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Laboratory Detection and Diagnosis of Filoviruses 被引量:6
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作者 Yun-peng Wang Xian-en Zhang Hong-ping Wei 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2011年第2期73-80,共8页
Ebola virus(EBOV) and Marburg virus(MARV),belonging to the Filoviridae family,emerged four decades ago and caused severe viral hemorrhagic fever in human and other primates.As high as 50-90% mortality,filoviruses can ... Ebola virus(EBOV) and Marburg virus(MARV),belonging to the Filoviridae family,emerged four decades ago and caused severe viral hemorrhagic fever in human and other primates.As high as 50-90% mortality,filoviruses can cause significant threats to public health.However,so far no specific and efficient vaccine has been available,nor have other treatment methods proved to be effective.It is of great importance to detect these pathogens specific,rapidly and sensitively in order to control future filovirus outbreaks.Here,recent progresses in the development of detection and diagnosis methods for EBOV and MARV are summarized. 展开更多
关键词 FILOVIRUS Ebola virus (EBOV) Marburg virus (marv) Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) Polymerase chain reaction (PCR)
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马尔堡病毒糖蛋白RBD基因的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备
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作者 王琪 盖微微 +15 位作者 闫飞虎 冯娜 吴芳芳 赵梓淇 曹增国 李岭 迟航 金宏丽 邱泊宁 崔健男 赵永坤 王铁成 高玉伟 王化磊 杨松涛 夏咸柱 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1261-1267,共7页
原核表达并纯化马尔堡病毒(Marburg virus,MARV)糖蛋白(glycoprotein,GP)受体结合域(receptor binding domain,RBD)蛋白,并以此为抗原免疫家兔制备抗MARV-GP-RBD多克隆抗体。参照GenBank提供的MARV GP全基因序列,找到主要抗原表位区域,... 原核表达并纯化马尔堡病毒(Marburg virus,MARV)糖蛋白(glycoprotein,GP)受体结合域(receptor binding domain,RBD)蛋白,并以此为抗原免疫家兔制备抗MARV-GP-RBD多克隆抗体。参照GenBank提供的MARV GP全基因序列,找到主要抗原表位区域,设计特异性引物,采用PCR方法扩增RBD基因,扩增产物经双酶切(EcoRⅠ/XhoⅠ)后定向克隆至原核表达载体pET-30a(+),构建重组表达质粒pET-30a(+)-GP-RBD,转化BL21(DE3)感受态表达宿主菌,在不同条件下(时间、IPTG浓度、温度)诱导表达目的蛋白,并用His-Band N+柱进行亲和层析纯化;以纯化的重组pET-30a(+)-GP-RBD蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。通过SDS-PAGE、Western blot和IFA鉴定重组蛋白的反应原性及免疫原性。结果显示:PCR扩增到长度为453bp的RBD基因片段;构建的重组质粒pET-30a(+)-GP-RBD经双酶切后得到与目的片段长度相同的特异性条带,测序结果显示没有突变;转化产物在培养7h、终浓度为0.4mmol/L IPTG和37℃条件下能够充分诱导目的蛋白表达,得到相对分子质量为25 000的重组蛋白,主要以包涵体形式存在,BCA试剂盒产量测定,每升诱导的重组菌可纯化约20mg纯度较高的目的蛋白;Western blot检测证实重组pET-30a(+)-GP-RBD蛋白能同时被抗His标签的单抗和兔源多抗识别并发生特异性反应,证明重组蛋白有良好的反应原性;IFA鉴定证实所制备的兔源多抗能够特异性识别表达MARV GP蛋白的重组杆状病毒rBacmid-GP-VP40,证明重组蛋白具有良好的免疫原性。结果表明:成功表达、纯化了MARV GP RBD蛋白,并完成了兔源多抗的制备,为MARV亚单位疫苗的制备和抗原、抗体检测方法的建立奠定基础。 展开更多
关键词 马尔堡病毒 糖蛋白受体结合域 原核表达与纯化 多克隆抗体
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也论刘郁《西使记》不明地理问题
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作者 沙西里 刘振玉 《西域研究》 CSSCI 北大核心 2018年第4期88-99,M0005,M0006,共14页
刘郁《西使记》中记录常德过阿母河的一段行程,涉及"里丑、马兰、纳商、殢扫儿"四个地名,历来为学术界讨论的焦点。1887年布莱特施耐德将《西使记》译为英文,并作了详细的注释,对于上述四个地点,他认为考证困难。20世纪90年代... 刘郁《西使记》中记录常德过阿母河的一段行程,涉及"里丑、马兰、纳商、殢扫儿"四个地名,历来为学术界讨论的焦点。1887年布莱特施耐德将《西使记》译为英文,并作了详细的注释,对于上述四个地点,他认为考证困难。20世纪90年代,张广达、王小甫合撰有《刘郁〈西使记〉不明地理考》,对此进行了专题研究,提出常德所走路线为:湛木、马鲁察谷地、也里、你沙不儿一线,并在此路线上对上述四个地点进行了考证。本文根据穆斯林文献,结合13世纪呼罗珊的实际交通情况,提出常德所走的路线为:阿模里、马鲁、你沙不儿一线,即被称为"呼罗珊大道"的干路,常德所提及的四个地名均能在此路线上得到比对。 展开更多
关键词 西使记 呼罗珊 马鲁 你沙不儿 呼罗珊大道 刘郁 常德
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