丁型肝炎病毒HDV-IgM筛查状况与感染患者临床特征分析

目的了解乙型肝炎人群丁型肝炎病毒感染筛查情况及感染患者临床特征。方法回顾性分析2014年1月至2023年10月我院乙型肝炎病毒感染(HBsAg阳性)患者丁型肝炎感染筛查(HDV-IgM)结果,分析筛查比例变化及阳性结果临床情况,收集丁型肝炎感染患者(HDV-IgM阳性)的临床资料,与HDV-IgM阴性乙型肝炎患者比较,总结丁型肝炎感染患者的临床特点。结果近10年乙型肝炎感染患者中HDV-IgM的平均筛查比例仅有3.60%(18533/514271),其中2014年的筛查比例最高,为6.67%(3407/51073),2020年的筛查比例最低,为1.84%(855/46413)。2014-2020年筛查比例呈逐年下降的趋势,2021年开始逐渐上升。HDV-IgM筛查阳性共45例,年龄(43.31±13.59)岁(1~80岁),男23例,女22例,其中有1例是乙肝阴性(HBsAg和HBV DNA均阴性)。地区分布是居住在北京的国际友人(主要为蒙古国)27例(60.00%);内蒙古自治区11例(24.44%);北京市4例(8.89%);河北省2例(4.44%);河南省1例(2.22%)。HDV-IgM阳性组与HDV-IgM阴性组比较,年龄、性别、HBV DNA水平差异无统计学意义情况下,HDV-IgM阳性组HBeAg阳性率明显低于HDV-IgM阴性组(P=0.001),且HDV-IgM阳性组ALT、AST和GGT高于HDV-IgM阴性组(P均<0.001)。HDV-IgM阳性组与HDV-IgM阴性组乙肝五项模式分布具有显著性差异(P<0.05)。结论近10年,丁型肝炎的筛查率低,阳性率不高,发病率高的地区应重视HDV的筛查,提高诊断率。HDV感染会加重肝炎病情程度,值得重视。

针对端粒酶的HDV核酶的设计及其对端粒酶活性抑制研究

设计针对端粒酶的HDV核酶,观察其对端粒酶活性抑制。设计和合成了针对端粒酶组分的HDV核酶的序列,构建了该核酶的体外转录和真核表达质粒,检测了HDV核酶对端粒酶组分的体外切割效力和对端粒酶活性的抑制作用。核酶对底物的最大剪切效率为70.4％。导入细胞后,使端粒酶活性下降90％。HDV核酶(g.RZ57)对端粒酶活性有抑制作用,可望成为有效的肿瘤治疗抑制剂。

逆转录病毒靶向介导HDV核酶体外抑制HBV表达

目的包装携带HDV核酶的肝细胞靶向性逆转录病毒载体,并检测体外HDV核酶对乙型肝炎病毒表达的影响。方法采用脂质体法,分别包装出携带针对HBV不同基因组区域的HDV核酶的肝细胞靶向性重组逆转录病毒,感染HepG2215细胞,ELISA及荧光定量PCR检测HDV核酶对乙型肝炎病毒表达的抑制作用。结果pMSCV-U6-PreS2-Rz和pM-SCV-U6-C-Rz对乙型肝炎病毒表面抗原抑制率明显高于其他HDV核酶和对照组,分别达80%和85%,且高于脂质体转染介导的同种核酶对乙型肝炎病毒表面抗原表达的抑制率。结论靶向性重组逆转录病毒能够携带HDV核酶进入HepG2215细胞,并且对乙型肝炎病毒的表达有较高的抑制作用,为抗病毒治疗的研究奠定了基础。

HepG2.9706细胞内HDV核酶对HCV RNA抑制活性的初步研究

目的 探讨HDV核酶在细胞内抑制HCVRNA的可能性。方法 将重组载体转染至转基因细胞HepG2 .970 6中 ,通过荧光定量PCR检测细胞和培养上清中的HCVRNA ,初步探讨HDV核酶对HCVRNA的抑制活性。结果 ①RzC1,RzC2 ,RzC3 3组HDV核酶定向插入到真核表达载体。②在转基因细胞HepG2 .970 6中 ,pC1 RzC1、pC1 RzC2、pC1 RzC3对HCV 5′NCR CRNA抑制活性分别为 69.2 %,3 8.7%、4.2 %。结论 ①成功构建了 3个HDV核酶重组表达载体。②pC1 RzC1、pC1 RzC2在转基因细胞HepG2 .970 6具有抑制HCV 5′NCR

剪切HCV RNA的HDV核酶的设计及活性测定

目的 探讨丁型肝炎病毒 (HepatitisDvirus ,HDV)核酶用于抗丙型肝炎病毒 (HepatitisCvirus ,HCV)基因治疗的可能性。方法 以HDV基因组核酶的假结样结构为基础 ,优化其茎Ⅳ区 ,改建其底物结合区 ,获得 3种针对HCVRNA的HDV核酶RzC1、RzC2 和RzC3 。体外转录获取含HCVRNA 5’ 非编码区 ( 5’ noncodingregion ,5’ NCR)及部分C区在内的底物RNA(HCVRNA 5’ NCR C) ,并进行 5’端放射性标记。在pH 7.5、37℃、Mg2 + 2 0mmol/L和去离子甲酰胺 2 .5mol/L等条件下 ,将核酶和底物按摩尔比 1 0 0∶1混合 ,在不同的时间点观察剪切百分率。结果 RzC1、RzC2 对底物的剪切百分率随时间延长而递增 ,90min时分别达 2 4.9%、2 0 .3% ;未观察到RzC3 有剪切活性。

病毒性肝炎HAV，HBV，HCV，HDV和HEV重叠感染的研究

采用ＥＬＩＳＡ法检测了１０８例乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者血清中的五种肝炎病毒──甲型（ＨＡＶ）、乙型（ＨＢＶ）、丙型（ＨＣＶ）、丁型（ＨＤＶ）和成型（ＨＥＶ）肝炎病毒的标志物，并采用ＰＣＲ技术检测了患者血清ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ及ＨＤＶＲＮＡ。结果五种肝炎病毒重叠感染者３５例（３２．４％），单纯ＨＢＶ感染者７３例（６７．６％）。ＨＢＶ、ＨＡＶＭ重感染率为４．６％，ＨＢＶ、ＨＣＶ二重感染率为９．２％，ＨＢＶ、ＨＤＶＭ重感染率为１４．８％，ＨＢＶ、ＨＥＶ二重感染率为１．９％，ＨＢＶ、ＨＣＶ和ＨＤＶ三重感染率为１．９％。ＨＢＶ、ＨＤＶ二重感染者发生肝硬化（ＬＣ）的频率明显高于单纯ＨＢＶ感染者（Ｐ＜０．０１）。在慢性乙肝和ＬＣ患者中，ＨＢＶ、ＨＣＶ二重感染，ＨＢＶ、ＨＢＶ二重感染和单纯ＨＢＶ感染者血清ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ阳性率之间无显著差别。上述结果提示五型肝炎病毒重叠感染情况比较严重；ＨＤＶ感染可导致肝炎慢性化、肝组织损伤加重和肝硬化的发生。ＨＣＶ和ＨＤＶ感染对ＨＢＶ复制无明显影响。

HDV/HBV体外感染原代培养人胎肝细胞的实验研究

目的 :建立HDV /HBV感染人胎肝细胞体外培养系统。方法 :利用HDV/HBV阳性血清同时感染体外培养的人胎肝细胞 ;应用ELISA、免疫组化法、原位杂交法和斑点法检测上清液和细胞中HBsAg、HDAg、HBVDNA和HDVcDNA。 结果 :上清液和细胞中HBsAg、HDAg、HBVDNA和HDVcDNA在感染后第 2天至第 16天均可测出 ,其中上清液中HBsAg、HDAg以感染后第 4天至第 12天达高峰。 结论 :HDV在原代培养人胎肝细胞中能稳定复制和表达至少达 12d。

硫代反义寡核苷酸体外对HDV的抑制作用

目的观察硫代反义寡核苷酸 (S- ASODN)体外对 HDV的抑制作用。方法在 HDV/ HBV感染人胎肝细胞中加入不同浓度的针对 HDV Stem 区 6 84～ 6 98位核苷酸的 15聚 S- ASODN,分别采用 EL ISA和斑点杂交法检测上清液中 HDAg和细胞中 HDV RNA。结果 HBs Ag、HDAg在感染后第 2 d至第 16 d均可测出 ,以第 4d至第 12 d达高峰。加入 S- ASODN(2、4、6 μmol/ L)后 2 d,肝细胞中 HDV复制受到抑制 ,培养上清中 HDAg分泌量也减少 ,其抑制率呈剂量依赖关系 ;在同等剂量时(4μmol/ L) ,S- ASODN作用 2 d、4d、6 d,对 HDV抑制率大至相同。结论 HDV在原代培养人胎肝细胞中能稳定复制和表达至少达 12 d;S- ASODN能有效抑制 HDV/ HBV感染人胎肝细胞中 HDV复制与表达。本研究为进一步在动物体内研究 S- ASODN抗HDV作用和向临床过渡提供了有益的实验依据。

重庆部分地区HDV感染的调查

本文收集了重庆部分地区乙肝患者ＨＢｓＡｇ无症状携带者血清标本２４２份，用ＥＬＩＳＡ法检测抗－ＨＤ，２４份阳性，阳性率为９．９１％，与其它地区比较重庆部分地区ＨＤＶ感染率较高，且郊区的阳性率明显高于市区，此结果符合以前曾报告的ＨＤＶ在我国呈地方性分布的论述。原发性肝癌病人，急、慢乙型肝炎病人和ＨＢｓＡｇ无症状携带者中，以原发性肝癌病人抗－ＨＤ阳性率较高，提示ＨＤＶ感染可能与原发性肝癌的致病有关。

慢性肝病HBVDNA,HDVRNA原位杂交及HBsAg,HBcAg研究

以特异性和敏感性较高的地高辛配基探针原位分子杂交及免疫组化技术，对云南６８例病毒性肝炎ＣＰＨ，ＣＡＨ，肝细胞癌及癌周组织进行ＨＢＶＤＮＡ，ＨＤＶＲＮＡ，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｃＡｇ研究，结果表明：ＨＢｓＡｇ作为靶抗原诱发机体免疫反应，参与炎症过程；除浆膜型ＨＢｃＡｇ，弥漫型、膜型ＨＢｓＡｇ外，ＨＢＶＤＮＡ在肝组织中表达也与肝炎活动性有关；肝癌中ＨＢｓＡｇ与乙肝肝细胞无异，存在多种形式；在ＨＤＶＲＮＡ阳性病例中可存在ＨＢＶ复制，以ＨＤＶＲＮＡ原位分子杂交证实云南省为ＨＤＶ感染高发区，检出率１３２％．

高清视频技术在教学中应用——HDV和AVCHD的比较

高清视频技术是电视技术发展的最新阶段,和其他行业一样,教育领域也面临着如何应用高清视频技术的问题。该文对HDV和AVCHD两种高清视频技术标准进行了理论分析和实验论证,指出这两种视频技术标准是教育领域高清技术应用的合适选择,并对两种标准各自的应用对象作了阐释。

延边农村地区朝鲜族HBV、HCV、HDV感染状况调查

为摸清延边农村地区朝鲜族人群乙、丙、丁型肝炎病毒(HBV、HCV、HDV)感染状况,用ELISA法对585名朝鲜族成年人进行了HBV、HCV和HDV感染标志物的检测.HBV、HCV标化感染率与HBsAg标化阳性率分别为50.91%、4.85%和8.57%,年龄组间差异无显著性.HBV、HCV双重感染率为2.56%,HBV与HCV的感染相关无显著性.42例HBsAg阳性者中HDV感染率4.76%.HBV感染模式有15种,其中以单项抗-HBs阳性多见,人群中占31.97%.表明人群中HBV、HCV和HDV感染的流行情况不同.

HBsAg阴性及HBVM阴性肝炎发生HDV感染的探讨

为探讨ＨＢｓＡｇ阴性甚至ＨＢＶ标志（ＨＢＶＭ）全部阴性血清中检出ＨＤＶ标志（ＨＤＶＭ）的可能性及原因，本文对４６５例病毒性肝炎患者进行了血清ＨＤＶ综合标志的检测，于ＨＢｓＡｇ阳性及阴性血清中均可检出ＨＤＶ标志，分别为２６．６２％（７０／２６３）和２３．３９％（２９／１２４）．不仅如此，甚至于ＨＢＶＭ全部阴性患者中亦可检出ＨＤＶＭ２１．７９％（１７／７８）。用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测发生ＨＤＶ感染的ＨＢｓＡｇ阴性或ＨＢＶＭ阴性血清中的ＨＢＶＤＮＡ，结果发现７５％（１５／２０）为阳性，提示上述阴性血清中多数存在ＨＢＶ体内复制及感染性，因检测技术及水平所限而未测出ＨＢＶＭ。同时对上述阴性血清随访６～２１个月，得出于ＨＢｓＡｇ阴性或ＨＢＶＭ阴性血清中检出ＨＤＶＭ的其它５种可能的原因。

丁型肝炎患者血清HDV_IgM检测结果及资料分析

目的 分析丁型肝炎的年龄分布、男女比例与乙型肝炎病毒 (HBV)重叠感染以及肝功能指标变化的情况。方法 用酶联免疫吸附法 (ELISA)对患者血清进行HBV抗体IgM(抗_HDV_IgM)的检测 ,同时观察肝功能指标的变化。结果 两组人群检测丁型肝炎抗体IgM(1)乙型肝炎人群组 ,丁型肝炎病毒 (HDV)感染率 4 9% (137/2 789) ,(2 )非乙型肝炎人群组 ,HDV感染率 0 13% (1/ 795 )。 138例丁型肝炎患者 ,肝功能指标异常率 81 2 % (112 /138) ,乙型肝炎患者未合并HDV感染 ,肝功能指标异常率 3 2 % (85 / 2 6 5 2 ) ,两组比较P <0 0 5 ,有显著性差异。HDV感染者以中老年多见 ,占 72 5 % ;且男多于女 ,男女比例为 2 9∶1。结论 乙、丁二型肝炎病毒重叠感染时 ,肝功能指标大多异常 ,临床上引起严重的和进行性肝病 ,并与暴发型肝炎和肝硬化密切相关 ,提示中老年乙型肝炎患者是丁型肝炎易感者 ,应积极治疗乙型肝炎 ,并做好自我保护 ,避免再染丁型肝炎。

HDV高清摄像机选型研究

对HDV格式的技术特点、HDV摄像机的技术标准进行了分析,通过性能比较与实践探索,着重对设备选型进行了研究。

人工合成HDV抗原27肽的应用──血清抗HDV的检测

采用自行设计、选择含天然ＨＤＡｇ部分片段的人工合成２７肽建立ＥＩＡ检测抗ＨＤＶ方法，在国内８家医院检测各类人员中血清抗ＨＤＶ状况。ＨＤＶ抗原合成肽由中国科学院上海生物化学研究所合成。结果：献血员（３１５例），甲型肝炎（１１３例）和非乙型肝炎（１５４例）中２例阳性；在ＨＢＶ感染者中共检出抗ＨＤｖ（＋）为２ｌ５／１４８２（１４．５１％）。其中ＡｓＣ为１４／４１４（３．３８％）、ＡＨ为１１／７６（１４．４７％），ＣＰＨ为５／２８（１７．８６％）、ＣＡＨ为３２／１８１（１７．６８％）ＳＨ为１７／８６（１９．７７％），ＬＣ为５２／１４２（３６．６２％），ＰＨＣ为３０／１３０（２３．０８％），另５４／４２５（１２．７１％）未分型。同一单位抗ＨＤＶ的检出与已往用市售试剂结果基本一致，与Ａｂｂｏｔｔ试剂符合率为９４．９％（７４／７８）。提示本ＨＤＶ抗原２７肽具有ＨＤＶ抗原活性，能特异地为天然抗ＨＤＶ识别，可作为检测抗ＨＤＶ诊断试剂。

广东地区HDV感染性标志物的调查

目的 了解广东地区的一般人群、HBsAg阳性者和临床肝炎患者中HDV感染现状。方法 ELISA方法检测HDV相关的指标。结果 一般人群HDV阳性率为 1 2 9‰ ( 2 /15 45 ) ;体检人群HBsAg携带者HDV阳性率为 2 5 6 %( 9/35 2 ) ;临床肝炎HBsAg阳性患者HDV阳性率为 5 0 3% ( 9/179) ,HBsAg阳性合并HAV、HCV感染肝炎患者的HDV阳性率为 6 6 7% ( 2 /30 )。结论 广东地区一般人群HDV感染率低于全国平均感染率 ( 1 6 5‰ ) ;临床肝炎HBsAg阳性患者HDV感染率高于HBsAg携带者。

HDV阳性重型肝炎患者外周血IL－2受体的变化

检测１６例ＨＤＶ（＋）重肝患者ＰＢＭＣ膜上ＩＬ－２Ｒ、培养上清和血清中ｓＩＬ－２Ｒ含量，以２１例ＨＤＶ（－）重肝为疾病对照，２０例献血员为正常对照，探讨ＩＬ－２Ｒ在丁型肝炎中变化意义。结果：ＨＤＶ（＋）组ＩＬ－２Ｒ表达虽增强，但不如ＨＤｖ（－）组明显；ｓＩＬ－２Ｒ含量，两重肝组均非常显著增高，但之间无差异。提示ＨＤＶ（＋）重肝组Ｔ淋巴细胞被激活状态并未因增加ＨＤＶ感染而加重，支持丁型肝炎肝损伤主要不是免疫介导的观点。

HDV 阳性重型肝炎患者外周血中 TNF、 IL-1 及 IL-6 的变化

目的：观察 Ｈ Ｄ Ｖ（＋ ）重型肝炎外周血中 Ｔ Ｎ Ｆ、 Ｉ Ｌ１ 及 Ｉ Ｌ６ 变化状况。方法：分离１６ 例 Ｈ Ｄ Ｖ（＋ ）／ Ｈ Ｂ Ｖ（＋ ）重型肝炎血清和 Ｐ Ｂ Ｍ Ｃ培养上清， Ｅ Ｉ Ａ 法测 Ｔ Ｎ Ｆ， Ｉ Ｌ１ 参照 Ｍｉｚｅｌ法， Ｉ Ｌ６ 参考 Ｏｋｕｄａ 与 Ｍｕｒａｇｕｃｈｉ法，以２１ 例 Ｈ Ｄ Ｖ（－ ）／ Ｈ Ｂ Ｖ（＋ ）重型肝炎为疾病对照，２０ 例献血员为正常对照。结果：两组重型肝炎患者血清及 Ｐ Ｂ Ｍ Ｃ上清中 Ｔ Ｎ Ｆ、 Ｉ Ｌ１ 及 Ｉ Ｌ６ 均非常显著升高，与献血员比较， Ｐ＜ ０．００１，但两组间无差异（ Ｐ＞ ０．０５）。结论：提示已发展为重型肝炎的 Ｈ Ｄ Ｖ（＋ ）／ Ｈ Ｂ Ｖ（＋ ）患者体内之炎性细胞因子均因单核巨噬细胞被激活而呈高度增高状态。结合 Ｈ Ｄ Ｖ（＋ ） Ｃ Ｈ 组 Ｉ Ｌ６ 显著高于 Ｈ Ｄ Ｖ（－ ） Ｃ Ｈ 组，提示 Ｉ Ｌ６ 可能在 Ｈ Ｄ Ｖ发病中占有重要地位。

乙肝病毒感染患者血清中HDV-M检测分析

采用ELISA法对231例乙型病毒感染患者血清中丁型肝炎病毒标本物(HDV-M)进行了检测分析,发现91例血清大三阳中HDV-M的检出率为26.4％;而101例小三阳的HDV-M为10.9％,两组具有显著差异,同时临床资料也表明乙肝丁肝在重叠感染组较单独乙肝组病情为重。