化学发光免疫分析（CLIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）检测抗环瓜氨酸肽抗体评价

目的对化学发光免疫分析（CLIA）和酶联免疫吸附法（ELISA）检测抗环瓜氨酸肽（抗CCP）抗体进行评价。方法依据2010ACR／EULAR类风湿关节炎分类诊断标准收集2012年1月～4月南通大学附属医院RA患者58例。其他风湿性疾病患者67例，南通大学附属医院体检健康且排除自身抗体阳性的健康体检者67例。用CLIA法和ELISA法分别检测所有研究对象血清中的抗CCP抗体；评估CLIA法检测抗CCP抗体的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及与ELISA法的相关性。结果CLIA法对RA的诊断敏感度和特异度分别为72．41％和97．01％；阳性预测值和阴性预测值分别为91．30％和89．04％；CLIA与ELISA方法差异无统计学意义（χ^2=1．207，P〉0．05）。结论CLIA自动化仪器检测，其操作的智能化程度高，快速简便，且易于进行质量控制。

口蹄疫病毒O型全自动磁微粒CLIA抗体定量检测方法的建立

【背景】口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、烈性传染病,疫苗接种是预防临床口蹄疫的有效措施。免疫抗体水平监测则是评估疫苗免疫效果、制定免疫程序的重要依据,是免疫工作和疫情防控必不可少的关键环节,因此建立高效、快速、全自动的抗体检测方法具有重要意义。【目的】基于磁微粒(micromagnetic particles,MPs)化学发光免疫分析技术(CLIA),建立一种新型、全自动、可定量的口蹄疫病毒O型抗体检测方法,为口蹄疫免疫监测和疫情防控提供技术支撑。【方法】使用纳米材料磁微粒为固相载体和分离载体包被捕获抗体,用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)标记检测抗体,经过条件优化建立了一种新型磁微粒CLIA检测方法(magnetic particle chemiluminescence immunoassay,MP-CLIA)。本方法首先加入磁微粒-兔抗偶联物(magnetic particle-polyclonal antibodies,MPs-p Abs)、待测样本、口蹄疫病毒O型抗原,37℃孵育;再加入适量酶标抗体(ALP-p Abs),37℃孵育;最后加入化学发光底物AMPPD,检测相对发光强度(relative light unit,RLU)。研究通过检测标准品拟合标准曲线,并应用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)确定检测方法的判定标准;利用质控样本进行方法学评价,同时检测田间样本,并和液相阻断ELISA(LPB-ELISA)比对,验证临床检测效果。【结果】优化后最佳反应条件为磁微粒浓度0.25 mg·m L^(-1)、口蹄疫病毒O型抗原1﹕1000稀释、酶标抗体1﹕2000稀释、加样量20μL。整个检测过程均在全自动化学发光免疫分析仪中完成,反应时间20 min,在抗体含量0—1280 U(效价0—1﹕2048)范围内标准曲线R2>0.99,可进行定量检测。该方法敏感性为94.66%;特异性为97.10%,检测口蹄疫A型、Asia I型血清型特异性为97.14%,与塞内卡病毒(SVV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、牛流行热病毒(BEFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、羊痘病毒(QRFV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体阳性血清无交叉反应;重复检测变异系数CV值<10%;田间样本检测结果与LPB-ELISA符合率为94.69%,定量结果相关系数R2为0.8473,P<0.0001,相关性显著。【结论】建立的MP-CLIA方法耗时短、操作简便,配套国产全自动化学发光仪,可进行全自动化检测,是一种新型、高效的口蹄疫病毒O型抗体定量检测方法,本方法对应的试剂盒已经完成中试生产和临床检测试验,在全国不同区域试用效果较好,具有较高的临床应用价值。

基于改进遗传算法的CLIA运行调度优化

针对化学发光免疫分析仪的运行调度优化问题,以最小化最长完工时间为优化目标,提出了一种改进的遗传算法。在传统遗传算法的基础上,引进了一种基于工件排列的编码方法;采用轮盘赌选择策略保留了种群多样性;利用POX交叉算子优化了交叉结果;对于解码算法的改进,通过加入自适应模块等待算法,解决了设备运行时出现的工件阻塞问题。结果表明,改进的遗传算法可以更合理安排多种工件的检测顺序,有效提高CLIA的运行效率,缩短检测的总时长,具有自动化程度高的优点。

3种非洲猪瘟病毒血清学检测试剂盒的比对

为评估不同非洲猪瘟病毒(ASFV)检测试剂的检测性能,采用标准阳性血清、标准阴性血清和临床血清,比较了酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光免疫分析(CLIA)、高敏荧光免疫分析3种ASFV血清抗体检测方法试剂盒的敏感性、特异性、符合率及临床应用效果。分析发现:4个ELISA试剂盒、1个CLIA试剂盒和1个高敏荧光免疫分析试剂盒在检测标准血清时,其敏感性、特异性和符合率差异不显著。3种试剂盒的检测临界值均可达到16倍稀释,但在32倍以上稀释时各试剂盒有所差异,ELISA试剂盒的检测灵敏度总体较高。用历年不同非洲猪瘟疫情猪场的临床血清进行检测,发现不同试剂盒检测的阳性率存在差异,ELISA试剂盒的阳性检出率整体优于其他2种方法的试剂盒。综上表明,3种方法的试剂盒在ASFV检测中都有一定的应用价值,其中ELISA试剂盒具有一定的优势,适用于ASFV的大规模筛查与监测。

9例核酸反应性标本与对应ELISA、CLIA法检测HBV的关联分析

目的为保障临床输血的安全性,比较已知酶联免疫吸附试验(ELISA)、ALT阴性合并核酸检测(NAT)反应性标本与对应化学发光(CLIA)法检测HBV的结果,对三种检测方法进行相关性分析。方法对17508例无偿献血者(排除ELISA法初复检公共阳性、ALT阳性等)进行NAT,并对NAT反应性标本进行CLIA检测。结果经核酸检测出9例HBV DNA反应性标本,未检出HCV RNA和HIV RNA反应性标本,其中1例为ELISA法"阴性高值"标本;对应CLIA法HBV"两对半"检测出现2例HBsAg(-)抗-HBs(-)抗-HBc(+)及5例HBs Ag(-)抗-HBs(+)抗-HBc(+)血清型,可能为OBI,2例均无反应性,可能为窗口期标本。结论无偿献血者的现有血液筛查方法 NAT检测和ELI SA法具有互补性,NAT检测可弥补ELISA法检测的"窗口期"问题;NAT与CLIA法检测结果具有一致性;OBI可能是本地区NAT检测HBV DNA献血者的主要类型;对可能影响血液质量的ELISA法"阴性高值"标本的淘汰,会降低输血感染风险。

CLIA与TP-ELISA检测梅毒螺旋体抗体的Meta分析

目的探讨化学发光免疫分析（CLIA）与酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）法检测梅毒螺旋体抗体的Meta分析。方法通过检索Pub Med、VIP中文期刊数据库、Wan Fang全文数据库和CNKI全文数据库476例文献,并采用Rev Man4.2软件进行统计分析。结果最终纳入11篇文献共25 413例患者,异质性检验χ2=2.05（P〉0.05）,选用固定效应模型进行合并,综合结果显示相对危险度（OR）为1.01（OR95%CI：0.93~1.09,P〉0.05）,提示CLIA与TP-ELISA法检测梅毒螺旋体抗体的差异无统计学意义。结论 ELISA和CLIA法是手术和输血前梅毒螺旋体抗体筛查的可靠方法,可用于临床检测。

TSHBAS-CLIA方法的建立

吖啶酯DMAE·NHS标记链亲和素 ,用生物素标记一株TSH单克隆抗体 ,另一株TSH单抗包被 96微孔板 ,建立TSHBAS -CLIA方法。该方法标准曲线的线性相关系数为 0 .999,分析灵敏度为 0 .0 0 7mIU/L。批内变异系数为 2 .36 % - 3.6 6 % ,批间变异系数为 2 .4 4 % - 4 .35 % ,平均回收率为 10 1.7%。与TSHIRMA法的回归方程为 :Y =- 0 .0 15 +1.0 2X ,相关系数为 0 .989;与本文的TSHCLIA也有明显相关 ,相关方程为 :Y =- 0 .2 4 +1.0 1X ,相关系数为 0 .992 ;与CibaCoriningTSHCLIA临床测量值也呈明显相关。

CLIA法检测血清CA125在卵巢癌诊断中的应用

目的 探讨化学发光免疫分析(CLIA)法检测血清CA125在卵巢癌诊断中的临床应用价值。方法 采用CLIA法检测247例卵巢肿瘤患者(其中卵巢癌63例,卵巢良性肿瘤184例)与98例正常健康体检女性的血清CA125水平。结果 卵巢癌组血清CA125水平为(296.53±325.06)U/ml,均显著高于正常对照组与卵巢良性肿瘤组(P<0.01),卵巢良性肿瘤组血清CA125水平显著高于正常对照组(P<0.01)。卵巢癌组、卵巢良性肿瘤组及正常对照组的血清CA125阳性率分别为81.0%、30.4%、12.2%。CLIA法检测血清CA125对卵巢癌诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及实验有效率分别为81.0%、75.9%、42.9%、94.7%与76.8%。结论 CLIA法检测血清CA125在卵巢癌诊断中具有重要临床价值,可作为速检项目尽快地为卵巢癌的临床诊断提供快速可靠的依据。

ELISA法和CLIA法检测HBs Ag和梅毒抗体的对比分析

目的:对比分析酶联免疫吸附实验(ELISA)和化学发光免疫测定(CLIA)法检测乙肝表面抗原(HBsAg)和梅毒螺旋体(TP)抗体的结果。方法:分别采用ELISA法和CLIA法平行检测3060份无偿献血标本的HBsAg和TP抗体,其中ELISA法检测HBsAg阴性的标本进行核酸检测(NAT),分析比较两种方法检测结果,检测结果不一致的标本送临检中心进行确证试验。结果:HBsAg检测结果,ELISA、CLIA的灵敏度分别为90.00%、90.00%,特异度分别为99.87%、100.00%;4例ELISA反应性CLIA阴性标本经确认为阴性,1例NAT反应性标本确认为反应性。TP抗体检测结果,ELISA、CLIA检测的灵敏度分别为40.00%、90.00%,特异度分别为99.84%、99.97%;12例ELISA反应性CLIA阴性标本确认阴性11例,反应性1例;8例ELISA阴性CLIA反应性标本有6例确认为反应性,2例为阴性。结论:CLIA检测血液标本的HBsAg和TP抗体具有较高的灵敏度和特异度。

血清CA19-9CLIA法检测的临床应用

目的探讨血清CA19-9化学发光免疫分析(CLIA)检测的临床应用价值。方法回顾分析1243例患者(其中恶性肿瘤511例、非肿瘤疾病732例)与253例健康对照组的血清CA19-9CLIA法检测水平。结果恶性肿瘤中,胰腺癌、胆囊及胆管癌、结直肠癌、胃癌、肝癌、肺癌、乳腺癌等患者血清CA19-9均值及阳性率均显著高于正常对照组(P<0.01);非肿瘤疾病中,胰腺炎、胆囊及胆管疾病、肝硬化等患者血清CA19-9均值及阳性率显著高于正常对照组(P<0.01);胃肠道疾病、肝炎、肺炎、乳腺非肿瘤疾病等患者血清CA19-9均值及阳性率与正常对照组差异均无显著性(P>0.05)。胰腺癌组、胆囊及胆管癌组、结直肠癌组、胃癌组、肺癌组、乳腺癌组CA19-9均值及阳性率分别显著高于其相对应非肿瘤疾病组(P<0.01)。肝癌组均值及阳性率均显著高于肝硬化组及肝炎组(P<0.01),肝硬化组均值及阳性率均显著高于肝炎组(P<0.01)。结论血清CA19-9CLIA法检测可作为速检项目为临床鉴别诊断胰腺癌、胆囊及胆管癌、结直肠癌、胃癌、肝癌、肺癌、乳腺癌等恶性肿瘤及胰腺炎、胆囊及胆管非肿瘤疾病、肝硬化等疾病提供快速可靠的依据。

超灵敏TSHCLIA动态监测在预测甲亢复发中的临床意义

目的 :采用超灵敏TSH 化学发光免疫分析方法 (TSH CLIA) ,动态监测甲亢患者血清TSH浓度 ,探讨其在预测甲亢复发中的意义。方法 :分为短疗程停药观察组 (A组 )和甲亢缓解组 (B组 ) ,A组 12例 ,抗甲亢药物治疗少于 1年。B组 8例 ,常规抗甲亢药物治疗 1.5年。结果 :A组 6例动态观察半年后FT3 .FT4同时升高。B组TSH <0 .1mIU/L 2例 ,随访 1年 ,有 1例FT3 升高。结论 :TSH <0 .1mIU/L的甲亢患者应定期监测TSH .FT3 .FT4。TSH CLIA可预测甲亢复发病例且优于FT3 .FT4。

化学免疫分析结核γ-干扰素释放试验在肺结核诊断中的价值探究

目的 分析化学免疫分析结核γ-干扰素释放试验在肺结核诊断中应用的价值。方法 选取2020年1月—2023年4月江苏省淮安市楚州中医院接受检查的109例疑似肺结核患者作为研究对象,全部研究对象均行结核菌素皮肤试验和化学免疫分析结核γ-干扰素释放试验,将抗酸染色试验的结果为金标准,比较两种检测方式在肺结核诊断中的应用结果及诊断效能。结果 结核γ-干扰素释放试验在肺结核诊断中真阳性例数多于结核菌素皮肤试验。化学免疫分析结核γ-干扰素释放试验的灵敏度(94.74%)和准确度(93.58%)高于结核菌素皮肤试验的84.21%、81.65%,差异有统计学意义(χ^(2)=5.588,7.144,P均<0.05)。结论 在肺结核疾病诊断中,应用化学免疫分析结核γ-干扰素释放试验具有较高价值,诊断结果与金标准较为接近,诊断效能较高。

O型口蹄疫病毒抗体高通量液相阻断CLIA检测方法的建立

为了能更高效和准确地对口蹄疫疫情进行诊断监测,建立了O型口蹄疫病毒抗体高通量液相阻断化学发光免疫定性检测方法(Liquid-phase blocking CLIA,LPB-CLIA)。通过以单一稀释倍数稀释样本进行检测,计算抑制率作为检测结果,将检测通量提高了5倍左右。应用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)确定试验最佳临界值为62.5%。重复性实验结果显示方法批内CV小于10%,批间CV小于15%。通过对326份田间血清样本检测结果与LPB-ELISA检测结果对比,敏感性为94.6%,特异性为95.6%,检测准确度为95.1%。建立的LPB-CLIA方法敏感性和特异性良好,缩减了时间和经济成本,为国内口蹄疫的检疫提供了新的方法。

应用回归方程设置CLIA法检测梅毒抗体的灰区范围

目的研究化学发光免疫分析(CLIA)法检测梅毒抗体时S/CO值与阳性预测值的相关关系,建立两者间的回归方程,并应用于设置该方法的灰区范围,以应对检测结果出现假阳性的问题。方法收集CLIA法检测梅毒抗体呈阳性(S/CO值≥1)的血清标本878例,按照S/CO值在1~<3、3~<5、5~<7、7~<9、9~<11、≥11的范围将所有标本分为6个组;以梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)为确证试验对各组标本梅毒抗体进行确认检测,计算各组标本CLIA法的阳性预测值;用SPSS20.0统计软件对CLIA法S/CO值与阳性预测值的关系进行曲线估计,获取最佳曲线模型并建立回归方程,通过回归方程设置CLIA法检测血清梅毒抗体的灰区范围。结果878例CLIA法检测梅毒抗体呈阳性的血清标本,经TPPA检测确认阳性(包括弱阳性)779例,阴性99例;S/CO值在1~<3、3~<5、5~<7、7~<9、9~<11、≥11这6个组的阳性预测值分别为50.77%、79.28%、89.28%、97.80%、98.57%、100.00%;回归分析显示CLIA法S/CO值与阳性预测值的关系呈S型曲线,回归方程为Y=e-1.692/X+0.174,CLIA法检测梅毒抗体的灰区范围设置为1≤S/CO值≤7.52。结论通过建立CLIA法S/CO值与阳性预测值的回归方程,可以为该方法检测梅毒抗体设置较为理想的灰区范围,并可以对检测的假阳性状况进行评估。

克伦特罗的CLIA分析试剂盒的研制

通过制备克伦特罗（Clenbuterol，CL）人工抗原获得高活性抗体，用辣根过氧化物酶（HRP）标记CL抗原，以鲁米诺（luminol）为发光底物，建立直接竞争法检测分析盐酸克伦特罗，并对包被液、包被条件、封闭蛋白、孵育时间、酶用量等参数进行优化，成功研制出化学发光法检测CL试剂盒。该方法的线性检测范围0.1~8.1 ng·mL-1，线性相关系数r=0.996，IC50值为0.607 ng·mL-1；理论检测限小于0.1 ng·mL-1；批内变异系数6.76%~8.31%；批间变异系数7.4%；回收率（90±15）%，与莱克多巴胺等其他β-激动剂不发生交叉反应。

ELISA、TPPA和CLIA三种检测方法在血清梅毒螺旋体特异性抗体检测中的应用观察

目的比较3种检测方法在血清梅毒螺旋体特异性抗体检测中的应用效果.方法 2016年2月至2018年2月本院住院和门诊共检测了10600个标本,首先用磁微粒化学发光法(CLIA)检测到梅毒特异性抗体阳性200例,然后对这200例标本用ELISA法进行检测,并以TPPA法为标准对检测结果进行确认分析,比较3种检测方法的阳性检测率、灵敏度、特异性、总符合率.结果CLIA法检测阳性率虽较高,但CLIA、TPPA及ELISA 3种检测方法对梅毒螺旋体特异性抗体阳性检测率比较差异无统计学意义,CLIA检测灵敏度显著高于ELISA法(P<0.05),特异性与总符合率均高于ELISA法,但差异无统计学意义.结论CLIA法对梅毒螺旋体特异性抗体阳性检测灵敏性较高,特异性与ELISA法近似.

乙型肝炎病毒血清学检验中应用CLIA和ELISA的作用及检出率分析

目的观察、分析乙型肝炎病毒血清学检验中采取CLIA(化学发光免疫分析法)和ELISA(酶联免疫吸附法)的临床效果。方法选取2018年1月至2020年1月于本院就诊的疑似乙型肝炎病毒患者研究,统计86例,视实时荧光定量PCR检测所得结果为金标准,分别采用CLIA、ELISA就血清学标志物(表面抗原、e抗原、e抗体及核心抗原、表面抗体)展开测定,比较不同方法诊断效能,同时统计相关标志物的检出率。结果相比于ELISA检测,CLIA检测精准性、阴性预估值及敏感度明显提高,组间对比P<0.05,两组特异度、阳性预估值比较P>0.05;CLIA于血清学标志物检出率较ELISA高,组间对比P<0.05。结论乙型肝炎病毒血清学检验中采取CLIA(化学发光法)具较高的检出率,可辅助临床制订诊疗方案,并为预后评估提供有力依据,值得推广。

CLIA'88推荐精密度目标在生化室内质控中的应用价值

目的探讨CLIA'88推荐精密度目标应用于生化室内质量控制(质控)中的价值,为生化室内质控寻求一个更为有效的方式。方法将引进自美国的CLIA'88推荐精密度目标应用于生化室内质控中,依次循环5个月后,将所获得的平均值与标准差作为此批号质量控制产品在有效期以内的常规值与标准差,应用于常规生化室内质控中。结果通过两幅质控图对比可看出,前者均优于后者,表明CLIA'88推荐精密度目标在生化室内质控应用中的失误率较低,随机误差检出特异性较常规生化室内质控图高,通过累计滚动方式得出的平均值与标准差与相关报道一致。根据CLIA'88推荐精密度目标所得出标准差制定的质控图的变异系数(CV)与当前生物学变异质量规范呈正相关,对直接观察室内质控产品缺乏精密情况,比较以滚动方式累计而成的标准差有重要作用。结论 CLIA'88推荐精密度目标比以往生化室内质控更为经济,且具有低失控、误差检测特异性良好的特点,对不符合检测标准的项目有积极意义。

核酸反应性标本9例与对应ELISA、CLIA法检测HBV的关联分析

目的:分析核酸反应性标本和对应ELISA、CLIA法检测HBV的关联性。方法:选取2017年1月-2018年1月无偿献血者1000例,提供核酸检测,同时对核酸反应性标本提供CLIA法检测。结果:通过核酸检测出HBV DNA反应性标本9例,没有检测出HCV RNA及HIV RNA反应性标本,其中属于ELISA法阴性高值标本1例;9例核酸反应性标本对应CLIA法HBV两对半检测产生HBsAg(-)抗-HBc(+)2例,HBsAg(-)抗-HBc(+)抗-HBe(+)血清型6例,剩余无反应性1例,怀疑为窗口期标本。结论:对于无偿献血者血液开展核酸检测以及ELISA法检测存在互补性,核酸检测能够良好弥补ELISA法检测窗口期问题,核酸检测和ELISA法检测存在相同结果,将影响血液质量的ELISA法阴性高值标本淘汰,能够有效减少输血感染的出现风险。

莱克多巴胺CLIA分析试剂盒的研制

通过制备莱克多巴胺-牛血清白蛋白偶联物（Ractopamine-BSA, RAC-BSA）人工抗原，制备并获得高活性单克隆抗体，用辣根过氧化物酶（HRP）标记RAC抗原，以鲁米诺（luminol）为发光底物，建立直接竞争法检测分析莱克多巴胺，并对包被液、包被条件、封闭蛋白、孵育时间、酶用量等参数进行优化，成功研制出化学发光法检测RAC试剂盒。该方法的线性检测范围可达0.1～10.0 ng/mL，线性相关系数r=0.998，IC50值为0.763 ng/mL；理论检测限小于0.1 ng/mL；批内变异系数7.62%~8.65%；批间变异系数8.15%；回收率在85%±15%，与常见的克伦特罗等其他β-激动剂不发生交叉反应。