MRI纹理分析与血清ETS-1、MMP-1和MBP联合检测在脑膜瘤鉴别诊断中的应用价值分析

目的:分析MRI纹理与ETS-1、MMP-1和MBP联合检测在脑膜瘤鉴别诊断中的应用价值。方法:选取同期内到我院诊治的54例脑膜瘤患者作为本次试验的研究组,实施MRI纹理分析,依据WHO分级将脑膜瘤患者分成良性组(n=43,WHOⅠ级)和恶性组(n=11,WHOⅡ、Ⅲ级)两个亚组。再选取50例健康体检者为参照组,测定两组血清ETS-1、MMP-1和MBP水平,同时将病理学检查结果作为金标准,分析MRI纹理与血清ETS-1、MMP-1和MBP单项及联合检测的诊断效能。结果:脑膜瘤良性组的MRI增强T1WI扫描的纹理参数低于脑膜瘤恶性组(P<0.05)。研究组的ETS-1、MMP-1和MBP水平均显著高于参照组(P<0.001)。四项联合检测的曲线下面积、敏感度及特异性高于单项检测(P<0.05)。结论:MRI纹理分析与血清ETS-1、MMP-1和MBP联合检测的灵敏度和特异性较高,在脑膜瘤的诊断中具有显著的临床应用价值。

血清UA、PSA-NCAM、MBP水平对精神分裂症患者病情评估的价值及临床意义

目的:探究精神分裂症患者血清尿酸(UA)、多唾液酸-神经细胞黏附分子(PSA-NCAM)、髓鞘碱性蛋白(MBP)水平对病情严重程度的相关性。方法:选取2019年3月-2021年3月在我院治疗的83例精神分裂症患者作为研究组,采用利培酮药物治疗1个月,另选择同期我院健康体检者作为对照组。比较2组一般资料、血清UA、PSA-NCAM、MBP水平,用阳性和阴性症状量表(PANSS)评估病情严重程度;用Pearson分析血清UA、PSA-NCAM、MBP水平与PANSS评分相关性;用多因素分析血清UA、PSA-NCAM、MBP水平与PANSS评分关系。结果:研究组治疗前、治疗1个月后UA、PSA-NCAM、MBP水平高于对照组(P<0.05);研究组治疗前UA、PSA-NCAM、MBP水平高于治疗1个月后(P<0.05);研究组治疗前阳性症状、阴性症状、一般精神病理、PANSS总分均高于治疗1个月后(P<0.05);研究组治疗前、治疗1个月后血清UA、PSA-NCAM、MBP与PANSS评分呈正相关(r=0.652、0.689、0.539、0.624、0.677、0.714,P<0.05);血清UA、PSA-NCAM、MBP水平与PANSS评分显著相关(P<0.05)。结论:血清UA、PSA-NCAM、MBP与精神分裂症患者PANSS评分呈正相关,并有助于对精神分裂症病情严重程度的评估。

退黄协定方熏洗联合光疗治疗新生儿黄疸疗效及对NSE、MBP水平的影响

目的研究和分析退黄协定方熏洗联合光疗治疗新生儿黄疸疗效及对神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)和髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)水平的影响。方法选择2021年10月—2023年3月在沧州市妇幼保健院接受治疗的100例新生儿黄疸患儿作为研究对象,随机对患儿进行编号,奇数设为对照组,偶数设为观察组,每组50例。两组患儿在进行蓝光治疗的基础上,对照组服用茵栀黄口服液治疗,观察组采用退黄协定方熏洗治疗。对治疗前后两组经皮测定胆红素值、每日平均睡眠时间和哭闹次数、治疗前后NSE、MBP水平和治疗后患儿家属满意度进行比较。结果治疗前,两组患儿经皮测定胆红素值比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后24 h、48 h、72 h,两组患儿的经皮测定胆红素值均降低,并且治疗后观察组患儿以上指标降低幅度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组睡眠时间长于对照组,平均哭闹次数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组NSE、MBP水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患儿的NSE、MBP水平均降低,并且治疗后观察组NSE、MBP水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组患儿家属的满意度显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论退黄协定方熏洗联合光疗治疗新生儿黄疸疗效显著,可提高患儿的睡眠质量,减少哭闹行为,降低NSE、MBP水平。

通督调神针刺对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能及VEGF、NGF、MBP表达的影响

目的:探讨通督调神针刺改善脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能机制。方法:选取健康雄性SD大鼠40只随机分为假手术组、模型组、药物组、针刺组各10只,采用改良Koizumi线栓法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型,缺血2 h再灌注24 h后,药物组大鼠腹腔注射丁苯酞氯化钠注射液,针刺组大鼠实施通督调神针刺治疗7 d,治疗前后均计算大鼠神经功能缺损评分(neurological severity scores,NSS),采用免疫组化和Western blot方法测定血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)表达。结果:药物组、针刺组治疗后NSS评分均低于治疗前(P<0.05);药物组治疗后NSS评分低于模型组(P<0.05),针刺组治疗后NSS评分低于模型组和药物组(P<0.05);药物组脑缺血组织中的VEGF、NGF、MBP表达高于模型组(P<0.05),针刺组脑缺血组织中的VEGF、NGF、MBP表达高于模型组和药物组(P<0.05)。结论:通督调神针刺明显改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,其机制可能与针刺上调VEGF、NGF、MBP表达进而营养神经、促进神经髓鞘组织再生有关。

实验性癫痫发作后早期血清NSE、S-100β、MBP的变化

目的探讨神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100β、髓鞘碱性蛋白(MBP)在癫痫(EP)大鼠痫性发作后各时间点血液中的动态变化,以寻求测定这些生化指标在癫痫诊治中的作用及临床前景。方法海人酸(KA)局部注射雄性大鼠海马部位建立癫痫动物模型,在痫性发作后3、6、12、24、48、72h抽取血液,测定血清中NSE、S-100β、MBP含量的变化。结果血清中NSE、S-100β含量在癫痫发作后均逐渐增加,并皆在24h达高峰;MBP在痫样发作后72h达到最高。结论检测血清NSE、S-100β、MBP可为临床癫痫诊治过程中客观评价神经元损伤、神经胶质细胞、神经髓鞘结构损伤程度和预后提供诊断依据。

NGF对坐骨神经损伤后腰髓与损伤神经MBP含量变化的影响

目的 探讨大鼠周围神经损伤后相应神经与脊髓组织髓鞘碱性蛋白 (Myelinbasicprotein ,MBP)含量变化及神经生长因子 (NGF)的影响。方法 Wistar大鼠行单侧坐骨神经切断 ,断端采用硅胶管桥接 ,管内注入NGF ,应用酶联免疫吸附法测定腰段脊髓和损伤坐骨神经组织MBP含量的变化 ,实验分为Ⅰ组 :生理盐水对照 ;Ⅱ组 :硅胶管内给NGF ;Ⅲ组 :硅胶管内给NGF +每日肌肉注射NGF(5 0 0ng/kg连续 2周 )。结果 治疗组之间比较无统计学意义 ;治疗组与对照组相比较有非常显著性差异 (P <0 0 1) ;治疗组2 4h、2周时MBP含量较伤前显著升高 (P <0 0 1) ,4周恢复到伤前水平。结论 NGF治疗能减少MBP含量 。

30%TBP-煤油-HNO_3体系的α辐解行为Ⅰ.溶剂辐解生成DBP/MBP的规律

用气相色谱法研究了238Pu为α源的30%TBP-煤油-HNO3体系的辐解产物DBP和MBP的生成情况,研究了反萃剂、反萃条件和钚等因素对DBP/MBP分析的影响,考察了辐照累积剂量、剂量率和稀释剂等因素对DBP和MBP生成量的影响。结果表明:DBP和MBP生成量随吸收剂量、剂量率的增加而增大;在剂量率73.7Gy/min、累积剂量5×105 Gy时,DBP浓度达到7.09×10-2 mol/L,MBP浓度达到9.84×10-3 mol/L;在吸收剂量5×105 Gy时,加氢煤油、正十二烷和特种煤油中的DBP生成量分别为4.45×10-2、4.44×10-2、4.35×10-2 mol/L,MBP生成量为3.52×10-3、3.50×10-3、3.52×10-3 mol/L,在吸收剂量5×105 Gy时,三种稀释剂的DBP和MBP的生成量近似相等;在吸收剂量5×104 Gy时,α辐照的DBP和MBP的生成量分别为5.57×10-2 mol/L和5.10×10-3 mol/L,对应的γ辐照的为2.50×10-3 mol/L和3.14×10-4 mol/L,α辐照产生的DBP和MBP的生成量明显大于γ辐照的。

自身免疫神经保护:MBP主动免疫对脊髓损伤后二次损害的有益作用

目的 研究髓鞘碱性蛋白 (MBP)主动免疫 ,对大鼠脊髓损伤 (spinalcordinjurySCI)后二次损害的治疗作用 ,探讨自身免疫T细胞对中枢神经系统损伤的神经保护机制。方法 用不完全福式佐剂 (IFA)乳化的MBP、全脊髓匀浆 (WSCH)、卵白蛋白 (OVA)分别免疫三组SD大鼠 ,1周后使用OHBASIKI打击器制作脊髓损伤模型 (SCI)。每周进行一次斜板试验及BBB评分 ,2 8天后标本取材行光镜及电镜检查。结果 用MBP或WSCH免疫鼠神经功能康复明显优于OVA免疫鼠 ,斜板实验及BBB评分与后者相比差异显著 (P <0 0 1)。形态学检查前两组大鼠损伤脊髓组织大部分恢复 ,形态基本正常 ,后者仍破坏严重。结论 MBP或WSCH主动免疫能中断SCI后二次损害的破坏作用 ,被激活的自身免疫T细胞对中神经系统损伤具有神经保护功能。

MBP融合肝素酶Ⅲ大肠杆菌高效表达体系构建

肝素酶Ⅲ(heparinase III,HepC)是一种重要的多糖裂解酶,在抗癌药物开发、低分子量肝素生产以及肝素类药物的质量控制等方面具有重要的作用。目前制约其工业应用前景的主要技术瓶颈是生产成本高,异源重组表达效果差,缺乏高效的表达方法。本研究借鉴前期经验,通过HepC基因的密码子优化,并与麦芽糖结合蛋白(maltose-binding protein,MBP)融合,构建了MBP-coHepC(基因密码子优化后的蛋白为coHepC)的大肠杆菌表达体系,结合培养条件优化大幅度提高了HepC的可溶表达比例,其摇瓶发酵总酶活值达到7603.46 IU·L?1;同时,本研究从转录和翻译水平揭示了HepC表达效果提高的可能原因。这些研究为肝素酶III的应用发展提供了基础。

MBP-52位点多态性与肺结核易感性的病例对照研究

[目的]探讨甘露糖结合蛋白(MBP)基因多态性与汉族人群肺结核发病的关系。[方法]采用病例对照研究,用特异引物PCR方法进行MBP的基因分型,对肺结核发病影响因素进行问卷调查,并进行单因素分析和多因素非条件Logistic回归分析。[结果]对126例病例和202例对照的MBP基因52位点进行分型,野生型、突变型(杂合子+纯合子)两种基因型在病例组和对照组中的分布频率分别为男性86.7%、13.3%、95.7%和4.3%;女性93.0%、7.0%、85.9%和14.1%。男性病例的突变频率显著高于对照组(OR为6.222,OR95%CI为1.285～30.134),而女性病例的突变频率明显低于对照组(OR为0.646,OR95%CI为0.564～0.740)。在多因素分析中调整卡介苗接种史、卡痕和家族史后,MBP-52基因突变与肺结核发病仍有统计学意义,与单因素分析的结果相同。[结论]MBP-52位点C/T突变可能与肺结核发病相关。

重组人MUC1-MBP融合蛋白的抗肿瘤作用

目的 :研究重组人MUC1 MBP的抗肿瘤作用。方法 :用重组人MUC1 MBP皮下注射途径免疫健康鼠 ,采用MTT法测定小鼠抗MUC1特异的CTL活性 ;通过免疫鼠成瘤及荷瘤鼠治疗实验检测其对肿瘤的预防和治疗作用。结果 :MUC1 MBP免疫鼠CTL对MCF 7及Lewis肺癌细胞的杀伤率分别为 (47.7± 4 .3) %和 (6 7.5± 6 .5 ) % ;免疫鼠成瘤结果免疫组小鼠共长 5个肿瘤 ,存活时间明显延长 ,对照组共长 5 1个 ,平均生存时间 2 3d ;荷瘤鼠治疗结果显示治疗组小鼠肿瘤平均体积 386mm3 ,对照组小鼠肿瘤平均体积 4 0 0 0mm3 。结论 :重组人MUC1 MBP具有明显的治疗、预防肿瘤和抑制肿瘤转移的作用 ,有希望发展成人类抗肿瘤疫苗。

基于L-MBP神经网络的煤自然发火期预测

针对不同矿井、矿井不同工作面预测煤自然发火期的难题,采用具有较好收敛性的L-M(Levernberg-Marquardt)BP算法的神经网络,开发出煤自然发火期预测仿真系统软件。根据煤自燃的内因和外因影响因素,在东北矿区各自燃采场收集了152个样本训练数据,并应用于该软件训练、预测其结果误差<10%。在神东矿区进行预测时,预测结果与实际情况吻合较好,为制定预防采场自然发火的技术措施提供了可靠的技术参数。

30%TBP/煤油中DBP和MBP的离子色谱分析

采用离子色谱作为检测仪器,建立了简单、快速、灵敏地测定30%TBP/煤油中DBP和MBP的新方法。以去离子水为反萃剂将有机相中DBP和MBP反萃到水相,去除有机相干扰,离子色谱仪进行检测。当DBP浓度在0.01~6.0 mmol/L、MBP浓度在0.02~2.5 mmol/L时,标准曲线均具有良好的线性,相关系数r 2均达到0.999,DBP的检出限为5.0μmol/L,MBP的检出限为4.0μmol/L。采用建立的方法对模拟30%TBP/煤油生成的辐解产物进行重加回收实验,DBP的重加回收率在92%~96%,模拟样品6次平行测定的s r=2.1%。

HBV PreS2-MBP融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化

目的优化HBV PreS2-MBP融合蛋白在大肠杆菌中的表达条件。方法通过改变重组质粒的宿主菌、培养基、诱导温度、诱导剂、诱导剂浓度、诱导时间等条件,利用SDS-PAGE和BandScan凝胶分析软件,分析以上条件改变对表达产物表达量的影响。将重组质粒连续传100代,检测融合蛋白的表达稳定性。结果重组质粒在大肠杆菌BL21菌株、GS培养基、28℃、0.5mmol/L IPTG或1.5mmol/L乳糖诱导4h时,目的蛋白的表达量最高,占菌体总蛋白的43.5%。重组质粒传代100代,融合蛋白的表达稳定。结论已确定出了融合蛋白在大肠杆菌中表达的最佳条件。

重组融合蛋白MBP-BSH在大肠杆菌中的表达及其纯化、功能鉴定

选择IF2融合标签,另选择含SUMO、GST、NusA和MBP融合标签的质粒构建表达载体。SDS-PAGE电泳结果显示,重组菌Escherichia Rosetta(DE3)(pLS932-BSH)的诱导表达细胞提取液上清出现了明显的融合蛋白MBP-BSH条带,经诱导表达条件优化后,MBP-BSH可溶性大幅度提高。用Ni-NTA Resin和Amylose Resin分别进行目标蛋白纯化,结果显示前者效果更好,并且C端融合His-Tag更有利于其与Ni离子结合,MBP-BSH蛋白纯化量更大,杂带更少。茚三酮显色反应测定酶活力,结果显示纯化后的MBP-BSH的酶比活力为2.4282U/mg。

重组人MUC1-MBP融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及其免疫活性测定

目的 :以MUC1为靶点研制抗肿瘤蛋白疫苗。方法 :将MUC1基因连入pMAL p2原核表达载体 ,并转化大肠杆菌 ,通过IPTG诱导MUC1表达 ,经Westernblot鉴定 ,Amylose亲和层析纯化蛋白。用MUC1 MBP免疫健康C5 7BL 6小鼠 ,测定其免疫活性 ,通过ELISA测定血清中抗MUC1抗体的效价 ;采用MTT法测定小鼠脾CTL活性 ,通过3H TdR掺入法测定T细胞增殖能力。结果 :成功构建了pMAL MUC1表达载体并得到稳定表达MUC1的菌株 ,鉴定了MUC1在大肠杆菌中的表达 ,纯化了MUC1蛋白。经重组MUC1 MBP免疫的C5 7小鼠 ,血清抗MUC1抗体的效价为 1:5 76 0± 32 2 1;脾CTL对MCF 7及Lewis肺癌细胞的杀伤率分别为 4 7 7%± 4 3%和 6 7 5 %± 6 5 %。结论 :人类重组MUC1融合蛋白可引发小鼠CTL反应和体液免疫应答 ,有希望研制成抗腺癌蛋白疫苗。

醒脑开窍针刺法对重度颅脑损伤患者血浆MBP、GFAP含量的影响

目的观察醒脑开窍针刺法对重度颅脑损伤(STBI)患者血浆髓鞘碱性蛋白(MBP)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)含量的影响。方法将60例STBI患者随机分成针刺组和对照组,对照组予西医常规治疗,针刺组在此基础上加用醒脑开窍针刺法治疗。分别于治疗前及治疗后3,7,14 d检测2组患者血浆MBP、GFAP含量,评估2组患者格拉斯哥昏迷评分(GCS);观察2组治疗7,14 d苏醒例数、苏醒时间;于治疗14 d后根据格拉斯哥预后评分(GOS)评定预后。结果 2组治疗后血浆MBP、GFAP含量均较治疗前逐渐下降,针刺组治疗后7,14 d血浆MBP和GFAP含量均明显低于对照组(P均<0.05),其中针刺组治疗后3 d血浆GFAP含量也明显低于对照组(P<0.05)。针刺组治疗后3,7,14 d GCS评分均明显高于对照组(P均<0.05);治疗后7,14 d苏醒率均高于对照组(P均<0.05),苏醒时间均较对照组明显缩短(P均<0.05);治疗后14 d总有效率明显高于对照组(P<0.05)。结论醒脑开窍针刺法可有效降低STBI患者血浆MBP、GFAP含量,促进STBI受损神经修复,有效抑制继发性脑损伤的发生,提高苏醒率,缩短苏醒时间,改善患者预后。

利用小鼠皮下人乳腺癌移植瘤模型观察MUC1-MBP抗乳腺癌作用

目的建立小鼠皮下人乳腺癌移植瘤模型,探讨MUC1-MBP蛋白疫苗的抗人乳腺癌作用。方法首先通过筛选最佳条件建立小鼠皮下人乳腺癌移植瘤动物模型,HE染色和免疫组化鉴定。利用已经建立的乳腺癌动物模型,通过肿瘤预防实验和治疗实验,观察MUC1-MBP抗人乳腺癌作用。结果通过5 Gy X射线照射,皮下注射MCF-7人乳腺癌细胞3×10~6个/只,FTY720灌胃4～6 d,成功建立小鼠皮下人乳腺癌移植瘤动物模型。在预防乳腺癌生长实验中,PBS对照组、MBP组和MUC1-MBP组小鼠成瘤率分别为100%、83%和67%,肿瘤平均体积分别为(91.9±56.3)mm^3、(22.3±21.5)mm^3和(17.2±18.0)mm^3。与对照组相比,MUC1-MBP组显著减小(P<0.001),MBP组明显减小(P<0.05),提示MUC1-MBP能明显预防乳腺癌生长,MBP对乳腺癌生长也有一定的预防作用。在治疗乳腺癌生长实验中,PBS对照组、MBP组和MUC1-MBP组小鼠肿瘤生长抑制率分别为0、17%和17%,肿瘤平均体积分别为:(101.7±73.6)mm^3、(56.9±56.7)mm^3和(32.6±32.3)mm^3,与对照组相比,MUC1-MBP组明显减小(P<0.05),差异显著,提示MUC1-MBP对乳腺癌具有治疗作用。MBP组无显著差异(P>0.05),无统计学意义,提示MUC1-MBP对乳腺癌具有治疗作用。肿瘤组织HE染色结果发现,MUC1-MBP和MBP免疫组小鼠肿瘤组织周围及癌细胞间淋巴细胞浸润较PBS组明显增多。结论成功建立ICR小鼠皮下人乳腺癌移植瘤模型,该模型为肿瘤疫苗活性研究提供良好的研究工具。利用该模型发现MUC1-MBP免疫明显抑制小鼠皮下人乳腺癌的生长,MBP免疫也具有一定的抗乳腺癌生长作用,其能明显增强MUC1的免疫原性。

MBP诱导小鼠免疫细胞凋亡的体内研究

为初步探讨ＭＢＰ与免疫细胞凋亡的关系，实验设置了超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素Ｂ（ＳＥＢ）作为阳性对照，普通蛋白抗原ＢＳＡ为阴性对照。实验方法以检测ＤＮＡ断裂为主，配以形态学观察。结果表明，ＭＢＰ处理组免疫细胞ＤＮＡ经电泳可见“典型”的梯状带；通过比色法和流式细胞术定量检测了ＤＮＡ断裂的数值。结果显示，ＭＢＰ处理组ＤＮＡ断裂百分数与ＳＥＢ组无明显区别（Ｐ＜０．０５）。同时形态学观察表明ＭＢＰ处理组凋亡细胞数目与ＳＥＢ组基本相同。上述结果表明ＭＢＰ具有类似超抗原ＳＥＢ的效应。

S-100B,NSE和MBP评估重型颅脑损伤预后的研究

目的研究重型颅脑损伤后血清S-100B蛋白、神经特异性烯醇化酶(NSE)和碱性髓鞘蛋白(MBP)浓度在预后评估中的价值。方法对2002年1月至2002年12月40例重型颅脑损伤住院病人在伤后12h内进行血清S-100B、NSE和MBP浓度检测,并结合GOS评分进行比较分析。结果本组40例重型颅脑损伤病人伤后血清S-100B、NSE和MBP浓度均显著高于正常对照组,不同预后组之间S-100B、NSE和MBP浓度存在显著差异。分别以伤后12h血清S-100B浓度2.0μg/L、NSE浓度30ng/ml和MBP浓度10ng/ml为分界标准评估预后,S-100B评估预后的特异度为91%,敏感度72%;NSE特异度为77%,敏感度67%;MBP特异度为63%,敏感度61%。结论伤后血清S-100B蛋白、NSE和MBP浓度对评估重型颅脑损伤预后具有较高的特异性和敏感性。而S-100B浓度在预后评估中的作用较NSE和MBP更为敏感,特异,因此可作为评估重型颅脑损伤预后的一种可靠的临床指标。