大鼠心肌缺血-再灌注损伤中转录因子ZFP580表达的变化

目的:研究核转录因子锌指蛋白580(ZFP580)在大鼠心肌缺血-再灌注(I-R)损伤中表达的变化,探讨其可能的作用。方法:48只SD大鼠分为:(1)假手术组;(2)I-R组,结扎冠状动脉左前降支30 min后恢复血液灌注;(3)L-精氨酸(L-Arg)预处理+I-R组,于缺血前给予L-Arg 300 mg/kg,重复I-R组操作;(4)L-Arg预处理+sham组。(2)、(3)组于I-R后1 h或4 h处死动物。各组大鼠取心肌标本HE染色,光镜下计数心肌组织中中性粒细胞数。检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,半定量RT-PCR或免疫组化染色分析ZFP580及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在心肌细胞的表达。结果:I-R后,缺血区心肌细胞肿胀,周围大量中性粒细胞浸润,血清LDH、CK活性及TNF-α浓度升高,心肌ZFP580和eNOS表达下调(P<0.05)。应用L-Arg预处理+I-R后,血清LDH、CK活性及TNF-α浓度降低,心肌ZFP580和eNOS的表达回升。结论:心肌I-R损伤引起ZFP580表达下调。ZFP580及eNOS的表达上调可能是L-Arg预处理拮抗心肌I-R损伤的机制之一。

履行不能与合同终止——以《民法典》第580条第2款为中心

《民法典》第580条第2款新规定的“履行不能情形下的合同终止条款”是合同编部分最为重要的修订,曾引发高度关注与争议。该条文通过赋予当事人请求司法机关终止存在终局性履行不能的合同,进而实现打破合同僵局的功能。本条的引入可填补立法的漏洞,且不会构成对现有合同法体系的颠覆或破坏。双务合同的风险负担及履行抗辩规则均无法有效解决合同僵局问题。在法律适用上,“致使不能实现合同目的”这一构成要件旨在防止可能出现的滥用;未来应考虑通过司法解释或指导性案例将本条扩张适用至金钱债务所引发的合同僵局;第580条第2款在适用上将可产生某种“外溢效应”。

miR-580-3p靶向COL11A1调控肝癌细胞凋亡

目的探究miR-580-3p靶向COL11A1调控肝癌细胞凋亡的机制。方法纳入肝细胞癌(HCC)患者42例,实时荧光定量PCR检测肝癌组织、癌旁组织、人正常肝细胞(LO2、QSG-7701)和人肝癌细胞系(HepG2、Huh-7、Li-7、SK-Hep-1)中COL11A1 mRNA和miR-580-3p表达水平。过表达和敲低miR-580-3p后,CCK8法检测肝癌细胞增殖水平,流式细胞术检测细胞的凋亡水平和细胞周期。免疫印迹分析肝癌关键通路Akt/PI3K在miR-580-3p中的作用。结果与癌旁组织比较,肝癌组织COL11A1 mRNA表达升高,miR-580-3p表达降低;与人正常肝细胞系比较,人肝癌细胞系miR-580-3p表达降低、COL11A1 mRNA表达升高(P<0.05)。COL11A1mRNA与miR-580-3p表达呈负相关(P<0.05)。miR-580-3p过表达后,人肝癌细胞的增殖水平、COL11A1 mRNA降低,凋亡率升高;miR-580-3p敲低后上述趋势反之,细胞周期停滞在G1/S期。人肝癌细胞凋亡率COL11A1过表达后降低,敲低后升高。p-Akt、p-PI3K表达在敲低COL11A1或过表达miR-580-3p后降低,过表达COL11A1或敲低miR-580-3p后升高。结论肝癌细胞和肝癌组织miR-580-3p表达水平降低,miR-580-3p/COL11A1轴可能通过调控PI3K/Akt通路影响肝癌细胞凋亡。

miR-580对乳腺癌细胞系中Twist1的调节作用

目的:探讨miR-580在MCF-10A细胞系中对于Twistl的调节。方法:本实验利用生物信息学方法预测Twistl的靶miRNA是miR-580。首先,采用qPCR法检测在MCF-10A系列细胞系中Twist1及miR-580的表达。然后,在MCF-10A细胞系中分别转染miR-580类似物和miR-580抑制物后,利用RT-PCR、Western blot、t检验分析Twistl的表达及细胞迁移能力的变化。最后利用荧光素酶实验验证miR-580通过结合在Twistl的3'UTR调节其表达。结果:1)在MCF-10A细胞系中Twist1与miR-580的表达呈负相关;2)在MCF-10A细胞系中转染miR-580类似物后,Twist1的表达下调;在MCF-10A细胞系中转染miR-580抑制物后Twistl的表达上调;3)在MCF-10A细胞系中引人miR-580类似物后细胞迁移能力降低;4)miR-580直接结合在Twistl的3'UTR。结论:miRNA-580在MCF-10A细胞系中通过结合在Twistl的3'UTR负向调节Twist1的表达从而克制细胞的迁移。

大鼠锌指蛋白ZFP580的原核表达与分离纯化

【目的】构建ZFP580基因的原核表达质粒,转化大肠杆菌,诱导表达并分离纯化大鼠锌指蛋白ZFP580。【方法】根据ZFP580 cDNA序列的开放阅读框设计引物,利用PCR技术扩增ZFP580的开放阅读框cDNA序列,将PCR扩增的目的片段与载体pET30a分别双酶切、回收纯化后做定向连接,Nco I、Xho I双酶切电泳筛选、鉴定并测序。将构建的重组质粒pET30a-ZFP580转化大肠杆菌BL21(DE3),由异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化目的蛋白。【结果】成功扩增ZFP580基因并构建了表达质粒pET30a-ZFP580,测序结果表明与GeneBank公布的序列一致。含有该质粒的大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达后,产物蛋白分子量约为19 kDa。【结论】成功表达并纯化了大鼠ZFP580蛋白,为进一步研究锌指蛋白ZFP580的功能奠定了基础。

创业项目“580”情绪转化站的SWOT分析及战略定位

对四川省省级大学生创业训练项目"580情绪转化站"进行SWOT分析,结果表明:项目优势大于劣势,机会大于风险。在SO(增长型)战略、ST(多文化)战略、WO(扭转型)战略、WT(防御型)四种战略中,充分运用内部优势、准确把握外部机会,同时规避外部劣势和威胁的SO(增长型)战略更适合项目的发展,可以为创业项目产生很好的"杠杆效应",从而达成创业梦想。

《民法典》第580条第2款之证成——以部分不能为切入点

《民法典》第580条第1款具有消灭履行不能之债务的效力,故在逻辑上,全部不能难以形成合同僵局,履行不能意义上的僵局主要存在于部分不能。传统民法无法圆满解决部分不能中债务人所面临的困境,因此第580条第2款的引入有其必要。尽管从结果上看,该款赋予了违约的债务人主动消灭合同的权利,但这一赋权可以通过对待给付义务的条件牵连性得以正当化。该款“不能实现合同目的”要件的介入,使得部分不能亦具有消灭整个合同的效力。在内涵界定上,由于所欲实现的功能不同,这一要件不能理所当然地与法定解除(第563条第1款)中的“不能实现合同目的”相等同。虽然第580条第2款在理论上无可指摘,但其裁判说明该款在实践中面临巨大的滥用风险,应予注意。

GAAS80/580焊机工艺参数设置对U71Mn钢轨焊接质量的影响

为了确定GAAS80/580焊机的各个参数在U71Mn钢轨焊接工艺中所起的作用和每个参数对焊接质量的影响程度,采用GAAS80/580焊机进行大量焊接试验,研究预热电压、预热次数、末期烧化速度、末期烧化电压、末期烧化电流限值等多个参数与灰斑面积、落锤性能之间的关系。研究结果表明,各个参数对灰斑面积、落锤性能的影响程度不同,相比较而言,预热次数、末期烧化速度、加热程度指数对焊接质量的影响较大。

不同播量对鄂麦580产量性状及抗逆性的影响

鄂麦580是湖北省优质弱筋专用小麦选育上的重大成果,开展不同播量对其产量性状及抗逆性的试验研究,试验结果表明以播量150~225 kg/hm^(2)时效果最佳,为该品种大面积种植提供科学依据。

GAAS80/580型钢轨闪光焊焊机记录曲线异常分析

针对在钢轨焊接的预热、烧化、顶锻和保压阶段,GAAS80/580型钢轨闪光焊焊机出现压力曲线、电流曲线和位移曲线等3类焊接记录曲线异常的现象,结合焊机工作原理,采用逐步排查的方法,探讨焊机故障的查找和处理措施。提出焊机设备日常维护的重点事项和方法建议。

1580mm热连轧机精轧支承辊新材料研制

研制出一种热连轧机精轧支承辊用新材料,通过试验测定了该材料的CCT曲线、淬火和回火加热温度,并测试了该钢种的各项性能。结果表明,通过强化淬火热处理冷却工艺方法,获得(马氏体+下贝氏体)基体+(M7C3+MC)型碳化物的金相组织,提高了支承辊耐磨性和抗接触疲劳强度,达到支承辊轧制周期延长一倍的目标。

迈克F 580与Sysmex XS500i血细胞分析仪检测系统比对研究

目的:以美国临床与实验室标准化委员会(CLSI)EP9-A3文件为依据,讨论了国产迈克F 580和日本Sysmex XS500i全自动血细胞分析仪结果的可接受性。方法:参照EP9-A3文件,以SysmexXS500i为参考系统,以迈克F580为实验系统,使仪器处于正常状态。测定40份新鲜抗凝全血标本的白细胞计(WBC)、红细胞计数(RBC)、血小板计数(PLT)、血红蛋白(Hb)和红细胞压积(HCT)。用ESD方法对测量结果进行离群值检验和评估偏移。利用最佳回归模型拟合回归方程,计算各项目医学决定水平处的偏移,并以1/2CLIA’88允许误差为标准,判断该偏移是否可接受。结果:Hb和Hct在两种血细胞分析仪的检测结果中偏移不被接受。WBC、RBC、PLT偏移均可接受。所有项目的偏移均小于允许误差。结论:根据CLSI EP9-A3标准,临床实验室血细胞分析仪定期比对试验是为临床使用提供准确可靠的试验数据的有力保证之一。

某金属矿山通风远程集控系统的实际应用

介绍了某金属矿山井下通风远程集控系统的实际应用,该系统使用西门子S7-1500 PLC、S7-1200 PLC、Wincc组态软件、ABB ACS580变频器之间相互配合对金属矿山井下风机进行实时监控、控制。该系统的使用提高了该矿山井下通风系统的自动化水平,大大便于操作人员根据现场实际情况对风机进行快速、灵活的控制,达到相关要求,提高了工作效率。

端巯基硅烷改性白炭黑填充丁基橡胶

采用端巯基硅烷偶联剂（KH-580）对白炭黑表面改性,研究了改性白炭黑对丁基橡胶力学性能和阻尼性能影响.结果表明：随着改性白炭黑用量的增加,丁基橡胶拉伸强度和断裂伸长率分别在30 phr时达到最大值和最小值;相比未改性白炭黑,改性白炭黑填充丁基橡胶在-40～80℃下,损耗因子（tan δ）值减小,有效阻尼温域略微变窄;在频率为0～20 Hz条件下,随着频率的增加,改性白炭黑填充丁基橡胶tan δ值和储能模量增大.KH-580有利于提高丁基橡胶和白炭黑之间的相容性.

后方医院战救药品消耗规律及其统计方法研究

目的：探讨伤员创伤严重度与药品消耗之间的关系，为客观地描述战时药材需求和需求分布提供一种有用的方法。方法：运用简明损伤严重度评分法（ Ａ Ｉ Ｓ Ｉ Ｓ Ｓ）和反映药物利用的约定日剂量（ Ｄ Ｄ Ｄ），研究“两山”作战中后方医院收治伤员的伤势和药品（抗感染药物）消耗的规律。结果：建立了战伤严重度 Ｉ Ｓ Ｓ值和抗感染药品消耗 Ｄ Ｄ Ｄ数的数学模型，其关系式为： Ｙ＝ １６．９９ｌｎ Ｘ－ ０．５３，决定系数ｒ２ ＝ ０．６６３ ７， Ｐ＜ ０．０１。在 Ｉ Ｓ Ｓ的一定范围内，抗感染药的使用频度随伤势的严重度增加而加大，且随着伤势的进一步加重，抗感染药物的使用有一个饱和的趋势。结论：解决了对伤员伤势难以量化的限制，对于揭示后方医院战伤救治药品消耗的一般规律具有实际意义。本方法具有使用方便、可操作性强的优点。

α-磷酸锆@磺酸基固体酸催化剂的表征及其催化酯化反应的研究

以层状结构的α-磷酸锆为载体,用四正丁基氢氧化铵对其剥离改性,再连接上γ-巯丙基三乙氧基硅烷(KH-580),通过氧化和酸化两步,制备出一种新型的固体酸催化剂α-磷酸锆@磺酸基。通过XRD、SEM、BET、TGA、FT-IR等手段对该催化剂进行表征。结果表明:制备的催化剂比表面积增大,结晶度降低,酸强为2. 43 mmol/g; FT-IR表征显示—SO_3H的存在,证明α-磷酸锆被成功磺化。将该催化剂应用于月桂酸与甲醇的催化酯化反应中,对反应条件进行优化,发现在反应温度90℃、反应时间5 h、酸醇摩尔比1∶30、催化剂用量3%(以月桂酸质量计)时,酯化率达到97%以上。该催化剂使用3次后,仍然保持着较高的催化活性,酯化率为87. 48%。

6061合金超大规格扁铸锭熔铸工艺研究

基于6061合金本身特性出发,从配料、熔炼、铸造等方面,对6061合金580mm×2 120mm超大规格扁铸锭进行了工艺研究,并对铸锭质量进行了分析,包括化学成分,金相显微组织,力学性能等方面。结果表明铸造出的6061合金580 mm×2 120 mm规格扁铸锭满足质量要求。

ZFP580基因过表达对大鼠骨髓源性内皮祖细胞分化的影响

【目的】内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)参与血管内皮修复及血管新生,EPCs分化受多种转录因子调控网络的影响,本实验旨在研究新型C2H2锌指蛋白基因ZFP580对EPCs分化作用的影响。【方法】密度梯度离心法,分离培养大鼠骨髓源性EPCs,免疫荧光染色鉴定EPCs;腺病毒转染过表达ZFP580的EPCs,QPCR及Western blotting检测ZFP580对EPCs分化的影响。【结果】细胞培养至7 d时,Dil-ac LDL/FITC-UEA-I双阳性细胞约占87.39%±2.98%。证实所培养细胞为EPCs。腺病毒转染技术获得过表达ZFP580的EPCs,ZFP580基因过表达促进成熟内皮表型CD31和v WF的表达。【结论】ZFP580基因过表达促进EPCs向成熟血管内皮细胞分化,提示ZFP580基因在EPCs分化过程中起重要的调控作用。

锌指蛋白ZFP580在低剪切应力诱导的动脉粥样硬化斑块中的表达

【目的】通过观察由低血流剪切应力诱导的小鼠颈总动脉粥样硬化斑块中锌指蛋白ZFP580的表达,探讨其在动脉粥样硬化病变中的作用。【方法】建立颈总动脉局部狭窄动物模型,HE染色观察局部狭窄血管远心端的形态学改变,RT-PCR方法检测动脉组织中ZFP580 mRNA的表达,免疫组织化学染色观察锌指蛋白ZFP580在病变处的表达。【结果】小鼠左颈总动脉局部狭窄2周后,远心端血管内膜增厚(P<0.05),且随处理时间的延长内膜增厚愈加明显(P<0.01),处理3周后,可见明显的动脉粥样硬化斑块。RT-PCR及免疫组织化学染色发现病变动脉中ZFP580的表达较未处理侧明显升高(P<0.01),且ZFP580阳性细胞多集中在内膜层。【结论】ZFP580可能在低剪切应力诱导的动脉粥样硬化斑块的形成及发展中发挥重要的调控作用。

H_2O_2诱导的氧化应激对锌指蛋白ZNF580表达的影响

【目的】研究过氧化氢(H_2O_2)对EA.hy926内皮细胞锌指蛋白580(zinc finger 580,ZNF580)表达的影响。【方法】先以不同浓度H_2O_2作用内皮细胞EA.hy926,测定细胞上清中乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)确定细胞的损伤程度。选择适宜的H_2O_2浓度作用细胞,在不同浓度和不同时间点提取总RNA和蛋白,以RT-PCR检测ZNF580的m RNA表达水平,同时western blotting检测其蛋白表达差异。【结果】随着H_2O_2浓度的升高,LDH释放随之升高,不同浓度H_2O_2作用EA.hy926内皮细胞后,ZNF580在m RNA转录水平和蛋白水平的表达均有增加,并呈现浓度依赖的趋势。同样的浓度为100μmol/L的H_2O_2作用EA.hy926内皮细胞不同时间后,检测可知ZNF580 m RNA和蛋白水平的表达增加,与对照组差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】一定浓度和时间的外源性H_2O_2作用内皮细胞可促进ZNF580在一定程度表达上调。