膝骨关节炎不同证候患者关节液BMP-2和CTGF浓度特点及其与证候程度间的相关性研究

目的研究膝骨关节炎肝肾亏虚证和痰瘀互结证患者关节液骨形态发生蛋白-2(BMP-2)和结缔组织生长因子(CTGF)的浓度特点及其与证候程度间的相关性。方法留取并测定89例膝骨关节炎不同证候患者关节液BMP-2和CTGF的浓度,应用中医证候评分量表量化证候程度,分析关节液BMP-2和CTGF的浓度特点及其与证候程度间的相关性。结果膝骨关节炎痰瘀互结证和肝肾亏虚证患者年龄、身高、体质量、生命体征、病程比较上差异未见统计学意义(P>0.05);膝骨关节炎肝肾亏虚证患者关节液BMP-2的浓度水平显著高于痰瘀互结证患者(z=-2.212,P<0.05);膝骨关节炎肝肾亏虚证患者关节液CTGF的浓度水平显著低于痰瘀互结证患者(z=-2.072,P<0.05);膝骨关节炎肝肾亏虚证患者关节液CTGF浓度水平与中医证候评分呈负相关(r^(2)=0.240,P<0.05)。结论膝骨关节炎痰瘀互结证和肝肾亏虚证患者关节液BMP-2和CTGF浓度特点不同,肝肾亏虚证患者关节液CTGF浓度可以在一定程度上反映其证候的严重程度,上述发现与中医病因病机的分析相一致,其作用机制可能与转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路的激活程度不同有关。

舒肝化癥方对肝纤维化模型大鼠VEGF、CTGF、CD31及vWF表达的影响及其相关性研究

目的:以四氯化碳(CCl_(4))致大鼠肝纤维化为研究对象,研究舒肝化癥方(SGHZD)对大鼠肝纤维化血瘀证的影响及机理,分析血管内皮生长因子(VEGF)、结缔组织生长因子(CTGF)、血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)及血管性血友病因子(vWF)在SGHZD抗肝纤维化过程中的表达及其相关性。方法:SPF级SD大鼠,雄性,54只,按随机原则分成空白组、模型组(2.0 mg/kg 40%CCl_(4)橄榄油溶液+等量的0.9%的生理盐水)、阳性对照组(2.0 mg/kg 40%CCl_(4)橄榄油溶液+0.2 mg/kg秋水仙碱溶液)、SGHZD高剂量组(2.0 mg/kg 40%CCl_(4)橄榄油溶液+29.52g/kgSGHZD)、SGHZD中剂量组(2.0 mg/kg 40%CCl_(4)橄榄油溶液+14.76 g/kgSGHZD)和SGHZD低剂量组(2.0 mg/kg 40%CCl_(4)橄榄油溶液+7.38 g/kgSGHZD),各9只。造模时间为8周,每周2次,从造模第2天起,用药治疗每天1次,治疗8周,实验期间动态监测所有大鼠的生理情况,马松染色(Masson)对肝组织病理形态学变化和胶原纤维沉积情况进行观察,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测VEGF、CTGF、CD31、vWF mRNA的表达水平,Western blot检测VEGF,CTGF,CD31,vWF的蛋白表达。结果:与空白组相比,模型组大鼠整体状况明显下降,Masson染色结果显示大鼠汇管区和中央静脉区形成假小叶,并伴有纤维间隔形成,胶原纤维沉积增多且有显著意义(P<0.05);RT-qPCR、Western blot结果显示,VEGF、CTGF、CD31、vWF mRNA和蛋白表达均上升(P<0.05);与模型组相比,阳性对照组和SGHZD组各剂量Masson染色显示胶原纤维沉积明显减少,纤维间隔程度减轻,差异有统计学意义(P<0.05),RT-qPCR、Western blot结果显示VEGF、CTGF、CD31、vWF mRNA及蛋白的表达量均下降,但以阳性对照组及中药高剂量组效果最好(P均<0.05);将Masson染色胶原容积分数分别与VEGF、CTGF、CD31及vWF蛋白表达进行相关性分析,发现VEGF、CTGF、CD31及vWF在肝纤维化的形成过程中随着肝纤维化程度加重其表达上调,而在SGHZD抗肝纤维化过程中随着胶原容积分数减少其表达减少;对VEGF、CTGF、CD31及vWF蛋白表达进行相关性分析,发现VEGF、CTGF、CD31及vWF在肝纤维化的形成发展中和SGHZD抗肝纤维化的过程中均呈显著正相关。结论:SGHZD对CCl_(4)所致肝纤维化大鼠有显著疗效,其作用机理可能与VEGF、CTGF、CD31及vWF的表达、病理性血管生成、肝窦毛细血管化及肝纤维化血瘀证相关。

miR-21、NT-proBNP、CTGF在心房颤动患者中的表达及对预后的预测价值分析

目的分析miR-21、氨基末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)、结缔组织生长因子(Connective tissue growth factor,CTGF)在心房颤动(Atrial fibrillation,AF)患者中的表达及对预后的预测价值。方法纳入2020年1月~2022年1月100例治疗的AF患者为研究对象,作为房颤组,另选取50例健康人作为对照组。对比2组研究对象miR-21、NT-proBNP、CTGF水平,比较miR-21、NT-proBNP、CTGF在房颤未复发与复发患者中的表达情况;绘制ROC曲线评价3者联合检测对AF患者复发情况的预测价值。结果2组研究对象基线资料对比,高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、Cr、hs-CRP、D-二聚体对比,差异具有统计学意义(P<0.05)。房颤组miR-21、NT-proBNP、CTGF水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。持续性房颤患者miR-21、NT-proBNP、CTGF水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。1年内复发患者miR-21、NT-proBNP、CTGF水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示:3者联合检测预测AF患者1年复发的灵敏度(94.2%)、特异度(91.8%)、AUC(93.4%)均高于单一指标检测。结论miR-21、NT-proBNP、CTGF在AF患者中表达明显增加,与AF持续时间呈正相关;miR-21、NT-proBNP、CTGF在AF复发组患者中表达水平明显升高,且三者联合对AF患者术后复发有预测价值。

益气化瘀通络法提高输卵管积液经微创疏通术后的临床疗效及抑制TGF-β1、CTGF的表达作用研究

【目的】探讨益气化瘀通络法对输卵管积液经微创疏通术(腹腔镜下输卵管伞端造口术)后的临床疗效及可能的作用机制。【方法】选取海口市中医医院2014年2月~2020年2月因不孕症经宫腔镜检查以及腹腔镜探查术确诊为双侧输卵管轻、中、重度积液患者各80例,分别设为A、B、C组,共计240例。根据治疗方式不同将A组患者分为A1、A2组,将B组患者分为B1、B2组,将C组患者分为C1、C2组,每组各40例。其中,A1、B1、C1为观察组,A2、B2、C2组为对照组。对照组患者单纯给予腹腔镜下输卵管伞端造口术治疗,观察组患者在对照组的基础上给予益气化瘀通络法治疗,每个月经周期服药半个月,共治疗3个月经周期并随访1年。比较观察组与对照组患者治疗后1年内的总妊娠率、活产率、异位妊娠率、流产率及复发率的差异,同时对比观察组与对照组患者术后7 d和术后3个月血清转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)水平的变化情况。【结果】(1)术后随访1年,观察组的轻度(A1组)、中度(B1组)、重度(C1组)输卵管积液患者的总妊娠率、活产率分别高于相同程度的对照组(A2、B2、C2组)患者,复发率分别低于相同程度的对照组(A2、B2、C2组)患者,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),而2组不同程度输卵管积液患者间的异位妊娠率和流产率比较(A1&A2,B1&B2,C1&C2),差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)术后7 d,观察组与对照组的不同程度输卵管积液患者的血清TGF-β1、CTGF水平比较(A1&A2,B1&B2,C1&C2),差异均无统计学意义(P>0.05)。术后3个月,2组患者的血清TGF-β1、CTGF水平均较术后7 d明显降低(P<0.05),且观察组的轻度(A1组)、中度(B1组)、重度(C1组)输卵管积液患者对血清TGF-β1、CTGF水平的降低作用均明显优于相同程度的对照组(A2、B2、C2组)患者,差异均有统计学意义(P<0.01)。【结论】益气化瘀通络法能提高输卵管积液经微创疏通术后的疗效,显著提高患者的妊娠率、活产率,降低患者的复发率,其作用机制可能与抑制血清TGF-β1、CTGF的表达有关。

卡格列净对糖尿病肾病的保护作用及对TGF-β1和CTGF表达的影响

目的探讨卡格列净对糖尿病肾病的保护作用机制及对转化生长因子(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法建立对照组、糖尿病肾病组、卡格列净干预组3种大鼠模型,前2组给予蒸馏水灌胃,卡格列净干预组给予卡格列净灌胃,观察大鼠血糖及尿蛋白变化情况,持续灌胃37 d后处死大鼠;采用qRT-PCR方法检测肾脏组织中TGF-β1、CTGF基因表达水平,采用Westerm blot方法检测肾脏组织中TGF-β1、CTGF蛋白表达水平,观察3组间基因及蛋白的表达水平。结果卡格列净干预组在给药第18天后血糖水平明显低于糖尿病肾病组(P<0.05);卡格列净干预组处死前的尿蛋白定量水平明显低于糖尿病肾病组(P<0.05);糖尿病肾病组、卡格列净干预组的TGF-β1及CTGF的基因表达水平、大鼠肾脏组织中的TGF-β1及CTGF蛋白表达水平均明显高于对照组(P<0.05),卡格列净干预组的TGF-β1及CTGF的基因表达水平、大鼠肾脏组织中的TGF-β1及CTGF蛋白表达水平明显低于糖尿病肾病组(P<0.05)。结论卡格列净通过降低TGF-β1及其下游因子CTGF的表达水平,发挥糖尿病肾病保护作用。

TGFBR2、TGF-β1及CTGF在盆腔器官脱垂患者子宫韧带组织中的表达及意义

目的 研究转化生长因子β受体2(transforming growth factor β receptor 2,TGFBR2)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)及结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)在盆底器官脱垂(pelvic floor organ prolapse,POP)患者子宫韧带组织中的表达及意义。方法 选取山西医科大学第二医院妇产科2020年10月至2022年10月收治的20例POP患者子宫主韧带及骶韧带组织为POP组,另选取20例因子宫肌瘤同期在该院行腹腔镜下全子宫切除术患者的主韧带及骶韧带组织为对照组。HE染色观察子宫主、骶韧带胶原纤维及成纤维细胞状态,并使用Masson染色进一步观察胶原纤维形态,免疫蛋白印迹法(Western blot)检测TGFBR2、TGF-β1、CTGF、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)及Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)的蛋白表达水平。另选取4例POP患者和5例子宫肌瘤患者骶韧带进行全基因转录组测序,从转录组测序结果中筛选出参与胶原代谢且显著低表达的TGFBR2基因,并对TGFBR2基因可能影响的TGF-β1及CTGF基因从蛋白表达及mRNA转录水平进行分析;采用Spearman相关分析对TGFBR2与TGF-β1和CTGF的mRNA相对表达水平进行相关性分析。结果 (1)POP组及对照组患者的年龄、孕产次、体质量指数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin staining,HE)染色显示POP组韧带组织胶原细胞数量较对照组明显减少且排列紊乱,Masson染色显示POP组韧带组织纤维结缔组织断裂呈片状,排列紊乱且结构疏松,数量较对照组明显减少。(2)基因转录组测序结果显示POP患者骶韧带组织与子宫肌瘤患者骶韧带组织基因转录组水平相比有98个基因显著低表达,其中TGFBR2基因显著低表达,差异有统计学意义(P_(调整)=0.013)。(3)Western blot检测显示:POP组韧带组织中TGFBR2、TGF-β1、CTGF、CollagenⅠ及CollagenⅢ的蛋白相对表达量均较对照组降低(P<0.001)。(4)实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)结果显示:POP组韧带组织中TGFBR2、TGF-β1、CTGF基因mRNA相对表达量均较对照组降低(P<0.05),TGFBR2与TGF-β1呈正相关(r=0.611,P=0.016),且TGFBR2与CTGF也呈正相关(r=0.667,P=0.04)。结论 盆底器官脱垂患者盆底韧带中TGFBR2、TGF-β1、CTGF在mRNA转录水平及蛋白表达水平上均降低,TGFBR2可能通过调控TGF-β1/CTGF基因通路影响纤维代谢参与POP发病。

子宫肌瘤患者血清CTGF、miR-26a手术前后变化及对术后复发的评估价值

目的探讨子宫肌瘤患者血清结缔组织生长因子(CTGF)、微小RNA(miR)-26a手术前后变化,并分析两者对术后复发的评估价值。方法选取2020年1月至2021年10月子宫肌瘤患者126例为研究对象,均采用手术治疗。入院时、出院前1 d检测血清CTGF、miR-26a水平,统计术后6个月复发率。分析血清CTGF、miR-26a与术后复发的关系,并采用受试者工作特征(ROC)曲线、决策曲线(DCA)、临床影响曲线分析血清CTGF、miR-26a在术后复发中的评估价值。结果出院前1 d患者血清CTGF水平低于入院时,miR-26a水平高于入院时(P<0.05);126例患者术后随访6个月,复发率为18.03%(22/122)。Logistic回归分析模型结果显示,调整混杂因素条件下,CTGF高表达患者术后复发风险是CTGF低表达的2.305倍,miR-26a高表达患者术后复发风险是miR-26a低表达的0.336倍;在模型2和模型3中,CTGF高表达患者术后复发风险分别是CTGF低表达的2.684、2.823倍,miR-26a高表达患者术后复发风险分别是miR-26a低表达的0.254、0.216倍。交互作用分析结果显示,CTGF与miR-26a对子宫肌瘤患者术后复发存在拮抗作用,两者联合评估子宫肌瘤术后复发对应AUC值大于单独评估效能(P<0.05)。经DCA比较不同模型,在阈值0.34~0.87范围内,CTGF、miR-26a联合评估子宫肌瘤术后复发的净受益率优于单独检测,被联合检测方案划分为高风险的人数与真阳性例数在阈值概率为0.45时,两者基本达到一致。结论血CTGF、miR-26a水平异常均会增加子宫肌瘤术后复发风险,且两者相加交互作用可显著增加复发风险,可为临床早期评估术后复发提供参考。

血清CTGF、IL-6、RLN水平与产后盆底功能康复效果的关系分析

目的 探讨血清结缔组织生长因子(CTGF)、白介素-6(IL-6)、松弛素(RLN)水平与产后盆底功能康复效果的关系。方法 选取2020年12月至2022年12月海口市妇幼保健院产后康复科收治的150例产后盆底功能障碍(PFD)患者作为研究对象,对研究对象进行盆底肌功能训练联合生物反馈治疗,持续治疗6周后按照MLD B42盆底表面肌功能评分将患者分为有效组(n=103)和无效组(n=47),采用多因素Logistic回归分析产后盆底功能康复效果不佳的独立影响因素;采用受试者工作特征曲线(ROC)评估血清CTGF、IL-6、RLN检测对产后盆底功能康复效果的诊断效能。结果 两组的产次、分娩方式、新生儿出生体重、血清CTGF、IL-6、RLN水平比较,差异具有统计学意义(χ^(2)=11.687、3.838、10.371,t=42.549、34.995、2.021,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,产次>1次、新生儿出生体重≥3 500 g、CTGF、IL-6、RLN为PFD患者产后盆底功能康复效果的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清CTGF、IL-6、RLN单独检测诊断产后盆底功能康复效果的曲线下面积(AUC)为0.965、0.912、0.598。结论 血清CTGF、IL-6、RLN与孕妇产后盆底功能康复效果密切相关,且血清CTGF、IL-6单独检测对产后盆底功能康复效果具有较高的诊断效能,值得推广使用。

牛磺酸抑制心肌纤维化作用

目的探讨牛磺酸(Tau)对异丙肾上腺素(Iso)诱导大鼠心肌纤维化(MF)的作用,并阐明其可能的作用机制。方法Wistar大鼠50只,体质量200~250 g,雌、雄各半。随机将Wistar大鼠分为对照组,模型组(Iso组),Tau低(60 mg/(kg·d))、中(120 mg/(kg·d))、高(240 mg/(kg·d))剂量组,每组10只。建立Iso大鼠MF模型,即大鼠背部注射Iso5 mg/(kg·d),连续10 d;对照组注射等体积生理盐水;Tau各剂量组于造模的第2天开始腹腔注射(Tau)给药,1次/d,连续14 d。计算各组大鼠心脏质量指数;HE染色观察心肌组织病理学改变;Masson染色法计算心肌组织胶原百分比;qRT-PCR检测心肌组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白及结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达。结果Iso组大鼠心脏质量指数显著高于对照组(P<0.05);低、中和高剂量Tau组与模型组比较大鼠心脏质量指数显著降低(P<0.05),且具有浓度依赖性。HE染色结果显示:Iso组大鼠心肌组织中出现典型的MF病理变化;低、中和高剂量Tau组大鼠上述病理变化程度显著改善,且与浓度具有正相关关系。与对照组比较,Iso组大鼠心肌胶原百分比显著高于对照组(P<0.05);与Iso组比较,低、中和高剂量Tau能够显著降低大鼠心肌胶原蛋白百分比(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,Iso组大鼠心肌组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白及CTGF mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.01);与Iso组比较,低、中和高剂量Tau能够明显降低Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白及CTGF mRNA表达水平(P<0.05)。结论Tau可显著降低大鼠心脏质量指数,改善各组大鼠心脏组织病变程度,降低心肌组织中Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白及CTGF mRNA表达水平,具有抑制大鼠MF的作用。

TGF-β1、PDGF、CTGF在尘肺病患者血清中的表达水平变化及意义

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)、血小板源性生长因子(PDGF)、结缔组织生长因子(CTGF)在尘肺病发生、发展中表达水平的变化及其意义。方法采用双抗体夹心法,测定70例尘肺病患者(其中包括29例矽肺病患者和41例煤工尘肺病患者)和77例健康对照者血清TGF-β1、PDGF、CTGF的表达水平。结果尘肺病患者血清TGF-β1、PDGF、CTGF含量分别为(44.95±23.72)ng/mL、(56.95±55.68)ng/mL、(346.70±259.49)pg/mL,对照组则分别为(6.81±4.99)ng/mL、(30.96±21.63)ng/mL、(307.49±235.40)pg/mL,病例组与对照组血清TGF-β1、PDGF含量差异均有统计学意义(P<0.05),血清CTGF含量在两组间差异无统计学意义(P>0.05);矽肺病患者血清TGF-β1、PDGF含量均高于煤工尘肺病患者,差异有统计学意义(P<0.05);尘肺病患者血清TGF-β1、PDGF含量随着期别的增加而降低,差异有统计学意义(P<0.05);两变量相关分析显示TGF-β1与PDGF、CTGF与PDGF呈正相关关系(P<0.05)。结论血清TGF-β1、PDGF表达水平与尘肺病的发生发展、病理类型及严重程度密切相关。

海昆肾喜对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用及其对肾组织CTGF蛋白表达的影响

目的:探讨海昆肾喜对糖尿病肾病大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达的影响。方法:60只大鼠随机分为2组,正常组10只,造模组50只。造模组采用空腹一次性腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病模型,模型组大鼠按55mg/kg,腹腔一次性注射链脲佐菌素,72h后血糖≥16.7mmol/L,尿糖≥4个+者为糖尿病造模成功。将造模成功的大鼠按血糖高低随机分组,分为模型组、厄贝沙坦组、海昆小剂量组和海昆大剂量组,给药12周。第4、8、12周末收集大鼠24小时尿量及检测尿蛋白量。12周末处死大鼠,取血并分离血清检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和甘油三酯(TG)等,采用HE、Mallory染色观察肾组织病理改变,并应用免疫组化检测肾组织CTGF蛋白的表达。结果:海昆肾喜能够降低糖尿病大鼠的蛋白尿,增加体质量,降低Scr和BUN,改善肾功能,调节TG,改善脂代谢紊乱,海昆肾喜能够明显减轻糖尿病肾病大鼠肾组织病理损害,并且能够降低糖尿病大鼠肾小管上皮细胞、肾间质细胞内的CTGF在细胞浆内的表达(P<0.01)。结论:海昆肾喜可能抑制CTGF蛋白的过度表达,进而减缓糖尿病肾病的病程进展。

灵芝多糖联合二甲双胍对2型糖尿病大鼠心肌AGEs及CTGF的影响及其机制

目的探讨灵芝多糖联合二甲双胍对2型糖尿病大鼠心肌纤维化的预防作用及其作用机制。方法 SD大鼠高脂饮食喂养4周后,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)30 mg·kg-1建立2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)模型。成模后将大鼠随机分为正常对照组、模型组、灵芝多糖组(灵芝多糖600 mg·kg-1)、二甲双胍组(二甲双胍600 mg·kg-1)及联合用药组(灵芝多糖300 mg·kg-1+二甲双胍300 mg·kg-1)。药物治疗12周末测量大鼠空腹血糖;饱和苦味酸-天狼猩红染色下观察心肌纤维化程度;荧光分光光度计法检测大鼠血清晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation end products,AGEs)的含量;测量心肌过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;免疫组化法和蛋白印迹法检测心肌组织AGEs及CTGF蛋白的表达。结果联合用药组可有效抑制心肌纤维化的病理进程,升高心肌组织CAT、GSH-Px水平及降低血清AGEs含量,减少心肌组织AGEs及CTGF的表达。结论灵芝多糖联合二甲双胍可能通过抑制心肌氧化应激,降低血清AGEs水平,以及下调心肌AGEs、CTGF的表达来预防心肌纤维化。

温补肾阳法对肾阳虚肺纤维化大鼠肺内CTGF表达的影响

目的探讨温补肾阳法治疗肾阳虚肺纤维化(PF)的作用及机制。方法 60只雄性6周龄Wistar大鼠采用随机数字表法分为正常组、模型组和干预组,采用一次性博来霉素A5气管插管给药加腺嘌呤连续灌胃28 d复制肾阳虚PF大鼠模型。正常组大鼠气管插管给予生理盐水加等渗生理盐水灌胃作为对照,模型组大鼠造模后生理盐水灌胃14 d,干预组大鼠造模后加味参附汤灌胃14 d,每组于实验第42天处死大鼠,留24 h尿液检测17-羟皮质类固醇(17-OH-CS)含量,同时,HE和MASSON染色观察肺纤维化程度,免疫组化法和Western印迹测定大鼠肺内结缔组织生长因子(CTGF)蛋白的表达,RT-PCR检测肺组织CTGF mRNA的表达。结果与正常组比较,肾阳虚肺纤维化模型大鼠尿17-OH-CS明显下降,模型大鼠肺组织内可见肺泡结构大量破坏,大量胶原沉积,干预组大鼠肺泡结构也基本消失,可见较多的胶原沉积,病理组织学表现明显轻于模型组。与正常组比较,模型组肺组织CTGF在肺内的表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,干预组大鼠肺内CTGF的表达降低(P<0.05)。结论肾阳虚PF大鼠肾阳虚症状明显,肺内纤维化表现明显,造模成功,加味参附汤可以改善大鼠肾阳虚症状,可能通过抑制CTGF蛋白表达而缓解肺内胶原的进一步沉积减缓肺纤维化的发展。

益气消癥通络方对慢性阻塞性肺疾病血管重塑模型大鼠VEGF、ET-1和CTGF表达的影响

目的:探讨益气消癥通络方对慢性阻塞性肺疾病(COPD)血管重塑模型大鼠血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)、内皮素-1(ET-1)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:60只Wistar大鼠随机分为6组:空白组(n=10)、模型组(n=10)、西药组(n=10)、益气消癥通络方低剂量组(n=10)、中剂量组(n=10)及高剂量组(n=10)。造模采用香烟烟雾暴露联合气道注入脂多糖(LPS)法制备COPD血管重塑大鼠模型。实验第4天起,模型组大鼠按10 mL/(kg·d)给予生理盐水灌胃;西药组大鼠雾化吸入布地奈德混悬液(剂量按体表面积换算为成人量的6.17倍),1次/d;中药组干预分别按照益气消癥通络方低剂量组[17.89 g/(kg·d)]、中剂量组[35.78 g/(kg·d)]、高剂量组[53.67 g/(kg·d)]灌胃给药,共12周。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清VEGF、ET-1、CTGF水平。结果:大鼠肺血管病理改变显示COPD血管重塑大鼠模型造模成功。ELISA检测结果:与正常组大鼠血清VEGF、ET-1、CTGF表达水平相比,其余各组均升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组VEGF、ET-1、CTGF表达水平相比,西药组的VEGF、ET-1含量表达下降,差异有统计学意义(P<0.01),益气消癥通络方低剂量组、中剂量组及高剂量组的VEGF、ET-1、CTGF表达水平明显均有下降趋势,差异有统计学意义(P<0.01);与西药组大鼠血清VEGF、ET-1、CTGF水平比较,益气消癥通络方低剂量组ET-1、CTGF表达水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05),中剂量组及高剂量组VEGF、ET-1、CTGF含量均下降,差异均有统计学意义(P<0.05);与益气消癥通络方高剂量组比较,西药组、低剂量及中剂量组差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:益气消癥通络方能够通过降低VEGF、ET-1、CTGF表达水平,干预COPD血管重塑,其中益气消癥通络方高剂量效果更为显著。

泄浊化瘀饮联合氯沙坦治疗早中期慢性肾衰竭疗效及对CTGF、BMP-7的影响

目的：探讨泄浊化瘀饮联合氯沙坦治疗早中期慢性肾衰竭疗效及对CTGF、BMP-7的影响。方法：120例早中期慢性肾衰竭患者,以随机数字表法分为对照组（60例）和观察组（60例）,分别给予氯沙坦单用和在此基础上加用泄浊化瘀饮辅助治疗;比较两组患者近期疗效,治疗前后中医证候积分、24 h尿蛋白定量、尿素氮、肌酐、e GFR、CTGF及BMP-7水平等。结果：观察组患者近期疗效显著优于对照组（P〈0.05）;观察组患者治疗后中医证候积分均显著低于对照组、治疗前（P〈0.05）;观察组患者治疗后肾脏功能指标水平均显著优于对照组、治疗前（P〈0.05）;观察组患者治疗后CTGF和BMP-7水平均显著优于对照组、治疗前（P〈0.05）。结论：泄浊化瘀饮联合氯沙坦治疗早中期慢性肾衰竭可有效改善临床症状体征,提高肾脏功能,并有助于调节CTGF和BMP-7水平。

实验性糖尿病鼠大血管病变TGF-β1和CTGF的表达及中药的干预作用

[目的]通过观测实验性糖尿病鼠大血管病变中转化生长因子(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)相关表达,揭示糖尿病大血管病变的发病机制。并通过中药干预的观察,明确中药在预防和治疗糖尿病大血管病变的靶点。[方法]雄性SD大鼠80只,其中正常对照组10只,70只造糖尿病模型并随机分为5组:模型组(n=14),中药高、中、低剂量组(n=14),二甲双胍组(n=14)。6组大鼠均予普通饲料加干预喂养12周后,取股动脉,应用免疫组化法观察糖尿病(DM)大鼠大血管中CTGF、TGF-β1表达的部位及其变化。[结果]TGF-β1主要在胞浆中表达。模型组TGF-β1表达呈强阳性反应,中药干预组TGF-β1表达明显下降(P<0.01),二甲双胍对TGF-β1表达有影响,但与中药高剂量组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。CTGF在模型组血管管壁下层细胞浆可见大量棕黄色物质表达呈强阳性反应,各药物干预组血管细胞CTGF表达都明显下降(P<0.01),中药高剂量组与西药对照组表达比较差异有统计学意义。[结论]1)糖尿病大血管病变可能与纤维化有关。2)中药组方加味桃核承气汤能有效降低致纤维化因子TGF-β1、CTGF在实验性糖尿病鼠大血管病变中的表达。其对DM大血管病变有改善作用,并存在剂量依赖关系。

肺纤维化前期肺组织中ICAM-1、TGF-β、CTGF的表达及其镜下形态改变的动态观察

目的动态观察博莱霉素诱发大鼠肺纤维化模型从肺损伤到肺纤维化前期肺组织中细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)水平的变化,探讨肺纤维化前期的发病机制。方法雌性SD大鼠108只,随机分为肺纤维化模型组、内毒素组、空白对照组(每组36只),并于干预后第3、7、14天取各组肺组织进行免疫组化SABC法观察。结果造模后各组TGF-β、ICAM-1、CTGF的表达依次为空白对照组<内毒素组<肺纤维化模型组。肺纤维化模型组显著高于空白对照组及内毒素组(P<0.05)。光镜下观察空白对照组中肺组织结构正常;肺纤维化模型组第7天未见明显肺纤维化改变,第14天VG染色可见少量胶原纤维形成;内毒素组第7天有轻度肺泡炎,第14天肺泡炎消失。结论肺纤维化前期纤维化的发生与TGF-β、ICAM-1、CTGF三种细胞因子均有密切关系,三者可能起协同作用。

急性白血病治疗前后骨髓中VEGF、CTGF mRNA水平的研究

目的探讨血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、结缔组织生长因子(CTGF)m RNA在急性白血病患者骨髓表达及治疗前后变化情况,研究其在白血病发生发展、浸润转移中的相互作用和临床意义。方法 71例初发急性白血病患者,对照组30例缺铁性贫血患者。收集研究对象骨髓液单个核细胞,应用Real-time PCR方法对VEGF-C及CTGF m RNA表达水平进行检测。结果初发急性白血病患者骨髓中VEGF-C、CTGF m RNA表达明显高于对照组,两者呈正相关(r=0.709,P<0.05)。经1周期化疗后,达完全缓解患者及部分缓解患者与未治疗时比较,VEGF-C、CTGF m RNA表达水平明显降低(P<0.05),未缓解患者与初发时比较,差异无统计学意义(P>0.05)。VEGF-C、CTGF m RNA的表达在急性白血病骨髓增生不同程度各组及是否伴髓外浸润各组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 VEGF-C、CTGF在急性白血病发生发展中具有协同作用,共同参与了白血病的发生、浸润及转移,并且与白血病预后相关。

白血病患者骨髓中CTGF、CYR61、VEGF-C、VEGFR-2mRNA、蛋白的表达及其临床相关性研究

本研究旨在探讨白血病患者骨髓单个核细胞中结缔组织生长因子(CTGF)、富含半胱氨酸蛋白61(CYR61)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)mRNA及蛋白的表达水平以及它们在白血病发生、发展、浸润转移中的作用和临床意义。初发白血病100例患者,26例完全缓解后急性白血病患者,30例对照者纳入本研究。收集骨髓单个核细胞,应用real time PCR和Western blot分别检测白血病患者及对照者CTGF、CYR61、VEGF-C、VEGFR-2 mRNA及蛋白的表达水平。结果表明,急性白血病患者骨髓中上述4种因子mRNA、蛋白水平明显高于对照组(P<0.05)。急性白血病缓解后只有CTGF mRNA表达与对照组比较有差异(P<0.05),且CTGF mRNA表达在急性白血病不同骨髓增生中有统计学意义(P<0.05)。CTGF蛋白表达在白血病不同染色体核型组有差异(P<0.05),CYR61和VEGF-C蛋白表达在急性白血病不同程度骨髓增生组中比较差异有统计学意义(P<0.05)。CML组CTGF、CYR61、VEGF-C mRNA和蛋白表达高于对照组(P<0.05),CLL组CTGF和CYR61蛋白表达水平高于对照组。在性别、髓外浸润等因素分组比较中,上述4种因子mRNA和蛋白表达水平比较均无差异有统计学意义(P>0.05)。在相关性分析中,白血病患者上述4种因子mRNA表达水平与骨髓原始细胞计数呈正相关(P<0.05),CTGF、CYR61、VEGF-C蛋白表达水平与其呈正相关(P<0.05)。除了VEGFR-2与骨髓原始细胞计数无相关性外,这些因子的mRNA及蛋白表达水平与骨髓原始细胞计数呈正相关。结论:CYR61、CTGF、VEGF-C和VEGFR-2 mRNA和蛋白表达在急慢性白血病中都有作用。在急性白血病(AML/ALL)中上述4种因子高表达,在CML中除了VEGFR-2外其他因子也高表达,多数因子的表达与骨髓原始细胞计数呈正相关。联合阻断这些相关的血管性因子可能对白血病靶向治疗有重要作用。

细胞因子TGFβ1,CTGF和IFN-γ对系统性硬皮病克隆成纤维细胞胶原代谢的影响

目的研究细胞因子(TGFβ1,CTGF和IFN-γ)对系统性硬皮病具有不同胶原合成能力的克隆成纤维细胞胶原代谢的影响。方法采用实时荧光定量RT-PCR法检测细胞因子(TGFβ1,CTGF和IFN-γ)对系统性硬皮病具有不同胶原合成能力的克隆成纤维细胞Ⅰ型前胶原和MMP-1 mRNA水平的影响情况。结果 TGFβ1(5ng/mL)作用48h仅使具有低胶原合成能力的系统性硬皮病克隆成纤维细胞的Ⅰ型前胶原mRNA水平上升(1.20±0.50vs0.04±0.04,P=0.001);CTGF(20ng/mL),IFN-γ(100ng/mL)作用48h使系统性硬皮病克隆成纤维细胞MMP-1 mRNA水平下降(F=6.221,P=0.034;F=53.505,P=0.000),且具有高胶原合成能力的克隆成纤维细胞MMP-1 mRNA水平下降幅度大(F=8.817,P=0.016;F=8.092,P=0.019)。结论系统性硬皮病具有不同胶原合成能力的克隆成纤维细胞Ⅰ型前胶原和MMP-1 mRNA水平对细胞因子的反应存在异质性。