跑台运动通过抑制小胶质细胞NAMPT表达并上调NAD+/SIRT1通路改善AD小鼠海马线粒体功能

目的:探讨12周有氧跑台运动对APP/PS1小鼠海马小胶质细胞NAMPT表达的影响及其在调节NAD^(+)/SIRT1/FOXO1/3a信号通路改善线粒体功能障碍中的作用。方法:3月龄野生型C57BL/6小鼠和APP/PS1小鼠随机分为野生型对照组(WT-sed)、野生型运动组(WT-exe)和APP/PS1对照组(AD-sed)、APP/PS1运动组(AD-exe)。运动组进行为期12周的有氧跑台运动干预。干预结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,免疫荧光检测小鼠海马Iba-1表达水平及NAMPT与Iba-1共定位水平,透射电镜检测小鼠海马线粒体超微结构,Western blot检测海马SIRT1、Ace-FOXO1/3a、PARP1、CD38蛋白表达水平,RT-PCR检测线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)、PARP1、CD38 mRNA表达水平,ELISA和试剂盒检测NAD^(+)、NADH、IL-1β、IL-6、TNF-α、ATP、H_(2)O_(2)的含量。结果:与WT-sed组相比,AD-sed组小鼠海马NAMPT与Iba-1共定位水平、PARP1、CD38、Ace-FOXO1/3a蛋白表达水平、IL-6、IL-1β、TNF-α、H_(2)O_(2)含量及受损线粒体数量均显著升高,NAD^(+)含量、NAD^(+)/NADH比值、SIRT1蛋白表达水平、mtDNA拷贝数、ATP含量及学习记忆能力均显著降低,而12周有氧跑台运动干预显著改善了APP/PS1小鼠海马上述异常变化。结论:12周有氧跑台运动可能通过抑制小胶质细胞NAMPT过度表达,降低神经炎症反应,减少PARP1、CD38对NAD^(+)的消耗,上调NAD^(+)/SIRT1/FOXO1/3a信号通路,改善线粒体功能障碍,最终起到缓解APP/PS1小鼠学习记忆衰退的作用。

西藏中部地区散养牦牛和绵羊细粒棘球绦虫cox1和nad1的多态性

目的分析西藏中部地区散养牦牛和绵羊细粒棘球绦虫cox1、nad1的基因多态性。方法采集西藏中部地区45份散养牦牛和绵羊细粒棘球蚴包囊,提取包囊生发层DNA,根据细粒棘球蚴线粒体cox1、nad1基因序列设计扩增的引物序列,用PCR技术扩增线粒体cox1、nad1基因片段,将扩增产物做琼脂糖凝胶电泳并测序;利用MEGA11.0软件做cox1、nad1序列特征与同源性比对,并构建系统进化树;运用DnaSP 5.0软件计算序列单倍型数量(H),分析核苷酸多样性(Pi)、单倍体型多样性(Hd)特性;利用Network软件为cox1、nad1基因的所有单倍体构建单倍体网络图,判断西藏中部地区散养牦牛和绵羊的主要单倍型。结果(1)cox1、nad1序列长度分别为925、839bp。(2)在cox1序列中,A、T、G、C碱基的平均含量分别为32.6%、33.1%、17.4%、16.9%;而nad1序列中,A、T、G、C碱基的平均含量为19.5%、47.6%、25.5%、7.4%;同源性分析结果显示,cox1序列之间的同源性为99.6%~100.0%,nad1序列之间的同源性为98.1%~100.0%;西藏中部地区散养牦牛和绵羊细粒棘球绦虫基因型为G1、G3、G6。(3)cox1、nad1单倍型个数分别为19个、7个,Hd、Pi分别为0.89600、0.56000和0.36500、0.00060。(4)单倍型网络图显示,Hc-2、Hc-12、Hn-1为西藏中部地区散养牦牛和绵羊的主要单倍型。结论西藏中部地区散养牦牛和绵羊细粒棘球绦虫基因型为G1、G3、G6,G1是主要基因型。上述结论为探明西藏中部地区细粒棘球蚴的分型和病原体遗传演化的情况提供了参考依据。

奇迹女侠NAD^(+)——烟酰胺腺嘌呤二核苷酸

NAD^(+)(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)是一种重要的生物分子,它在细胞内起着关键的能量传递和代谢调控作用。近年来,NAD^(+)在医学和健康领域的研究备受关注,尤其是在衰老、代谢疾病和癌症治疗方面,与它相关的食物也逐渐变成了当代人们餐桌上的新宠。本文用拟人化的口吻介绍了NAD^(+)的化学结构、生物功能以及与健康相关的最新研究发展,分析了它从抗衰老领域转型临床运用的潜力。

生物细胞内NAD水平分析技术的研究进展

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是所有活细胞中普遍存在的关键辅助分子,在细胞代谢中担任着重要角色。NAD是细胞能量合成过程中的重要因子,参与DNA损伤修复,调控细胞内钙离子浓度等重要生命过程,在细胞的代谢反应中发挥着关键的作用。关于生物细胞内NAD检测的研究一直是近20年生命科学研究中的热点之一。该文从NAD结构特性、合成途径角度着手,总结了国内外关于生物细胞NAD水平检测方法的研究进展,详细介绍了各种方法的原理、优缺点及适用范围并展望了其发展趋势,以期为相关研究提供参考。

年龄对眼周NAD(P)H水平影响及一款眼霜抗皱功效评价

通过招募一批不同年龄段受试者,使用皮肤无创仪器检测方法分析眼周NAD(P)H水平与年龄、肤色和弹性参数R2之间的相关性。另招募一批受试者,使用一款眼霜评估眼部抗皱效果。研究结果表明:随着年龄增长,眼周颗粒层细胞NAD(P)H水平降低、鱼尾纹等级增大,皮肤弹性R2值减小,肤色加深,皮肤ITA°值减小。年龄、肤色、弹性与NAD(P)H水平之间存在相关性。15名受试者使用眼霜28天后,与使用前相比眼周NAD(P)H水平增加,皮肤弹性R2值增加,鱼尾纹评级下降,胶原纤维谐波强度增加。该产品具有一定的抗皱效果。

NAD^(+)代谢机制及其对衰老相关疾病影响研究进展

综述NAD^(+)代谢机制及其对衰老相关疾病的影响研究进展。重点从NAD^(+)的生物合成途径、消耗途径及其调控机制等方面阐述NAD^(+)参与的信号通路和细胞过程,以及它在健康与疾病中的作用,并且以NAD^(+)代谢网络中前体物质和关键酶的作用机理为依据,探讨NAD^(+)代谢调控在衰老相关疾病中的潜在治疗方法,为理解NAD^(+)水平下降和衰老相关疾病之间复杂的因果关系提供新的视角;同时从NAD^(+)及其前体的分布和运输、有毒代谢物的产生和修复、NAD^(+)代谢动态的监测和测量等方面阐述NAD^(+)研究发展过程中存在的瓶颈。最后展望以NAD^(+)为靶点进行疾病治疗和药物开发的广阔前景。

NAD依赖型去乙酰化酶SRT在植物表观遗传调控中的作用

SRT(sirtuin)是一类与酵母沉默信息调节蛋白2(yeast silent information regulator 2, Sir2)高度同源的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide, NAD)依赖型蛋白质去乙酰化酶。真核生物中,SRT通过催化特异组蛋白或非组蛋白赖氨酸(Lys)残基的去乙酰化反应,调控染色体稳定、基因转录及相关蛋白的活性状态。研究表明,SRT介导的去乙酰化在植物代谢、生长发育和逆境胁迫响应等过程中起重要作用。本文对植物SRT的鉴定、结构与分类、生物进化、表观遗传调控机制和生物学过程调控方面的研究加以综述,并对该蛋白未来研究方向进行展望,以期为今后SRT介导的表观遗传学生物过程的研究提供基础。

基于NAD算子的三阶Runge-Kutta方法及波场模拟

为求解二维声波方程,本文结合空间高阶偏导数离散化的八阶NAD算子和时间导数离散化的三阶Runge-Kutta方法,推导出八阶NAD-RK算法。详细研究了八阶NAD-RK算法的计算效率和地震波数值模拟。结果显示:在达到相同精度下,八阶NAD-RK算法的内存需求约为八阶LWC算法的20%,约为八阶SG算法的25%;八阶NAD-RK算法的计算速度约为八阶LWC算法的5.8倍,约为八阶SG算法的1.52倍。地震波数值模拟实验进一步验证八阶NAD-RK算法数值频散压制效果。

八阶NAD-RK方法及其数值频散研究

为求解二维声波方程,本文结合空间高阶偏导数离散化的八阶NAD算子和时间导数离散化的三阶Runge-Kutta方法,推导出八阶NAD-RK方法。详细推导和分析了八阶NAD-RK方法的数值频散。结果显示:同八阶Lax-Wendroff(LWC)格式和八阶交错网格(SG)格式相比,八阶NAD-RK方法具有最小的数值频散和最小的数值频散各向异性。该方法能够有效地抑制粗网格条件下声波方程离散化引起的数值频散。

NAD^(+)在硫芥导致中毒损伤中的作用及研究进展

硫芥(SM)作为一种经典的糜烂性化学毒剂,曾造成大量人员伤亡,目前仍有潜在威胁。SM可导致皮肤、眼睛和呼吸系统等多脏器和系统的损伤,其中毒机制不清,尚无特效救治药物。本文回顾了近年关于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+))与SM中毒方面的研究进展,介绍了NAD^(+)在体内的合成及生物学作用,阐述了SM导致细胞内NAD^(+)降低的现象及机制,重点从多聚ADP核糖聚合酶1的过度活化、沉默信息调节因子1的抑制和诱导氧化应激三个方面解析了NAD^(+)在SM导致毒性损伤中的作用,并总结了NAD^(+)前体药物治疗SM中毒的研究进展,以期为SM导致中毒损伤的机制及救治药物的研发提供新的思路。

NAD(H)调控线粒体功能在疾病中的作用

线粒体是细胞内最重要的细胞器之一,不仅作为能量合成器在细胞代谢中发挥着重要作用,也通过介导SIRTs、PARPs等多种酶的功能参与细胞信号传导。NAD(H)是活细胞中的辅酶,可作为线粒体的调控因子广泛参与调节细胞生长、分化、能量代谢、凋亡等生物学过程,从而影响疾病的发生与发展。本文综述NAD(H)调控线粒体功能的分子机制,并简述NAD(H)的合成、消耗与检测方法,阐述其在神经系统变性疾病、衰老、肿瘤和心血管疾病等状态下的调控机制和潜在的药物靶点特性,旨在为NAD(H)介导的疾病预防和诊疗提供新的思路。

NADH和NADPH代谢和功能的研究进展

近年来的研究发现,NADH和NADPH在机体生理与病理条件下都发挥重要的功能,本文综述了NADH和NADPH的合成和降解,重点阐述了NADH、NADPH和NADPH氧化酶的功能,并按炎症、心血管疾病、肿瘤、神经退行性疾病等不同病理状况分别叙述。当前对细胞内NADH(NADPH)作用和代谢的研究已成为国际性的研究热点,其相关机制的探讨将逐步深入。

线粒体nad 1内含子2序列在石斛属植物分子鉴定中的应用(英文)

目的在兰科石斛属药用植物鉴定中应用新的分子标记。方法扩增并测定9种石斛属植物线粒体中NADH脱氢酶亚基1编码基因(nad 1)内含子2(in tron 2)的全长序列。结果比对后的nad 1 in tron 2序列长872bp,其中有17个变异位点,可以鉴别除粉花石斛D end robium lodd ig esii以外的8种植物。结论线粒体nad 1 in tron2序列可以作为一种新的分子标记用于石斛属植物的鉴定。

高效液相色谱法测定骨骼肌ATP、ADP、AMP、NAD^+、NADH含量

采用高效液相色谱法测定骨骼肌腺嘌呤核苷酸和辅酶Ⅰ含量。高压液相系 统包括：惠普公司ＺＯＢＡＸ－Ｃ１８反相柱５ｍｍ×１２ｃｍ，５９０ＵＶ检测器。流动相为２２０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸钾缓冲液，内含１０％甲醇，用四丁基氢氧化胺ＴＢＡＨ调ｐＨ至６５。等比洗脱，流速为０８ｍｌ／ｍｉｎ。检测波长为２５４ｎｍ。所有样品和标准品在进样前均用０４５μｍ孔径的虑膜过滤后进样５μｌ作色谱分析。结果表明：ＨＰＬＣ可以同时测定ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ、ＮＡＤ＋、ＮＡＤＨ，分离效率高，操作简便，快速每个样品仅需１５分钟，而且，重现性好，定性可靠，定量准确。

烟酰型辅酶NAD(P)^+和NAD(P)H再生的研究进展

大部分氧化还原酶的催化反应需要烟酰型辅酶NAD(P) + 和NAD(P)H作为氧化剂或还原剂参与 ,由于氧化还原酶应用广泛而辅酶价格昂贵 ,使得辅酶再生逐渐成为研究热点 .综述了近年来NAD(P) + 和NAD(P)H酶法再生、电化学法及光化学法再生的研究进展 。

草莓果实采后NAD激酶活性与NAD(H)、NADP(H)含量及活性氧代谢的关系

【目的】研究草莓采后成熟衰老过程中NADK活性与NAD(H)、NADP(H)及活性氧代谢和膜氧化产物变化的关系,以探讨NADK在非跃变型果实成熟衰老过程中的作用,为调控果实的成熟衰老提供理论依据。【方法】将从果园采回的草莓果实贮藏于不同的温度下并进行每天取样,研究草莓果实在低温(4℃)、常温(20℃)贮藏期间成熟衰老过程中NAD激酶(NADK)活性及其底物NAD(H)、产物NADP(H)以及超氧阴离子O2.-过氧化氢(H2O2)、膜氧化产物丙二醛(MDA)含量的变化并分析NADK与上述指标的关系。【结果】草莓果实在低温(4℃)贮藏时,其NADK活性比常温(20℃)贮藏的高,NAD(H)含量则相应比常温贮藏的低,NADP(H)含量则高于常温下的;同时,在常温贮藏期间果实O2-.生成速率和H2O2含量、膜氧化产物MDA含量均比低温贮藏的高,暗示NADK可能通过影响NAD(H)、NADP(H)的含量及比例来调控O2-.生成速率和H2O2含量,从而调控果实的成熟衰老。【结论】非跃变型果实草莓采后成熟衰老过程中,保持较高的NADK活性有利于延缓果实的成熟衰老,降低NADK活性可导致NAD和NAD(H)含量的积累,进而加速电子传递,产生大量的活性氧O2.-和H2O2,从而促进膜过氧化作用和积累较多的MDA,最终导致果实衰老变质。

抑制NAD(P)H氧化酶表达和活性对大鼠糖尿病肾病的影响

【目的】 探讨NAD(P)H氧化酶在糖尿病肾病发病中的作用和防治方法?【方法】 链脲佐菌素(STZ)诱导的大鼠糖尿病模型随机分为糖尿病组NAD(P)H氧化酶抑制剂apocynin治疗组(0.2 g·kg-1·d-1)和血管紧张素转换酶抑制剂福辛普利治疗组(10 mg· kg-1· d-1),疗程8周?用RT-PCR检测肾NAD(P)H氧化酶亚基p22phox mRNA表达;组织病理学检查观察肾病变程度;测定血肌酐(Scr)?内生肌酐清除率(Ccr)?24 h尿蛋白排泄量?肾质量指数等?【结果】 糖尿病大鼠肾p22phox mRNA的表达较正常大鼠明显升高(P < 0.05), apocynin治疗不影响肾p22phox mRNA 的表达;福辛普利治疗4周,明显降低了肾p22phox mRNA表达(P < 0.05);apoc-ynin和福辛普利均显著降低了肾小球细胞外基质蛋白?Scr?尿蛋白和肾质量指数(P < 0.05),提高了Ccr(P < 0.05),但对血糖和血压均没有显著影响?【结论】 糖尿病大鼠肾组织中,NAD(P)H氧化酶的表达明显升高并参与了糖尿病肾病发病;抑制NAD(P)H氧化酶活性和表达的治疗措施可延缓糖尿病肾病的发生和发展?

甘蔗NAD(P)H脱氢酶复合体O亚基基因克隆及其与甘蔗花叶病毒VPg互作

NAD(P)H脱氢酶(NDH)复合体介导循环电子传递,对于维持叶绿体高效的光合作用具有重要作用。甘蔗(Saccharum spp. hybrid)中NDH复合体应答及参与甘蔗花叶病毒(Sugarcane mosaic virus,SCMV)的侵染尚未见报道。本研究克隆了甘蔗NDH复合体的O亚基,命名为ScNdhO,其开放读码框(open reading frame,ORF)长度为471 bp,编码长度为156 aa的蛋白。生物信息学分析表明,ScNdhO为稳定的亲水性蛋白,不存在信号肽,无跨膜结构域;蛋白二级结构元件多为无规则卷曲,具有典型的NDH复合体O亚基结构域;系统进化树分析表明,该蛋白属于NDH复合体O亚基蛋白家族。实时荧光定量 PCR分析发现,ScNdhO基因的表达具有明显的组织特异性,在成熟甘蔗叶片中的表达量最高,在茎中的表达量最低,在根中几乎不表达;ScNdhO基因在SCMV侵染早期上调表达,后期下调表达。亚细胞定位分析表明,ScNdhO定位于叶绿体。酵母双杂交(yeast two hybrid,Y2H)和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)实验表明,ScNdhO与SCMV-VPg互作。推测ScNdhO被SCMV选择性利用,可能参与SCMV基因组复制及花叶病症状的产生。

草莓和番茄果实采后NAD激酶、NADP磷酸酶活性变化的研究

研究了草莓和番茄果实采后在 4℃和 2 0℃下 ,NAD激酶 (NADK)、NADP磷酸酶活性变化及其与果实呼吸、乙烯释放率、钙调素拮抗剂三氟啦嗪 (Trifluoperazine ,TFP)的关系。结果表明 ,两种果实的NADK、NADP磷酸酶活性变化趋势存在显著差异 ,草莓果实采后NADK活性先下降、后上升 ,NADP磷酸酶活性出现第 1个峰后继续缓慢上升 ,而番茄果实NADK活性先上升、后下降 ,NADP磷酸酶活性在出现第 1个峰后继续下降 ;两种果实NADK活性变化与呼吸变化趋势相似 ,NADP磷酸酶变化与乙烯释放率变化趋势相似 ;低温激活NADK ,抑制NADP磷酸酶 ,TFP对NADK有激活作用 ,对NADP磷酸酶影响较小。表明果实后熟衰老过程与NAD激酶、NADP磷酸酶密切相关 ,激活NADK可能与延缓果实后熟衰老有关。

过量表达NADH氧化酶加速光滑球拟酵母合成丙酮酸

【目的】进一步提高光滑球拟酵母(Torulopsis glabrata)发酵生产丙酮酸的生产强度。【方法】将来源于乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)中编码形成水的NADH氧化酶noxE基因过量表达于丙酮酸工业生产菌株T.glabrata CCTCCM202019中,获得了一株NADH氧化酶活性为34.8U/mg蛋白的重组菌T.glabrata-PDnoxE。【结果】与出发菌株T.glabrata CCTCC M202019相比,细胞浓度、葡萄糖消耗速率和丙酮酸生产强度分别提高了168%、44.9%和12%,发酵进行到36h葡萄糖消耗完毕。补加50g/L葡萄糖继续发酵20h,则使丙酮酸浓度提高到67.2g/L。葡萄糖消耗速度和丙酮酸生产强度增加的原因在于形成水的NADH氧化酶过量表达,导致NADH和ATP含量分别降低了18.1%和15.8%,而NAD+增加了11.1%。【结论】增加细胞内NAD+含量能有效地提高酵母细胞葡萄糖的代谢速度及目标代谢产物的生产强度。