Ecological control of forest pest： a new strategy for forest pest control

In comparison with integrated pest management and chemical control, the authors put forward a new strategy of forest pest control, named ecological control of forest pest （ECFP）. This paper reviewed the development history, summarized the concept and principles of ECFP, discussed the technology and methods of ECFP, and evaluated the ECFP and its application conditions.

多聚甲醛固定对荧光蛋白分子间FRET效率的影响

目的：研究多聚甲醛固定对利用荧光共振能量转移（fluorescence resonance energy transfer，FRET）检测细胞中蛋白质相互作用的影响，解决运动能力较强的细胞中FRET效率检测的问题。方法：选用两个已知能够相互作用的蛋白分子TRA和TRB，将荧光蛋白ECFP和EYFP的编码基因通过融合PCR分别标记在其C端；将两个融合基因共转染靶细胞，一组细胞经低浓度（0．5％）多聚甲醛短时（0．5～1h）固定，另一组不固定，利用激光共聚焦扫描显微镜检测两个融合蛋白之间的FRET效率，比较其在两组细胞之间的差异情况。结果：经过统计学分析，在活细胞和经低浓度多聚甲醛短时间固定的细胞中，ECFP与EYFP之间的FRET效率没有显著差异。结论：低浓度短时间的多聚甲醛固定对于荧光蛋白分子之间的相互作用没有显著的影响，因此对于运动能力过强的细胞可以固定后再进行FRET检测。

小泛蛋白样修饰物双荧光融合蛋白及其特异性蛋白酶的原核表达及鉴定

本实验克隆了人的4种SENP(Sentrin-specific protease)C端催化结构域、3种SUMO(Smallubiq uitin-like modifer)、ECFP(Enhanced cyan fluorescent protein)以及EYFP(Enhanced yellow fluorescent protein)的基因,通过RecJoin克隆技术分别成功构建SENP和ECFP-SUMO-EYFP表达载体B28和B13。将表达载体转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,通过Ni-NTA离子交换柱层析纯化,进一步采用SDS-PAGE和Westernblotting分析鉴定,并以酶切实验初步分析了SENP相对于底物ECFP-SUMO-EYFP的酶切特异性。最终,SENP3C(SENP3 catalytic domain)截短表达,SENP5C以包涵体形式表达,其他蛋白均为可溶性表达,SDS-PAGE分析表明表达产物分子质量(Mr)与预期相符,Western blotting方法进一步证实其为目的蛋白。酶切实验初步鉴定了SENP1C和SENP2C的酶切特异性。以上蛋白的原核表达为荧光共振能量转移实验奠定了实验基础。