^（211）At标记单克隆抗体3H11及其对人胃癌细胞DNA和RNA合成的影响

采用间接标记方法，先合成对砹苯甲酸中间体，再与抗胃癌单抗３Ｈ１１偶联制得２１１Ａｔ－３Ｈ１１。２１１Ａｔ－３Ｈ１１的放化产率不低于２１１Ａｔ初始活度的３０％，其放射性比度可达１１１ＧＢｑ／ｇＭｃＡｂ。标记后２１１Ａｔ－３Ｈ１１的免疫活性与未标记的３Ｈ１１ＭｃＡｈ一致。核素前体参人法研究表明，２１１Ａｔ－３Ｈ１１对人胃癌细胞ＤＮＡ、ＲＮＡ合成的抑制效应强于Ｎａ２１１Ａｔ，尤其抑制ＲＮＡ合成，其作用呈量效关系。２１１Ａｔ－３Ｈ１１作用解除后，ＤＮＡ合成可逐渐恢复，提示２１１Ａｔ－３Ｈ１１为干扰代谢型药物。

^（211）At标记单克隆抗体3H11及其Fab片段对裸鼠人胃癌移植瘤导向治疗的实验研究

用α放射性核素２１１Ａｔ标记的抗胃癌单克隆抗体３Ｈ１１和它的Ｆａｂ片段进行了荷人胃癌裸鼠的实验性治疗研究。经腹腔注射１４．８或２２．２ｋＢｑ／ｇ鼠的标记单抗，每５天一次，连续三次。治疗结果表明，此单抗对肿瘤有较强的抑制作用，治疗１５天后疗效最显著，抑制率分别达６５％和７２％。未发现各重要器官有明显的辐射损伤。

^（211）At标记抗胃癌单抗3H11及其Fab片段在荷人胃癌裸小鼠体内的分布

利用ＨＰＬＣ和ＥＬＩＳＡ法对￣（２１１）Ａｔ－３Ｈ１１的分析鉴定表明，间接亲核标记法得到的产品具有３Ｈ１１的天然性和纯度，并保持其免疫活性。￣（２１１）Ａｔ在荷瘤裸小鼠体内分布的结果表明，￣（２１１）Ａｔ－３Ｈ１１Ｆａｂ和￣（２１１）Ａｔ－３Ｈ１１与胃癌细胞有明显的特异亲合力，注射药物３ｈ后，其胃癌摄取率（％／ｇ）分别为９．４８±０．６５和４．９１±２．０５，前者的Ｔ／ＮＴ值在１２－１４ｈ左右明显大于后者。

^（211）At标记抗胃癌单抗3H11的高效液相色谱分析

报道了^（２１１）Ａｔ标记抗胃癌单抗３Ｈ１１的高效液相色谱分析方法。采用疏水性色谱柱和梯度洗脱程序，３Ｈ１１紫外色谱峰的保留时间（ｔ＿Ｒ）为１３．００ｍｉｎ，与此相对应出现^（２１１）Ａｔ－３Ｈ１１的放射性色谱峰，并与其它放射性杂质峰有较好的分离。在０．３５～３．５μｇ范围内，３Ｈ１１色谱峰的峰面积与进样量呈线性关系。

NH3在Ir（211）和Ir（221）表面吸附的第一性原理计算

采用密度泛函理论,结合周期性平板模型,研究了NH 3在Ir(211)和Ir(221)表面上的吸附行为.计算结果显示,在Ir(211)、(221)两个面上,NH 3的优势吸附位皆为脊上的top位,吸附能均达到1.0 eV以上,都为化学吸附.电子结构计算结果表明,NH 3通过其N原子的2p z轨道与底物金属Ir的5d z 2轨道混合吸附于表面.

非小细胞肺癌患者血清CA211水平和NK细胞数与预后相关

目的 探究非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清糖类抗原211(CA211)表达水平和自然杀伤(NK)细胞数与预后的相关性。方法 选取杭州师范大学附属医院2019年6月至2022年7月收治的132例NSCLC患者作为实验组,另选取同期收治的132例肺部良性病变患者作为对照组。从检验科收集数据分析NSCLC患者血清CA211表达水平和NK细胞数与患者预后关系以及影响NSCLC患者预后的相关因素。结果 实验组中性粒细胞/淋巴细胞值(NLR值)和血清CA211表达水平高于对照组(P<0.05),NK细胞数低于对照组(P<0.05);实验组血清CA211表达水平和NK细胞数呈负相关(r=-0.405,P<0.001);不同血清CA211表达水平和NK细胞数的患者淋巴结转移情况以及TNM分期存在显著性差异(P<0.05);CA211低表达者1年生存率高于CA211高表达者(P<0.05),NK细胞高水平者1年生存率高于NK细胞低水平者(P<0.05);淋巴结转移、TNM分期、CA211是影响NSCLC患者预后的危险因素(P<0.05),NK细胞是NSCLC患者预后的保护因素(P<0.05)。结论 NSCLC患者血清CA211表达水平及NK细胞数与临床病理特征及预后有密切联系。

circFAT1调节miR-211-5p/CCND2轴对糖尿病心肌病大鼠心肌损伤的影响

目的探讨circFAT1对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心肌损伤的影响及对miR-211-5p/细胞周期蛋白D2(CCND2)轴的调节机制。方法利用高糖高脂饲料联合链脲佐菌素建立DCM大鼠模型,并随机分为DCM组、circ-NC组、circFAT1组、circFAT1+激动剂-NC组和circFAT1+miR-211-5p激动剂组,以喂食普通饲料的大鼠作为对照组,每组20只。实时PCR检测心肌组织中circFAT1、miR-211-5p、CCND2水平;Western blotting检测心肌组织CCND2蛋白表达;生化分析仪检测大鼠空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平;心脏超声检测大鼠心功能;HE和Masson染色观察心肌组织病理形态;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡情况;ELISA法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;双荧光素酶报告基因实验验证circFAT1、miR-211-5p、CCND2之间的靶向关系。结果与对照组相比,DCM组circFAT1、CCND2 mRNA及蛋白表达,左心室射血分数(LVEF)、左心室缩短分数(LVFS)水平降低(P<0.05),FBG、TC、TG、左心室舒张末期直径(LVEDd)、左心室收缩末期直径(LVEDs)、胶原容积分数(CVF)、细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均升高(P<0.05);与DCM组相比,circFAT1组circFAT1、CCND2 mRNA及蛋白表达,LVEF、LVFS水平升高(P<0.05),FBG、TC、TG、LVEDd、LVEDs、CVF、细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低(P<0.05);miR-211-5p激动剂逆转了circFAT1对DCM心肌损伤的缓解作用,且CCND2 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05)。结论circFAT1通过调控miR-211-5p/CCND2轴减轻DCM大鼠心肌组织损伤。

用于^(211)At生产的高功率金属Bi靶热效应模拟

为提高用于医用同位素^(211)At生产的金属Bi靶在高束流功率作用下的可靠性与使役寿命,对多种束流均匀化方法进行了模拟与对比,利用计算流体力学(CFD)方法模拟分析了在wobbler磁铁作用下强度为500 eμA的α束流轰击Bi靶产生的热效应,为靶系统的设计和寿命的延长提供了关键技术支撑。结果表明,通过扫描实现束流均匀化可大幅降低靶上的最大热功率密度;在靶前采用wobbler磁铁对束流进行周期性圆扫描可有效降低Bi靶的表面温度。当扫描频率为50 Hz时,Bi靶最高温度为189.8℃,低于其熔点(271.3℃),能够满足Bi靶在此高功率束流照射下安全运行的温度要求。

^(211)At干馏装置研制及分离工艺研究

^(211)At是一种α核素,其半衰期为7.2 h,不仅适用于α靶向内放射治疗,也可替代长半衰期核素用于α辐解的研究。为解决现有^(211)At干馏工艺产额低、稳定性差的问题,本研究优化设计了^(211)At干馏生产工艺,集成了一套半自动化^(211)At干馏分离装置。采用碘干馏模拟实验确定了影响干馏分离的主要影响因素,改进得到了简便可行的^(211)At干馏分离工艺步骤。^(211)At干馏分离结果表明:当加速器α束流强度为20μA、能量为28.5 MeV时,轰击Bi靶4 h后,^(211)At的3次平均产额为17.87 mCi(6.61×10^(8) Bq),产品核纯度>99.9%,无Bi、Cu等杂质。^(211)At收率达98%以上,分离耗时45~60 min。本研究不仅为各类^(211)At应用工作的开展垫定了良好的基础,也可为后续^(211)At干馏自动化装置的研制提供参考。

皮肤恶性黑色素瘤血清miR-211、miR-128水平及与疗效关系

目的探究皮肤恶性黑色素瘤(CMM)血清miR-211、miR-128水平及与疗效关系。方法选取2021年7月至2022年6月期间河南中医药大学第三附属医院收治的120例CMM患者为CMM组,选取同期90例非肿瘤皮肤病患者为对照组,比较两组血清miR-211、miR-128表达水平,分析血清miR-211、miR-128表达与CMM临床病理特征关系;3个月后,根据CMM组患者实体瘤疗效分为缓解组和未缓解组,分析血清miR-211、miR-128表达与患者疗效关系。结果CMM组血清miR-211、miR-128表达量低于对照组,差异有统计学意义(t=18.186、48.871,P均<0.05)。不同病理类型、分化程度、淋巴结转移、临床分期、Ki-67指数患者血清miR-211表达比较差异有统计学意义(F或t=13.209、3.044、5.601、7.996、3.748,P均<0.05),不同分化程度、淋巴结转移、临床分期患者血清miR-128表达比较差异有统计学意义(t=5.940、9.592、12.895,P均<0.05)。缓解组与未缓解组病理类型、分化程度、有无淋巴结转移、临床分期、Ki-67指数水平、是否手术比较差异均有统计学意义(χ^(2)=8.062、19.171、7.333、14.436、5.025、4.309,P均<0.05);治疗后,缓解组血清miR-211、miR-128表达均高于未缓解组,差异有统计学意义(t=13.926、8.849,P均<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,低分化(OR=2.275,95%CI:1.027~5.042)、淋巴结转移(OR=2.643,95%CI:1.243~5.622)、临床分期Ⅲ~Ⅳ期(OR=3.022,95%CI:1.348~6.777)、miR-211低表达(OR=2.208,95%CI:1.217~4.006)、miR-128低表达(OR=2.375,95%CI:1.086~5.192)是影响患者疗效的危险因素(P<0.05)。结论CMM患者血清miR-211、miR-128表达水平明显降低,两指标均与患者临床病理特征及疗效有关,具有一定参考价值。

miR-211-5p和miR-202-3p在抑郁症患者中的表达及其与患者病情程度和认知功能的关系

目的探究微小核糖核酸-211-5p(miR-211-5p)和微小核糖核酸-202-3p(miR-202-3p)在抑郁症患者中的表达及其与患者病情程度和认知功能的关系。方法选取2021年1月至2023年6月郑州大学第一附属医院精神科收治的92例确诊为抑郁症的患者为抑郁症组,同期选取本院体检健康(精神状态正常)的志愿者92例为对照组。根据抑郁自评量表(SDS)分为轻度抑郁组(SDS:53~62分)45例、中度抑郁组(SDS:63~72分)30例、重度抑郁组(SDS:73分及以上)17例。根据简易智力状态检查量表(MMSE)评分分为轻度认知功能障碍组(MMSE:21~26分)24例、中度认知功能障碍组(MMSE:10~20分)40例、重度认知功能障碍组(MMSE:1~9分)28例。实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-211-5p和miR-202-3p水平。血清miR-211-5p、miR-202-3p水平对抑郁症的诊断价值采用ROC曲线进行分析。血清miR-211-5p、miR-202-3p水平与病情程度及认知功能的关系采用Spearman相关性分析。结果抑郁症患者血清miR-211-5p水平低于对照组,miR-202-3p水平高于对照组(P<0.05)。miR-211-5p、miR-202-3p联合诊断抑郁症的AUC高于miR-211-5p(Z=4.701,P<0.001)、miR-202-3p(Z=2.275,P=0.023)单独诊断的AUC。与轻度抑郁组相比,中度抑郁组和重度抑郁组miR-211-5p水平依次降低,与轻度抑郁组相比,中度抑郁组和重度抑郁组miR-202-3p水平依次升高。不同认知功能抑郁症患者血清miR-211-5p水平比较:重度认知功能障碍组<中度认知功能障碍组<轻度认知功能障碍组;miR-202-3p水平比较:重度认知功能障碍组>中度认知功能障碍组>轻度认知功能障碍组(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,抑郁症患者血清miR-211-5p水平与病情程度及认知功能损害呈负相关,miR-202-3p水平与病情程度及认知功能损害呈正相关(P<0.05)。结论抑郁症患者血清miR-211-5p低表达,miR-202-3p高表达,二者与病情程度及认知功能有关,有成为抑郁症辅助诊断生物学指标的潜力。

阿尔茨海默症患者血清miR-211和miR-202表达水平及其与认知功能、焦虑抑郁情绪的相关性研究

目的分析阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease)患者血清微小核糖核酸(microRNA,miR)-211和miR-202表达水平及与认知功能、焦虑抑郁情绪的相关性研究。方法选取2019年3月~2022年3月河北燕达医院收治的阿尔茨海默症患者90例作为研究组,根据临床痴呆评定量表(clinical dementia rating,CDR)评分将患者分为轻度组(n=24)、中度组(n=48)和重度组(n=18)。另选取同期健康体检者90例作为对照组,比较血清miR-211和miR-202表达水平。Pearson法和Spearman法分析血清miR-211,miR-202以及二者与认知功能、焦虑抑郁情绪的相关性,采用Logistic回归分析阿尔茨海默症的影响因素。结果与对照组比较,研究组血清miR-211(0.59±0.16 vs 1.01±0.31)、miR-202(0.35±0.10 vs 1.00±0.32)表达水平降低,差异具有统计学意义(t=11.422,18.393,均P<0.05)。轻度、中度和重度组血清miR-211(0.73±0.21,0.62±0.17,0.32±0.08)表达水平、miR-202(0.51±0.15,0.33±0.10,0.19±0.04)表达水平、简易精神状态检查量表(mini-mental state examination,MMSE)评分(22.54±1.41分,19.35±1.01分,16.23±1.00分)和蒙特利尔认知评估量表(montreal cognitive assessment,MoCA)评分(25.35±2.60分,18.59±1.32分,16.59±1.24分)逐渐降低,差异具有统计学意义(F=32.006,46.917,163.048,163.703,均P<0.05)。与轻度组比较,重度组、中度组血清miR-211,miR-202,MMSE和MoCA评分降低,差异具有统计学意义(t=3.685~25.375,均P<0.05)。轻度、中度和重度组Hamilton焦虑量表(hamilton anxiety scale,HAMA)评分(12.34±1.27分,20.59±2.09分,31.29±2.19分)和Hamilton抑郁量表(hamilton depression scale,HAMD)评分(14.35±2.13分,23.89±2.20分,35.35±1.21分)逐渐升高,差异具有统计学意义(F=496.059,553.939,均P<0.05)。根据Pearson相关性分析得知,miR-211与miR-202呈正相关(r=0.615,P<0.05)。根据Spearman相关性分析得知,miR-211和miR-202与MMSE和MoCA呈显著正相关(r=0.539~0.585,均P<0.05);与HAMA和HAMD呈显著负相关(r=-0.651~-0.539,均P<0.05)。根据Logistic回归分析得知miR-211[OR(95%CI):5.321(1.648~17.180)]和miR-202[OR(95%CI):3.158(1.989~5.012)]低表达是影响阿尔茨海默症的危险因素(均P<0.05)。结论阿尔茨海默症患者血清miR-211和miR-202表达水平降低,且miR-211和miR-202与认知功能、焦虑抑郁情绪密切相关。

车古211井抗高温防塌钻井液技术

车古211井是重点评价井,完钻井深5054.3m。车古区块地质结构复杂,地层发育超温,井底温度达180℃,勘探过程中复杂情况不断发生,车古区块一度成为勘探开发的禁区。通过优选复合盐防塌钻井液体系和抗高温无固相钻井液体系,配合现场钻井液维护处理工艺,保证了工程的顺利进行,钻井过程中井壁稳定,完井作业顺利,为该区块的进一步勘探开发提供了宝贵的技术参数和施工经验。

白癜风患者血清LncRNA MALAT1及miR-211-5p表达水平与临床特征的相关性分析

目的探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子1(long non-coding RNA metastasis associated transcription factor 1 in lung adenocarcinoma,Lnc RNA MALAT1),微小核糖核酸(micro RNA,miR)-211-5p表达水平变化与临床特征的相关性。方法选取2022年1~6月河北省沧州中西医结合医院皮肤科收治的白癜风患者80例为研究对象(白癜风组),同期于该院进行体检的健康者80例为对照组。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q RT-PCR)法检测受试者血清中Lnc RNA MALAT1,mi R-211-5p表达水平;两组间比较采用独立样本t检验;多组间(不同临床分期、临床分型、皮损面积及病程)比较进行单因素方差分析,组间多重比较采用SNK-q检验;白癜风患者皮损面积及病程与血清中Lnc RNA MALAT1和mi R-211-5p表达水平的相关性采用Pearson法分析。结果白癜风组患者血清Lnc RNA MALAT1(1.90±0.25)表达水平高于对照组(1.02±0.13),血清mi R-211-5p(0.53±0.07)表达水平低于对照组(1.05±0.10),差异均有统计学意义(t=27.933,38.103,均P=0.000)。进展期及快速进展期血清Lnc RNA MALAT1水平均高于稳定期(2.29±0.42,2.47±0.31 vs 1.54±0.12),差异有统计学意义(t=15.000,16.766,均P<0.001)。血清mi R-211-5p水平均低于稳定期(0.28±0.09,0.22±0.06 vs 0.74±0.11),差异有统计学意义(t=24.748,25.217,均P<0.001)。寻常型血清Lnc RNA MALAT1(2.06±0.26)表达水平高于节段型(1.50±0.16),寻常型血清mi R-211-5p(0.39±0.11)表达水平低于节段型(0.86±0.21),差异有统计学意义(t=9.768,13.127,均P<0.001)。泛发型血清Lnc RNA MALAT1相对表达水平高于肢端型、局限型及散发型(2.59±0.38 vs 2.02±0.19,1.98±0.44,1.89±0.30),差异有统计学意义(t=5.559,6.038,7.375,均P<0.001)。血清mi R-211-5p水平低于肢端型、局限型及散发型(0.17±0.04 vs 0.39±0.09,0.43±0.11,0.45±0.10),差异有统计学意义(t=7.651,9.177,10.520,均P<0.001)。皮损面积<1%,1%~50%和>50%的白癜风患者血清Lnc RNA MALAT1表达水平依次升高(1.69±0.19,1.92±0.21,2.56±0.26),差异有统计学意义(t=6.424,17.408,12.312,均P<0.001);皮损面积<1%,1%~50%和>50%的白癜风患者血清mi R-211-5p表达水平依次升高(0.70±0.09,0.41±0.10,0.21±0.03),差异有统计学意义(t=18.972,22.964,9.012,均P<0.001)。Pearson相关性分析显示,白癜风患者血清Lnc RNA MALAT1与皮损面积呈正相关(r=0.576,P<0.001),血清mi R-211-5p与皮损面积呈负相关(r=-0.475,P<0.001)。病程<1年、1~3年和>3年的白癜风患者血清Lnc RNA MALAT1表达水平依次降低(1.65±0.18,1.88±0.22,2.48±0.23),差异有统计学意义(t=5.984,20.581,13.291,均P<0.001);病程<1年、1~3年、>3年的白癜风患者血清mi R-211-5p表达水平依次降低(0.68±0.11,0.53±0.10,0.21±0.04),差异有统计学意义(t=8.352,24.942,15.170,均P<0.001)。Pearson相关性分析表明,血清Lnc RNA MALAT1与病程呈正相关(r=0.344,P<0.001),血清mi R-211-5p与病程呈负相关(r=-0.433,P<0.001)。结论白癜风患者血清中Lnc RNA MALAT1表达上调,mi R-211-5p表达下调,且与皮损面积及病程等临床特征显著相关。

miRNA-211通过BIN1介导肝癌细胞PD-L1依赖的免疫逃逸研究

目的探讨miR-211对程序性死亡-配体1(PD-L1)介导的肝癌细胞免疫逃逸作用及其相关机制。方法收集我院19例肝癌患者肿瘤组织,通过qRT-PCR检测肝癌组织中miR-211和PDL1表达水平并分析两者的相关性。检测人肝癌HepG2、HCCLM3细胞和人正常肝上皮细胞HL-02中miR-211和PD-L1表达水平。将HepG2细胞分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-211组(转染miR-211),检测2组细胞中miR-211和PD-L1表达水平以及NK-92细胞对肝癌细胞的杀伤率。采用荧光素酶报告基因实验检测miR-211和BIN1的靶向关系。再将HepG2细胞分为miR-NC+oe-NC组(转染miR-NC和oe-NC)、miR-211+oe-NC组(转染miR-211和oe-NC)及miR-211+oe-BIN1组(转染miR-211和oe-BIN1),检测各组细胞中miR-211、BIN1和PD-L1表达及NK-92细胞对肝癌细胞的杀伤率。结果肝癌患者肿瘤组织中miR-211和PD-L1表达呈正相关(r=0.6007,P=0.001)。与HL-02细胞比较,HepG2和HCCLM3细胞中miR-211、PD-L1表达水平升高(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-211组miR-211、PD-L1表达水平升高(P<0.05),NK-92细胞对肝癌细胞的杀伤率降低(P<0.05)。miR-211靶向结合并抑制BIN1。与miR-NC+oe-NC组比较,miR-211+oe-NC组miR-211、PD-L1表达水平升高(P<0.05),BIN1表达水平降低(P<0.05),NK-92细胞对肝癌细胞的杀伤率降低(P<0.05)。与miR-211+oe-NC组比较,miR-211+oe-BIN1组BIN1表达水平升高(P<0.05),PD-L1表达水平降低(P<0.05),NK-92细胞对肝癌细胞的杀伤率升高(P<0.05)。结论在肝癌细胞中,miR-211靶向抑制BIN1表达,从而促进PD-L1依赖的免疫逃逸。

人工智能超声辅助诊断系统联合血清miR-211鉴别诊断甲状腺结节的临床价值

目的探讨人工智能超声辅助诊断系统(以下简称AI超声系统)联合血清miR-211鉴别诊断良恶性甲状腺结节的临床应用价值。方法选取我院经病理证实的甲状腺结节患者203例(良性146例,恶性57例,均为单发),术前均先行AI超声系统检查评估结节良恶性,再分别由1名高年资超声医师和1名低年资超声医师评估结节良恶性;检测并比较良恶性甲状腺结节血清miR-211的差异。分析AI超声系统及不同年资超声医师诊断结果与病理结果的一致性,计算并比较其诊断效能。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-211鉴别良恶性甲状腺结节的诊断效能,比较AI超声系统联合血清miR-211与其单独应用的诊断效能。结果AI超声系统诊断良性结节119例,恶性结节84例,与病理结果的一致性一般(Kappa=0.627,P<0.01),其准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为82.76%、92.98%、78.77%、63.10%、96.64%;高年资超声医师诊断恶性结节124例,恶性结节79例,与病理结果的一致性一般(Kappa=0.607,P<0.01),其准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为82.27%、87.72%、80.13%、63.29%、94.35%;低年资超声医师诊断良性结节105例,恶性结节98例,与病理结果的一致性较差(Kappa=0.470,P<0.01),其准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别73.89%、89.47%、67.81%、52.04%、94.29%。三者诊断准确率、特异度比较差异均有统计学意义(均P<0.05);其中AI超声系统和高年资超声医师诊断准确率、特异度均高于低年资超声医师(均P<0.05)。恶性结节血清miR-211高于良性结节,差异有统计学意义(Z=7.807,P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-211鉴别诊断良恶性甲状腺结节的曲线下面积为0.853,诊断准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为84.24%、89.47%、82.19%、66.23%、95.24%。AI超声系统联合血清miR-211鉴别诊断良恶性甲状腺结节的准确率、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为90.15%、89.47%、90.41%、78.46%、95.65%,联合应用的诊断准确率、特异度、阳性预测值均高于AI超声系统和血清miR-211单独应用,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论AI超声系统在良恶性甲状腺结节鉴别诊断方面具有较好价值,其与miR-211联合应用可提高诊断准确率、特异度及阳性预测值。

苯并[a]芘恶性转化细胞THBEc1中miR-584-5p/miR-211-5p/叉头框蛋白A1轴参与IDH1和HSPB1转录调控

目的探索苯并[a]芘(BaP)恶性转化人支气管上皮细胞T-16HBE-C1(THBEc1)中微RNA(miRNA)调控叉头框蛋白A1(FOXA1)表达上调的机制,并筛选和验证FOXA1的潜在靶基因。方法利用TargetScan,ENCORI数据库和THBEc1细胞与非转化细胞16HBE间miRNA的二代测序(NGS)结果,综合预测靶向调控FOXA1的miRNA,并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)进一步筛选预测的miRNA。采用miRNA模拟物(mimics)转染THBEc1细胞,Western印迹法测定FOXA1蛋白表达水平,对靶向调控FOXA1的miRNA进行鉴定。利用hTF,JASPAR和ENCODE数据库结合FOXA1敲除细胞THBEc1-ΔFOXA1-c34和对照细胞THBEc1-ctrl间mRNA的NGS结果,综合预测FOXA1的潜在靶基因。利用RT-qPCR进一步对预测的靶基因[跨膜蛋白98(TMEM98)、IKAROS家族锌指2(IKZF2)、异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)、肿瘤坏死因子受体相关因子5(TRAF5)、骨形态发生蛋白2型受体(BMPR2)、热休克蛋白B1(HSPB1)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、golgin A7家族成员B(GOLGA7B)和维甲酸相关孤核受体A(RORA)]进行筛选。通过转染过表达质粒构建稳定表达FOXA1的细胞模型THBEc1-ΔFOXA1-c34-oe,即FOXA1功能回补,并利用RT-qPCR和Western印迹法验证FOXA1的潜在靶基因。结果TargetScan和ENCORI数据库分别预测到213和145个可能靶向调控FOXA1的miRNA。NGS共发现351个miRNA在THBEc1细胞中表达下调(差异倍数<0.5,且错误发现率<0.05),其中hsa-miR-584-5p(miR-584-5p),hsa-miR-142-5p(miR-142-5p)和hsa-miR-211-5p(miR-211-5p)在上述2个数据库中均被预测可靶向调控FOXA1。RT-qPCR结果证实,THBEc1细胞中miR-584-5p,miR-142-5p和miR-211-5p表达水平显著低于16HBE细胞(P<0.01)。转染miR-584-5p模拟物或miR-211-5p模拟物均可显著下调THBEc1细胞FOXA1蛋白表达水平(P<0.01),而转染miR-142-5p模拟物对THBEc1细胞FOXA1蛋白表达水平无明显影响。THBEc1-ΔFOXA1-c34和THBEc1-ctrl细胞间的20个差异表达基因(差异倍数<0.5或>2,且错误发现率<0.05)被hTF,JASPAR和ENCODE数据库均预测为FOXA1的潜在靶基因。RT-qPCR结果显示,在THBEc1-ΔFOXA1-c34中,TMEM98,IKZF2,IDH1,TRAF5,BMPR2,HSPB1和RUNX2 mRNA表达水平显著下调(P<0.05,P<0.01),GOLGA7B和RORA mRNA表达水平显著上调(P<0.05,P<0.01);在THBEc1-ΔFOXA1-c34-oe中,IDH1和HSPB1的mRNA表达水平显著上调(P<0.01),余7个基因mRNA表达水平未见改变。Western印迹结果显示,THBEc1-ΔFOXA1-c34细胞中IDH1和HSPB1表达水平较THBEc1-ctrl均显著下调(P<0.01);而恢复FOXA1表达的THBEc1-ΔFOXA1-c34-oe细胞中IDH1和HSPB1表达水平较对照细胞THBEc1-ΔFOXA1-c34-ctrl均显著上调(P<0.01)。结论BaP恶性转化细胞THBEc1中miR-584-5p/miR-211-5p/FOXA1轴参与IDH1和HSPB1转录调控。

急性脑梗死患者血清CCR5和miR-211-5p表达水平及其临床意义

目的探究急性脑梗死(acute cerebral infarction)患者血清CC趋化因子细胞受体5(chemokine C-C motif receptor type 5,CCR5)和微小核糖核酸(microRNA,miR)-211-5p表达水平及其临床意义。方法选取2019年2月~2021年2月石家庄平安医院收治的130例急性脑梗死患者(观察组),另选同期130例健康体检者作为对照(对照组)。实时荧光定量PCR检测血清中CCR5信使RNA(messengerRNA,mRNA)和miR-211-5p相对表达水平;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清中CCR5水平;Pearson法分析CCR5 mRNA和miR-211-5p表达水平与美国国立卫生研究院卒中量表(the National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分相关性;分析CCR5 mRNA和miR-211-5p表达水平与急性脑梗死患者临床病理特征关系;受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析CCR5 mRNA和miR-211-5p表达水平对急性脑梗死的诊断价值;Kaplan-Meier生存曲线分析CCR5 mRNA和miR-211-5p表达水平与急性脑梗死预后生存的关系。结果与对照组相比,观察组患者血清中CCR5 mRNA表达(1.49±0.29 vs 1.03±0.24)和蛋白含量水平(290.96±10.35ng/ml vs 152.37±8.97ng/ml)显著增高,mi R-211-5p相对表达水平(0.59±0.18 vs 0.96±0.22)显著降低,差异均有统计学意义(t=13.933,115.374,14.841,均P<0.001);轻度组、中度组、重度组CCR5 mRNA(1.26±0.21,1.58±0.22,1.77±0.24)和蛋白含量水平(257.34±7.26ng/ml,289.31±9.36ng/ml,357.31±8.12ng/ml)依次增加,miR-211-5p相对表达水平(0.74±0.17,0.61±0.1,0.28±0.18)依次降低,差异均有统计学意义(F=57.145,1396.953,73.759,均P<0.001)。急性脑梗死患者CCR5 mRNA表达水平与miR-211-5p表达水平呈负相关性(r=-0.341,P<0.001),与NIHSS评分呈正相关性(r=0.315,P<0.001);miR-211-5p表达水平与NIHSS评分具有显著的负相关性(r=-0.475,P<0.001)。CCR5 mRNA和miR-211-5p表达水平与急性脑梗死患者脑梗死体积、OCSP分型及血脂异常有关(P<0.05),与性别、梗死部位无关(P>0.05)。CCR5 mRNA和miR-211-5p诊断急性脑梗死的曲线下面积为0.834,0.868,二者联合诊断的曲线下面积为0.921。CCR5 mRNA高表达患者的90天生存率显著低于低表达患者(61.97%vs 81.36%),miR-211-5p高表达患者的90天生存率显著高于低表达患者(80.65%vs 61.76%),差异均有统计学意义(χ^(2)=5.853,5.589,均P<0.05)。结论急性脑梗死患者血清CCR5 mRNA和蛋白表达水平增高,miR-211-5p表达水平降低,均与患者的病情程度有关,对急性脑梗死有一定诊断价值。

子宫颈癌患者血清miR-153、miR-211水平变化及对术后生存情况的影响

目的探讨子宫颈癌患者血清miR-153、miR-211水平变化及对术后生存情况的影响。方法选取2016年5月至2018年5月我院收治的子宫颈癌患者102例为观察组,同期健康体检的正常女性58例为对照组。比较两组血清miR-153、miR-211水平,分析子宫颈癌患者血清miR-153、miR-211水平与病理特征的相关性,Cox回归分析子宫颈癌患者术后生存的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-153、miR-211水平对子宫颈癌患者术后生存情况的预测价值。结果观察组患者血清miR-153、miR-211水平低于对照组(P<0.05)。不同临床分期、淋巴结转移、深肌层浸润、分化程度、宫旁浸润、脉管浸润子宫颈癌患者血清miR-153、miR-211水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析显示,将深肌层浸润、分化程度、宫旁浸润、脉管浸润控制后,临床分期、淋巴结转移及血清miR-153、miR-211低水平均为影响子宫颈癌患者术后生存的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,miR-153、miR-211联合预测子宫颈癌患者术后生存情况的AUC值最大,为0.853,对应敏感度为88.48%,特异度为67.90%。结论子宫颈癌患者血清miR-153、miR-211水平与术后生存情况关系密切,检测血清miR-153、miR-211水平对临床评估子宫颈癌患者术后生存情况具有积极意义。

人OC细胞系细胞miR-211-5p表达、转染miR-211-5p模拟物后的增殖及迁移侵袭和EMT观察

目的观察人卵巢癌(OC)细胞系细胞微小RNA-211-5p(miR-211-5p)表达、转染miR-211-5p模拟物(miR-211-5p mimics)后的增殖及迁移侵袭和上皮间质转化(EMT)。方法体外培养人OC细胞系(SKOV3、A2780、HO8910细胞)及人正常卵巢上皮IOSE80细胞,采用qRT-PCR法检测上述细胞miR-211-5p。取对数生长期的SKOV3细胞,并随机分为两组,高表达组转染miR-211-5p mimics,对照组转染miR-NC,采用CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell实验、Western blotting法分别测算两组细胞OD值、划痕移动距离百分比、侵入细胞数、EMT相关蛋白及壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)蛋白灰度值比值。将miR-211-5p mimics或miR-NC与CHI3L1野生型双荧光素酶报告载体CHI3L1-wt或CHI3L1突变型双荧光素酶报告载体CHI3L1-mut共转染入SKOV3细胞中,分为记为miR-211-5p mimics+CHI3L1-wt组、miR-NC+CHI3L1-wt组、miR-211-5p mimics+CHI3L1-mut组、miR-NC+CHI3L1-mut组,转染24 h后收集并裂解细胞,应用荧光素酶试剂盒检测各组细胞的荧光素酶活性。结果与IOSE80细胞比较,SKOV3、A2780、HO8910细胞miR-211-5p相对表达量降低(P均<0.05)。与对照组比较,高表达组OD值、划痕移动距离百分比、侵入细胞数、N-Cadherin和Fibronectin蛋白灰度值比值降低,E-Cadherin蛋白灰度值比值升高(P均<0.05)。与对照组比较,高表达组CHI3L1蛋白灰度值比值降低(P<0.05)。与miR-NC+CHI3L1-wt组比较,miR-211-5p mimics+CHI3L1-wt组细胞相对荧光素酶活性降低(P<0.05)。结论miR-211-5p在OC各细胞系中表达降低;转染miR-211-5p mimics可抑制SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及EMT,机制是通过负向调控CHI3L1表达实现的。