化L-赖氨酸单盐酸盐转化为L-2-氨基己二酸.最优条件为:细胞浓度为45 g(干重)/L,L-赖氨酸单盐酸盐浓度为100 mmol/L,pH=7.0,温度为30℃,反应时间144 h.在最优条件下,从100 mmol/L L-赖氨酸单盐酸盐产生90 mmol/L L-2-氨基己二酸,产率为90%.我们推测了生物催化过程中L-2-氨基己二酸产生的反应机理.

老年腹股沟疝患者应用L型腔镜拉钩辅助TAPP治疗对血清MMP-2及β-EP表达水平的影响

目的:探讨老年腹股沟疝患者应用L型腔镜拉钩辅助腹腔镜经腹膜前疝修补术(Laparoscopic preperitoneal hernia repair,TAPP)治疗对血清基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)、β-内啡肽(Beta-endorphins,β-EP)表达水平的影响。方法:选取2019年8月至2022年8月我院收治的68例老年腹股沟疝患者作为研究对象,用随机数字表法将其分对照组和观察组,各34例,对照组接受TAPP手术治疗,观察组接受L型腔镜拉钩辅助TAPP治疗,比较两组患者治疗疗效、围术期指标、血清MMP-2及β-EP指标、疼痛程度、并发症等。结果:观察组住院时间、肛门排气时间、手术用时短于对照组,术中出血量、术后2 d时视觉模拟评分法(Visual analog scoring,VAS)评分明显低于对照组(P<0.05);观察组胰岛素(Insulin,InS)、生长激素(Growth hormone,GH)、T-AOC明显高于对照组,β-EP明显低于对照组(P<0.05);观察组基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(Matrix metalloproteinase tissue inhibitor-2,T1MP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(Matrix metalloproteinase tissue inhibitor-2,T1MP-1)、MMP-2、基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)明显低于对照组(P<0.05);观察组并发症发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论:临床用L型腔镜拉钩辅助TAPP治疗老年腹股沟疝患者,能进一步保护机体微环境,促进术后恢复,降低并发症发生几率,疗效理想。

NH_(2)MIL与半胱氨酸的相互作用及其荧光传感应用

为研究L-半胱氨酸(L-Cys)的荧光检测方法,先将Fe^(3+)和2-氨基对苯二甲酸(NH_(2)BDC)通过水热法聚合制备结晶纳米配位聚合物NH_(2)MIL,再利用NH_(2)MIL中的Fe^(3+)和L-Cys中巯基之间的氧化还原反应使NH_(2)MIL解聚,释放配体NH_(2)BDC,通过对NH_(2)BDC的荧光检测实现L-Cys检测.实验结果表明,悬浮液中L-Cys的浓度和NH_(2)MIL悬浮液的荧光发射强度在10~200 nmol·L^(-1)浓度范围内呈良好的线性关系,R^(2)=0.999 1,检测限达1.78 nmol·L^(-1),且该检测方法对L-Cys有较强的选择性和抗干扰能力,具有一定的使用前景.

禁用{B_(k+1),K_(2,l+1)}的图α谱半径极值问题

令K_(s,t)是完全二部图,K_(n)是完全图,其中s,t和n是正整数.令B_(4,l)是由l个共享一条边的K_(4)构成的图,B_(l)是由B_(4,l)的所有生成子图构成的集合.本文研究了禁用{B_(k+1),K_(2,l+1)}的图的最大α-谱半径问题.利用B_(k+1)和K_(2,l+1)的结构特点以及基本不等式,在具有n个顶点、最大度为Δ且禁用{B_(k+1),K_(2,l+1)}的连通图中,获得了α-谱半径的上界,且刻画了达到上界的极值图.相应地,在具有n个顶点、最大度为Δ且禁用B_(k+1)或K_(2,l+1)的连通图中,得到了α-谱半径的上界.

急性冠脉综合征患者外周血KLF2、CD62L、CCR7水平与病情及预后的关系

目的观察急性冠脉综合征(ACS)患者外周血Kruppel样转录因子2(KLF2)、L-选择素(CD62L)、趋化因子受体7(CCR7)的表达水平,并探讨其与病情和预后的关系。方法前瞻性选取西安凤城医院2017年2月至2022年2月收治的214例ACS患者,根据类型不同分为不稳定型心绞痛(UA组)86例,ST段抬高型心肌梗死(STEMI组)75例,非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI组)53例,另选取同期100例健康体检者作为对照组。比较各组受检者及不同Killip心功能分级患者外周血KLF2 mRNA、CD62L、CCR7 mRNA的表达水平,并采用Pearson相关分析法分析KLF2 mRNA、CD62L、CCR7 mRNA与Gensini评分的关系。随访1年,统计患者主要不良心血管事件(MACE)发生率,根据有无MACE发生分为预后良好组和预后不良组;采用多因素Logistic回归分析探究ACS预后影响因素,应用受检者工作特征曲线(ROC)分析外周血KLF2 mRNA、CD62L、CCR7 mRNA对ACS预后的预测价值。结果各组受检者对比发现,KLF2 mRNA、CD62L表达水平为STEMI组<NSTEMI组<UA组<对照组,CCR7 mRNA为STEMI组>NSTEMI组>UA组>对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);不同心功能分级患者对比发现,KLF2 mRNA、CD62L表达水平为Ⅳ级<Ⅲ级<Ⅱ级<Ⅰ级,CCR7 mRNA为Ⅳ级>Ⅲ级>Ⅱ级>Ⅰ级,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关分析法分析结果显示,外周血KLF2 mRNA、CD62L表达与Gensini积分均呈负相关(P<0.05),CCR7 mRNA表达与Gensini积分呈正相关(P<0.05);随访1年内,16例失访,198例有效随访患者中58例预后不良,140例预后良好。预后不良组患者的外周血KLF2 mRNA、CD62L表达水平分别为0.31±0.12、(45.30±10.85)%,明显低于预后良好组的0.54±0.15、(60.49±14.12)%,CCR7 mRNA表达水平为3.01±0.48,明显高于预后良好组的1.84±0.43,差异均有统计学意义(P<0.05);经多因素Logistic回归分析结果显示,合并高血压、合并糖尿病、吸烟史、CCR7 mRNA高表达、Gensini积分是ACS患者预后不良的危险因素(P<0.05),KLF2 mRNA高表达、CD62L高表达是其保护因素(P<0.05);经ROC分析结果显示,外周血KLF2 mRNA、CD62L、CCR7 mRNA及三者联合预测ACS患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.899、0.808、0.964、0.994。结论ACS患者外周血KLF2、CD62L表达下调,CCR7表达升高,且与患者心功能分级及冠脉病变程度有关,三者联合检测对ACS预后有较高预测价值。

二维Navier-Stokes-Cahn-Hilliard系统光滑解的全局存在性和L^(2)衰减估计

本文研究二维不可压缩Navier-Stokes-Cahn-Hilliard系统.假设初值(u_(0),φ_(0))∈H^(s)(R^(2))×H^(s)(R^(2))并且divu_(0)=0,其中s∈N且s> 1,通过利用能量估计的方法证明该系统存在唯一的全局光滑解.此外,采用Fourier分离方法,研究该系统光滑解及其高阶空间导数的L^(2)-衰减估计.

狼毒化学成分基于Mpro靶点的虚拟筛选及抗SARS-CoV-2活性分析

目的 对瑞香狼毒和狼毒大戟中的化学成分进行基于新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome-coronavirus-2,SARS-CoV-2)3CL水解酶(Mpro)的抑制剂虚拟筛选以及体外活性验证以为发现抗新型冠状病毒疾病(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)治疗药物提供参考。方法 以瑞香狼毒和狼毒大戟中的天然产物为研究对象,以Mpro为靶点,以Mpro晶体结构(PDB ID:6LU7)中的配体小分子N3为阳性对照,采用AutoDock Vina进行分子对接,对结合亲和力和结合构象进行分析并进行基于SARS-CoV-2 Mpro蛋白的体外抑制活性测试。结果 与N3(亲和力为-7.7 kcal/Mol)相比,双黄酮类化合物狼毒素和异狼毒素呈现了最高的Mpro靶点亲和力(-9.7 kcal/Mol),且优于利托那韦、更昔洛韦、利巴韦林、氯喹、达芦那韦、阿巴卡韦等已知抗病毒药物以及其他天然产物的亲和力。对接构象分析发现二者均能有效占据Mpro蛋白结合位点并形成若干重要的氢键结合,其中以异狼毒素为最优,这对于二者与Mpro靶点的结合以及Mpro靶点抑制构象的稳定起着重要作用。异狼毒素在50μM浓度下显示出优于狼毒素的较好的Mpro体外抑制活性。结论 狼毒素和异狼毒素具有基于Mpro靶点抑制SARS-CoV-2病毒的潜在活性,可作为结构优化和抗SARS-CoV-2体内外活性研究的先导化合物。

基于融合Lasso的非参数加性分位数回归模型

加性分位数回归为非线性关系的建模提供一种灵活、鲁棒的方法.拟合加性分位数模型的方法通常使用样条函数逼近分量,但需要先验的选择节点,计算速度较慢,并不适合大规模数据问题.因此文中提出基于融合Lasso的非参数加性分位数回归模型(Nonparametric Additive Quantile Regression Model Based on Fused Lasso,AQFL),是在融合Lasso罚和l_(2)罚之间折衷的可对加性分位数回归模型进行估计和变量选择的模型.融合Lasso罚使模型能快速计算,并在局部进行自适应,从而实现对所需分位数甚至极端分位数的预测.同时结合l_(2)罚,在高维数据中将对响应影响较小的协变量函数值压缩为零,实现变量的选择.此外,文中给出保证收敛到全局最优的块坐标ADMM算法(Block Coordinate Alternating Direction Method of Multipliers,BC-ADMM),证明AQFL的预测一致性.在合成数据和碎猪肉数据上的实验表明AQFL在预测准确性和鲁棒性等方面较优.

重型颅脑损伤病人血清NF-L和TIMP-2水平变化及临床意义

目的探讨重型颅脑损伤(TBI)病人血清神经丝蛋白轻链多肽(NF-L)、组织基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2的水平变化及临床意义。方法2019年8月~2021年8月前瞻性收集重型TBI共122例,采用酶联免疫吸附试验检查入院血清NF-1和TIMP-2水平;伤后6个月,应用GOS评分评估预后,其中4~5分为预后良好,1~3分为预后不良。结果伤后6个月,预后良好72例,预后不良50例。预后不良组血清NF-L以及TIMP-2水平明显高于预后良好组(P<0.05)。入院血清NF-L水平(r=-0.585)、TIMP-2水平(r=-0.542)与入院GCS评分呈明显负相关(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,血清NF-L、TIMP-2水平增高是重型TBI伤后6个月预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示血清NF-L1≥54.60 pg/ml联合血清TIMP-2≥42.59 ng/ml预测重型TBI伤后6个月预后不良的曲线下面积为0.854(95%CI 0.789~0.919),灵敏度为82.0%,特异度为70.8。结论重型TBI病人血清NF-L、TIMP-2水平明显增高,是伤后6个月预后不良的危险因素;两者联合应用对病人预后具有较高的预测价值。

重金属Pb^(2+)对早熟禾种子萌发的影响

[目的]探究重金属铅对早熟禾种子萌发的影响。[方法]用不同浓度Pb^(2+)(20、40、60、80 mg/L)处理早熟禾种子,测定Pb2+对早熟禾种子萌发、叶绿素以及生根等指标的影响。[结果]随着Pb2+浓度的增加,草籽的萌发率、发芽指数降低,但降低趋势不明显。逐日萌发率在第3天出现高峰,早熟禾的根茎长度呈下降趋势。叶绿素a、叶绿素b含量降低明显,类胡萝卜素含量在Pb^(2+)浓度80 mg/L时增加。[结论]早熟禾种子的萌发率在Pb^(2+)浓度20~80 mg/L范围内受影响较小,而叶绿素含量、类胡萝卜素含量以及幼苗根茎的生长受到一定的抑制。

交互作用Fock空间l^(2)(Г,{λ_(n)})上算子的性质

给出了交互作用Fock空间l^(2)(Г,{λ_(n)})的随机梯度算子、适应梯度算子和投影算子的定义,讨论了这些算子的相关性质.

R^(1+1)中Maxwell-Chern-Simons-Higgs模型解的L^(∞)估计

用能量守恒估计和特征线估计的方法解决(1+1)维Maxwell-Chern-Simons-Higgs模型解的Sobolev范数增长性估计问题,给出模型有限能量解的一阶导数的L^(∞)估计,并通过改进指数增长得到解的H^(2)范数的多项式增长.

2-酮-L-古龙酸还原酶分离纯化及其理化、酶学性质的研究

从发酵Ｌ山梨糖的Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒｏｘｙｄａｎｓ和Ｂａｃｉｌｕｓｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ２９８０混和菌株的无细胞抽提液中分离到了２酮Ｌ古龙酸还原酶（ＫＧＲ），测得其分子量为９０ｋＤａ。动力学性质研究表明它为一个典型的ＭｉｃｈａｅｌｉｓＭｅｎｔｅｎ氏酶，对２酮Ｌ古龙酸作用的Ｋｍ值为３４２×１０－３ｍｏｌ，最适作用ｐＨ为６５，最适作用温度为３０℃。２酮Ｌ古龙酸还原酶的合成不受Ｌ山梨糖和２酮Ｌ古龙酸的诱导，故推测２酮Ｌ古龙酸还原酶是Ｇｌｕｃｏｎｏｂａｃｔｅｒｏｘｙｄａｎｓ的一个组成酶。