温度对MX-80膨润土物理性能的影响

为研究高温受热对膨润土物理性能的影响,将MX-80膨润土粉末置于4种不同温度(25、100、150、200℃)下受热30 d后,对其进行比重、界限含水率、膨胀指数试验。在此基础上,利用热重分析试验(TGA)和X射线衍射试验(XRD)揭示高温受热后MX-80膨润土的物理性能变化及微观机理。试验结果表明:MX-80膨润土的比重、界限含水率、膨胀指数均随受热温度增加而减小,100℃以下受热时温度对膨润土物性的影响较小,在150℃及以上受热时对物性指标的影响较大;受热30 d后MX-80膨润土中蒙脱石含量减少,150、200℃下受热后出现了新矿物钠云母,表明受热温度达到150℃后土中出现了蒙脱石向钠云母的转化;受热后MX-80膨润土吸附的弱结合水、强结合水含量减少;MX-80膨润土物理性能的变化可归因于不同高温作用后土中蒙脱石向钠云母的转化和结合水的脱附。

MX-80膨润土高温老化时间效应的细微观分析

在200℃高温条件下,对MX-80膨润土粉末进行了不同时长(0、15、30、60、90、120 d)的热老化预处理;通过热重分析(thermogravimetric analysis,简称TGA)、X射线衍射(X-ray diffraction,简称XRD)和电镜扫描(electron microscope scanning,简称SEM)等试验探讨了MX-80膨润土中结合水、矿物成分、微观形貌等随热老化时间t的变化规律;基于蒙脱石矿物晶体结构学理论揭示了MX-80膨润土高温老化时间效应的细微观机制。试验结果表明:(1)膨润土中自由水、弱结合水和强结合水随热老化时间t的递增均发生不同程度的脱附现象,0~15 d变化显著,15 d后趋于稳定,120 d后三者降幅分别为82.6%、68.8%和96.5%;(2)随着热老化时间t的增加,膨润土主要矿物成分蒙脱石部分转化为稳定性较好的钠云母,0~15 d变化显著,15 d后趋向稳定,120 d后二者的变化量分别为–12.57%和+12.47%;(3)高温热老化过程中,蒙脱石矿物的晶层间距减小,引起片层状矿物之间收缩变形,导致膨润土的微观形貌随着热老化时间t的递增发生不同程度的变化;(4)高温热老化状态下,膨润土的矿物成分转化、结合水脱附、微观形貌改变等三者之间相互作用和彼此影响,是引起膨润土宏观物理力学性能发生变化的根本原因。

系统性红斑狼疮患者外周血AC007278.2、MX2表达水平与疾病活动度及补体水平的关联性分析

目的分析系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血长链非编码RNA AC007278.2、MX动力蛋白样GTP酶2(MX2)表达水平与疾病活动度、补体水平的关联性。方法招募2018年11月至2020年2月武汉亚心总医院及中部战区总医院收治的SLE患者168例(SLE组)。根据患者入院24 h内进行SLE疾病活动指数-2000(SLEDAI-2000)评分,其中疾病活动度为无活动者42例,轻度活动者45例,中度活动者42例,重度活动者39例。招募同期健康人群80名作为对照组。比较不同组的临床资料,采用Pearson相关分析探讨AC007278.2、MX2水平与补体C3、C4水平及疾病活动度的相关性,采用多元线性回归分析影响SLE疾病活动度的因素。结果SLE组AC007278.2、MX2水平高于对照组,补体C3、C4及白细胞(WBC)、淋巴细胞、血小板(PLT)、血红蛋白(Hb)水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,SLE患者AC007278.2、MX2水平与补体C3、C4水平呈负相关(P<0.05),与SLEDAI-2000评分呈正相关(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,AC007278.2(β=0.410)、MX2(β=0.512)与SLE疾病活动度呈正关联(P<0.05),补体C3(β=-0.362)、C4(β=-0.528)与SLE疾病活动度呈负关联(P<0.05)。结论SLE患者外周血AC007278.2、MX2表达水平升高,与SLE疾病活动度及补体C3、C4具有关联性。

Mx基因稀有密码子和mRNA结构及大肠杆菌表达优化

通过对稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构的分析,构建了4种重组表达菌株BL21(DE3)/pET-Mx,Rosseta(DE3)/pET-Mx,BL21(DE3)/pGEX-Mx和Rosseta(DE3)/pGEX-Mx,在大肠杆菌中进行Mx基因的表达,Rosseta(DE3)/pET-Mx和Rosseta(DE3)/pGEX-Mx重组表达菌中都获得了表达,Western blotting检测到了特异的75 kDa表达产物。实验结果证明稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构对Mx蛋白表达都有影响,选择适用于稀有密码子表达的菌株Rosetta(DE3)有利于Mx蛋白的表达,同时翻译起始区二级结构能值较低的表达载体pGEX-Mx获得的表达量明显增高。实验中首次获得了重组表达鸡全长Mx蛋白的大肠杆菌重组菌。

鸡Mx蛋白基因诱变修饰及抗病活性

【目的】进一步研究鸡Mx蛋白第631位氨基酸的变异与鸡群抗病性的相关性。【方法】本实验利用PCR突变技术将鸡Mx蛋白基因的全长cDNA第2032位的碱基由G突变为A(既631位氨基酸的改变),并将突变的Mx基因插入真核表达载体pcDNA3.0,重组表达载体转染COS-Ⅰ细胞后,进行RT-PCR与间接免疫荧光(IFA)鉴定。【结果】对鸡Mx蛋白基因的cDNA进行PCR诱变修饰正确,构建了能够正确表达鸡Mx蛋白的重组真核表达载体;诱变修饰重组Mx蛋白对抗新城疫病毒(NDV)感染分析结果显示,重组Mx蛋白具有较强的抗新城疫病毒生物活性。【结论】为下一步研究鸡Mx蛋白的抗病机理与制备抗病转基因鸡奠定了坚实的基础。

Mx基因抗性位点在12个地方鸡种中的分布及遗传结构分析

通过PCR-RFLP技术检测Mx基因S631N位点的抗性等位基因A和敏感性等位基因G在我国地方鸡种中的分布差异。结果表明:PCR-RFLP能准确检测出抗性等位基因A与敏感性等位基因G在12个地方鸡种内的突变,抗性等位基因A在所有群体内的基因频率平均为0.304,敏感性等位基因G的频率平均为0.696;12个地方鸡种群体Mx基因S631N位点的观察杂合度平均为0.657 2,Shannon信息指数平均为0.524 0。在该位点上,12个地方鸡种除仙居鸡显著偏离Hardy-Weinberg平衡(P<0.01)外,其余11个群体均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);经Ewens-Watterson中立性检验,该位点在各群体内(除白耳鸡群体外)都属于中立性选择。基于该位点等位基因频率构建的UPGMA聚类图将12个地方鸡种分为3大类,聚类结果反映了12个地方鸡种在Mx基因抗性方面存在的差异和优势。

鸡抗病毒Mx蛋白修饰及其真核表达载体的构建

利用高保真RT-PCR的方法从Poly(I).Poly(C)诱导的鸡成纤维细胞总RNA中扩增出鸡全长MxcD-NA,扩增产物克隆到pMD19-T Simple载体上,利用PCR突变技术将其第2 032位的碱基由G突变为A,经克隆测序证实突变成功后,将已突变的Mx基因插入真核表达载体,通过PCR、酶切鉴定插入片段正确,提取质粒转染COS-Ⅰ细胞进行RT-PCR鉴定。结果表明:正确克隆了鸡Mx基因,并成功对该基因进行PCR诱变修饰,构建了能够表达鸡Mx基因的重组真核表达载体,为Mx基因体内外表达及生物学活性的进一步研究奠定了基础。

氯化消毒饮用水中强致突变物MX[3-氯-4-(二氯甲基)-5-羟基-2(5H)-呋喃酮]的形成

利用一系列XAD吸附树脂及大孔阴、阳离子交换树脂,将太湖水中溶解态有机物分离为溶解态富里酸类、腐殖酸类、憎水弱酸类、憎水碱类、憎水中性物类、亲水酸类、亲水碱类七种组分,分别对不同组分的有机物进行氯化处理后,用GC/MS选择离子峰面积法测定了产物中的MX[3-氯-4-（二氯甲基）-5-羟基-2（5H）-呋喃酮]。结果表明,太湖水体中的溶解态腐殖酸类可能是生成MX的重要前驱物。

基于Flash MX实现计算机图形学经典算法仿真演示

计算机图形学算法的传统教学和学习方式抽象不直观，让学习者难以理解，因此成为学习上的难点。用Flash MX实现的算法仿真演示可以处理用户任意输入的图形，自动生成演示内容，同步显示算法执行的每一步中间过程和对输入图形的处理结果，并且还可以随意调节程序的执行速度及单步执行，形象直观，对学习者掌握算法提供了很大的帮助。该文阐述了仿真演示的原理、结构和实现方法。

睾丸注射Mx基因生产抗病转基因鸡初探

采用脂质体转染法,将线性化pcDNA3.0-MMx质粒随机打点注射入18周龄青年公鸡睾丸内,术后观察公鸡日常活动、常规检测精子;采集转染后25、50、75 d公鸡精液,并于转染70 d后人工采精,授精于正常母鸡,产生F1后代,采用常规PCR检测技术,检测证实外源Mx基因的整合情况,探讨外源Mx基因在鸡体内稳定整合和遗传的能力。结果表明:手术法转染外源基因过程对公鸡的生殖功能未造成明显影响;PCR检测证实外源Mx基因已整合到精子基因组,且能通过体外受精传递给后代,后代PCR检测的阳性率为27.27%(6/22)。证明外源Mx基因能稳定整合到基因组上,睾丸内注射法可能是一种切实可行、易于推广的制备抗病转基因鸡的方法。

鸡抗病毒Mx基因的克隆与序列分析

用干扰素诱导剂poly（I）／（C）诱导鸡胚成纤维细胞，提取细胞总RNA，采用RT—PCR方法扩增了北京白鸡Mx基因全长编码区序列。序列分析表明：该基因编码区长2118bp，编码705个氨基酸残基，其第631位为天冬酰胺，理论上推测具有抗病毒活性。通过与GenBank中已登录的7个品系鸡Mx基因进行核苷酸系统进化树分析，结果显示，北京白鸡Mx基因与WL—N品系鸡Mx基因的亲缘关系最近。北京白鸡Mx基因序列与其他动物Mx基因序列的比较结果显示，核苷酸同源性为49．5％～76．8％，氨基酸同源性为44．1％～61．6％。据此可以推断：克隆的Mx基因具有抗病毒活性的分子特征和特征性功能结构，不同种属动物Mx基因的同源性与其亲缘关系呈正相关。

赤眼鳟Mx基因全长cDNA克隆及其经GCRV攻毒后的组织表达分析

为研究赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)Mx蛋白(Myxovirus resistance protein)的功能,采用简并PCR和SMART RACE方法从赤眼鳟脾脏中克隆得到Mx基因全长cDNA,并通过生物信息学方法分析其同源性,再利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测其在脾、肝、肠、肾等9个组织中的表达,以及感染草鱼呼肠孤病毒(Reovirus of Grass carp)GCRV-104后不同时间点赤眼鳟Mx的时空表达规律。结果表明:赤眼鳟Mx基因cDNA序列(ScMx)全长2325 bp,包含5′-UTR 40 bp,3′-UTR 371 bp和ORF 1884 bp,共编码627个氨基酸,其编码的Mx蛋白分子量约为70.9 kD,理论等电点pI为8.25,具有脊椎动物Mx蛋白共有的结构特征;赤眼鳟Mx与鲫鱼Mx3同源性最高;Mx在赤眼鳟脾、肝、肠、肾等9个组织中均有表达,其中肝脏中的相对表达量最高,脾脏次之,肠组织中的表达量最低;经GCRV-104病毒感染刺激后,ScMx在肝和脾组织中的表达量显著上调,均在48h到达峰值,分别为对照组的10倍(肝)和5倍(脾),且在这两个组织中的表达模式相似,均表现为先升高后下降的波动型变化趋势。研究表明ScMx参与了赤眼鳟抗GCRV-104病毒的免疫反应。

草鱼呼肠孤病毒上调稀有鮈鲫鳃中TLR3和Mx基因的表达(英文)

鳃暴露在水环境中,增加了对疾病的易感性。为了研究稀有鮈鲫人工感染草鱼呼肠孤病毒过程中鳃部先天性免疫反应机制,我们克隆了抗病毒效应分子Mx基因的部分序列,用适时荧光定量PCR检测双链RNA的模式识别受体(Toll-like receptor3,TLR3)及I型干扰素指示基因Mx的表达。TLR3和Mx基因的表达在注射病毒后12h显著升高(p<0.05),TLR3的表达水平在注射后48h恢复到正常水平(p>0.05),而Mx的高水平表达一直持续到实验结束(p<0.05)。结果表明在GCRV感染中,鳃能发生局部免疫反应,其干扰素途径被激活。

Mx蛋白研究进展

Mx蛋白是干扰素诱导表达的抗病毒蛋白家族中的成员之一。人、哺乳动物、鱼类、家禽体内都有Mx蛋白。Mx蛋白具有GTP酶活性 ,在其肽链氨基端均包含一个氨基酸序列高度保守的的三联GTP结合区域 ,羧基端存在有亮氨酸拉链区域。人和鼠的Mx蛋白有抗病毒活性。家禽中鸭的Mx蛋白无抗病毒活性 ;鸡的Mx蛋白的抗病毒活性受 6 31位氨基酸的影响 ,当 6 31位氨基酸为天冬酰胺时有抗病毒活性 ,为丝氨酸时则无抗病毒活性。

家鸡Mx基因多态性及其诱变修饰的研究

研究采用错配PCR-RFLP的方法对家鸡14个品种的Mx基因变异性分布进行了探索;并利用PCR突变技术将Mx基因全长cDNA第2032位碱基由G突变为A(即631位氨基酸的改变),并将突变的Mx基因插入真核表达载体pcDNA3.0,转染COS-Ⅰ细胞,进行RT-PCR与间接免疫荧光(IFA)鉴定,研究结果显示,14个品种Mx基因的2032位点存在2个等位基因(A、G),3种基因型(AA、AG、GG),其中鹿苑鸡、狼山鸡、斗鸡未发现AA型个体,茶花鸡未发现GG个体;并成功对Mx基因进行PCR诱变修饰和构建了能够表达鸡Mx基因的重组真核表达载体,为其体内外表达及生物学活性的进一步研究奠定了基础。

常规处理工艺对饮水中MX及致突变性影响

目的研究3-氯-4-二氯甲基-5-羟基-2(5氢)-呋喃酮(MX)和总有机碳(TOC)浓度以及非挥发性有机提取物致突变性在饮用水常规处理工艺过程中的变化,为城市给水处理工艺优化提供依据。方法采集某自来水厂饮用水常规处理工艺过程中的源水、预加氯后的混凝沉淀水、沉淀水、过滤水、加氯消毒后的出厂水和管网末梢水。采用气相色谱/质谱联用(GC/MS)和TOC分析仪分别检测水样MX浓度和TOC浓度,Ames试验检测水样非挥发性有机提取物的致突变性,同时检测水样的浊度和pH值。结果常规处理工艺过程中不同工艺段水样MX和TOC浓度的变化趋势一致,与源水比较,均表现为预加氯和加氯消毒后二者浓度上升,经过沉淀处理后二者浓度下降;水中MX的生成量与TOC浓度呈显著正相关,而与水的浊度和pH值无相关关系;加氯消毒后的出厂水和管网末梢水致突变活性也有所增加。结论在饮用水常规处理工艺过程中,加氯和沉淀工艺是影响MX和TOC浓度的重要环节;加氯可增加饮用水中MX的生成量和致突变活性,影响饮水安全。

氯化饮水有机提取物和MX对大鼠脂质过氧化作用影响的研究

采用 Wistar大鼠灌胃染毒方法 ,观察氯化饮水有机提取物和氯化副产物 3 -氯 - 4 - (二氯甲基 ) - 5 -羟基 - 2 ( 5氢 ) -呋喃酮 (简称 MX)对大鼠组织脂质过氧化作用 ( L PO)及谷胱甘肽 ( GSH)含量的影响。结果表明 ,不同浓度的氯化饮水有机提取物均可使大鼠肝脏、肾脏和睾丸中脂质过氧化产物——丙二醛 ( MDA)含量明显增加 ,肝脏丙二醛的含量随浓度的增高而增高 ,GSH随浓度的增高而下降。MX对染毒大鼠组织中丙二醛和 GSH含量无明显影响。

Fenton氧化法降解HMX废水中有机物的氧化反应动力学

用Fenton氧化技术研究了降解HMX废水中有机物的工艺及氧化反应动力学。结果表明,适宜的降解工艺条件为:H2O2投加量2mol/L,H2O2与Fe2+摩尔比为40∶1,pH值为3,反应温度20℃,反应时间1.5h。在上述条件下HMX废水的COD去除率为68.5%。在研究的温度范围内,用Fenton氧化法降解HMX废水中有机物的氧化反应为一级反应,反应的活化能和指前因子分别为7.03kJ/mol和0.067 7min-1。

苏太猪Mx1基因第14外显子多态性及其与繁殖性能的关联分析

采用PCR-RFLP方法对苏太猪Mx1基因第14外显子的多态性进行分析,PCR产物经Hin6Ⅰ酶切后,共检测到3个等位基因,6种基因型。卡方检验结果表明,苏太猪在Mx1基因Hin6 I酶切位点已经达到Hardy-Weinberg平衡状态。基因型为BC的种母猪第3胎总产仔数、产活仔数、初生窝重、断奶仔猪数和断奶窝重均显著高于基因型为BB的个体(P<0.05),也高于基因型为AA、AB、AC和CC的个体,但是差异不显著(P>0.05)。通过测序在扩增片段中新发现了3种类型的碱基突变,前2个分别导致了Thr和Glu向Ala和Arg的替换,最后一个突变不引起氨基酸的变化,且后两个突变位点为BB基因型所特有;本研究提示Mx蛋白Glu→Arg的突变位点可能与其抗病毒能力有关。

基于Mx启动子和荧光素酶报告基因定量检测鸡Ⅰ型干扰素生物学活性的研究

为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,24 h后用鸡IFN-α/β处理细胞,结果荧光素酶基因在Mx启动子的作用下获得转录表达;荧光素酶的表达量与干扰素的抗病毒活性有着良好的线性相关性,并在干扰素处理细胞6 h后就可以检测;对鸡IFN-α和IFN-β检测的敏感性分别约为抗病毒活性定量检测方法的10和100倍。该检测系统与传统抗病毒定量检测方法相比,具有快速简便、准确敏感、便于高通量检测等优势,在禽类乃至哺乳动物干扰素生物学基础和应用研究及产业化过程中具有重要应用价值。