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(A11,A12)胰岛素原移位突变体的表征研究
1
作者
井健
《北京师范大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期381-384,共4页
将(CysA11Ser,SerA12Cys)人胰岛素原移位突变体基因克隆至高效表达质粒pET22b多克隆位点区,构建重组表达质粒pET-A112,并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)pLys中进行了表达.表达产物存在于包涵体中,通过包涵体的分离及二硫键变复性,获得A6-A1...
将(CysA11Ser,SerA12Cys)人胰岛素原移位突变体基因克隆至高效表达质粒pET22b多克隆位点区,构建重组表达质粒pET-A112,并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)pLys中进行了表达.表达产物存在于包涵体中,通过包涵体的分离及二硫键变复性,获得A6-A12二硫键突变型的胰岛素原突变体.SDS-PAGE电泳显示突变型胰岛素原的电泳迁移率与野生型胰岛素原基本相同.质谱检测表明,突变性胰岛素原的分子结构均一、纯度良好,氨基酸组成与理论值基本一致.以野生型人胰岛素原为对照进行的胰岛素受体试验及胰岛素放射免疫试验表明,A6-A12二硫键错接型胰岛素原突变体的受体结合活性和放免活性是野生型胰岛素原的11%与55%.
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关键词
a11
-
a12
移位突变
胰岛素原突变体
胰岛素受体结合活性
放射免疫活性
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题名
(A11,A12)胰岛素原移位突变体的表征研究
1
作者
井健
机构
北京师范大学生命科学学院
出处
《北京师范大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第4期381-384,共4页
基金
国家自然科学基金面上资助项目(30171100)
文摘
将(CysA11Ser,SerA12Cys)人胰岛素原移位突变体基因克隆至高效表达质粒pET22b多克隆位点区,构建重组表达质粒pET-A112,并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)pLys中进行了表达.表达产物存在于包涵体中,通过包涵体的分离及二硫键变复性,获得A6-A12二硫键突变型的胰岛素原突变体.SDS-PAGE电泳显示突变型胰岛素原的电泳迁移率与野生型胰岛素原基本相同.质谱检测表明,突变性胰岛素原的分子结构均一、纯度良好,氨基酸组成与理论值基本一致.以野生型人胰岛素原为对照进行的胰岛素受体试验及胰岛素放射免疫试验表明,A6-A12二硫键错接型胰岛素原突变体的受体结合活性和放免活性是野生型胰岛素原的11%与55%.
关键词
a11
-
a12
移位突变
胰岛素原突变体
胰岛素受体结合活性
放射免疫活性
Keywords
(a11
,
a12)-mutant proinsulin
intra-A chain disulfide bond
insulinbiological activity
radioimmunoactivity
分类号
Q578 [生物学—生物化学]
S511 [农业科学—作物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
(A11,A12)胰岛素原移位突变体的表征研究
井健
《北京师范大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009
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