ATP-TCA、常见耐药蛋白表达与IB3~IIB期宫颈癌新辅助化疗疗效的关系

目的评价联合三磷酸腺苷-肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)和常见耐药蛋白检测两种方法预测宫颈癌化疗敏感性的可行性。方法收集2014年12月至2017年12月接受治疗前IB3~IIB期(根据FIGO 2018标准重新分期)宫颈鳞癌患者的新鲜肿瘤组织标本100例。采用ATP-TCA对宫颈癌细胞进行体外药敏检测。同时采用En Vision免疫组化法检测P-gp、GST-π、TopoⅡ和TS 4种蛋白的表达。标本取材后,患者均接受紫杉醇+卡铂方案新辅助化疗2个周期。评价新辅助化疗的近期疗效以及两种检测方法联合预测临床化疗敏感性的可行性。结果(1)95例患者完成ATP-TCA体外药敏检测,紫杉醇+卡铂方案的体外有效率达80.0%。95例患者中获CR 5例,PR 68例,有效率为76.8%。体外药敏试验结果与近期疗效的符合率为86.3%,其预测临床化疗敏感性的灵敏度和特异度分别为93.2%和63.6%。(2)P-gp、GST-π、TopoⅡ和TS蛋白的阳性表达率分别为42.1%(40/95)、28.4%(27/95)、33.7%(32/95)和55.8%(53/95)。耐药蛋白P-gp、GST-π和TopoⅡ表达与近期疗效有关(P<0.05)。GST-π表达与近期疗效符合率最高,为75.8%;其预测临床化疗敏感性的灵敏度、特异度分别为80.8%和59.1%。(3)仅耐药蛋白GST-π与ATP-TCA检测结果有关(P<0.05),两者符合率达81.0%。(4)耐药蛋白GST-π表达联合体外药敏试验与近期疗效的符合率最高,为87.4%。结论ATP-TCA体外药敏试验联合耐药蛋白GST-π表达能够预测宫颈癌化疗的敏感性,为实现宫颈癌同步放化疗化疗药物的个体化选择提供参考。

ATP-TCA结合MDR水平检测在临床乳腺癌化疗药物筛选中的应用

目的建立乳腺癌个体化疗体系，减少滥用药物或过度用药给患者带来的副作用，提高化疗药物的有效率．方法分离、培养乳腺癌患者新鲜组织细胞，加入临床常用化疗药物，体外培养一定时间后，按ATP—TCA试剂盒说明书进行细胞ATP含量检测，根据荧光强度计算药物半数致死量及细胞生长增殖抑制率；提取切除的手术标本及癌旁组织RNA，RT—PCR，检测MDR基因表达水平；根据细胞敏感程度及MDR基因水平检测优化对患者的化疗方案．结果142例患者对常见的化疗药物敏感程度各有不同；在这些耐受病例中约有50％-80％病例MDR基因高表达．结论ATP—TCA配合MDR基因水平检测有利于建立个体化化疗体系，提高临床化疗药物的有效性．

ATP-TCA药敏试验测定的胃癌耐药性与MDR1 mRNA和P-gp表达的关系

目的评价三磷酸腺苷-肿瘤体外药敏试验(ATP-TCA)测定的原发性胃癌耐药性与耐药基因以及蛋白表达的关系。方法选择2009-2011年间收治的胃癌患者52例,采用ATP-TCA检测胃癌患者对5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、顺铂、5-氟尿嘧啶+阿霉素+丝裂霉素、奥沙利铂+20倍5-氟尿嘧啶5种方案的体外药物敏感性,采用逆转录PCR以及荧光定量PCR检测胃癌患者组织中耐药基因MDR1的表达,采用流式细胞仪检测胃癌患者血中P-糖蛋白(P-gp)表达,采用χ2检验分析ATP-TCA检测结果与MDR1和P-gp表达之间的相关性。结果①5-氟尿嘧啶、丝裂霉素、顺铂、5-氟尿嘧啶+阿霉素+丝裂霉素、奥沙利铂+20倍5-氟尿嘧啶5种方案与临床疗效明显相关(P<0.01),其中奥沙利铂+20倍5-氟尿嘧啶方案的ATP-TCA检测结果与临床疗效的符合率最高,达84.6%(44/52)。②ATP-TCA检测化疗敏感和耐药患者MDR1 mRNA的表达水平分别为(0.673±0.143)和(1.436±0.594),两者比较差异有统计学意义(P=0.008)。③用流式细胞仪检测52例胃癌患者P-gp表达量,其中阳性20例,阳性率达38.4%,P-gp的表达与ATP-TCA药敏试验有明显相关(P<0.01)。结论 ATP-TCA检测耐药结果与MDR1 mRNA和P-gp表达之间存在明显的相关性,临床检测MDR1 mRNA和P-gp表达可有效预测临床化疗敏感性,指导胃癌的个体化治疗。

体外药物敏感试验ATP-TCA在肝癌化疗中的应用

目的:探讨体外三磷酸腺苷生物荧光法化疗药物敏感试验(ATP-TCA)在肝癌化疗中的应用价值。方法:用ATP-TCA法检测6种化疗药物对37例肝细胞癌标本的敏感率和耐药率。结果:37例肝癌标本中,ATP-TAC的可评估率为89.19%,6种化疗药物的敏感率分别为:更生霉素(ACTD)84.85%;长春瑞滨(NVB)78.79%;丝裂霉素C(MMC)75.76%;羟基喜树碱(HCT)42.42%;长春新碱(VCR)39.39%;吡柔比星(THP)36.36%。各试验药物的敏感率与肿瘤的大小、血清甲胎蛋白(AFP)无显著相关性(P>0.05),ACTD在P53蛋白阴性时敏感性较好,而ACTD、HCT、THP对、级肝癌的敏感率高于、级。结论:ATP-TCA法在检测肝癌化疗药物敏感性时稳定可靠,可作为肝癌化疗药物筛选的方法之一。

ATP-TCA在大肠癌化疗药物敏感性检测中的应用

目的:评估ATP-TCA肿瘤药敏检测法指导制定大肠癌化疗方案的可行性。方法:应用ATP-TCA肿瘤药敏检测法,检测28例大肠癌手术标本和19例大肠癌外周血标本对8种常用抗肿瘤药物的敏感性。结果:大肠癌对抗癌药物的敏感程度存在着异质性,联合用药的敏感率高于单药。外周血标本和手术标本检测结果具有一致性,检测结果与临床疗效基本相符。结论:ATP-TCA肿瘤药敏检测法可用于临床制定大肠癌个体化的化疗方案。

基于ATP-TCA在消化道肿瘤中的临床应用研究

目的:探讨ATP-TCA在消化道肿瘤中的临床应用价值及效果。方法:取本院确认的消化道肿瘤患者100例,时间段为2016年6月1日至2018年6月30日,根据ATP-TCA药敏结果将其分为化疗药物敏感组(n=50)和耐药组(n=50)。比较两组的近期和远期临床效果。结果:药敏组患者的临床近期疾病总控制率明显高于耐药组(P<0.05),随访1年,药敏组患者的生存率明显高于耐药组(P<0.05)。结论:对于消化道肿瘤患者采用ATP-TCA药敏试验,能明显为患者临床有效治疗提供重要的依据,提高患者临床疗效和生存率,具有积极的推广价值。

黄芪注射液对人类小涎腺腺样囊性癌细胞株的抑制作用

目的研究黄芪注射液对人类小涎腺腺样囊性癌(NACC)细胞株的抑制作用。方法以不同浓度的黄芪作用于NACC细胞,应用三磷酸腺苷肿瘤化疗药敏试验(ATPTCA)法测定黄芪注射液对NACC细胞的体外增殖抑制作用;应用PI细胞染色法在流式细胞仪上测定细胞凋亡。结果研究发现作用48h后,黄芪浓度为0.065g·mL-1时已对体外培养的细胞株有抑制作用,NACC抑制率达8%,可高度诱导NACC细胞的凋亡。经黄芪作用的癌细胞在显微镜下表现为细胞稀疏、收缩,胞质拉长。HE染色可见明显的细胞内空泡和细胞出泡等凋亡形态学变化现象。结论黄芪注射液能抑制NACC细胞株增殖并诱导细胞凋亡,有较好的抗癌作用。

消化道肿瘤MDR1基因和P-糖蛋白的表达与化疗药物耐药的关系

目的探讨消化道肿瘤多药耐药基因MDR1基因和P-糖蛋白(P-gp)的表达与肿瘤化疗药物耐药之间的关系。方法选择72例消化道肿瘤患者的手术标本,采用荧光定量PCR检测MDR1 mRNA表达量,ELISA法检测P-gp表达水平,并与ATP-TCA化疗药物敏感性试验结果作对照。结果 72份消化道肿瘤组织中,MDR1 mRNA阳性表达率为75%,P-gp阳性表达率为67%。72份消化道肿瘤组织中,对10种化疗药物均不敏感的有12份,对1种化疗药物敏感的有15份,对2种化疗药物敏感的9份,对3种化疗药物敏感的有9份,对5种化疗药物敏感的有15份,对8种化疗药物敏感的有9份,对所有化疗药物均敏感的有3份。消化道肿瘤MDR1mRNA、P-gp的阳性表达率与其对化疗药物敏感程度呈负相关(r s值分别为-0.672、-0.715,均P<0.05)。结论 MDR1基因、P-gp表达与肿瘤耐药性相关,MDR1基因、P-gp阳性表达提示患者可能对化疗药物存在获得性耐药。

Ⅲ型β-微管蛋白、微管相关蛋白tau及凋亡抑制蛋白survivin的mRNA水平与胃癌对紫杉醇敏感性的研究

目的:探讨胃癌细胞中Ⅲ型β-微管蛋白(ClassⅢβ-tubulin)、微管相关蛋白tau(MAPT)和凋亡抑制蛋白survivin的表达水平对化疗药物紫杉醇敏感性的预测价值。方法:采用ATP生物荧光法检测54例胃癌原代细胞对紫杉醇的体外药物敏感性,RT-PCR法检测胃癌细胞内ClassⅢβ-tubulin、MAPT和survivin的mRNA表达水平,分析胃癌细胞对紫杉醇的体外敏感性与上述生物学指标表达水平的关系。结果:ClassⅢβ-tubulin的mRNA表达水平为1.04±0.22,与分化程度有关(P=0.029);MAPT的mRNA表达水平为0.80±0.17;survivin的mRNA表达水平为1.00±0.19,与分化程度有关(P=0.009)。药敏指数与ClassⅢβ-tubulin表达水平呈负相关(r=-0.372,P=0.006),与MAPT表达水平呈负相关(r=-0.292,P=0.032),与survivin表达水平呈负相关(r=-0.340,P=0.012);ClassⅢβ-tubulin与MAPT mRNA表达水平呈正相关(r=0.284,P=0.037),与survivin mRNA表达水平呈正相关(r=0.559,P=0.000)。结论:胃癌细胞中ClassⅢβ-tubulin、MAPT和survivin的表达水平可能对紫杉类药物的化疗敏感性具有较好的预测价值。

人膀胱癌原代培养体外药敏试验的研究

目的:探讨用ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)研究膀胱癌药敏的异质性和个体化疗的可行性。方法:用ATP-TCA检测来自45例初发和6例复发膀胱癌患者的手术标本对4种化疗药物的敏感程度。结果:51例标本中有49例获得药敏结果,可评价率为96·0%。最有活性的药物是吡柔比星,有43·8%(21/48)的标本对它表现强敏感;28·6%(14/49)的标本无强敏感药物;69·4%(34/49)的标本无耐药药物。结论:膀胱癌对抗癌药物的敏感程度存在着异质性。ATP生物荧光肿瘤药敏检测技术可用于为膀胱癌选择合适的化疗药物。

ATP生物荧光技术在卵巢癌体外药敏检测中的应用

目的 评价ATP生物荧光肿瘤药敏检测与临床疗效的相关性,探讨其临床应用价值。方法 对34例卵巢癌新鲜瘤组织和腹水进行肿瘤细胞分离、原代培养,以ATP生物荧光体外药敏检测技术进行检测。结果ATP生物荧光法测定细胞数量具有相关性好(r=0.9981),量程宽(10-100000个细胞),敏感性高(最小检测10个活细胞)的优点,其检测结果与其他方法相比有较高的相关性。32例卵巢癌病人体外药敏结果表明,其整体预测值为90.6％;其中阳性预测值为94.7％,阴性预测值为84.6％,敏感性90％,特异性91.7％。各种药物体外药敏检测结果与临床资料基本相符。结论 ATP生物荧光肿瘤药敏检测结果与临床疗效具有较好的相关性。该药敏检测方法对于筛选及临床应用新药,研究和确定新的化疗方案和治疗原则,评估联合用药方案,实现肿瘤病人的个体化化疗具有指导作用。

OPRT,DPYD,TS的mRNA水平与胃癌对氟尿嘧啶敏感性的相关性研究

目的:探讨胃癌细胞中乳清酸磷酸核糖转移酶(orotate phosphoribosyltransferase,OPRT)、二氢嘧啶脱氢酶(dihydropy-rimidine dehydrogenase,DPYD)、胸腺嘧啶合成酶(thymidylate synthase,TS)的表达水平对氟尿嘧啶药物敏感性的预测价值。方法:采用ATP生物荧光法检测47例胃癌原代细胞对氟尿嘧啶的体外药物敏感性,RT-PCR法检测胃癌细胞内OPRT、DPYD、TS的mRNA表达水平,并分析胃癌细胞对氟尿嘧啶体外敏感性与这3种酶表达的关系。结果:OPRT的mRNA表达水平为0.74±0.36,DPYD的mRNA表达水平为0.85±0.35,TS的mRNA表达水平为0.57±0.28。药敏指数与OPRTmRNA表达水平呈正相关(rs=0.744,P=0.001);与TSmRNA表达水平呈负相关(rs=-0.375,P=0.009);与DPYDmRNA表达水平呈负相关(rs=-0.159,P=0.287),但无统计学显著性。结论:胃癌细胞中OPRT和TSmRNA的表达水平对氟尿嘧啶药物的治疗敏感性可能具有较好的预测价值。

ATP生物荧光法检测非小细胞肺癌胸水癌细胞对化疗的敏感性

目的探讨ATP生物荧光法(ATP-TCA)体外药敏试验预测非小细胞肺癌(NSCLC)胸水治疗药物敏感性的可行性。方法采用ATP-TCA检测24例NSCLC患者胸水标本,对4种含铂类二药联合方案及培美曲塞单药的敏感性。结果 24例胸水标本的可评价率为95.8%(23/24),其中GP方案的敏感率最高,为60.9%,其次为TC、TP及NP方案,敏感率分别为43.5%、39.1%和34.8%。8例培美曲塞单药二线治疗标本的敏感率为50.0%。在敏感检测标本中,不同方案对不同病理类型的敏感度亦不同。结论 NSCLC对抗癌药物的敏感程度存在着异质性,ATP-TCA体外药物敏感性检测技术是一种重要的体外药物筛选方法,可以辅助选择NSCLC合适的化疗药物。

ATP生物荧光体外药敏检测在中晚期结直肠癌化疗药物筛选中的应用

目的探讨ATP生物荧光体外药敏检测法(ATP-TCA)的特点及其在中晚期结直肠癌患者化疗方案中的指导价值。方法应用ATP-TCA体外检测59例结直肠癌细胞对常用抗癌药物的敏感性。结果 ATP-TCA法对结直肠癌标本的可评估率为96.61%。57例结直肠癌细胞对4组联合化疗药物氟尿嘧啶+丝裂霉素、氟尿嘧啶+奥沙利铂、氟尿嘧啶+伊立替康、氟尿嘧啶+奥沙利铂+伊立替康相比氟尿嘧啶、丝裂霉素、伊立替康、奥沙利铂4种单药的敏感度有高度显著性差异(P=0.0006)。应用ATP-TCA检测结果指导中晚期结直肠癌患者化疗,临床近期有效率为59.65%(34/57),总预测准确率为63.16%(36/57),阳性符合率为61.82%(34/55),阴性符合率为100%(2/2)。结论 ATP-TCA能有效检测化疗药物的敏感性,对指导中晚期结直肠癌患者化疗有重要的临床意义。

应用ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术研究大肠癌药敏的异质性

目的探讨用ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)研究大肠癌药敏的异质性和个体化疗的可行性。方法用ATP-TCA检测58例大肠癌标本对16种单药或联合用药的敏感性。结果个体之间的药物敏感性存在着明显的异质性。单药中最有效的药物为长春瑞滨、羟基喜树碱、氟尿嘧啶和紫杉醇。联合用药最有效的是氟尿嘧啶+丝裂霉素+阿糖胞苷,91.6%(11/12)的标本对其敏感,其次是氟尿嘧啶+顺铂+阿霉素,健择+顺铂和5-FU氟尿嘧啶+长春新碱+卡氮芥。结论大肠癌对抗癌药物的敏感程度存在着异质性。ATP生物荧光肿瘤药敏检测技术可用于为大肠癌选择合适的化疗药物。

三磷酸腺苷法肿瘤药敏实验在筛选鼻咽癌新辅助化疗药物中的应用

目的探讨肿瘤体外药敏实验ATP生物荧光法(ATP-TCA)在筛选鼻咽癌新辅助化疗药物中的应用。方法应用ATP-TCA法体外检测84例鼻咽癌活检组织对8种常用化疗药物的敏感性。结果组织标本的可评估率为100.0%。PXT最敏感,体外有效率为50.00%,其次为DDP(35.45%)、5-Fu(31.25%)、NVB(23.53%)、HCT(10.53%)、MTX(10.53%)、VP-16(7.69%)、THP(5.00%)。化疗药物对鼻咽癌的杀伤作用具有较强的个体差异性。结论体外鼻咽癌组织对8种化疗药物敏感性不同,存在明显差异性,ATP生物荧光肿瘤体外药物敏感性检测法可用于临床制定个体化的鼻咽癌新辅助化疗方案。

琥珀酸对产酸克雷伯氏菌好氧发酵甘油产1，3-丙二醇的影响

好氧条件下,通过产酸克雷伯氏菌发酵甘油产1,3-丙二醇的摇瓶实验中发现,添加副产物琥珀酸对菌体生长和1,3-丙二醇合成有促进作用,在5L自动发酵罐上做批式发酵,也得到相似的结果。为探讨其原因,进行了类似的摇瓶实验,分别添加副产物乳酸和乙酸,菌体生长和1,3-丙二醇合成均受到抑制,添加琥珀酸、柠檬酸和苹果酸,对菌体生长和1,3-丙二醇合成均有促进作用。上述结果初步表明,琥珀酸强化了三羧酸循环产生更多的能量,促进了甘油脱水酶的复活,引起1,3-丙二醇产量的增加。

ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测在筛选乳腺癌化疗药物中的应用

目的:探讨肿瘤体外药物敏感实验ATP生物荧光法(ATP-TCA法)在筛选乳腺癌常用化疗药物中的应用。方法:采用ATP-TCA法,对4组不同乳腺癌常用化疗药物选择相同规格、不同厂家共8种品规药品,同时检测对30例乳腺癌标本的杀伤效果,以比较同种乳腺癌细胞对抗肿瘤药品的敏感性。结果:ATP-TCA肿瘤药敏检测技术在乳腺癌标本中的可评价率为90%(27/30),4种药物对乳腺癌细胞株的敏感性顺序为紫杉醇(PTX)>长春瑞滨(NVB)>阿霉素(ADM)>丝裂霉素(MMC);不同厂家生产的同一种化疗药物的敏感性基本上具有一致性,但是也有个别具有差异性。结论:ATP-TCA法可应用于临床作为乳腺癌化疗药物的筛选。

广西眼镜蛇毒对人类小涎腺腺样囊性癌细胞株的抑制作用

目的研究广西眼镜蛇毒(guangxicobravenom)对人类小涎腺腺样囊性癌(NACC)细胞在体外生长的抑制作用。方法以不同浓度的眼镜蛇毒作用于NACC细胞,应用三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法)测定细胞的增殖状态;应用细胞形态学和流式细胞仪观察细胞凋亡。结果实验显示眼镜蛇毒对体外培养的NACC有明显的抑制作用,与浓度和作用时间呈正比。用浓度2.0μg/mL的眼镜蛇毒处理癌细胞48h后,试验组细胞凋亡率显著高于对照组。HE染色观察到眼镜蛇毒作用NACC细胞后其形态发生改变。结论眼镜蛇毒能抑制NACC细胞增殖并诱导其凋亡。

肿瘤药敏指导下的化疗对非小细胞肺癌并恶性胸水治疗的有效性

目的探讨ATP肿瘤药敏(ATP-TCA)指导下的化疗对非小细胞肺癌并恶性胸水治疗的有效性。方法采用ATP-TCA检测120例非小细胞肺癌(NSCLC)患者的胸水标本,选择最敏感的化疗方案用于胸水治疗(治疗组);同期收治的56例非小细胞肺癌胸水患者,非药敏指导下的化疗(对照组)。两者效果进行比较。结果治疗组胸水治疗有效率67%,对照组46%,P<0.05。难治性胸水患者,治疗组中有效率69%,对照组40%,P<0.05。体外敏感与体内有效性之间有相关性(P<0.01)。结论 ATP-TCA指导下的化疗对非小细胞肺癌并恶性胸水治疗的有效率较非药敏指导下的化疗有效率高,特别是对难治性胸水的治疗有指导价值。