降钙素基因相关肽（CGRP）受体的纯化和鉴定

降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）为３７肽，它在体内主要分布于神经系统和心血管系统，是较强的扩张血管物质。人们已认识到脑部的ＣＧＲＰ最多，由于新鲜猪脑来源丰富，故我们选用猪脑为材料来纯化ＣＧＲＰ受体。以期为该受体的深入研究提供足够的材料和奠定基础，纯化的受体将用于制备抗ＣＧＲＰ受体的单克隆抗体，为了从猪脑中纯化ＣＲＲＰ受体，首先用含有胆盐的磷酸盐缓冲液将该受体从猪脑细胞膜上解离下来，解离下来的受体量较多，而杂蛋白较少，且受体活性可保持较长时间不降低。以离子交换柱层析（ＱＡＥ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ａ－２５）进行初步分离纯化，再用化学合成的ＣＧＲＰ与活化的琼脂糖（Ａｆｆｉ－Ｇｅｌ－１０，Ｂｉｏ－Ｒａｄ公司产品）制备的亲和层析柱进行亲和层析，取得的纯化受体保留了与１２５Ｉ－ＣａＧＲＰ结合的能力，而与降钙素（Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ）神经肽Ｙ（ＮｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅＹ）和Ｋａｔａｃａｌｃｉｎ等无交叉反应，但与有４６％氨基酸序列同源性的Ａｍｙｌｉｎ有一定交叉反应。纯化的受体经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和高压液相色谱（ＨＰＬＣ）鉴定呈现单一蛋白条带或蛋白峰，其位置对应分子量为６６ｋＤ。

基于真实世界数据的CGRP靶向药物不良事件的对比分析

目的 对比分析降钙素基因相关肽(CGRP)靶向药物上市后的不良事件,为患者药物选择和临床安全用药提供参考。方法 收集美国食品药品监督管理局(FDA)不良事件报告系统(FAERS)中自药品上市时间至2023年9月30日的原始数据,采用报告比值比法(ROR)和贝叶斯可信区间递进神经网络法(BCPNN),对比分析小分子CGRP受体拮抗剂(吉泮类)和CGRP单抗类药物的不良事件信号。结果 吉泮类不良事件信号共计176个(报告例数10 569),单抗类不良事件信号共计401个(报告例数87 605)。所有CGRP靶向药物均存在药物无效和治疗效果下降的不良事件。吉泮类共有的不良事件信号包括恶心、嗜睡和眩晕,单抗类共有的不良事件信号为注射(或输液)部位的各种反应。存在FDA说明书中未记载的多个不良事件信号,有些信号是某类药物所特有的,如阿托吉泮的便秘,瑞美吉泮的上腹痛和咽部肿胀等,乌布吉泮的胸痛、颈痛和心悸等,加卡奈珠单抗的眩晕和体重增加,瑞玛奈珠单抗的肿舌和耳鸣,艾普奈珠单抗的咽喉刺激、鼻充血和超敏反应等。结论 CGRP靶向药物的不良事件既有共性也有各自的特性,对于说明书未记载的不良事件,临床应予以关注并指导患者安全用药。

LncRNAuc.48+对CGRP介导的三叉神经痛的作用

目的探究长链非编码核糖核酸uc.48+(long non-coding RNA,lncRNA uc.48+)如何影响三叉神经痛(trigeminal neuralgia,TN)大鼠三叉神经节(trigeminal ganglion,TG)中降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)以及其潜在的作用机制。方法慢性压迫性损伤大鼠眶下神经(chronic compression injury to the infraorbital nerve,CCI-ION)建立大鼠TN动物模型。成模后,经眶下孔局部注射uc.48+小干扰敲低lncRNAuc.48+,以及向正常大鼠转染uc.48+质粒过表达lncRNAuc.48+。通过行为学来观察各组大鼠面部机械痛阈值(mechanical pain threshold,MWT),结合qPCR、蛋白印迹等方法观察大鼠TG中CGRP的含量及变化。ELISA法观察1L-1β的变动状况。结果接受uc.48+小干扰处理的TN大鼠机械痛敏阈值明显上升;TG中CGRP的蛋白、mRNA水平明显下降(P<0.01),1L-1β的水平也降低(P<0.01);此外,与正常大鼠相比,正常大鼠转染uc.48+质粒后,其机械痛敏阈值明显下降,TG中CGRP的蛋白、mRNA水平明显上升(P<0.01),1L-1β的水平明显增加(P<0.01)。结论TN大鼠敲除uc.48+显著减轻疼痛,而过表达uc.48+则加剧了TN的疼痛传导。uc.48+小干扰对TN有一定的抑制作用,该机制可能是通过减少神经病理痛大鼠TG中CGRP的表达,抑制初级感觉神经节对三叉神经病理痛信息的传播,进而减轻三叉神经病理痛对机械性疼痛的敏感性。

壮医药线点灸治疗偏头痛急性期的疗效及对血清CGRP、IL-6、TNF-α的影响

目的:观察壮医药线点灸治疗偏头痛急性期的临床疗效及对血清降钙素基因相关肽(CGRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:选择70例偏头痛急性期患者为研究对象,按就诊先后顺序单盲随机分为试验组和对照组,每组35例,试验组予壮医药线点灸治疗,对照组予口服西药盐酸氟桂利嗪胶囊治疗,两组均治疗4周。结果:试验组总有效率为94.29%,显著高于对照组的77.14%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者血清CGRP、IL-6、TNF-α水平及头痛强度积分、头痛发作次数积分、头痛持续时间积分、头痛症状总积分均较治疗前明显降低(P<0.05),且试验组患者上述指标均较对照组改善更显著(P<0.05)。治疗期间,对照组出现轻度恶心、腹痛等胃肠道不良反应4例,试验组未出现不良反应,对照组不良反应发生率(11.43%)高于试验组(P<0.05)。结论:壮医药线点灸治疗偏头痛疗效显著且安全性较高,其作用机制可能与抑制CGRP释放、降低炎症因子(IL-6、TNF-α)水平有关。

CGRP通过ALKBH5/m6A抑制自噬促进缺氧/复氧心肌细胞增殖

目的探讨CGRP通过ALKBH5/m6A调控自噬对缺氧/复氧心肌细胞增殖和凋亡的影响。方法将心肌细胞H9c2随机分为Control组(H9c2细胞正常培养基培养)、H/R组(制备缺氧/复氧H9c2细胞损伤模型组)、CGRP组(缺氧/复氧模型前加入1×10^(-1)mol/L的CGRP作用20 min)和CGRP+sh-ALKBH5组(将sh-ALKBH5转染至H9c2细胞中,培养24 h后加入1×10^(-1)mol/L CGRP作用20 min,后制备缺氧/复氧模型)。采用CCK-8和EdU染色检测H9c2细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;检测心肌细胞中乳酸脱氢酶(LDH)活性;Dot blot检测m6A甲基化水平;蛋白质印迹法和RT-PCR检测细胞中ALKBH5、Beclin-1、p62、LC3Ⅱ、LC3Ι蛋白和m RNA表达。结果与Control组比较,H/R组细胞存活率[(46.27±4.09)%]、EdU阳性细胞率[(3.89±0.87)%]明显降低,细胞凋亡率[(13.62±1.27)%]、LDH浓度(276.32±25.14)、m6A相对表达量(2.46±0.18)明显增加(P<0.05);与H/R组比较,CGRP组细胞存活率[(87.31±6.24)%]、EdU阳性细胞率[(40.71±2.53)%]均明显增加,细胞凋亡率[(3.17±0.82)%]、LDH浓度(78.24±7.19)、m6A相对表达量(1.42±0.13)明显降低(P<0.05);CGRP+sh-ALKBH5组细胞存活率[(61.04±5.48)%]、EdU阳性细胞率[(8.76±1.24)%]均明显低于CGRP组,细胞凋亡率[(10.19±0.95)%]、LDH浓度(229.06±22.43)、m6A相对表达量(2.09±0.15)明显高于CGRP组(P<0.05)。与Control组比较,H/R组细胞中ALKBH5(0.34±0.03)、p62蛋白(0.32±0.04)和mRNA表达(0.21±0.04)明显降低,Beclin-1蛋白(0.97±0.13)及mRNA表达(2.14±0.17)和LC3Ⅱ/LC3Ι比值(0.64±0.08)明显升高(P<0.05);与H/R组比较,CGRP组细胞中ALKBH5(0.78±0.09)、p62蛋白(0.71±0.08)和m RNA(0.87±0.08)表达明显增加,Beclin-1蛋白(0.41±0.06)及mRNA表达(1.26±0.12)和LC3Ⅱ/LC3Ι比值(0.23±0.03)明显降低(P<0.05);与CGRP组比较,CGRP+sh-ALKBH5组细胞中ALKBH5(0.50±0.07)、p62蛋白(0.40±0.05)和mRNA表达(0.30±0.05)明显降低,Beclin-1蛋白(0.86±0.10)及mRNA表达(1.95±0.14)和LC3Ⅱ/LC3Ι比值(0.58±0.06)明显升高(P<0.05)。结论CGRP可能通过促进m6A去甲基酶ALKBH5的表达来发挥作用,抑制心肌细胞在缺氧/复氧条件下的自噬和凋亡,从而提高心肌细胞的存活率。

电针对多囊卵巢综合征小鼠机械痛阈及TRPV1和CGRP表达的影响

目的:观察电针关元及敏化点对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)小鼠关元穴、敏化点机械痛阈值及T13-L2节段脊髓、背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中瞬时受体电位香草酸亚型1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)表达的影响,探讨PCOS小鼠模型体表敏化的部分机制。方法:32只雌性ICR小鼠,随机分为对照组、模型组、电针关元组、电针敏化点组,每组8只。采用双酚A灌胃的方式制备PCOS模型,对照组用玉米油灌胃;电针关元及敏化点,每日20 min,连续5天,共4周。电针结束后第3天,用von Frey测量小鼠体表敏化点及关元穴机械痛阈值;HE染色法观察卵巢组织病理形态;蛋白印迹法、免疫荧光法检测脊髓、DRG中TRPV1及CGRP表达水平。结果:与对照组比较,模型组卵巢组织囊性扩张、闭锁卵泡增加,关元穴、敏化点痛阈值下降,脊髓及DRG中TRPV1、CGRP蛋白表达上升,脊髓中TRPV1/CGRP共表达光密度升高、DRG中TRPV1/CGRP共表达细胞增加;与模型组比较,电针关元组及电针敏化点组卵泡及黄体发育良好,关元穴及敏化点痛阈值升高,脊髓、DRG中TRPV1及CGRP蛋白表达降低、脊髓中TRPV1/CGRP共表达光密度降低、DRG中TRPV1/CGRP共表达细胞减少。结论:电针敏化点与关元可提高PCOS小鼠关元穴及敏化点机械痛阈值,调节PCOS小鼠体表敏化现象,其作用机制可能与下调TRPV1、CGRP的异常高表达有关。

通窍活血汤治疗缺血性脑卒中的疗效观察及对ET-1、CGRP因子影响

目的通过动物实验,探讨通窍活血汤治疗缺血性脑卒中的临床疗效及对ET-1、CGRP因子的影响。方法实验以48只健康雄性SD大鼠为对象,其中8只大鼠作为假手术组,其余40只用于制备MCAO动物模型。将造模成功的大鼠随机分为4组,模型组及通窍活血汤高、中、低剂量组,每组各8只(排除死亡和不符合标准的模型)。假手术组与模型组灌服同体积的生理盐水,通窍活血汤组按高、中、低剂量灌胃,分别持续灌服14 d,1次/d,给药第14天测定大鼠神经功能情况,并于末次给药后2 h处死。用RT-qPCR法检测大鼠脑组织ET-1及CGRP含量,用TTC染色法观察大鼠梗死情况。结果与假手术组相比,模型组与通窍活血汤各剂量组血清ET-1表达水平均有所上升(P<0.05),脑组织CGRP表达水平有差异(P<0.05),呈下降趋势,有统计学意义;与模型组相比,大鼠血清ET-1含量在通窍活血汤各剂量组的表达水平下降(P<0.05),脑组织CGRP表达水平升高(P<0.05),有统计学意义;与通窍活血汤高剂量组相比,大鼠血清ET-1表达在通窍活血汤中、低剂量组升高(P<0.05),脑组织CGRP在通窍活血汤中、低剂量组表达降低(P<0.05),有统计学意义,说明通窍活血汤高剂量组比中、低剂量组疗效更优。结论通窍活血汤治疗急性缺血性脑卒中可能是通过影响血管内皮因子的舒缩功效,发挥对血管内皮功能的保护作用。

CGRP/ASIC3参与大鼠食道扩张内脏痛模型中背根神经节神经元高敏感机制的研究

目的:探讨降钙素基因相关肽(CGRP)和酸敏感离子通道3(ASIC3)参与大鼠食道扩张(ED)内脏痛模型中脊髓背根神经节(DRG)神经元高敏感发生的机制。方法:将50只健康雄性SD大鼠随机分为实验组(n=30)和对照组(n=20)。腹腔麻醉50只SD大鼠,暴露大鼠食管下段,利用PE-240管对实验组大鼠的胸段食管进行1 h重复ED刺激,对照组则不予处理。分离并培养50只大鼠胸段脊髓DRG神经元,根据实验组培养液中有无加入CGRP拮抗剂(CGRP8-37)将其进一步分为ED组(n=15)和ED+CGRP8-37组(n=15)。采用全细胞膜片钳技术记录DRG神经元动作电位及ASIC3电流变化;免疫荧光法检测DRG神经元中CGRP、ASIC3的表达定位;逆转录实时聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测CGRP与ASIC3 mRNA表达;Western blot法检测CGRP与ASIC3蛋白表达。结果:ED组DRG神经元动作电位数较对照组显著增加(P<0.01);免疫荧光结果示CGRP与ASIC3在DRG神经元中存在共表达;与对照组比较,ED组CGRP与ASIC3的mRNA、蛋白水平显著上调(P<0.01);且CGRP的mRNA、蛋白表达与ASIC3的mRNA、蛋白表达均呈正相关(r分别为0.833、0.981,P<0.01);ED组和ED+CGRP8-37组ASIC3电流较对照组显著增加(P<0.01),ED+CGRP8-37组ASIC3电流较ED组明显减少(P<0.01)。结论:CGRP和ASIC3共同参与了ED模型中DRG神经元的超敏反应,CGRP参与调节ASIC3电流变化可能是DRG神经元高敏感发生的重要机制之一。

针刺对偏头痛大鼠三叉神经节和三叉神经脊束尾核A1R/ERK1/2/CGRP通路的影响

目的:探讨针刺太冲穴对肝阳上亢型偏头痛模型鼠镇痛作用的可能机制。方法:66只SD大鼠随机分为空白对照组(n=10)、模型组(n=56),以附子汤灌胃加右肩颈部皮下注射硝酸甘油建立肝阳上亢偏头痛模型,其中50只大鼠成模,将成模大鼠随机分为模型组、太冲组、非穴组、太冲+DPCPX(A1R拮抗剂)组和太冲+EGF(ERK1/2激动剂)组,每组10只。太冲组、太冲+DPCPX组及太冲+EGF组针刺双侧太冲穴,非穴组针刺双侧胁下非穴,均留针30 min。观察各组大鼠行为学(耳红持续时间、挠头及爬笼次数)、三叉神经节(TG)和三叉神经脊束尾核(TNC)中A1R、ERK1、ERK2、CGRP的mRNA及蛋白水平。结果:除空白对照组外,其余各组均在注射硝酸甘油后3~4 min出现耳红,持续约3 h消失;与模型组比较,太冲组耳红持续时间较短,差异具有统计学意义(P<0.05),与太冲组比较,非穴组、太冲+DPCPX组及太冲+EGF组耳红持续时间较长,差异具有统计学意义(均P<0.05);针刺前1 h,除空白对照组外,各组挠头、爬笼次数明显增加且各组间差异无统计学意义(均P>0.05);针刺后1 h、2 h,与模型组比较,太冲组挠头、爬笼次数减少,差异具有统计学意义(P<0.05);与太冲组比较,非穴组、太冲+DPCPX组及太冲+EGF组挠头、爬笼次数增加,差异具有统计学意义(均P<0.05)。与空白对照组比较,模型组TG、TNC中ERK1、ERK2、CGRP mRNA和蛋白表达均增加,差异具有统计学意义(均P<0.05),A1Rm RNA和蛋白表达均减少,差异具有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,太冲组大鼠TG、TNC中ERK1、ERK2、CGRP mRNA和蛋白表达均减少,差异具有统计学意义(均P<0.05),A1R mRNA和蛋白表达均增加,差异具有统计学意义(均P<0.05);与太冲组比较,非穴组、太冲+DPCPX组及太冲+EGF组大鼠TG、TNC中ERK1、ERK2、CGRP mRNA和蛋白表达均增加,差异具有统计学意义(均P<0.05),A1R mRNA和蛋白表达均减少,差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论:针刺太冲穴治疗偏头痛的可能机制是通过激活TG和TNC的A1R,抑制ERK1/2磷酸化,进而减少CGRP的释放来缓解偏头痛。

血清CGRP、Cystatin C、VEGFR水平与烟雾病患者血管重建术后认知功能的相关性分析

目的:探究烟雾病患者行血管重建术后血清降钙素基因相关肽(CGRP)、血清胱抑素C(Cystatin C)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)与认知功能的相关性。方法:选择2020年7月-2021年7月在我院行血管重建术的113例烟雾病患者为研究对象,根据术后3个月认知功能情况,分为认知正常组(n=92例)、认知障碍组(n=21例),比较两组临床资料、蒙特利尔认知量表(MoCA)评分、CGRP、Cystatin C、VEGFR水平,分析CGRP、Cystatin C、VEGFR与MoCA评分的相关性。结果:两组Suzuki分期、MMSE评分比较,差异有统计学意义(P<0.05);认知障碍组血清CGRP水平低于认知正常组,Cystatin C、VEGFR水平均高于认知正常组(P<0.05);Pearson分析显示,CGRP水平与MoCA评分呈正相关(r=0.427,P<0.05),Cystatin C、VEGFR水平与MoCA评分呈负相关(r=-0.512、-0.458,P<0.05);多因素分析发现,血清CGRP、Cystatin C、VEGFR水平与MoCA评分显著相关(P<0.05)。结论:烟雾病患者血管重建术后血清CGRP水平明显降低,Cystatin C、VEGFR水平明显增高,且与认知功能、预后密切相关。

天麻素对偏头痛患者外周血CGRP、NO和ET-1表达的影响

目的观察天麻素治疗偏头痛患者的临床疗效及血清中降钙素基因相关肽(CGRP)、一氧化氮(NO)及内皮素-1(ET-1)表达水平的影响。方法 80例偏头痛患者随机分为对照组和治疗组各40例,对照组在抗感染、降压、改善睡眠等常规治疗的基础上加用氟桂利嗪每晚10mg口服,治疗组则在常规治疗的基础上加用天麻素注射液600mg加入0.9%氯化钠溶液250mL静脉滴注。采集治疗前、治疗第10天及35例健康体检者的外周静脉血:1观察2组患者治疗前后VAS评分变化及其治疗有效率;2采用ELISA法检测并比较患者血清中的CGRP、NO及ET-1含量变化。结果 12组治疗后VAS评分均较治疗前降低,治疗组VAS评分低于对照组(P<0.05),治疗组总有效率高于对照组(P<0.05);2治疗前,对照组与治疗组间CGRP、NO及ET-1的表达无明显差异(P>0.05),与健康体检者比较,则明显增高(P<0.01);3治疗第10天,治疗组与对照组CGRP、NO及ET-1的表达较治疗前均下降(P<0.01),而治疗组较对照组下降明显(P<0.05)。结论天麻素能明显改善偏头痛患者临床症状,同时降低患者血清CGRP、NO及ET-1表达水平,这可能是天麻素缓解偏头痛症状的可能机制之一。

CGRP、ET活性应变效应与急性脑卒中关系的研究

采用放免法监测６４例急性脑卒中患者血浆、脑脊液（ＣＳＦ）中降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）、内皮素（ＥＴ）含量变化。结果表明，两种物质呈负相关性同步敏感活跃。脑出血组ＣＧＲＰ升高占优势（Ｐ＜０．０１）；脑梗塞组ＥＴ升高占优势（Ｐ＜０．０１）。恢复期脑出血组ＣＧＲＰ明显下降，ＥＴ回升；脑梗塞组相反，ＥＴ显著下降，ＣＧＲＰ回升。ＣＧＲＰ、ＥＴ变化与病变部位、病灶大小、血压高低相关。提示ＣＧＲＰ、ＥＴ活性变化与血管舒缩功能失衡有其内在联系。

针刺对便秘型肠易激综合征患者血浆5-HT、NPY和CGRP的影响

目的观察针刺对便秘型肠易激综合征(IBS-C)患者血浆中5-羟色胺(5-HT)、神经肽Y(NPY)和降钙素基因相关肽(CGRP)水平的影响,从脑-肠轴的角度阐述针刺治疗IBS-C的效应机制。方法 60例IBS-C患者随机分为针刺组和西药组。针刺组30例,予针刺治疗,取天枢、足三里、上巨虚、太冲、三阴交、印堂、百会,每日1次,每周5次,4周为1个疗程;西药组30例,予口服乳果糖口服溶液,15mL每次,每日3次,4周为1个疗程。观察2组治疗前后临床症状改善情况。同时采集2组患者治疗前后及30名健康志愿者外周静脉血,采用Elisa法检测患者血浆中的5-HT、CGRP和NPY的水平,探讨针刺对IBS-C患者血浆5-HT、NPY和CGRP的影响。结果 1针刺及西药均能显著改善IBS-C患者的临床症状(P<0.01),针刺组疗效均优于西药组(P<0.01)。22组IBS-C患者血浆5-HT、NPY和CGRP水平均明显高于健康志愿者,差异有统计学意义(P<0.01)。治疗后2组IBS-C患者血浆5-HT、NPY和CGRP水平均下降,针刺组患者血浆5-HT、NPY和CGRP水平较治疗前有显著差异(P<0.01);西药组患者血浆5-HT、NPY水平较治疗前也有显著差异(P<0.01),CGRP水平与治疗前比较无统计学意义(P>0.05)。2组治疗后组间比较血浆5-HT、NPY无统计学差异(P>0.05),血浆CGRP有统计学差异(P<0.01),针刺组下降趋势优于西药组。结论 1针刺可显著改善IBS-C患者的临床症状,疗效均优于西药组。2IBS-C患者血浆5-HT、NPY和CGRP水平均升高,说明脑肠肽水平异常与IBS-C症状密切相关。3针刺能明显降低患者血浆5-HT、NPY和CGRP水平,缓解腹痛与腹部不适程度,表明针刺对IBS-C患者血浆脑肠肽水平的良性调控作用可能是其治疗本病的效应机制之一。

针刺内关对心肌缺血-再灌注损伤家兔CGRP和PGE_2的影响

目的:对比观察电针内关与心肌缺血预处理对心肌缺血-再灌注损伤家兔心肌组织中降钙素基因相关肽(CGRP)及前列腺素E2(PGE2)的影响,以探讨针刺内关抗心肌缺血的作用机理。方法:健康家兔46只,随机分为5组,即假手术组、缺血-再灌注模型组、缺血预处理组、电针内关组、电针足三里组;结扎家兔冠脉左前降支造成心肌缺血模型,以RM46多导生理仪持续监测心电,用硝基四氮唑兰染色测量心肌梗死范围,用放射免疫法检测家兔心肌组织CGRP、PGE2含量。结果:结扎冠脉左前降支后,心梗范围扩大;除预处理组外,其余各组与假手术组比较均有显著性差异,而假手术组、预处理组和针内关组与模型组比较均有明显差异;CGRP和PGE2水平模型组明显低于假手术组、预处理及针内关组(P<0.05或P<0.01)。结论:心肌缺血预处理与电针内关对缺血-再灌注心肌均有明显的保护作用,其作用机制可能与CGRP、PGE2的参与有关。

长期饮酒脑缺血大鼠血浆NPY、CGRP、ET含量的测定

目的 探讨长期饮酒对脑缺血大鼠血浆中神经肽 Y ( NPY )、降钙素基因相关肽 ( CGRP)、内皮素( ET)含量的影响。方法 选用 180～ 2 0 0 g雄性 Wistar大鼠 5 0只 ,分为饮水组与饮酒组 ,饮酒组以 7.2 %酒精喂养10 0 d,制作长期饮酒模型 ,后将两组用线拴法制作脑缺血模型 ,在缺血前、缺血 1h、3h、6 h分别取血 ,用放免法测定NPY、CGRP、ET。结果 各时间段饮酒组 NPY含量明显高于饮水组 P<0 .0 5 ,缺血 3h时 ,两组血浆 NPY含量明显升高 ,于 6 h逐渐下降 ;各时间段饮酒组 CGRP均低于饮水组 P<0 .0 1,饮水组于缺血 3h、饮酒组于缺血 1h时 ,血浆中 CGRP明显下降 ;饮酒组血浆 ET于缺血前及缺血 1h明显高于饮水组 P<0 .0 5 ,饮水组于缺血 3h、饮酒组于缺血1h血浆 ET明显升高。结论 脑梗死超早期伴有血浆 NPY、CGRP、ET的动态改变 ,长期饮酒可加重这些变化 ,增加血浆中缩血管物质的含量减少舒血管物质的含量 ,进一步减少脑部血液供应。

腹针对颈性眩晕患者血浆ET-1 CGRP水平影响的研究

目的:观察腹针灸治疗对颈性眩晕患者的血浆ET-1、CGRP水平变化的影响。方法:将24例确诊为颈性眩晕的病人进行腹针治疗,治疗前后进行积分评估、血浆ET-1、CGRP水平变化的对比、不同的症状改善情况统计。结果:发现治疗前后积分评估显著升高,血浆ET-1水平显著下降;血浆CGRP水平显著升高;CGRP/ET-1的比值在治疗前后有显著提高,均具统计学意义。结论:腹针可能通过对ET-1与CGRP的水平的调整,是治疗颈性眩晕的机理之一。

Losartan和CGRP对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖作用的影响

目的比较非肽类血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型阻断剂氯沙坦(Losartan)和血管活性肽降钙素基因相关肽(CGRP)对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖作用的影响,为探讨此两类物质的降压机制提供实验依据。方法采用MTT,3H-参入法和流式细胞仪分别测定血管紧张素Ⅱ刺激下,Losartan或CGRP干预下血管平滑肌细胞的增殖变化,W est-ern b loting法测定不同状态下血管平滑肌细胞内ERK1/2的活性变化。结果Losartan或CGRP能抑制血管紧张素Ⅱ刺激下血管平滑肌细胞的生存率、DNA合成、细胞周期增殖指数,以及细胞内ERK1/2的活性,并呈剂量依赖性。而且,CGRP抑制作用强于Losartan。结论Losartan或CGRP能抑制血管紧张素Ⅱ刺激下血管平滑肌细胞增殖,其细胞内的信号传导途径与ERK1/2有关。

缺血中风急性期CGRP,ET动态变化及其与证候的相关性

目的观察缺血中风急性期降钙素基因相关肽(CGRP)及内皮素(ET)的动态变化及其与证候要素相关性。方法以健康体检者30例对照,对60例缺血中风急性期患者各时点应用放射免疫法(RIA)测CGRP,ET的含量,同时采集中医临床四诊信息并确定其证候要素。结果各时点患者血浆ET的动态水平都高于正常对照组(P<0·01),呈逐步下降趋势;第3、7患者血浆CGRP的水平低于正常对照组(P<0·01),第14天水平低于正常对照组(P<0·05),并呈逐步上升趋势。第7、14天血瘀证患者CGRP含量低于其他证型组,而第3、7天ET含量高于其他证型组,并符合血浆CGRP,ET的动态变化。结论CGRP和ET参与缺血中风的急性过程,与血瘀证密切相关;CGRP和ET含量测定可能对缺血中风血瘀证的临床治疗有一定的指导意义。

ET-1和CGRP在颅脑创伤后脑血管痉挛中的作用

目的利用流体冲击液压伤装置建立中重度颅脑外伤动物模型,探讨内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、降钙素基因相关肽(CGRP),在创伤后脑血管痉挛中(cerebral vasopasm,CVS)的作用。方法用流体冲击液压伤装置建立中重度颅脑外伤的动物模型,分别于伤前,伤后1、3、7d行经颅多普勒超声(transcranial doppler sonography,TCD)检查,测定基底动脉脑血流速度,并采血及脑脊液应用放免法测定ET-1及CGRP浓度。结果模型动物制作成功,伤后1、3、7d基底动脉峰值血流速度与术前对照组比较,均有明显增高,差异有统计学意义(P<0.05),伤后3d达最高;ET-1在血液中浓度在伤后1、3、7d持续增高,在脑脊液中ET-1浓度变化与基底动脉血流速度相应。CGRP在体液中的浓度也有相应升高。结论(1)创伤后CVS可能与ET在脑脊液中的浓度有关,而与ET-1在血浆中的浓度关系不大;(2)在兔颅脑创伤后脑脊液和血液中CGRP浓度也有升高,但升高的CGRP并不能抑制脑血管的收缩反应。

头痛宁对电刺激三叉神经节大鼠脑膜血流与CGRP的影响

目的:观察头痛宁对偏头痛大鼠模型硬脑膜动脉血流和外周血中降钙素基因相关肽(calci-tontin gene-related peptide,CGRP)的调节作用。方法:24只雄性SD大鼠随机分成四组:生理盐水组(N组)、头痛宁组(T组)、舒马曲坦组(S组)、假手术组(Sham组)。电刺激三叉神经节建立偏头痛大鼠模型,放射免疫分析法测定大鼠外周血中CGRP含量,利用激光多普勒脑血流仪检测大鼠硬脑膜动脉血流量。结果:电刺激三叉神经节时,T组与N组比较其CGRP含量明显低于N组,差异非常显著(P<0.01),而与S组比较差别不大(P>0.05),N组与Sham组比较差异非常显著(P<0.01)。电刺激三叉神经节时,T组与N组比较其脑膜血流量明显低于N组,差异非常显著(P<0.01),而与S组比较差别不大(P>0.05),N组与Sham组比较差异非常显著(P<0.01)。结论电刺激三叉神经节可导致大鼠外周血中CGRP含量及脑膜血流量增加。头痛宁能明显抑制CGRP的表达与减少脑膜血流量,从而有效地治疗偏头痛。