火龙罐联合通络止痛酊溻渍对膝骨性关节炎患者疼痛和睡眠质量的影响

目的探究火龙罐联合通络止痛酊溻渍对膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者疼痛和睡眠质量的影响。方法择取河南中医药大学第三附属医院2022年7月至2023年7月就诊的KOA患者90例,按随机数字表法分为研究组与对照组,45例/组。对照组行通络止痛酊溻渍干预,研究组则行火龙罐联合通络止痛酊溻渍干预,每一疗程7 d,均干预两个疗程。干预前、干预1周及2周后通过视觉模拟评分法(Visual Analogue Scale,VAS)、匹兹堡睡眠质量指数(Pittsburgh Sleep Quality Index,PSQI)评估患者膝关节疼痛程度、睡眠质量,且对比两组干预前、干预2周后中医证候积分、膝关节功能恢复及生活质量。结果研究组干预1周、2周VAS评分、PSQI评分均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);研究组干预2周中医证候总积分、西安大略麦马斯特大学骨关节炎指数量表(Western Ontario and McMaster University Osteoar-thritis Index,WOMAC)评分均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),Lysholm膝关节功能量表评分(Lysholm Knee Score Scale,LKSS)、关节炎生活质量测量量表2-短卷(Arthritis Impact Measurement Scales 2-Short Form,AIMS2-SF)各项评分均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论火龙罐联合通络止痛酊溻渍能明显缓解KOA患者疼痛,改善其睡眠质量、膝关节功能及生活质量。

马鞭草醇提液对绒毛膜癌JAR细胞增殖及表皮生长因子受体表达的影响

用溶剂蒸馏法制备了马鞭草醇提液 ( EV) ,分别作用于体外培养的绒毛膜癌 JAR细胞、人肝癌SMMC-772 1细胞及人胚肺二倍体成纤维细胞 ( 2 BS)。MTT法及荧光法检测结果表明 ,EV对 JAR细胞增殖有明显抑制作用 ,两种方法测得抑制率分别为 71 .9%± 4 .0 %和 69.6%± 2 .0 % ;同时还测得 EV对 JAR细胞质中表皮生长因子受体 ( EGFR)的表达也有明显抑制作用 ,含 2 5mg/ ml和 50 mg/ ml EV的培养液对其抑制率分别为 3 6.7%和 80 .6%。而 EV对 SMMC-772 1细胞及 2 BS细胞则无明显影响。EV对体外培养的绒毛膜癌 JAR细胞有明显抑制作用 ,且具有特异性 ,这一作用可能与抑制 EGFR的表达有关。

马鞭草C部位使人绒癌JAR细胞阻滞于G_2/M期并诱导细胞凋亡

目的:观察马鞭草C部位(VerbenaofficinalisC)对人绒癌JAR细胞周期分布和凋亡的影响,探讨其诱导凋亡机制。方法:采用MTT比色法测定马鞭草C部位对JAR细胞增殖的影响;流式细胞仪检测其对JAR细胞周期分布和细胞凋亡的影响;RT鄄PCR检测药物作用前后Bax和Bcl鄄2mRNA表达变化。结果:马鞭草C部位抑制绒癌JAR细胞增殖,并呈明显时间和剂量效应关系。流式细胞仪结果显示,与对照组比较,40g/L马鞭草C部位处理48h后,使JAR细胞G2/M期增加154.3%,S期比例降低41.6%;JAR细胞凋亡率增加6.74倍。不同剂量马鞭草C部位处理JAR细胞48h后,Bax表达水平增加,Bcl鄄2表达水平下降,并呈剂量依赖性。结论:马鞭草C部位阻滞绒癌JAR细胞于G2/M期,通过改变Bax和Bcl鄄2表达,诱导JAR细胞凋亡。

马鞭草提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞增殖的影响

目的探讨马鞭草(Verbenaofficinalis)提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞增殖的影响。方法通过相差显微镜观察活细胞贴壁程度、细胞形态改变;MTT法测定不同浓度C部位在不同时段对JAR细胞的增殖抑制率,结果用方差分析进行统计学检验;流式细胞仪检测细胞阻滞周期。结果马鞭草C部位可引起细胞数目减少并萎缩;细胞增殖抑制率随着时间的延长和浓度的增加逐渐增大,72h的40mg/ml剂量组抑制最明显,抑制率为65%;流式细胞仪检测结果显示阻滞周期在G2/M期之间。结论马鞭草提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞增殖有明显抑制作用,其作用机制有待进一步探索。

马鞭草醇提液对绒毛膜癌JAR细胞增殖的影响

目的 探讨马鞭草醇提液 (ae Vo)对绒毛膜癌 JAR细胞株的影响。方法 JAR细胞株与人肝癌 SMMC- 772 1细胞株及人胚肺 2倍体成纤维细胞株 (2 BS)体外培养比较 ,应用溴化甲噻唑基四唑 (MTT)法、荧光法测得细胞相对生长曲线及增殖抑制率。结果 ae Vo对 JAR细胞有明显抑制作用 ,于加药后 4 8h,增殖抑制率为 (71.9± 4 .0 ) %及 (69.6± 2 .0 ) % ,MTT法及荧光法所测结果无明显差异 (P>0 .0 5 )。 ae Vo对 SMMC- 772 1细胞及 2 BS细胞无明显影响。结论 ae Vo具有抗绒癌作用 ,且作用具有特异性 。

乌苯美司对JAR,SKOV3和3AO细胞体外生长的抑制作用

目的:观察乌苯美司对人绒毛膜癌和卵巢癌细胞体外生长的抑制作用。方法:应用MTT比色法观察不同浓度的乌苯美司(0.5g/L、1g/L、5g/L、10g/L、15g/L、20g/L)对人绒毛膜癌JAR细胞、卵巢癌3AO细胞和SK-OV3细胞的生长抑制作用,溴乙啶和丫啶橙荧光染色荧光显微镜观察凋亡细胞DNA结构改变。结果:乌苯美司能抑制JAR细胞、3AO细胞和SKOV3细胞的生长,且对JAR和SKOV3细胞的抑制作用呈时效(r=0.412,r=0.339,P均=0.000)和量效(r=0.704,r=0.753,P均=0.000)关系。5g/L乌苯美司作用48h后荧光显微镜下见细胞染色质边聚,细胞核碎裂等凋亡改变。结论:乌苯美司通过细胞凋亡途径可抑制绒毛膜癌和卵巢癌细胞的生长。

4′-甲醚-黄芩素诱导绒毛膜癌JAR细胞凋亡的实验研究

目的探讨4′-甲醚-黄芩素(4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果不同质量浓度(10、20、40mg/L)的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用,呈剂量依赖,作用72h后其增殖抑制率分别为(14.14±0.75)%、(34.34±2.99)%、(61.11±2.99)%(P<0.01);4-MS作用72h后细胞内Ca2+浓度分别为81.3±6.7、103.3±5.9、120.7±11.0,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。40mg/L4-MS作用12、24、36h后其早期凋亡率分别为(2.36±0.19)%、(4.22±2.44)%、(7.34±0.56)%,明显高于对照组(P<0.01)。20、40mg/L4-MS作用48h后hTERT mRNA的表达量为0.05±0.01和0.02±0.01,明显低于对照组(P<0.01)。结论4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖,诱导凋亡,其机制与提高细胞内Ca2+浓度、降低hTERT mRNA的表达有关。

生存素在5-氟尿嘧啶诱导人绒癌细胞株JAR凋亡中的作用

目的探讨生存素(survivin)在化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导的人绒癌细胞株(JAR)凋亡中的作用。方法用JAR细胞株进行培养传代,以不同浓度5-Fu作用于JAR细胞,MTT方法观察5-Fu对JAR细胞生长的抑制情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率,用逆转录聚合酶链(RT-PCR)和免疫印迹技术(Western-blot)方法检测survivin基因和蛋白的表达。结果①5-Fu对JAR细胞的生长具有抑制作用,并有浓度和时间的依赖性;②5-Fu诱导JAR细胞凋亡,凋亡率随浓度而增加;③5-Fu作用后survivin基因和蛋白表达减少,随浓度增加而减少。结论5-Fu可能是通过降低survivin表达水平,诱导JAR细胞凋亡。

TGF-β1对人早孕细胞滋养层细胞和绒毛膜癌JAR细胞明胶酶mRNA表达的影响和意义

目的:探讨TGF-β1和明胶酶在妊娠滋养细胞疾病(GTD)发病机制中的作用。方法:RT-PCR法检测TGF-β1诱导的人正常早孕细胞滋养细胞(CTB)和绒毛膜癌JAR细胞中明胶酶CMMP2和MMP97及其抑制剂(TIMP1和TIMP2)mRNA的表达。结果:TGF-β1上调CTB细胞MMP2的表达,但对MMP9的mRNA表达无明显作用(P>0.05)。TGF-β1能显著上调JAR细胞MMP2和MMP9的mRNA表达(P<0.01)。随着TGF-β1浓度的增加,TGF-β1能明显诱导CTB细胞TIMP1和TIMP2的mRNA表达水平上调(P<0.01);然而这种转录水平在TGF-β1处理或未处理的绒毛膜癌细胞中均为极低表达甚至无表达。结论:TGF-β1与明胶酶在GTD的发生、发展中起了协同促进其侵袭、浸润和恶化进展的作用。

4’-甲醚-黄芩素对绒毛膜癌JAR细胞c-myc表达的影响

目的探讨4’-甲醚-黄芩素(4-MS)诱导人绒毛膜癌JAR细胞凋亡的分子机制。方法应用透射电镜、流式细胞术、实时定量PCR法和Western blotting方法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果电镜下可见用药后JAR细胞凋亡的形态学改变;流式细胞术显示,随着作用时间和药物剂量的增加,早期凋亡细胞和坏死细胞增加,明显高于对照组(P<0.01)。20、40 mg.L-1 4-MS作用48 h后c-myc mRNA的表达量为0.87±0.12和0.45±0.08;c-myc蛋白的表达量是0.37±0.02和0.25±0.02,均低于对照组(P<0.01)。结论 4-MS诱导JAR细胞凋亡,其机制与降低c-myc的表达有关。

应用JAR细胞株建立SCID beige小鼠绒毛膜癌移植瘤病理模型

目的建立稳定有效的绒毛膜癌SCID beige小鼠移植瘤模型,观察模型的病程特点和生物学行为。方法将3-5周龄SCID beige雌性小鼠随机分为实验组和对照组;实验组12只小鼠分为A（皮下移植瘤模型）/B（肺转移瘤模型）两组,分别皮下注射或尾静脉注射JAR细胞5×10^6/只,应用形态学、放射性免疫分析法测定β-HCG、小动物活体成像系统（IVIS）和组织学HE染色方法明确JAR细胞皮下移植瘤及肺转移瘤形成等情况。结果实验组接种28 d后,A组小鼠皮下形成质硬肿瘤结节,HE染色符合绒毛膜癌细胞形态学表现;B组小鼠应用IVIS检测显示体内出现单个或多个肿瘤实体包块,HE染色表明肺组织均有不同程度的瘤细胞浸润。接种第14天,实验组β-HCG水平显著高于对照组（P〈0.05）;其中B组β-HCG水平明显高于A组（P〈0.05）。结论 SCID beige小鼠皮下/尾静脉注射JAR细胞可成功构建人绒毛膜癌移植瘤病理模型,该模型能模拟临床绒毛膜癌上皮性实体瘤特性及肺转移特点,是研究人类绒毛膜癌发病机理及实验治疗的良好模型。

火龙罐综合灸改善肾阳虚腰痛患者的临床疗效

目的:观察火龙罐综合灸治疗肾阳虚腰痛患者的临床效果。方法:选取2023年1月—3月,天津市南开医院和天津市南开老年病医院收治的肾阳虚腰痛患者60例,采用随机抽样方法,按患者就诊顺序分为对照组及观察组各30例,对照组给予常规拔罐治疗,观察组给予火龙罐综合灸治疗。比较两组患者在同周期治疗后JOA下腰痛评分情况及视觉模拟评分法(VAS)评分情况。结果:在治疗同一周期内,两组患者各项指标都有所改善,治疗前,观察组及对照组患者JOA评分,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组患者JOA评分改善率86.67%(26/30),高于对照组的56.67%(17/30),差异有统计学意义(P<0.05);两组间视觉模拟评分法(VAS)评分治疗后较治疗前都有所降低,且治疗后观察组评分明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:两种治疗方法对于改善肾阳虚腰痛患者的症状均有效,但是与常规拔罐治疗相比,火龙罐综合灸疗法在改善患者腰痛功能障碍方面具有明显优势,能够有效控制肾阳虚腰痛患者的疼痛症状,临床疗效显著。

F10基因过表达及沉默对绒癌细胞系JAR侵袭相关蛋白酶表达的影响

目的 F10基因是本研究前期发现在葡萄胎中高表达的新基因,本文为明确F10过表达和沉默对绒癌细胞系JAR侵袭性的影响,探讨F10基因与部分侵袭相关蛋白的关系。方法通过细胞转染技术及RNA干扰技术,分别建立和筛选出F10基因稳定过表达及沉默的绒癌细胞系JAR。取SPF级裸鼠30只,随机均分为F10过表达组、未处理组、F10沉默组,每组10只,依次接种F10基因过表达的JAR细胞、未处理的JAR细胞和F10基因沉默的JAR细胞株,于接种5周后处死裸鼠收获皮下肿瘤,采用免疫组织化学及Western blot检测方法,比较不同组瘤体组织中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)及金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitors of metalloproteinases-1,TIMP-1),血浆纤溶酶原激活物抑制因子(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)等侵袭相关蛋白酶的表达差异。结果免疫组化法检测结果显示:F10、MMP-2、8、11、16、19在F10过表达组、未处理组、F10沉默组中间的表达依次递减,差异有统计学意义(P<0.05),TIMP-1、PAI-1在F10过表达组中分别为0.118±0.029、0.174±0.005,在未处理组中分别为0.214±0.028、0.289±0.009,在F10沉默组中分别为0.430±0.017、0.517±0.074,3组间的表达差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,F10、MMP-2、8、11、16、19蛋白在F10沉默组、未处理组、F10过表达组依次递增(P<0.001),而TIMP-1及PAI-1蛋白表达水平依次递减(P<0.001)。结论 F10通过上调MMP-2、8、11、16、19的表达,下调TIMP-1、PAI-1表达,参与调节绒癌细胞的增殖,从而可能参与调节绒癌的侵袭和转移。

热封条件及氛围对蓄电池壳体力学性能的影响

采用热焊法制备了蓄电池专用PP样条,利用改变热封条件和气体氛围对PP材料的结晶行为、热稳定性能和力学性能进行了深入研究。DSC和偏光显微镜结果表明,样品的有效热封温度应不低于172.3℃,而热封后冷却温度应不高于117.5℃。TGA结果表明,与空气氛围下相比,样品在氮气氛围下的热稳定性较好,初始分解温度可达366℃。扫描电镜结果表明,氮气氛围下,样品具有更粗糙的断面且没有出现气孔(空气氛围下出现)。力学性能测试结果表明,与空气氛围下相比,在氮气氛围下,样品的拉伸强度较高,并且,随着热封温度、焊接时间和保压时间的增加,呈先升高后降低的趋势。综合以上结果可以得到最佳的热封条件为氮气氛围、热封温度为340℃、焊接时间为5 s、保压时间为5 s。

优势乳酸发酵菌株筛选、鉴定及对发酵萝卜风味品质的影响

[目的]筛选优良乳酸菌菌株以构建萝卜专用的泡菜发酵菌种。[方法]从不同地区收集萝卜老坛泡菜母水,采用稀释涂布法从泡菜母水中分离乳酸菌,通过生理鉴定、形态学鉴定(菌落观察和,革兰氏染色法)、16S rDNA基因测序和系统发育树构建确定种类并对其生长特性、耐受能力和风味物质进行检测。[结果]分离筛选结合生理鉴定共获得120株菌株,其菌落为圆形凸起,镜检呈杆状或球状且均为革兰氏阳性菌。进一步通过产酸能力测试获得15株产酸能力较强的菌株。分子鉴定表明,1株为芽孢杆菌属、13株为植物乳杆菌属,1株为戊糖片球菌属。对不同类型发酵菌株进行生长特性分析,发现菌株LA-8与LA-11的生长速度比其他菌株快;菌株LA-8的产酸能力强,耐10%盐和15%蔗糖。4株不同类型菌株均具有较强的降解亚硝酸盐能力。萝卜发酵初试试验表明,菌株LA-8和LA-11的发酵能力较强,产酸速度快。4株不同类型乳酸菌发酵萝卜所产生的挥发性物质存在差异。[结论]从不同地区萝卜老坛泡菜母水中筛选得到3个不同类型的优势发酵菌,可作为萝卜泡菜产业生产的菌种来源。

葡萄胎病理相关新基因F10与绒癌细胞系JAR成瘤性的关系研究

目的探讨葡萄胎病理相关新基因F10与绒癌细胞系JAR裸鼠皮下成瘤的关系。方法通过细胞转染技术及RNA干扰技术,分别建立和筛选出F10基因稳定过表达及沉默的绒癌细胞系JAR。将30只4~5周龄SPF级裸鼠随机均分为JAR F10过表达组、JAR F10沉默组、JAR未处理组（n=10）,分别于颈背部皮下接种5×107个F10基因过表达的JAR细胞、F10基因沉默的JAR细胞及未处理的JAR细胞。接种后每3~4d称重并观察,记录肿瘤发生时间,观察皮下肿瘤的生长情况。绘制在体肿瘤生长曲线,计算各组裸鼠的成瘤率。细胞接种5周后处死小鼠,取瘤组织称重,比较各组的瘤体重量。结果 3组的成瘤率均为100%（10/10）。JAR F10过表达组、JAR F10沉默组、JAR未处理组的成瘤时间分别为4.4±1.1、4.4±1.1、4.6±1.3d,组间比较差异无统计学意义（F=0.097,P=0.908）。与JAR未处理组相比,JAR F10过表达组肿瘤的在体生长速度明显增快,JAR F10沉默组则明显减慢,差异均有统计学意义（P〈0.05）。JAR F10过表达组、JAR F10沉默组、JAR未处理组肿瘤重量分别为607.49±216.19、270.73±81.53、423.87±74.75mg,组间比较差异有统计学意义（F=14.462,P=0.000）。结论 F10基因与绒癌细胞系JAR的增殖调节有关,可增强JAR细胞系在裸鼠体内的致瘤性。

1α,25-二羟基维生素D_3对绒毛膜癌细胞株JAR的影响及其机制

目的:研究生物制剂1α,25-二羟基维生素D3(calcitriol)对绒毛膜癌细胞株JAR的影响,探讨其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度(10-8、10-7、10-6mol/L)calcitriol在不同的时间点(1天、3天、6天)对JAR细胞增殖的影响;流式细胞仪检测calcitriol对JAR细胞周期的影响;RT-PCR检测维生素D受体(VDR)mRNA水平的表达;Western blot检测VDR蛋白表达。结果:MTT比色法检测10-6mol/Lcalcitriol作用JAR细胞3天,10-7、10-6mol/L calcitriol作用6天抑制率分别为(22.74±12.08)%(P<0.05),(29.64±8.66)%(P<0.01),(49.74±17.42)%(P<0.01),呈明显的时间-剂量效应关系。calcitriol作用JAR细胞的半数抑制浓度(IC50)组与对照组比较,细胞周期G1期细胞比例从39.78%增至59.81%(P<0.01),S期细胞数百分比从54.6%减至33.08%(P<0.01)。calcitriol上调JAR细胞的VDR mRNA及蛋白表达水平。结论:calcitriol能明显抑制绒毛膜癌细胞株JAR增殖,并诱导JAR分化,其作用机制与calcitriol上调VDR mRNA,进而增加VDR蛋白的表达有关。

4’-甲醚-黄芩素对绒毛膜癌JAR细胞内Ca^(2+)浓度的影响

目的:探讨4′-甲醚-黄芩素对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及细胞内Ca2+浓度的影响。方法:应用MTT法、流式细胞术和激光共聚焦扫描显微镜技术,体外观察该化合物对JAR细胞的影响。结果:4′-甲醚-黄芩素对JAR细胞的生长具有抑制作用。随着药物浓度与作用时间的增加,Annexin Ⅴ-FITC+/PI-细胞、细胞内Ca2+浓度逐渐增加,与对照组相比差异有显著性。结论:4′-甲醚-黄芩素能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖,诱导凋亡,其机制与提高细胞内Ca2+浓度有关。

RNA干扰VEGF对体外JAR细胞生长的影响

利用pSUPER质粒作为载体,在人绒癌JAR细胞内成功的沉默了VEGF基因的表达,建立了稳定转染pSUPER-shVEGF1,pSUPER-shVEGF2干扰质粒的JAR细胞株.随后利用RT-PCR证实了在JAR细胞株中,VEGF基因的表达被抑制.显微观察及流式细胞学检测转染后细胞株克隆生长情况显示体外培养条件下VEGF基因受抑后JAR细胞生长周期无发生变化,提示VEGF在体外可能对JAR细胞增殖无直接作用.

低分子肝素对抗心磷脂抗体阳性血清中JAR细胞增殖能力的影响

目的研究子痫前期孕妇抗心磷脂抗体(ACA)阳性血清对JAR细胞生长周期和增殖能力的影响,以及低分子肝素对该细胞生长的调节。方法 JAR细胞按如下3组培养:对照组添加健康妊娠妇女血清;处理1组添加ACA阳性的子痫前期孕妇血清;处理2组添加抗ACA阳性的子痫前期孕妇血清及低分子肝素。采用MTT法检测细胞的增殖能力,以490 nm处的平均吸光度(OD值)表示;采用流式细胞仪检测细胞生长周期。结果正常对照组的OD值为0.460±0.069,处理1组的OD值为0.310±0.058,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);处理2组的OD值为0.410±0.076,与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。流式检测结果显示,正常对照组S期细胞占(27.27±3.73)%,处理1组的S期细胞比例[(18.12±3.75)%]下降,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);而处理2组的S期细胞为(24.67±4.66)%,与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论体外实验表明,ACA对可以调节JAR细胞的生长周期,抑制其增殖能力,而低分子肝素能逆转抗体的这种作用。