g-C_(3)N_(4)锚定Cu(Ⅰ)高选择性催化CCl_(4)合成2,4,4,4-四氯丁腈

以尿素和Cu(NO_(3))_(2)·3H_(2)O为前体,采用热缩合法制备了不同Cu负载量的氮化碳(g-C_(3)N_(4))基催化剂Cu/CNn(n=1、2、3),采用X射线衍射仪、傅里叶变换红外光谱、X射线光电子能谱、比表面积测试、扫描电子显微镜及透射电子显微镜对其结构和形貌进行了表征,比较了不同Cu负载量的Cu/CNn催化CCl_(4)与丙烯腈(AN)的原子转移自由基加成(ATRA)反应合成2,4,4,4-四氯丁腈(TBN)的催化性能。结果表明,Cu/CN1呈现优异的催化性能,以乙腈(MeCN)为溶剂,n(Cu/CN1)∶n(AN)=1∶1000,120℃反应12h,TBN的选择性可达96.5%,产率可达83.3%,Cu/CN作为多相催化剂,经过滤处理便可重复利用,使用7次其催化活性仍能稳定保持。基于相关的实验结果,提出了Cu/CN催化CCl_(4)和AN的ATRA反应的氧化-还原循环机理。实验结果揭示了Cu与g-C_(3)N_(4)载体的协同作用机制,为CCl_(4)深加工开发高效的催化体系提供了新的思路。

全反式维甲酸对肝纤维化氧化应激损伤自然杀伤细胞的保护作用

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对肝纤维化氧化应激损伤NK细胞功能的保护作用。方法:采用CCl_(4)制备肝纤维化小鼠模型,通过生化及病理检测评价小鼠肝脏受损及纤维化程度,观察小鼠肝组织NK细胞变化及氧化应激损伤;体外采用H_(2)O_(2)诱导的NK92细胞株氧化应激损伤模型评价ATRA对NK92细胞的保护作用。结果:ATRA可以改善CCl_(4)模型小鼠肝功能,抑制肝脏炎症及纤维化,增加肝脏SOD活性和GSH含量,促进肝内NK细胞比例和数量;体外实验证实ATRA可以保护H_(2)O_(2)诱导的NK细胞氧化损伤及凋亡。结论:ATRA可以改善CCl_(4)引起的肝损伤及纤维化,可能与其保护NK细胞氧化应激损伤有关。

ATRA和雄黄对白血病细胞PML基因及蛋白表达的影响

目的探讨PML基因及蛋白在白血病细胞中的表达和细胞内分布定位。 方法经ATRA、雄黄处理后的NB4、HL - 60、K5 62细胞为研究对象 ,细胞形态学观察采用Wright s染色法及荧光染色法 ;PML蛋白细胞内分布定位采用免疫荧光技术 ;PMLmRNA表达采用RT -PCR法。 结果 1 ATRA处理后 ,NB4和HL - 60细胞形态学上出现分化表现 ,K5 62细胞无变化 ;经雄黄处理后 ,各组细胞形态学上均出现凋亡特征性改变。 2 ATRA处理后 ,NB4细胞内融合蛋白降解 ,PML蛋白恢复定位 ,HL - 60、K5 62细胞内PML蛋白定位分布无变化 ;雄黄处理后NB4细胞内融合蛋白降解 ,PML聚积于POD结构 ,随后降解 ;在HL - 60及K5 62细胞 ,PML发生相似改变。3 ATRA、雄黄处理后各组细胞PMLmRNA表达均无显著影响。 结论在不同诱导剂刺激下 ,PML基因在蛋白水平参与细胞终末分化及诱导白血病细胞凋亡机制 ;PML蛋白在POD中发挥诱导凋亡控制细胞生长的作用。

ATRA对甲状腺鳞癌细胞生长及RARβ和p21mRNA表达的影响

目的观察全反式维甲酸(ATRA)对甲状腺鳞癌SW579细胞株生长增殖及维甲酸受体β(RARβ)和p21表达的影响,进而探讨维甲酸的抗癌作用机制。方法甲状腺鳞癌SW579细胞株经不同浓度ATRA作用48h后,在倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化;MTT法测定细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞周期;RT-PCR方法检测细胞RARβ及p21mRNA的表达。结果随着ATRA的升高,SW579细胞的生长呈显著抑制状态,细胞生长滞留在G1期,RARβ和p21mRNA表达水平均显著上调,呈剂量依赖性。结论 ATRA在一定浓度范围内对甲状腺鳞癌SW579细胞株有剂量依赖性的增殖抑制作用,其机制可能与提高细胞RARβ基因的表达、进而再上调p21的表达有关。

ATRA与细胞因子对早幼粒白血病细胞体外增殖的影响

原代早幼粒白血病（ＡＰＬ）细胞在体外增殖试验中，ｒｈＧ－ＣＳＦ或ｒｈＴＮＦ均呈现增殖抑制作用，ｒｈＧＭ－ＣＳＦ或ＩＬ－６无明显抑制其增殖作用，且在一定浓度范围内呈增殖促进作用，本试验浓度条件下，单独ＡＴＲＡ对原代ＡＰＬ细胞表现为对增殖有抑制作用，对正常造血细胞无明显增殖促进或抑制作用，较低浓度ＡＴＲＡ合并上述４种因子对原代ＡＰＬ细胞都表现为增殖抑制作用，其中ｒｈＧＭ－ＣＳＦ或ＩＬ－６合并ＡＴＲＡ比单独ＡＴＲＡ对ＡＰＬ细胞增殖的抑制作用小。

浙江眼镜蛇(Naja naja atra)蛇毒镇痛多肽的分离纯化及其性质的研究

研究浙江眼镜蛇 (Najanajaatra)蛇毒的镇痛活性组分 ,为寻找镇痛效果好 ,而无成瘾性的新型镇痛药奠定基础。采用CM Sephadex离子交换色谱和SephadexG 5 0凝胶过滤色谱对浙江产眼镜蛇蛇毒中的镇痛活性组分进行分离纯化。采用PAGE IEF及HPLC等实验方法对产物纯度进行鉴定。采用SDS PAGE法和HPLC法测定产物的分子质量 ,用IEF法测定产物的等电点 ,用小鼠热板法与醋酸扭体法考察产物的镇痛活性。结果表明眼镜蛇毒经 3次柱色谱后 ,产物AAP经鉴定为单一组分。AAP经SDS PAGE法和HPLC法测定的分子质量分别是 7 2 8Mr 和 7 2 5Mr,等电点是 9 5 8。AAP的痛阈提高百分率和扭体抑制率分别为 91 3% ,77 2 %。眼镜蛇毒经

白骨顶的种内巢寄生行为及对不同类型寄生卵的反应

种内巢寄生是鸟类的条件性繁殖策略,具有特定的进化历史和地域特征。白骨顶(Fulica atra)作为古北界广泛分布的湿地水禽,其种内巢寄生和反寄生行为策略对于巢寄生理论假说的验证具有重要意义。通过模型卵和真卵放置试验,探究白骨顶对不同类型寄生卵的识别能力,并分析其繁殖期不同阶段的寄生防御策略。结果表明:白骨顶具有较高的种内巢寄生频率,拒卵行为包括埋卵、将寄生卵排出巢外等,对模型卵有较强的识别能力,尤其是深色模型卵未出现错误拒卵,而对于真卵的识别能力相对较弱,模型卵和真卵的拒卵成功率差异显著(χ^(2)=4.304,p=0.038)。不同繁殖阶段白骨顶的拒卵反应差别很大,在产卵期拒卵强度高于孵卵后,两个阶段的拒卵成功率差异极显著(χ^(2)=9.580,p=0.002)。白骨顶通过寄生卵识别和拒卵行为,减少种内巢寄生的影响,同时又权衡拒卵防御成本,在不同繁殖阶段采取有利于自身适合度的行为适应策略。

ATRA调节人异位子宫内膜间质细胞GJIC Connexin基因、蛋白的作用及意义

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对人异位子宫内膜间质细胞间隙连接细胞间通讯(GJIC)、connexin基因、蛋白的调节作用及意义。方法:取24例子宫内膜异位症患者卵巢处异位内膜标本,分离纯化得到间质细胞,分别用0.1mmol/L、1mmol/L、10mmol/LATRA处理24h、48h、72h、96h、120h,同时设置空白对照组,采用荧光漂白后恢复技术检测异位内膜间质细胞的GJIC功能,并检测与GJIC功能密切相关的Cx43、Cx26、Cx32的基因及蛋白表达。结果:ATRA处理72h内,1mmol/L、10mmol/L组的异位内膜间质细胞荧光恢复功能明显增强;0.1mmol/LATRA组的异位内膜间质细胞荧光恢复功能无明显变化。未经ATRA处理的异位内膜间质细胞中无Cx43、Cx26、Cx32的mRNA及蛋白表达;经1mmol/LATRA处理后,异位内膜间质细胞中检测到Cx43mRNA和蛋白表达,但未见Cx26、Cx32的mRNA及蛋白表达。结论:ATRA能选择性地诱导Cx43基因及蛋白表达,从而有效上调异位内膜间质细胞的GJIC功能;ATRA可能是治疗子宫内膜异位症的潜在药物。

抗癌药5-FU联合α-IFN与ATRA对SACC-83细胞株作用的研究

目的:探讨诱导分化剂联合抗代谢药物对人涎腺腺样囊性癌(SACC)细胞的作用效能，寻找治疗SACC的新途径。方法：应用全反式维甲酸(ATRA)、α-干扰素(α-IFN)和5-氟尿嘧啶(5-FU)，分别以单用、双用和联用对涎腺腺样囊性癌-83(SACC-83)细胞株作用，用MTT法、软琼脂集落形成、BrdU掺入法和形态学观察的方法观察细胞的形态和功能变化。结果：①随着单用、双用和联用，SACC细胞的抑制率逐渐升高、平板克隆形成率逐渐下降、DNA合成受抑制。②癌细胞异型性逐渐消失，成熟细胞特征逐渐增多。③药物作用后细胞凋亡现象明显，可见大量凋亡小体。结论：3种药物联合使用时可对SACC细胞产生显著的抑制增殖、诱导分化和促凋亡作用。联合抗代谢药物诱导分化对SACC细胞有明显的抗肿瘤作用。

FAM及FAM辅加ATRA方案对胃癌术后患者疗效对比观察

目的对比观察FAM及FAM辅加ATRA方案对胃癌术后患者的疗效。方法将62例胃癌根治性手术(D2、D3)后患者随机分为FAM+ATRA组及FAM组。结果FAM+ATRA组术后第1、2、3年的肿瘤复发转移率分别为16.1%,38.7%和67.7%;FAM组分别为25.8%,54.8%和74.2%。术后FAM+ATRA组1、2、3年生存率分别为93.5%、74.2%和38.7%;FAM组分别为80.7%、61.3%和35.5%。2组术后第1、2年的肿瘤复发转移率和患者1、2年生存率比较均有显著性差异(P<0.05),2组术后第3年肿瘤复发转移率和患者3年生存率比较无显著性差异(P>0.05)。结论FAM辅加ATRA治疗能有效提高胃癌术后患者的近期疗效及1、2年生存率。

比较丹参酮ⅡA、ATRA和As_2O_3对NB_4细胞PML-RARα融合蛋白作用的规律

目的 :比较丹参酮ⅡA、ATRA和As2 O3 对NB4细胞PML -RARα融合蛋白作用的规律 ,探索TanⅡA降低PML -RARα融合蛋白水平的原因。方法 :药物作用 2 4、 72、 12 0h ,用间接免疫荧光方法检测PML -RARα融合蛋白的变化。结果TanⅡA影响NB4细胞PML -RARα荧光染色颗粒的规律与ATRA作用一致 ,与As2 O3 作用不一致。结论 :TanⅡA可能通过激活caspase裂解PML -RARα融合蛋白或通过PML -RARα融合蛋白中RARα的AF - 2部分而降解PML -RARα融合蛋白 ,致PML -RARα融合蛋白水平降低 ,NB4细胞分化。

蟾蜍灵联合ATRA诱导HL-60细胞分化并上调Syk表达

目的:观察低剂量蟾蜍灵、全反式维甲酸(All-trans retinoic acid,ATRA)单药或联合应用对HL-60细胞增殖及分化的影响,同时检测上游通路Syk表达的变化。方法:流式细胞仪技术检测CD11b表达;West-ern Blot检测Syk和Tubulin表达。结果:与对照组相比,低剂量蟾蜍灵、ATRA或联合用药不同程度地抑制HL-60细胞增殖,同时蟾蜍灵联合ATRA以时间依赖性的方式诱导HL-60细胞分化,并伴有Syk表达上调,但是Syk的酪氨酸磷酸化并未受影响。结论:Syk表达上调可能参与调节低剂量蟾蜍灵联合ATRA对HL-60细胞的分化诱导作用。

ATO与ATRA联合小剂量HHT治疗急性早幼粒细胞白血病的临床疗效

目的探讨亚砷酸(ATO)、全反式维甲酸(ATRA)联合小剂量高三尖杉酯碱(HHT)治疗急性早幼粒细胞白血病(APL)的临床疗效。方法按入院先后顺序,将48例APL患者随机分为观察组与对照组各24例。观察组先予ATRA+ATO+小剂量HHT诱导治疗,再以HA方案巩固治疗2个疗程;对照组先予ATRA+ATO+柔红霉素(DNR)诱导治疗,再以DA方案巩固治疗2个疗程。比较两组的完全缓解率(CR)、达CR时间、骨髓PML/RARa融合基因转阴率、不良反应、成分输血及住院费用等情况。结果观察组的CR、达CR时间及PML/RARa融合基因转阴率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);观察组诱导期间败血症发生率低于对照组,输血小板量和平均住院费用少于对照组,组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 ATRA、ATO联合小剂量HHT治疗初诊APL效果确切,并发症发生率低,治疗费用少,具有重要临床应用价值。

中药辅助As_2O_3+ATRA双诱导治疗急性早幼粒细胞白血病4周的疗效观察

目的:观察中药辅助As2O3+ATRA双诱导治疗急性早幼粒细胞白血病4周的临床疗效。方法:回顾性分析22例确诊为急性早幼粒细胞白血病患者,其中治疗组12例,对照组10例,对照组行As2O3+ATRA双诱导治疗,治疗组在行双诱导治疗的基础上辅助以中医药治疗,并于治疗前后行血常规、骨髓涂片检查及临床症状评估。结果:经28天治疗后,两组患者的指标均较前改善,指标改善中药参与组更明显;同时考虑患者的症状改善情况,治疗组整体疗效较对照组更为显著,有效率高达91.6%。结论:中药辅助As2O3+ATRA双诱导治疗急性早幼粒细胞白血病4周后,较对照组更能改善患者外周血及骨髓的相关指标,同时改善患者症状,整体疗效满意。

ROZ与ATRA联合应用对MCF-7细胞诱导作用

研究PPARγ激动剂罗格列酮(ROZ)与全反式维甲酸(ATRA)联合应用诱导MCF-7细胞发生分化和凋亡的作用,阐述PPARγ激活后的抗肿瘤作用和机制.采用克隆原形成实验测定两化合物对MCF-7细胞存活率的影响;采用诱导分化实验测定两化合物对MCF-7细胞分化的影响;并进一步应用RT-PCR分析两化合物对MCF-7细胞相关基因表达的影响.集落形成实验显示,两化合物联合应用后,能明显抑制MCF-7细胞的生长.诱导分化实验表明,ROZ在低剂量时促进MCF-7细胞的分化,而随着剂量的增加,分化作用减弱,与ATRA联合应用后,同样在低剂量时促进MCF-7细胞分化,并且出现脂滴的细胞数增加,脂滴增大,在高剂量时,分化作用亦有所减弱.RT-PCR结果表明,在两化合物的作用下,MCF-7细胞中PPARγ的表达升高,并使MCF-7细胞中与凋亡相关基因的表达发生变化.ROZ与ATRA联合应用具有协同作用,激活PPARγ,抑制MCF-7细胞增殖,诱导MCF-7细胞发生分化.

HSP90β在ATRA诱导的白血病细胞株HL60耐药中的作用研究

目的:通过检测HSP90β基因在白血病细胞株HL60及其耐药株HL60/ATRA中的表达差异,探讨HSP90β基因在ATRA相关多药耐药性发生中的作用。方法:采用ATRA浓度递增及间歇诱导法建立HL60/ATRA耐药细胞株;用MTT法和流式细胞检测技术(Flow cytometry,FCM),分别检测HL60和HL60/ATRA细胞的增殖及细胞周期;RT-PCR、Western blot法检测HSP90β基因在HL60及HL60/ATRA细胞中的表达;通过MTT法检测HL60和HL60/ATRA细胞对常用化疗药物(VCR、CTX、VP-16、ADM)敏感性。结果:成功构建了白血病细胞耐药株HL60/ATRA;在mRNA和蛋白两个水平,均检测到HSP90β在耐药株HL60/ATRA中的表达较HL60明显增高(P<0.01);药敏结果显示HL60/ATRA细胞对VCR、CTX、ADM、VP-16的耐药倍数分别为10.74、5.51、4.01、3.24。结论:ATRA能够诱导HL60细胞中HSP90β高表达,经ATRA诱导后的HL60/ATRA细胞对抗癌药物的敏感性显著降低、耐药性增高,这提示HSP90β可能在ATRA相关多药耐药性的发生过程中发挥着重要作用。

ATRA对新城疫疫苗的体液免疫增强作用的研究

为了研究全反式维甲酸(ATRA)对新城疫疫苗的体液免疫增强效果,本试验选取1日龄AA肉鸡作为研究对象,低剂量组和高剂量组分别灌服1μmol/kg体重和5μmol/kg体重ATRA,在7日龄和28日龄时对药物对照组、低剂量组、高剂量组通过滴鼻、点眼的方法免疫新城疫疫苗。在7、14、21、28、35、42日龄和49日龄,每组随机取7只鸡,称重,采集胸腺、脾脏、腔上囊和血清,计算胸腺、脾脏和腔上囊免疫器官指数,利用血凝抑制(HI)试验检测血清中新城疫抗体效价。结果表明,ATRA可以促进雏鸡免疫器官生长,提高雏鸡免疫器官指数和新城疫抗体效价,表明ATRA可以增强雏鸡的体液免疫应答,且5μg/kg体重剂量ATRA对新城疫疫苗的体液免疫增强效果更显著。

中华眼镜蛇(Naja Naja Atra)毒神经生长因子对PC_(12)细胞κ阿片受体mRNA表达的影响

目的研究眼镜蛇毒神经生长因子(nNGF)对PC12细胞κ阿片受体mRNA表达的影响,探讨nNGF诱导PC12细胞分化的分子机制。方法用RT-PCR方法半定量地考察nNGF及κ阿片受体的一些拮抗剂和激动剂对PC12细胞κ阿片受体mRNA表达的影响。结果(1)在25,50和100 ng/mL 3个nNGF剂量组中,50和100 ng/mL nNGF显著下调PC12细胞κ阿片受体mRNA的表达。(2)50 ng/mL nNGF分别处理PC12细胞1,3,5,7,10 d后,结果显示κ阿片受体mRNA表达随时间有降低的趋势,7 d时显著下调(P<0.05),10 d时特别显著(P<0.01)。(3)10μmol/L吗啡上调PC12细胞κ阿片受体mRNA表达,并能逆转nNGF对该κ阿片受体mRNA表达的下调效应。10μmol/L纳络酮对PC12细胞κ阿片受体的表达无显著影响,也能逆转nNGF对该κ阿片受体mRNA表达的下调效应。但吗啡和纳络酮共存时不能逆转NGF对该κ阿片受体mRNA表达的下调效应。结论nNGF诱导PC12细胞分化时,能下调其κ阿片受体mRNA表达,这种下调能分别被吗啡或纳络酮逆转,但不能被吗啡和纳络酮共存时逆转。

甲胎蛋白抑制PTEN活性导致肝癌细胞耐受ATRA诱导的凋亡的研究

目的研究分析甲胎蛋白对PTEN活性产生抑制引起肝癌细胞耐受ATRA发生凋亡。方法选取2012年11月一2013年11月期间本院诊治36例肝癌患者，将患者术后肝癌细胞制成标本。结果人体肝癌HepG2与Bel7402细胞均存在PTEN表达，经160μmol／L的ATRA处理24h后可加强这些细胞的PTEN的表达。Co—IP技术实验得知甲胎蛋白可与PTEN相结合，最终对ATRA产生影响。结论肝癌细胞中表达的甲胎蛋白可与PTEN相结合，最终发现AFP为肝癌细胞耐受ATRA的重要因子。

中华眼镜蛇（Naja naja atra）毒细胞毒素对动物急性及长期毒性研究

目的探讨中华眼镜蛇毒中分离纯化的细胞毒素（ＣｈｉｎｅｓｅＣｏｂｒｏＶｅｎｏｍ－Ｃｙｔｏｔｏｘｉｎ，ＣＶ－ＣＴＸ）对动物急性及长期毒性的作用。方法急性毒性：小鼠５０只，尾静脉一次注入不同剂量的ＣＶ－ＣＴＸ注射液，观察７ｄ内死亡率。犬５只，戊巴比妥钠静脉麻醉后，分别静脉恒速注入不同剂量的ＣＶ－ＣＴＸ，观察５ｈ内血压、心电图及呼吸的变化。长期毒性：大鼠１６０只分别腹腔注射生理盐水２０ｍｌ、ＣＶ－ＣＴＸ２５０，５００，１０００μｇ／ｋｇ·ｄ－１，连续４０ｄ。结果（１）小鼠急性ＬＤ５０及其９５％可信限为１１５８．７（１０７０～１２５４．６）μｇ／ｋｇ，中毒症状呈匍伏、毛松、懒动直到心跳停止，解剖未见重要脏器（心、肺、肝、脾、肾）明显变化。（２）犬静脉恒速注入１００μｇ／ｋｇ间隔１ｈ，共５次，呼吸、血压、心电图未见明显变化，一次超过５００μｇ／ｋｇ，可使心律不齐而停搏，呼吸停止。（３）大鼠长期毒性实验，３个剂量组，连续用药４０ｄ，无一死亡，肝、肾功能及血液生化均无明显影响。病理检查高剂量组部分动物肝脏中度浊肿及水样变性和散在点状坏死，肺有散在性出血；中剂量组肝脏轻度浊肿，偶伴有水样变性，个别动物有小点状坏死，肺有点状出?