Effect of Sodium Carbonate on Extraction by Aqueous Decoction of Total Polyphenols from Crushed and Whole Leaves of Combretum micranthum

Sodium bicarbonate is sometimes used to aid in the extraction of total polyphenols. Its main effect is to increase the pH of the extraction solution. Raising the pH can cause changes in the chemical structure of polyphenols. This can lead to variations in their biological properties, solubility and stability. This work studied the effect of sodium carbonate on the extraction by aqueous decoction of total polyphenols from the leaves of Combretum micranthum. The content of total phenolic compounds in the extracts was estimated by the Folin-Ciocalteu method. The color of the samples was measured using a colorimeter (type: KONICA MINOLTA. Japan) based on the CIELAB color system. The results obtained were subjected to a one-way ANOVA analysis of variance with R software version 3.2.4 Revised (2018) and Minitab-18 software. The results reveal a drop in the concentration of extracted polyphenols proportional to the addition of sodium carbonate, i.e. a drop from 3.30 to 1.04 mg·AG·100 g-1 of extract on whole leaves and 3.921 to 2.551 mg·AG·100 g-1 extract on crushed leaves. On the other hand, the intensity of the coloring of the extracts increases significantly with the addition of sodium carbonate from 0.0 g·L -1 to 0.666 g·L-1.

Study on Extraction Technology for Polysaccharide from Blood-Supplementing Angelica Sinensis Decoction

Purpose:Optimize water-alcohol technology for extracting polysaccharide from blood-supplementing angelica sinensis decoction to improve the extraction rate.Method:Draw the standard curve of glucose reference substance and build the regression equation to calculate the polysaccharide content.Investigate the effect of water addition times,extraction duration,extraction times,ethanol concentration for ethanol precipitation and times of ethanol precipitation on the extraction rate of polysaccharide.Result Add 8 times the medicinal material quality of water,and perform 2 extractions for 120min each time;it shows that conducting 2 ethanol precipitations with 80%ethanol concentration results in the maximum polysaccharide content,indicating the best extraction condition.Conclusion:The experiment establishes an easy and convenient water-alcohol method for extracting polysaccharide from blood-supplementing angelica sinensis decoction,and lays a research foundation on pharmacodynamics of polysaccharide in blood-supplementing angelica sinensis decoction.

Optimization of the Aqueous Decoction Process of Combretum micranthum Leaves

This work proposes to compare the extraction of total polyphenols and the coloring obtained after several series of decoction at 100°C/20min, of whole or crushed leaves of Combretum micranthum. The total phenolic content of the extracts obtained after decoction was determined by Folin’s method. The color parameters were measured using a colorimeter based on the CIELAB system. The analysis of variance (ANOVA) shows significant differences (p 0.05) on different parameters evaluated. The Minitab 19 software was used to classify the extracts according to the color parameters (L, A, and B). The results showed that the maximum of polyphenols (21.67%) was extracted in the crushed leaves after three series of decoctions while with the whole leaves the maximum of 16.17% is obtained after six series of decoctions. The concentration of total polyphenols becomes low from four series of decoctions with 0.146 g·AG·100 g-1 MS. The red and yellow coloring drops respectively by 85 and 69% with crushed leaves and 64 and 21% with whole leaves. The conductivity and the brix of the extracts fall according to the series of decoctions. These results show that for optimal use of C. micranthum leaves in traditional medicine, crushed leaves and three series of decoctions are indicated and sufficient.

基于QbD理念的散偏汤提取工艺设计空间预测

目的:预测散偏汤提取工艺的设计空间。方法:基于质量源于设计和设计空间理念,采用鱼骨图结合失效模型与效应分析的方法确定提取次数、提取时间、加水倍量为散偏汤提取工艺的关键工艺参数,以阿魏酸、芥子碱硫氰酸盐、甘草苷、甘草酸的含量及出膏率为关键质量属性,采用Box-Behnken响应面法试验设计拟合数学模型,考察其相互关系,建立散偏汤提取工艺设计空间。结果:依据数学模型建立了散偏汤提取工艺设计空间,在此空间内取点验证,发现单个处方阿魏酸、芥子碱硫氰酸盐、甘草苷、甘草酸的质量分数分别为0.450‰、0.787‰、0.248‰、0.451‰,出膏率为23.83%,符合关键质量属性的要求。结论:建立的设计空间可为散偏汤放大生产和质量控制提供参考。

巴芪柔肝方基准样品HPLC特征图谱建立及其量值传递规律研究

目的建立巴芪柔肝方基准样品HPLC特征图谱,并考察其量值传递规律。方法测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、迷迭香酸、莪术烯醇、耐斯糖含量,计算饮片-水煎液-基准样品转移率,记录出膏率、pH值。结果15批基准样品HPLC特征图谱中有16个特征峰,相似度均大于0.90,鉴定出9个。饮片-基准样品中耐斯糖、毛蕊异黄酮葡萄糖苷平均转移率分别为(83.14±6.25)%、(77.81±8.31)%,水煎液-基准样品中迷迭香酸、莪术烯醇平均转移率分别为(81.71±6.27)%、(72.16±5.91)%,平均出膏率为(38.91±1.46)%,pH值为5.13±0.08。结论该方法稳定可行,可为巴芪柔肝方制剂工艺选择、关键化学属性评价提供参考。

和血柔肝方通过PI3K/Akt/NF-κB信号通路调控自噬相关蛋白改善大鼠肝纤维化机制研究

目的:探讨和血柔肝方通过调控磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核因子-κB(NF-κB)信号通路调控自噬相关蛋白改善大鼠肝纤维化的作用机制。方法:将40只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、秋水仙碱组与和血柔肝方最佳剂量组,每组各10只。除空白对照组外,其余各组均以四氯化碳(CCl_(4))构建肝纤维化大鼠模型。造模8周后,空白对照组、模型组采用0.9%氯化钠溶液灌胃;秋水仙碱组采用秋水仙碱灌胃;和血柔肝方最佳剂量组以和血柔肝方灌胃。灌胃结束后,取各组大鼠血清及肝脏组织。生化检测各组大鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平;HE及Masson染色评估大鼠肝纤维化情况。RT-qPCR法检测大鼠肝组织PI3K、Akt、NF-κB以及NF-κB下游自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3-Ⅱ)、Beclin-1的mRNA的表达水平;蛋白免疫印迹(Western blot)检测大鼠肝组织中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、NF-κB P65、p-NF-κB P65、LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达水平。结果:与模型组比较,和血柔肝方最佳剂量组血清ALT、AST水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,和血柔肝方最佳剂量组大鼠肝脏病理受损可见明显缓解。与模型组比较,和血柔肝方最佳剂量组大鼠肝组织PI3K、Akt、NF-κB、LC3-Ⅱ、Beclin-1基因表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,和血柔肝方最佳剂量组的PI3K、Akt、p-Akt、NF-κB P65、p-NF-κB P65、LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白表达Western blot结果均显著降低(P<0.05)。结论:和血柔肝方可通过抑制肝纤维化大鼠肝组织PI3K/Akt/NF-κB信号通路的表达以降低自噬相关蛋白活化,从而改善大鼠肝脏炎症,减缓肝脏病理损害,改善肝纤维化。

基于QbD理念的经典名方研究:真武汤的提取工艺优化研究

目的 基于质量源于设计(QbD)理念,优化经典名方真武汤的提取工艺。方法 以芍药苷、6-姜辣素的含量和出膏率作为真武汤提取工艺的关键质量属性,筛选潜在关键工艺参数,在单因素试验结果的基础上采用Box-Behnken设计-响应面法优化提取工艺,建立真武汤提取工艺的设计空间,并进行空间优化,验证得到最佳提取工艺。结果 通过设计空间的优化,得到真武汤的最佳提取工艺:加水倍量10倍、提取时间60 min、提取次数1次。结论该研究基于质量源于设计理念,开发得到的制剂中间体与基准样品的关键质量属性保持一致,可为后续颗粒剂的制备工艺奠定基础。

基于层次分析-熵权法优选温肺平喘汤的提取工艺

目的:采用层次分析(AHP)-熵权法(EWM)建立多指标综合评价复方的方法,优化温肺平喘汤的提取工艺。方法:以芍药苷、甘草苷、迷迭香酸、丹酚酸B、甘草酸含量和干浸膏得率为评价指标,采用AHPEWM确定权重系数,通过L9(34)正交设计考察加水倍量、提取时间、提取次数对温肺平喘汤提取工艺的影响。结果:最佳提取工艺为8倍量水提取3次,每次1 h。结论:优选的提取工艺重复性好、稳定性好、提取率高,适用于温肺平喘汤的标准化生产。

运脾化痰通窍方提取工艺优化

目的实现运脾化痰通窍方提取工艺优选,并建立组方指纹图谱。方法应用总量统计矩法,对提取液指纹图谱进行宏观表征和相似度分析,以黄芩苷、汉黄芩苷、迷迭香酸、甘草苷、甘草酸、出膏率为关键质量属性,以提取时间、加水倍量、提取次数为关键工艺参数,采用AHP-独立性权重法进行综合评分,优选出最佳提取工艺,并进行验证。结果建立总量统计矩相似度评价方法,不同提取方法指纹图谱总量统计矩相似度均值为0.8807,工艺评价模型函数方差分析结果显示,P<0.0001、R2=0.9904,该模型具有统计学意义。优选得到最佳提取工艺为全方饮片加10倍量水,提取1.5 h,提取2次。结论优化的工艺稳定可靠,建立了符合该方提取液指纹图谱特点的总量统计矩分析方法,为该方后续工艺研究全过程质量控制奠定物质基础。

中心组合设计-响应面法优选当归-川芎饮片苯酞、酚酸类成分提取工艺

目的优选当归-川芎饮片苯酞、酚酸类成分最佳提取工艺。方法在单因素试验基础上,采用中心组合设计-响应面法,以提取时间、乙醇浓度、乙醇用量为影响因素,洋川芎内酯I、洋川芎内酯A、藁本内酯含量及浸膏得率的总评归一值为评价指标,优选当归-川芎饮片苯酞类成分提取工艺;以绿原酸、咖啡酸、阿魏酸含量及浸膏得率的总评归一值为评价指标,优选当归-川芎饮片酚酸类成分提取工艺。结果苯酞类成分最佳提取工艺:加7倍量90%乙醇,每次提取130 min,提取2次;酚酸类成分最佳提取工艺:加7.5倍量65%乙醇,每次提取120 min,提取2次。结论优选的当归-川芎饮片苯酞、酚酸类成分提取工艺稳定、可行,可为后续研究提供依据。

BP神经网络算法多指标优化酸枣仁汤提取工艺

为了优化酸枣仁汤的提取工艺,以提取时间、提取次数、料液比为考察因素,以总黄酮、总皂苷、总酚、多糖的提取率为评价指标,采用熵权法进行综合评价。在单因素试验的基础上,运用Box-Behnken响应面设计和BP神经网络算法,优化酸枣仁汤化学成分的提取工艺,并进行工艺验证。结果表明,BP神经网络算法预测的最优提取工艺综合评分为149.11,优于Box-Behnken响应面法的综合评分137.16。确定BP神经网络验证的工艺为最优工艺,即提取时间80 min,提取次数2次,料液比1:7 g/mL,该条件下获得的总黄酮、总皂苷、总酚、多糖含量分别为(10.73±0.63)mg/g,(73.34±1.77)mg/g,(16.73±0.56)mg/g,(413.08±8.34)mg/g。研究为酸枣仁汤的提取工艺优化提供依据。

柔肝散结汤加减联合富马酸替诺福韦二吡呋酯片治疗慢性乙型肝炎的效果

目的:观察在慢性乙型肝炎治疗上选择柔肝散结汤加减联合富马酸替诺福韦二吡呋酯片的应用效果。方法:选取2021年1月—2023年6月宁化县总医院收治的178例慢性乙型肝炎患者作为研究对象,按照随机数表法分为对照组和观察组,每组各89例。对照组采用柔肝散结汤加减法,观察组在对照组基础上联合富马酸替诺福韦二吡呋酯片。观察两组临床效果、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)、乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)、肝弹性硬度、HBeAg、HBV-DNA 转阴率、HBeAg转阴率、不良反应发生情况及生活质量。结果:观察组较对照组的疗效更高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后AST、ALT、TBil、HBV-DNA 、肝弹性硬度和HBeAg比对照组低,差异有统计学意义(P<0.05);观察组的HBV-DNA转阴率和HBeAg转阴率较对照组更高,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应,差异无统计学意义(P>0.05);治疗前,两组生活质量比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组生活质量评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在慢性乙型肝炎治疗上选择柔肝散结汤加减联合富马酸替诺福韦二吡呋酯片具有良好疗效,其可有效改善患者各临床指标,提升HBV-DNA 及HBeAg 转阴率,提高生存质量,改善预后。

芪七连胶囊两种不同制备工艺对剂型成型的影响及药效评价研究

目的:改进芪七连胶囊的提取工艺和制备工艺,并进行药效学评价。方法:以粒度分布、休止角、吸湿率、胶囊的装量差异为评价指标,对比两种制备工艺(乙醇回流提取法和水煎法)对芪七连胶囊成型的影响,并以自发性高血压大鼠(SHR)为模型,对所得的芪七连胶囊成品的降压和血管内皮保护作用进行评价。结果:分别以10倍量、8倍量的50%乙醇回流提取方中黄芪、黄连、黄柏、蒲黄、杜仲、钩藤药材2次,第1次2 h,第2次1 h,减压干燥后加入三七细粉,制粒后填充胶囊。其粒度分布、休止角、吸湿率、胶囊的装量差异均优于原工艺(水煎法)。药效学实验表明,新工艺所制芪七连胶囊成品,给与临床使用量,可明显降低SHR大鼠的血压,且具有保护血管内皮细胞作用,其药效优于原工艺成品(P<0.05或P<0.01)。结论:新工艺的制备工艺可行、稳定,所制得成品具有明显的降压及保护血管内皮的作用。

基于药效学优化参花方提取工艺及其治疗银屑病的谱效关系研究

目的建立参花方不同工艺提取物的HPLC指纹图谱,评价其治疗银屑病的谱效关系,为参花方的新药开发提供依据。方法采用HPLC法建立参花方水提、醇提、水提醇沉提取物的指纹图谱,分析样品之间相似度;采用咪喹莫特诱导建立银屑病样小鼠模型,考察不同提取物对小鼠皮损的治疗作用;以小鼠皮损组织的银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)评分和表皮厚度为药效指标,借助灰色关联度法分析各共有峰与抗银屑病的谱效关系。结果共标定出18个共有峰,相似度均不低于0.922,指认出4个特征峰(指认峰1为苦参碱,峰5为绿原酸,峰12为木犀草苷,峰17为蒙花苷)。3种提取物均能降低小鼠皮损的PASI评分及表皮厚度,其中水提物药效最佳;共有峰中与银屑病药效指标PASI评分及表皮厚度有较大关联性的峰分别有16个及15个。结论本研究建立了参花方指纹图谱的质量评价方法,水提法为最优提取工艺,其抗银屑病作用是多种成分共同作用的结果。

经典名方附子汤物质基准特征图谱及多成分含量测定研究

【目的】建立附子汤物质基准的高效液相色谱(HPLC)特征图谱及多成分含量测定方法。【方法】建立附子汤物质基准特征图谱方法,并采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)对15批附子汤物质基准的特征图谱进行分析。分别建立附子汤物质基准中11个成分的HPLC含量测定方法,并测定15批附子汤物质基准对应实物的干膏率。【结果】15批附子汤物质基准特征图谱的相似度均大于0.9,遴选了12个共有峰,并指认其中8个。结果显示,附子汤物质基准样品中苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、白术内酯Ⅲ、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷的含量分别为:0.0503~0.1911、0.0267~0.0470、0.0430~0.1276、0.5546~1.0068、0.5687~0.9795、0.9299~1.7261、1.0589~2.1184、1.4303~4.9655、6.8829~9.5111、0.0561~0.2625、0.1606~0.3690 mg/g。15批附子汤物质基准对应实物的平均干膏率为29.54%。【结论】建立的特征图谱和多指标成分测定方法准确、稳定,可为经典名方附子汤物质基准及相关制剂的质量控制提供依据。

经典名方清金化痰汤基准样品HPLC指纹图谱及量值传递研究

基于建立的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱结合多指标成分含量的测定方法,研究了清金化痰汤(QJHTD)的量值传递规律。制备15批QJHTD基准样品,建立其HPLC指纹图谱并进行相似度评价,确定共有峰;对QJHTD基准样品中4种指标性成分(栀子苷、芒果苷、黄芩苷、甘草酸)进行含量测定,分析饮片-基准样品的量值传递规律。结果表明,15批QJHTD基准样品指纹图谱的相似度均大于0.98。标定了26个共有峰,并对各共有峰进行药材归属。指标性成分栀子苷、芒果苷、黄芩苷、甘草酸的含量分别为44.60~76.82mg·g^(-1)、98.04~145.25 mg·g^(-1)、46.82~75.64 mg·g^(-1)、81.60~126.63 mg·g^(-1),转移率分别为32.91%~62.42%、21.78%~35.93%、29.98%~57.12%、27.51%~49.34%。15批QJHTD基准样品的出膏率为16.98%~25.19%,平均出膏转移率为67.19%。结合指纹图谱、多成分含量测定以及出膏率,研究经典名方QJHTD基准样品的量值传递规律,可为后续制剂质量控制提供参考。

基于Box-Behnken设计-响应面法优化改良葛根芩连汤提取工艺研究

优化和评价改良葛根芩连汤的提取工艺,为提高其临床适用性以及开发新兽药奠定基础。采用Box-Behnken设计-响应面法,以葛根素含量为评价指标,对提取次数、煎煮时间、加水量3个影响因素进行考察,并对响应面条件下17批样品进行定量分析,得出各因素对葛根素提取率的影响程度。通过Box-Behnken中心组和设计建立数学模型分析回归模型方差以及响应面曲面图,获得改良葛根芩连汤最佳提取工艺为:提取3次,提取时间2 h,加水量9倍。通过工艺验证测得葛根素含量平均值为0.8108 mg/mL,与预测值0.8110 mg/mL接近。优化的改良葛根芩连汤最佳提取工艺特征有效成分溶出率高,稳定可行,可为该复方制剂的进一步研究提供理论依据。

鸡根标准汤剂提取工艺优化及其质量标准建立

目的优化鸡根标准汤剂提取工艺,并建立其质量标准。方法在单因素试验基础上,以浸泡时间、加水量、一煎时间为影响因素,3,6′-二芥子酰基蔗糖含量、出膏率的综合评分为评价指标,响应面法优化提取工艺。测定3,6′-二芥子酰基蔗糖含量及转移率,建立HPLC特征图谱,进行聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘判别分析。结果最佳条件为浸泡时间60 min,加水量(12+11)倍,煎煮时间(47+20)min,综合评分为97.98分。15批标准汤剂平均出膏率为14.182%,转移率为20.468%;其特征图谱中有6个共有峰,相似度均大于0.9(除S4、S8外)。各批标准汤剂聚为2类,3种主成分累积方差贡献率达91.4%,峰2、6为质量标志物。结论该方法精密稳定,重复性好,可用于鸡根标准汤剂的制备及质量控制。

正交试验优选十枣汤的提取工艺

目的优选十枣汤的提取工艺。方法以十枣汤中大戟二烯醇的含量及干膏得率的综合评分为评价指标,在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验考察加水量、提取时间和提取次数对十枣汤提取工艺的影响。结果最佳提取工艺为提取2次,提取时间为1.5 h,加入10倍量水。验证试验结果显示,5份样品中大戟二烯醇的平均含量为0.99 mg/g,RSD为1.24%(n=5);平均干膏得率为44.01%,RSD为1.64%(n=5)。结论优选的提取工艺合理、可行。

Box-Behnken设计-响应面法优化经典名方散偏汤的提取工艺

目的 优选与基准样品指标性成分含量、出膏率和指纹图谱相似度均接近的散偏汤提取工艺。方法 以阿魏酸、芥子碱硫氰酸盐、甘草苷及甘草酸的含量和出膏率作为综合评分的指标,在单因素试验结果的基础上采用Box-Behnken设计-响应面法优化提取工艺。结果优化后的散偏汤提取工艺为加水20倍量、提取60 min、提取1次,全方在此提取工艺条件下所得阿魏酸、芥子碱硫氰酸盐、甘草苷和甘草酸含量分别为40.54 mg、70.87 mg、22.30mg、40.63 mg,出膏率为23.83%,与基准样品的质控标准最为接近。结论 散偏汤提取工艺经Box-Behnken设计-响应面法优化后更加可靠,且符合基准样品质量标准范围,可为后续剂型开发提供参考。