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ACE2对猪流行性腹泻病毒体外感染传代猪小肠上皮细胞的影响
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作者 任莉鑫 张静怡 +3 位作者 徐沙沙 杨柳 张兴翠 宋振辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1238-1248,共11页
为探究血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)感染仔猪过程中发挥的作用,本研究通过转录组学分析仔猪肠道ACE2在PEDV感染前后表达的变化情况,然后利用猪... 为探究血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)感染仔猪过程中发挥的作用,本研究通过转录组学分析仔猪肠道ACE2在PEDV感染前后表达的变化情况,然后利用猪小肠上皮细胞(porcine intestinal epithelial cells, IPEC-J2细胞)模型,通过RT-qPCR、Western blot检测PEDV感染后ACE2的mRNA、蛋白表达水平的变化。过表达与抑制表达ACE2后通过RT-qPCR、Western blot、TCID50检测PEDV复制水平。结果显示,PEDV感染IPEC-J2后ACE2的mRNA及蛋白表达水平均显著下调,与转录组学结果一致。过表达ACE2组PEDV感染量显著上升,抑制表达ACE2组PEDV感染量显著下降。本研究在细胞水平上验证了ACE2在PEDV感染过程中的作用,即PEDV感染能够使ACE2表达量下降,在IPEC-J2细胞中过表达ACE2能提高PEDV复制水平,抑制ACE2的表达可降低PEDV复制水平。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶2 ace2 猪流行性腹泻病毒 猪小肠上皮细胞
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装载ACE2的植物来源细胞外囊泡防治PM_(2.5)暴露后细胞损伤
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作者 叶旋 钤嫄 +1 位作者 王红云 周蕾 《上海大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期208-217,共10页
探究装载血管紧张素转化酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)的植物来源细胞外囊泡(plant-derived extracellular vesicles,PDEVs)在保护机体抵抗空气污染颗粒物(particulate matter,PM_(2.5))引发的呼吸系统损伤过程中的作用.... 探究装载血管紧张素转化酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)的植物来源细胞外囊泡(plant-derived extracellular vesicles,PDEVs)在保护机体抵抗空气污染颗粒物(particulate matter,PM_(2.5))引发的呼吸系统损伤过程中的作用.基于葡萄提取PDEVs并装载ACE2过表达的质粒,通过CCK8实验、二氢乙锭(dihydroethidium,DHE)染色、蛋白免疫印迹、实时荧光定量多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)等方法,探究改造后的PDEVs对PM_(2.5)暴露后人支气管上皮细胞(Beas-2B)的保护效果.PM_(2.5)暴露会造成Beas-2B细胞氧化应激、细胞凋亡增加,以及炎症因子增加,而装载ACE2的PDEVs能够有效递送ACE2,从而缓解PM_(2.5)诱导的细胞损伤.因此,PDEVs可作为潜在的递送载体,防治大气PM_(2.5)暴露引发的细胞凋亡及损伤. 展开更多
关键词 细胞外囊泡 血管紧张素转化酶2 PM_(2.5) 葡萄
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抗奥合剂通过p38 MAPK/NF-κB信号通路和ACE2/Ang1-7/Mas轴缓解急性肺损伤研究
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作者 陈思琪 严佳煜 +1 位作者 李瑞 顾宁 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期446-456,共11页
目的探讨抗奥合剂(KAHJ)治疗小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制,为其可能作为缓解新型冠状病毒(COVID-19)感染后症状的药物提供依据。方法采用网络药理学方法预测KAHJ治疗ALI的主要活性成分、潜在靶点和相关信号通路。将C57BL/6J小鼠随... 目的探讨抗奥合剂(KAHJ)治疗小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制,为其可能作为缓解新型冠状病毒(COVID-19)感染后症状的药物提供依据。方法采用网络药理学方法预测KAHJ治疗ALI的主要活性成分、潜在靶点和相关信号通路。将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+KAHJ组。LPS+KAHJ组小鼠灌胃KAHJ(4.76 g·kg^(-1)·d^(-1),8.8 mL·kg^(-1)·d^(-1)),其余组小鼠灌胃生理盐水(8.8 mL·kg^(-1)·d^(-1))。14 d后,腹腔注射LPS(5 mg·kg^(-1))诱导ALI模型。收集小鼠血清和肺组织,通过组织病理学观察肺组织的病理变化。采用Western blot、qPCR、ELISA和IHC等方法评估KAHJ对ALI的改善作用。结果通过网络药理学筛选出疾病和药物共同的70个核心靶基因,并显示与多个信号通路密切相关,如MAPK、NF-κB、Apoptosis、COVID-19和肾素-血管紧张素系统(Ras)信号通路等。此外,通过实验验证发现KAHJ能改善小鼠ALI后的炎症和细胞凋亡,减少肺损伤和肺水肿,抑制肺纤维化。同时,KAHJ的作用机制与p38 MAPK和NF-κB的磷酸化以及ACE2/Ang1-7/Mas轴的调控也有着密切关系。结论KAHJ可能通过抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路和调控ACE2/Ang1-7/Mas轴缓解ALI,为缓解COVID-19感染后症状提供了补充和替代药物。 展开更多
关键词 急性肺损伤 p38 MAPK/NF-κB信号通路 ace2/Ang1-7/Mas轴 新型冠状病毒
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槲皮素通过抑制ACE2治疗SARS-CoV-2所致心肌损伤的研究进展
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作者 万敬强 郭振东 +1 位作者 马永霞 谢萍 《心脏杂志》 CAS 2024年第2期215-219,共5页
2019年底,由重症急性呼吸道综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒病肺炎(COVID-19)在全球迅速蔓延,由于其潜伏期长、传播性强、突变率高,因此,COVID-19的防治已成为全球卫生领域的焦点问题。由于人体呼吸道黏膜表面血管紧张... 2019年底,由重症急性呼吸道综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒病肺炎(COVID-19)在全球迅速蔓延,由于其潜伏期长、传播性强、突变率高,因此,COVID-19的防治已成为全球卫生领域的焦点问题。由于人体呼吸道黏膜表面血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)含量丰富,而SARS-CoV-2表面的刺突蛋白(S蛋白)具有介导受体识别和结合功能,其受体结构域可特异性结合ACE2的肽酶结构域。因此,ACE2是作为SARS-CoV-2感染的宿主的途径,在SARS-CoV-2感染机体过程中发挥至关重要的作用。与此同时,心肌组织ACE2含量较丰富,且COVID-19合并心肌损伤患者心肌组织ACE2呈现表达异常。而我国传统中医药六大处方防治COVID-19疗效显著,其中,共有中药单体成分槲皮素备受关注,防治机制可能与槲皮素抑制ACE2密切相关。迄今为止,少有SARS-CoV-2所致心肌损伤药物治疗的相关报道。因此,本文旨在通过文献汇总和生信预测探讨槲皮素是否通过抑制ACE2在心肌组织中的高表达从而改善COVID-19所致心肌损伤,从而降低COVID-19患者心源性死亡率及心血管并发症。 展开更多
关键词 槲皮素 SARS-CoV-2 ace2 COVID-19 心肌损伤
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修正创伤评分结合ACE和ACE2对急诊创伤性休克患者预后评估的价值 被引量:2
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作者 梁兵 于晓钧 卢炳棋 《川北医学院学报》 CAS 2023年第1期114-117,125,共5页
目的:分析修正创伤评分结合血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素转换酶2(ACE2)对急诊创伤性休克患者预后评估的价值。方法:选取108例创伤性休克患者作为研究对象。根据临床资料是否存活,分别纳入生存组(n=41)和死亡组(n=67)。对比两组HB-... 目的:分析修正创伤评分结合血管紧张素转换酶(ACE)、血管紧张素转换酶2(ACE2)对急诊创伤性休克患者预后评估的价值。方法:选取108例创伤性休克患者作为研究对象。根据临床资料是否存活,分别纳入生存组(n=41)和死亡组(n=67)。对比两组HB-RTS评分、静脉血ACE、ACE2水平差异;采用Logistics回归分析影响患者预后的独立危险因素;各指标的诊断效能以受试者工作特征(ROC)曲线研究。结果:不同APACHEⅡ评分、ISS评分、输血情况、休克持续时间、HB-RTS和ACE、ACE2水平患者生存率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistics回归分析显示APACHEⅡ评分、ISS评分、HB-RTS和ACE、ACE2水平是影响创伤性休克患者预后生存的独立危险因素(P<0.05)。HB-RTS和ACE、ACE2以联合检测的敏感度最高,ROC曲线下联合检测的AUC值最高。结论:HB-RTS评分、ACE、ACE2水平在创伤性休克患者中升高,急诊时联合检测三指标表达水平在预测患者预后中有较高诊断效能,具有推广价值。 展开更多
关键词 创伤性休克 修正创伤评分 ace ace2 急诊 预后评估
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奥司他韦对肺炎幼鼠ACE2/Ang(1-7)/Mas受体轴及肺损伤的影响
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作者 黄蕊 翟英辰 +3 位作者 陈煜 林辰曦 陈凌 林兴盛 《西部医学》 2023年第4期495-500,共6页
目的 研究奥司他韦对肺炎幼鼠ACE2/Ang(1-7)/Mas受体轴、肺损伤及炎症水平的影响。方法 SPF级SD雄性幼鼠50只随机抽取12只作为健康组,剩余38只幼鼠建立流感病毒模型。建模中意外死亡2只,随机数字表法将建模成功的36只幼鼠分为模型组、... 目的 研究奥司他韦对肺炎幼鼠ACE2/Ang(1-7)/Mas受体轴、肺损伤及炎症水平的影响。方法 SPF级SD雄性幼鼠50只随机抽取12只作为健康组,剩余38只幼鼠建立流感病毒模型。建模中意外死亡2只,随机数字表法将建模成功的36只幼鼠分为模型组、奥司他韦组及对照组,每组各12只。健康组与模型组幼鼠常规饲养,奥司他韦组幼鼠给予10 mg/kg奥司他韦灌胃,1次/d,持续5 d;对照组幼鼠经尾静脉注射75 mg/mL阿奇霉素,1次/d,持续1周。另取40只SPF级幼鼠建立病毒性肺炎模型后分为激动剂组、抑制剂组、激动剂+奥司他韦组、抑制剂+奥司他韦组,共诊治7 d,1次/d。ELISA检测各组IL-6、IL-8、TNF-α水平。小动物肺功能检测仪检测各组肺功能指标。HE染色观察各组肺炎幼鼠肺组织病理形态。TUNEL检测各组幼鼠肺组织细胞凋亡。免疫印迹检测各组幼鼠ACE2、Ang(1-7)、MasR、ACE、AngⅡ蛋白表达水平。结果 与健康组相比,模型组、奥司他韦组与对照组幼鼠血清中IL-6、IL-8、TNF-α、肺组织细胞凋亡率升高(P<0.05),在经过奥司他韦干预后IL-6、IL-8、TNF-α、肺组织细胞凋亡率均降低(P<0.05)。与健康组相比,模型组FEF50、FEF75、MMF、PEF水平降低(P<0.05),肺系数升高(P<0.05),在经过奥司他韦干预后FEF50、FEF75、MMF、PEF水平升高(P<0.05),肺系数降低(P<0.05)。各组肺组织病理形态对比明显。与健康组相比,模型组、奥司他韦组、对照组、抑制剂组、激动剂组、激动剂+奥司他韦组与抑制剂+奥司他韦组ACE2、Ang(1-7)、MasR水平降低(P<0.05),ACE、AngⅡ水平升高(P<0.05);与模型组相比,奥司他韦组、对照组、激动剂组、激动剂+奥司他韦组ACE2、Ang(1-7)、MasR水平升高(P<0.05),ACE、AngⅡ水平降低(P<0.05),抑制剂组ACE2、Ang(1-7)、MasR水平降低(P<0.05),ACE、AngⅡ水平升高(P<0.05);模型组与抑制剂+奥司他韦组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,奥司他韦组、激动剂组、激动剂+奥司他韦组ACE2、Ang(1-7)、MasR水平升高(P<0.05),ACE、AngⅡ水平降低(P<0.05);奥司他韦组与激动剂组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05);与奥司他韦组相比,激动剂+奥司他韦组ACE2、Ang(1-7)、MasR水平升高(P<0.05),ACE、AngⅡ水平降低(P<0.05)。结论 奥司他韦通过提高ACE2/Ang(1-7)/Mas受体轴水平及降低炎症因子水平,改善肺炎幼鼠肺功能。 展开更多
关键词 奥司他韦 肺炎 ace2/Ang(1-7)/Mas受体轴 肺损伤 炎症水平
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葶苈大枣泻肺汤通过ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴对心梗后心衰模型大鼠心室重构的影响 被引量:6
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作者 袁中杰 郝轩轩 +6 位作者 李彬 谢世阳 王新陆 王幼平 常鑫迪 包宇 朱明军 《中国药房》 CAS 北大核心 2023年第2期161-167,共7页
目的探讨经方葶苈大枣泻肺汤对心肌梗死后心力衰竭模型大鼠心室重构的作用机制。方法应用左冠状动脉前降支结扎术构建心肌梗死后心力衰竭大鼠模型,分8组:假手术组、模型组、A779组(1 mg/kg)、A779(1 mg/kg)+葶苈大枣泻肺汤等效剂量组(0.... 目的探讨经方葶苈大枣泻肺汤对心肌梗死后心力衰竭模型大鼠心室重构的作用机制。方法应用左冠状动脉前降支结扎术构建心肌梗死后心力衰竭大鼠模型,分8组:假手术组、模型组、A779组(1 mg/kg)、A779(1 mg/kg)+葶苈大枣泻肺汤等效剂量组(0.8 g/kg)、A779(1 mg/kg)+葶苈大枣泻肺汤高剂量组(1.6 g/kg)、葶苈大枣泻肺汤等效剂量组(0.8 g/kg)、葶苈大枣泻肺汤高剂量组(1.6 g/kg)和氯沙坦钾组(10 mg/kg),各组分别给予等体积蒸馏水或者相应的药物,灌胃4周。采用Masson染色法测定大鼠心肌组织中胶原纤维分布;采用碱水解法测定心肌组织羟脯氨酸(Hyp)含量;采用免疫组化法检测心肌组织中Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(COLⅢ)的表达水平;采用酶联免疫吸附测定法检测大鼠血清中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)、可溶性致瘤性抑制因子2(sST-2)等心肌纤维化相关指标;采用Western blot法检测心肌组织中血管紧张素转换酶2-血管紧张素-(1-7)-Mas[ACE2-Ang-(1-7)-Mas]轴相关蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组、A779组心肌细胞排列紊乱,胶原纤维沉积明显增多,心肌纤维化明显,Hyp含量和MMP-2、MMP-9、sST-2水平显著升高,COLⅠ、COLⅢ阳性表达显著增强,TIMP-1水平和ACE2、Ang-(1-7)、Mas蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,葶苈大枣泻肺汤等效剂量组和高剂量组上述指标均可得到不同程度的改善。与A779组比较,A779+葶苈大枣泻肺汤等效剂量组及A779+高剂量组心肌排列及胶原分布可一定程度地改善,Hyp含量和MMP-2、MMP-9水平降低,COLⅠ、COLⅢ阳性表达显著减少(P<0.05),但Ang-(1-7)和Mas蛋白表达水平未显著升高。结论葶苈大枣泻肺汤可通过提高ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴蛋白的表达改善心肌梗死后心力衰竭模型大鼠的心室重构。 展开更多
关键词 葶苈大枣泻肺汤 心力衰竭 心室重构 血管紧张素转换酶2-血管紧张素-(1-7)-Mas轴
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二脒那秦激活ACE2对非酒精性脂肪肝病大鼠肝线粒体影响研究 被引量:1
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作者 张亚峰 朱斌 +1 位作者 马畅 张源淑 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3895-3904,共10页
旨在通过建立高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型,研究二脒那秦(DIZE)激活血管紧张素转换酶2(ACE2)对线粒体结构和功能的影响。试验选取26只雄性SD大鼠,随机选取9只大鼠饲喂普通饲料作为对照... 旨在通过建立高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型,研究二脒那秦(DIZE)激活血管紧张素转换酶2(ACE2)对线粒体结构和功能的影响。试验选取26只雄性SD大鼠,随机选取9只大鼠饲喂普通饲料作为对照组(CON组),其余大鼠饲喂高脂饲料进行造模,4周后,随机各取1只进行处理,经病理组织学检查确认成功建立NAFLD模型。造模成功的大鼠随机分为模型组(MOD组)和二脒那秦组(DIZE组)(每组8只),MOD组继续饲喂高脂饲料同时灌胃3 mL·d^(-1)生理盐水,DIZE组饲喂高脂饲料并灌胃15 mg·(kg·d)^(-1)DIZE,CON组继续饲喂普通饲料并灌胃等量生理盐水。试验至第10周,采集大鼠血清和肝组织样品进行试验:1)检测血清中TG、TC含量;2)ELISA法测定肝组织中AngⅡ和Ang1-7含量;3)Western blot法检测ACE2,线粒体融合蛋白(Mfn1、OPA1),分裂蛋白(Fis1、Drp1)及解偶联蛋白1(UCP1)的蛋白表达水平;4)RT-qPCR法检测线粒体生物发生和线粒体呼吸链复合物相关基因的mRNA表达水平。结果表明:1)高脂饲料饲喂4周后大鼠HE染色肝脏出现明显的脂肪沉积,成功建立NAFLD模型;2)与CON组相比,MOD组大鼠血清中的TG、TC含量显著升高(P<0.05),DIZE组则较MOD组显著降低(P<0.05);3)与CON组相比,MOD组ACE2蛋白表达水平极显著降低(P<0.01),AngⅡ/Ang1-7比值显著升高(P<0.05),DIZE组则较MOD组ACE2蛋白表达水平极显著升高,AngⅡ/Ang1-7比值极显著降低(P<0.01);4)与CON组相比,MOD组线粒体融合、分裂及UCP1蛋白表达水平极显著或显著降低(P<0.01或P<0.05),DIZE组则较MOD组极显著升高(P<0.01);5)与CON组相比,MOD组线粒体生物发生和线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅲ基因mRNA表达水平极显著下调(P<0.01),DIZE组则较MOD组极显著或显著上调(P<0.01或P<0.05)。综上表明,DIZE能够激活ACE2继而缓解由高脂饮食引起的对线粒体生物发生、融合、分裂以及呼吸链相关指标的抑制作用,从而达到治疗NAFLD的效果。本研究为DIZE治疗NAFLD提供新思路,DIZE作为老药新用具有潜在的研究价值。 展开更多
关键词 二脒那秦(DIZE) 非酒精性脂肪肝病 血管紧张素转换酶2(ace2) 线粒体 大鼠
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基于深度学习的SARS-CoV-2RBD-ACE2结合亲和力预测方法 被引量:1
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作者 吴敏明 李维华 +1 位作者 王玉霜 丁海燕 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期575-582,共8页
新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的快速变异导致不断出现新的毒株.已有研究表明SARS-CoV-2的S蛋白受体结合域(Receptor Binding Domain,RBD)与宿主ACE2的结合亲和力与病毒的侵染能力相关.随着新型冠状病毒在全球的持续暴发,出现了大量RBD多点... 新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的快速变异导致不断出现新的毒株.已有研究表明SARS-CoV-2的S蛋白受体结合域(Receptor Binding Domain,RBD)与宿主ACE2的结合亲和力与病毒的侵染能力相关.随着新型冠状病毒在全球的持续暴发,出现了大量RBD多点突变的新毒株.通过生物试验方式获得突变毒株RBDACE2结合亲和力费时费力,远远落后于突变株的积累,不能满足对该病毒实时监控的需求.为了快速预测具有多点突变毒株的结合亲和力,设计了一种深度神经网络模型.该模型结合卷积神经网络、循环神经网络与注意力机制,从RBD序列上学习关键特征并预测RBD-ACE2的结合亲和力,在真实数据集上对模型进行训练和评估.实验结果表明新模型可以有效地预测关切变异株的RBD-ACE2结合亲和力,也有助于对SARSCoV-2突变株的传播能力进行监控. 展开更多
关键词 新型冠状病毒 RBD-ace2结合亲和力 深度神经网络
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新冠病毒受体蛋白ACE2结构与功能的生信分析及原核表达 被引量:2
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作者 徐本锦 陈晓聪 +7 位作者 宣焱 杜淼 范蕾 李卓禧 李璟 刘玲 宋彬妤 侯艳香 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1230-1237,共8页
目的:构建ACE2原核表达载体并对其进行结构与功能的生物信息学分析,探究其介导SARS-CoV-2入侵人体的分子机制。方法:采用Protparam、ProtScale、NetPhos3.1、SignaIP 4.1、YinOYang 1.2 Server、NetNGlyc 1.0 Server、SOPMA、SWISS-MODE... 目的:构建ACE2原核表达载体并对其进行结构与功能的生物信息学分析,探究其介导SARS-CoV-2入侵人体的分子机制。方法:采用Protparam、ProtScale、NetPhos3.1、SignaIP 4.1、YinOYang 1.2 Server、NetNGlyc 1.0 Server、SOPMA、SWISS-MODEL、Blast、Clustal X2和MEGA7.0等对ACE2的生物学特性、同源性及进化性进行系统分析。采用分子克隆技术构建pET-22b-ACE2,在大肠杆菌中进行表达。结果:ACE2全长805个残基,呈酸性,分子量为92.5 kD,pI=5.36,共含77个潜在的磷酸化位点和14个糖基化位点,是一种亲水性较强的跨膜蛋白。ACE2主要散布于内质网膜、高尔基体和胞质膜,二级结构组成以α-螺旋为主。原核表达结果显示,细菌裂解后,沉淀中ACE2表达多于上清与全菌,为疫苗研发提供了理论依据。多序列比对和进化分析显示,倭黑猩猩与智人亲缘关系最近。结论:本研究为ACE2蛋白的纯化及研究奠定了基础,有助于阐明ACE2介导SARS-CoV-2入侵人体的分子机制,对SARS-CoV-2感染治疗和跨物种传播提供了新的见解,为研究广谱抗病毒药物、治疗SARS-CoV-2和其他致命冠状病毒株的有效分子靶点提供了依据。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 载体构建 ace2蛋白 生信分析 原核表达
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基于ACE2受体探讨玉屏风散预防新型冠状病毒肺炎的网络药理学机制 被引量:2
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作者 王登 王娣 +1 位作者 曹青 闫抗抗 《西部中医药》 2023年第2期18-24,共7页
目的 :运用网络药理学方法研究玉屏风散介导血管紧张素转化酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)受体预防新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)的多成分、多靶点、多通路作用机制,为其基础研究及临床应用提供依... 目的 :运用网络药理学方法研究玉屏风散介导血管紧张素转化酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)受体预防新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)的多成分、多靶点、多通路作用机制,为其基础研究及临床应用提供依据。方法:通过数据库检索并筛选玉屏风散的活性成分和对应靶点,并寻求与ACE2受体基因相关的交集靶点;通过Cytoscape软件构建药物-成分-靶点-疾病网络图,利用STRING数据库进行蛋白相互作用分析,寻求关键靶点;采用DAVID数据库进行GO、KEGG富集分析,寻求玉屏风散介导ACE2受体预防COVID-19的潜在作用通路。结果:玉屏风散中筛选得到44个活性成分,涉及CASP3、EGFR、PRKCB、ESR1、EGF等56个ACE2相关靶点。GO和KEGG富集分析显示,玉屏风散主要涉及缺乏配体时的体外凋亡信号通路、凋亡过程负调控、凋亡线粒体的变化等105个显著相关生物过程。玉屏风散主要通过癌症通路、HIF-1信号通路、PI3K-Akt信号通路等通路介导ACE2受体来发挥预防COVID-19的作用。结论:玉屏风散可能通过多成分、多靶点、多途径调控ACE2受体而发挥预防COVID-19的作用,为进一步开展作用机制研究提供了理论基础。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 玉屏风散 血管紧张素转化酶2 网络药理学
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鸭血管紧张素转换酶2(ACE2)双抗体夹心ELISA检测方法的建立与应用
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作者 陈雨涛 纪晓霞 +2 位作者 李帅 伍钢 张源淑 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2023年第1期75-85,共11页
为建立鸭血管紧张素转换酶2 (angiotensin converting enzyme 2, ACE2)双抗体夹心酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)定量检测方法,首先利用纯化的鸭ACE2重组蛋白,成功制备了兔抗鸭ACE2多克隆抗体,间接ELISA... 为建立鸭血管紧张素转换酶2 (angiotensin converting enzyme 2, ACE2)双抗体夹心酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)定量检测方法,首先利用纯化的鸭ACE2重组蛋白,成功制备了兔抗鸭ACE2多克隆抗体,间接ELISA法确定抗体效价为1∶800;然后利用制备的鼠抗鸭ACE2多克隆抗体作为捕获抗体,通过戊二醛二步法对兔抗鸭ACE2多克隆抗体进行HRP标记,并将HRP标记的兔抗鸭ACE2多克隆抗体作为检测抗体,纯化获得的鸭ACE2重组蛋白作为标准品,建立鸭ACE2双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对抗体浓度、捕获抗体最适包被条件、孵育条件、封闭条件及显色条件等进行优化;通过Western blot法检测正常白鸭与患传染性浆膜炎的病鸭不同组织间ACE2表达的变化;利用RT-qPCR方法检测正常鸭与患传染性浆膜炎的病鸭不同组织中ACE2基因的相对表达量。结果表明:所建立的双抗体夹心ELISA方法最低检测浓度为5 ng·mL^(-1),最佳线性范围为25~1 600 ng·mL^(-1),批内变异系数为1.65%~5.62%,批间变异系数为3.66%~6.81%,可检测出麻鸭各组织中ACE2含量。传染性浆膜炎组白鸭以及健康鸭心脏、肝脏等组织样品ACE2含量或表达存在差异,心脏组织中显著升高或上调;鸭传染性浆膜炎组心脏中ACE2 mRNA水平显著上调,肝脏组织中ACE2 mRNA水平升高不明显。采用该ELISA方法对不同畜(大鼠、猪、羊)、禽(鸭、鸡、鹅)的不同组织中ACE2进行了定量测定,证实该方法在不同畜禽上存在较大种属差异,仅适用于家禽ACE2的定量检测。综上,该研究成功建立了鸭ACE2检测的双抗体夹心ELISA方法,可用于禽类样品中ACE2的快速定量检测。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶2(ace2) 抗体制备 双抗体夹心酶联免疫吸附试验 定量检测
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基于PPI分析新型冠状病毒(SARS-CoV-2)受体ACE2在高血压靶点中的网络关联影响
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作者 吴佳芸 李玲玲 +2 位作者 朱春临 姚睿祺 黄力 《中国循证心血管医学杂志》 2023年第2期150-156,共7页
目的基于PPI网络探讨新型冠状病毒(SARS-CoV-2)受体ACE2在高血压靶点中的网络关联影响及相互作用关系,为临床治疗COVID-19合并高血压提供理论参考。方法从GeneCards、DisGnet、OMIM和TTD数据库检索高血压靶点,通过关联分数筛选重要靶点... 目的基于PPI网络探讨新型冠状病毒(SARS-CoV-2)受体ACE2在高血压靶点中的网络关联影响及相互作用关系,为临床治疗COVID-19合并高血压提供理论参考。方法从GeneCards、DisGnet、OMIM和TTD数据库检索高血压靶点,通过关联分数筛选重要靶点,将所得靶点统一导入String平台,得到蛋白相互作用(PPI)网络,利用Cytoscape3.8.0筛选与ACE2最为直接相关的靶点后,再次通过String数据库获取新的PPI网络,提取该网络中的核心蛋白功能模块,并完成GO、KEGG富集分析。参考ACE2在各模块中的评分结果,分析其在整体网络结构中的影响意义和关联。结果最终从高血压靶点中筛选得到33个与ACE2直接相关的蛋白,通过聚类分析发现它们共聚集形成了3个功能模块,主要涉及的生物学功能是管径调节、激素水平调节与内分泌调节,分子功能分别是执行调控受体调节子活性、外肽酶活性与激素活性,而主要富集的通路有神经活性配体受体相互作用、肾素-血管紧张素系统信号转导途径等。评分结果显示,ACE2所在模块内评分较高的是ACE2、CAT、DPP4、ACHE、CMA1,提示它们对其他蛋白模块的影响可能更大;而在跨模块关联分析中则发现AGT、AGTR1、EDN1、ALB与AGTR2评分较高,说明上述蛋白可能是模块3与其他模块发生相互作用的关键节点。结论ACE2在高血压靶点网络中占据重要地位,而RAS是连接COVID-19与高血压病的核心枢纽,其失衡是引起单纯COVID-19患者发生血压升高或COVID-19合并高血压出现高致死率的关键所在。ACE2通过与CAT、ACHE、CMA1、EDN1等蛋白的交互作用参与升高血压,同时与COVID-19相联系,但其上调是否有助于SARS-CoV-2入侵以及ACEI、ARB类在合并高血压的COVID-19患者的应用仍有待验证。 展开更多
关键词 ace2 SARS-CoV-2 高血压 跨模块关联 网络影响评价
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定心方Ⅳ上调ACE2减轻人脐静脉内皮细胞损伤机制
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作者 蒋晶 刘林凌 +6 位作者 顾毓艳 张雅心 崔小冰 吴雪滢 余文彬 冯莎 周凤华 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期72-77,共6页
目的 研究由黄连、丹参、酸枣仁、灵芝组成的定心方Ⅳ(Dingxin Recipe Ⅳ,DXR Ⅳ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的作用机制。方法 正常培养HUVECs并随机分为5组,分别予以空白血清及定心方Ⅳ含药血清5%... 目的 研究由黄连、丹参、酸枣仁、灵芝组成的定心方Ⅳ(Dingxin Recipe Ⅳ,DXR Ⅳ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的作用机制。方法 正常培养HUVECs并随机分为5组,分别予以空白血清及定心方Ⅳ含药血清5%、10%、20%进行预处理4 h,再采用50μg·mL^(-1)ox-LDL诱导细胞损伤。采用CCK-8法观察HUVECs增殖情况;Western Blotting和q PCR法检测血管紧张素转换酶2(ACE2)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)和E选择素(E-selectin)等蛋白和基因的表达;ELISA法检测细胞上清中白细胞介素6(IL-6)水平。采用miR-421 mimics干预细胞,分别检测相关蛋白及基因表达情况。结果 定心方Ⅳ中剂量组可抑制IL-6分泌(P<0.01);同时,定心方Ⅳ可促进血管紧张素(1-7)、ACE2基因表达,抑制E-selectin、VCAM-1、MMP-9、ICAM-1、miR-421基因表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001);定心方Ⅳ可上调ACE2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),高剂量组可抑制E-selectin、VCAM-1蛋白表达(P<0.05)。与模型组比较,过表达miR-421可降低ACE2蛋白和基因的表达(P<0.001),增加ICAM-1、MMP-9基因表达(P<0.05)。结论 定心方Ⅳ可能通过激活ACE2蛋白,抑制E-selection、VCAM-1和IL-6等炎性因子表达,起到保护内皮细胞的作用。 展开更多
关键词 定心方Ⅳ 人脐静脉内皮细胞(HUVECs) miR-421 ace2
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血管紧张素转换酶2(ACE2)基因在家猫不同组织中的表达差异分析
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作者 昂艳芬 汪娅媛 +3 位作者 严涵 田仰清 张学峰 严玉霖 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期228-233,共6页
【目的】分析血管紧张素转换酶2(ACE2)基因在家猫不同组织中的相对表达量及特定组织中的蛋白定位,为后续以ACE2基因为受体的疫病防控提供理论基础。【方法】采用qRT-PCR技术检测ACE2基因在家猫8个组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、... 【目的】分析血管紧张素转换酶2(ACE2)基因在家猫不同组织中的相对表达量及特定组织中的蛋白定位,为后续以ACE2基因为受体的疫病防控提供理论基础。【方法】采用qRT-PCR技术检测ACE2基因在家猫8个组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、小肠和肠系膜淋巴结)中的mRNA相对表达水平,并利用免疫组织化学法检测家猫肾脏、胰腺和小肠中ACE2蛋白的组织定位。【结果】ACE2基因在家猫肾脏、胰腺和小肠组织的表达量极显著高于肺脏组织(P<0.01),在心脏、脾脏和肠系膜淋巴结组织的表达量极显著低于肺脏组织(P<0.01);不同性别家猫的ACE2表达量存在一定差异,但不显著;ACE2蛋白在小肠组织中的表达量最高,其次是肾脏,在胰腺的表达量最低。【结论】家猫ACE2基因在各组织中广泛分布且存在一定的表达差异。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶2 家猫 组织 表达
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芪参颗粒调控ACE2-Ang(1-7)-Mas轴改善大鼠心力衰竭合并骨骼肌萎缩的作用及机制探讨
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作者 常宏 高振安 +6 位作者 张美沙 宿玮洁 王萌 刘思宇 肖银军 唐徐浩 王勇 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1824-1828,共5页
目的 探讨芪参颗粒对大鼠心力衰竭合并骨骼肌萎缩的作用及相关机制。方法 通过结扎大鼠左冠脉前降支建立模型,随机分为模型组、芪参颗粒组和福辛普利组,以假手术组作为对照。术后干预12周,超声检测大鼠心脏射血分数(ejection fraction, ... 目的 探讨芪参颗粒对大鼠心力衰竭合并骨骼肌萎缩的作用及相关机制。方法 通过结扎大鼠左冠脉前降支建立模型,随机分为模型组、芪参颗粒组和福辛普利组,以假手术组作为对照。术后干预12周,超声检测大鼠心脏射血分数(ejection fraction, EF),ELISA法检测N端脑利钠肽前体(n-terminal brain natriuretic peptide precursor,NT-pro BNP)、血管紧张素(angiotensin,Ang)Ⅱ和Ang (1-7)浓度,测定大鼠抓力值和腓肠肌重量,苏木素伊红(htoxylin eosin, HE)观察心脏和腓肠肌形态,Western blot检测血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)2、(mas receptor,MasR)和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHc)蛋白的表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠心脏EF值下降,NT-pro BNP和AngⅡ的浓度升高,Ang(1-7)含量降低,HE染色显示心肌组织排列不规则,大鼠的抓力值和腓肠肌重量都降低,腓肠肌肌纤维的横截面积缩小,蛋白ACE2、MasR和MyHc的表达降低(P<0.05)。与模型组比较,芪参颗粒和福辛普利均能提高心脏EF值,降低NT-pro BNP和AngⅡ的浓度,升高Ang(1-7)含量,改善心肌组织排列,增加大鼠抓力、腓肠肌重量和肌纤维横截面积,升高ACE2、MasR和MyHc的表达水平(P<0.05)。结论 芪参颗粒能抑制心力衰竭合并骨骼肌萎缩的发生,其机制可能与增加ACE2-Ang(1-7)-Mas轴活性有关。 展开更多
关键词 心力衰竭 骨骼肌萎缩 芪参颗粒 ace2-Ang(1-7)-Mas轴
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SARS-CoV-2 S蛋白引起呼吸道上皮细胞炎症反应的研究进展
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作者 刘兴健 张华华 张锐钢 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期112-118,共7页
严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)感染引起的肺炎对人类生命健康产生威胁,对社会经济造成巨大损失。病毒的结构蛋白刺突蛋白(S蛋白)一直被认为主要介导病毒侵入宿主细胞。S蛋白可独立于病毒引起多种细胞产生炎症反应,因此,了... 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)感染引起的肺炎对人类生命健康产生威胁,对社会经济造成巨大损失。病毒的结构蛋白刺突蛋白(S蛋白)一直被认为主要介导病毒侵入宿主细胞。S蛋白可独立于病毒引起多种细胞产生炎症反应,因此,了解S蛋白本身对呼吸道的影响能够为防治新型冠状病毒感染提供新视角。本文对SARS-CoV-2结构蛋白S蛋白引起呼吸道上皮细胞炎症反应的可能机制、临床表现等方面的研究进展进行了梳理,以期为疾病的预防和治疗提供参考。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 S蛋白 ace2 呼吸道炎症
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SARS-CoV-2 S蛋白主要结构与突变及S蛋白引起疾病的潜在机制
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作者 刘兴健 张锐钢 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期857-861,共5页
严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)对人类生命健康构成威胁,备受研究者的关注。研究发现,病毒的刺突蛋白(S蛋白)被认为是病毒感染的关键结构蛋白,该蛋白与靶细胞受体结合导致组织器官发生炎症反应。因此研究S蛋白引起疾病的潜... 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2)对人类生命健康构成威胁,备受研究者的关注。研究发现,病毒的刺突蛋白(S蛋白)被认为是病毒感染的关键结构蛋白,该蛋白与靶细胞受体结合导致组织器官发生炎症反应。因此研究S蛋白引起疾病的潜在机制对于疾病的治疗至关重要,然而病毒的演变进化给研究工作增加了一定的难度。本文总结了SARS-CoV-2 S蛋白的主要结构以及从Alpha到Omicron突变,及其引起多种疾病的潜在机制,从而为疾病的预防和治疗提供参考。 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 S蛋白 ace2 呼吸道炎症
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血管紧张素转化酶2:乳酸的一个潜在靶点
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作者 苏晶 张源媛 +3 位作者 黄犇犇 钟朕 刘先发 钟佳宁 《赣南医学院学报》 2024年第5期470-477,共8页
目的:探讨血管紧张素转化酶2(Angiotensin converting enzyme 2,ACE2)在L-乳酸和D-乳酸条件下的蛋白功能影响及其效应机制。方法:通过AlphaFold2对ACE2进行了蛋白结构预测,将ACE2分别与L-乳酸、D-乳酸、丙酮酸和MLN-4760进行分子对接模... 目的:探讨血管紧张素转化酶2(Angiotensin converting enzyme 2,ACE2)在L-乳酸和D-乳酸条件下的蛋白功能影响及其效应机制。方法:通过AlphaFold2对ACE2进行了蛋白结构预测,将ACE2分别与L-乳酸、D-乳酸、丙酮酸和MLN-4760进行分子对接模拟分析,其中MLN-4760为ACE2的特异性抑制剂,作为本研究的阳性对照。基于分子对接模拟分析结果,使用ACE2活性荧光检测试剂盒检测L-乳酸和D-乳酸对ACE2酶活性的影响。对HEK-293细胞进行常规培养,同时转染RBD-Flag和ACE2-HA质粒后分别用L-乳酸和MLN-4760处理,co-IP检测RBD与ACE2的结合水平。结果:对接结果显示L-乳酸和D-乳酸结合在ACE2的氯离子结合位点,体外酶活性测定发现L-乳酸和D-乳酸均能够以浓度依赖性抑制ACE2酶活性,L-乳酸对ACE2的抑制作用较D-乳酸强,丙酮酸对ACE2活性无显著影响。ACE2是介导SARS-CoV-2入侵细胞的关键受体,co-IP实验结果发现,L-乳酸能够增强SARS-CoV-2病毒S蛋白RBD和ACE2结合,而ACE2抑制剂MLN-4760对RBD与ACE2的结合无显著影响。结论:L-乳酸能够抑制ACE2酶活性,并促进RBD与ACE2结合。 展开更多
关键词 乳酸 血管紧张素转换酶2 肾素-血管紧张素-醛固酮系统 糖尿病 高血压
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三七总皂苷对心梗后心室重构大鼠ACE2与TNF-α表达的影响 被引量:22
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作者 郭洁文 李丽明 +5 位作者 邱光清 邓志军 符永恒 杨敏 潘竞锵 刘若轩 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期89-92,共4页
目的:研究三七总皂苷(PNS)对急性心肌梗塞后左室重构血管紧张素转换酶2(ACE2)与大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法:采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法建立AM I模型,术后24 h后随机分为对照组和实验组,连续4 w分别灌胃给予... 目的:研究三七总皂苷(PNS)对急性心肌梗塞后左室重构血管紧张素转换酶2(ACE2)与大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响。方法:采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法建立AM I模型,术后24 h后随机分为对照组和实验组,连续4 w分别灌胃给予生理盐水、福辛普利及PNS低、中、高剂量,观察PNS对病鼠血清丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、ACE2、TNF-α含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响。结果:PNS与福辛普利均能显著降低MDA含量,提高GSH-Px活性(P<0.05或P<0.01),高剂量PNS还能显著降低NO含量(P<0.05),PNS低、中、高剂量均能促进ACE2的释放,并减少TNF-α的表达(P<0.05)。结论:PNS可通过促进病鼠ACE2的释放,抑制脂质过氧化反应及TNF-α的释放,减轻心肌细胞损伤,保护心肌,改善心室重构。 展开更多
关键词 三七总皂苷 急性心肌梗塞 心室重构 抗氧化 ace2 TNF-Α
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