豹皮菌中两种氨基酸成分对N－甲基D－门冬氨酸（NMDA）受体的作用

报道豹皮菌（Ａｍａｎｉｔａｐａｎｔｈｅｒｉｎａ）中两种氨基酸成分ＫＩ－Ⅰ、ＫＩ－Ⅱ对ＮＭＤＡ（Ｎ－Ｍｅｔｈｙｌ－Ｄ－Ａｓｐａｒｔａｔｅ）受体的活性研究。ＫＩ－Ⅰ和ＫＩ－Ⅱ对ＮＭＤＡ受体的作用是通过大鼠大脑皮质和脊髓突触部分的受体结合实验进行的。实验结果指出：ＫＩ－Ⅰ是一种高活性ＮＭＤＡ受体激动剂；ＫＩ－Ⅱ是ＮＭＤＡ受体拈抗剂。

氟中毒大鼠脑组织中NMDA受体及内质网应激相关通路蛋白的表达

背景:前期研究发现N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid receptor,NMDA)受体与氟相关,但其在氟诱导的内质网应激中的作用尚不明确。目的:观察实验性氟中毒大鼠脑组织中兴奋性神经递质NMDA受体及内质网应激IRE1α-ASK1-JNK通路蛋白表达变化,并应用NMDA受体抑制剂干预SH-SY5Y细胞,探讨氟中毒神经系统损伤的发病机制。方法:(1)动物模型:18只1月龄SD大鼠随机分为对照组(饮水含氟量<0.5 mg/L)、低氟组(饮水含氟量为10.0 mg/L)、高氟组(饮水含氟量为100.0 mg/L),每组6只,雌雄各半。饮水摄氟饲养6个月后,观察大鼠氟斑牙发生情况,测定24 h尿氟含量;大鼠麻醉处死后取脑组织观察组织病理变化,蛋白印迹法检测脑组织中NMDA受体及IRE1α、ASK1、JNK蛋白表达。(2)细胞模型:体外培养SH-SY5Y细胞,选择终浓度为0.3 mmol/L和3 mmol/L的氟化钠染氟处理,并用10μmol/L的NMDA受体拮抗剂Ifenprodil、MK-801对染氟细胞进行干预,观察相关蛋白改变。结果与结论:(1)高氟组大鼠氟斑牙发生率、尿氟水平显著高于对照组和低氟组(P<0.05);(2)与对照组相比,低氟组大鼠海马CA3区神经细胞胞质嗜碱性略增加,高氟组CA3区神经细胞排列紊乱,嗜碱性增加,部分细胞核固缩;(3)大鼠脑组织内,高氟组NR2A与低氟组NR2B的蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),且高氟组NR2B、IRE1、ASK1、p-JNK蛋白表达明显高于对照组和低氟组(P<0.05);(4)SH-SY5Y细胞内,高氟组NR1、NR2A、NR2B蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),且高氟+Ifenprodil组、高氟+MK-801组NR1、NR2A蛋白表达均明显低于高氟组(P<0.05),高氟+Ifenprodil组NR2B蛋白表达也明显低于高氟组(P<0.05);(5)SH-SY5Y细胞内,高氟组IRE1、ASK1、p-JNK蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),且高氟+Ifenprodil组、高氟+MK-801组ASK1、p-JNK蛋白表达均明显低于高氟组(P<0.05),高氟+Ifenprodil组IRE1蛋白水平也明显低于高氟组(P<0.05);(6)提示:过量氟摄入可激活中枢神经系统NMDA受体,引起内质网应激IRE1α、ASK1、p-JNK蛋白表达增加,使用NMDA受体抑制剂对氟中毒所致内质网应激具有一定缓解作用。

NMDA受体在偏头痛中作用的研究进展

N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体是一种离子型谷氨酸受体,广泛表达于中枢神经系统,介导兴奋性突触传递的Ca2+内流,并在突触可塑性、学习、记忆等方面发挥重要作用。偏头痛是临床常见的原发性头痛,因其发作频繁,给患者带来严重的生活和心理负担。偏头痛的发病机制尚不明确,研究发现,谷氨酸及NMDA受体与偏头痛的发生关系密切。本文主要就NMDA受体与偏头痛的发生,NMDA受体拮抗剂与偏头痛的预防和治疗的相关进展进行综述,旨在为偏头痛的发病机制及药物治疗等提供参考。

急性症状性发作对抗NMDA受体脑炎患者预后的影响

目的探讨急性症状性发作(ASS)是否为抗N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体脑炎功能预后不良的危险因素。方法选择2013年2月至2020年8月在首都医科大学附属北京天坛医院神经内科就诊的68例抗NMDA受体脑炎患者进行研究。根据改良Rankin量表(mRS)将患者预后分为两组:预后良好组(mRS≤2)和预后不良组(mRS>2)。采用单因素和多因素Logistic回归分析评估ASS与抗NMDA受体脑炎功能预后的相关性。结果与预后良好组相比,预后不良组ASS(P=0.033)、精神行为异常(P=0.007)、脑脊液寡克隆区带阳性(P=0.032)比例均较高,男性(P=0.045)比例较低,年龄(P=0.010)较大,发病至首次免疫治疗时间(P=0.009)较长。多因素Logistic回归分析显示:经校正年龄、性别、发病至首次免疫治疗时间、精神行为异常、脑脊液寡克隆区带阳性后,ASS比例增加是抗NMDA受体脑炎患者预后不良的独立危险因素(OR=18.023,95%CI:1.594~203.771,P=0.019)。结论ASS是抗NMDA受体脑炎的主要表现,对免疫治疗疗效明确,也是脑炎功能预后不良的独立危险因素,临床工作中应注意该症状的早期诊断和治疗,对提高患者的预后有重要意义。

洛伐他汀调节NMDA受体功能减缓NMDA兴奋性毒性损害

目的:检测洛伐他汀(lovastatin,LOV)对N⁃甲基⁃D⁃天门冬氨酸(N⁃methyl⁃D⁃aspartate,NMDA)诱导的兴奋性毒性的神经保护作用并探讨LOV调节NMDA受体功能在神经保护中的潜在机制。方法:培养的大鼠原代神经元细胞分未处理组、LOV组、NMDA组、LOV+NMDA组、谷氨酸(glutamate,Glu)组及Glu+APV(一种特异性NMDA受体拮抗剂)组。免疫荧光染色检测神经元形态,TUNEL分析检测神经元凋亡,免疫印迹测定蛋白水平,生物素化法检测细胞表面受体。结果:①与NMDA组或Glu组少数幸存微管相关蛋白(microtubule⁃associated protein 2,MAP⁃2)阳性神经元相比,LOV+NMDA组和Glu+APV组MAP⁃2阳性神经元的数量明显增多,神经元树突的数目和长度均明显增加(P<0.001);②与NMDA组或Glu组TUNEL阳性细胞显著增多相比,LOV+NMDA组或Glu+APV组TUNEL阳性细胞显著减少(P<0.001);③与未处理组相比,NMDA组NMDA受体蛋白(N⁃methyl⁃D⁃aspartate receptor,NR2B)表达显著减少(P<0.001),而LOV预处理后增加NR2B蛋白表达(P<0.05);④生物素化法检测细胞表面受体显示,NMDA处理导致细胞表面大部分NR2B丢失(P<0.001),LOV预处理能显著减少NMDA诱导的细胞表面NR2B丢失(P<0.05)。进一步研究显示,NMDA处理后,NR2B在酪氨酸(tyrosine,Tyr)1472位点的磷酸化下降(P<0.05),LOV预处理显著恢复Tyr1472位点的磷酸化(P<0.05)。结论:LOV能减轻NMDA诱导的兴奋性毒性损害,这一作用可能与其影响NMDA受体亚单位NR2B的细胞内吞和/或胞内降解,进而调节NR2B表面分布有关。

NMDA通过Wnt/β-catenin通路促进大鼠神经元中神经连接蛋白3表达

目的:探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)对大鼠神经元来源的细胞系H19-7细胞中神经连接蛋白3(NLGN3)表达的影响及分子机制。方法:分别利用NMDA、NMDA受体(NMDAR)特异性拮抗剂D-AP5和β-catenin特异性siRNA处理大鼠海马神经元细胞系H19-7细胞,通过Western Blot和real time RT-PCR检测β-连环蛋白(β-catenin)、NLGN3及c-Myc的表达变化。结果:NMDA刺激后H19-7细胞中β-catenin蛋白上调,与此同时NLGN3和c-Myc表达增加;使用D-AP5阻断NMDAR以及特异性siRNA沉默β-catenin均能抑制NLGN3的表达。结论:NMDA能够通过Wnt/β-catenin通路促进大鼠神经元中NLGN3表达。

p150glued缺失小鼠的脊髓运动神经元中NMDA受体增多

目的 探讨运动神经元病致病基因Dctn1编码蛋白p150glued对小鼠脊髓运动神经元中N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体的影响。方法 利用蛋白印迹法检测p150glued缺失(cKO)小鼠及对照(Ctrl)小鼠脊髓中NMDA受体亚基NR1和NR2B的含量。利用免疫荧光染色法观察Ctrl和cKO小鼠脊髓运动神经元中NRI分布的变化。结果 与Ctrl小鼠相比,6月龄cKO小鼠脊髓组织中NR1和NR2B的蛋白水平明显增加,cKO小鼠脊髓运动神经元中NR1阳性斑点数也明显增多、增大。结论 神经元中p150glued缺失可以引起6月龄小鼠脊髓运动神经元中NMDA受体亚基NR1和NR2B增多。

针刺调节NMDA受体干预中枢神经系统疾病的研究进展

N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)是中枢神经系统兴奋性氨基酸——谷氨酸的离子型受体中的一种重要亚型,NMDA受体活性调节的失衡可能是血管性痴呆、阿尔兹海默症及缺血性脑卒中等许多中枢神经系统疾病发病的基础。该文重点就针刺调节NMDA受体与神经退行性疾病的关系进行综述,以期为临床针灸医师提供治疗依据。

儿童抗NMDA受体脑炎误诊1例

N-甲基-M-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体脑炎是一种自身免疫性脑炎,由Dalmau等于2007年首次报道并命名,近年来在儿童和青少年中的发生率逐年增加。患者常因严重的精神症状、行为异常、癫痫发作、记忆缺失等,最早被送往精神卫生中心诊治。现回顾1例以精神行为障碍为首发症状就诊于本精神卫生中心的病例,后经复旦大学附属儿童医院确诊。

抗NMDA受体脑炎儿童与成人临床特征和预后的对比分析

目的通过探究儿童与成人抗N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体脑炎的临床特点和预后的差异性,为儿童与成人抗NMDA受体脑炎患者的诊断和治疗提供指导依据。方法回顾性分析2017年1月至2019年1月广东三九脑科医院住院治疗后确诊的46例抗NMDA受体抗体阳性脑炎患者的临床资料,按年龄分为儿童组和成人组,年龄<14岁纳入儿童组,年龄≥14岁纳入成人组,其中儿童组有11例,年龄(7.6±3.7)岁;成人组有35例患者,年龄(27.4±13.0)岁。对比分析儿童组和成人组首发症状、主要临床症状、辅助检查及预后的差异。统计学方法采用χ^(2)检验。结果首发症状:儿童和成人两组首发症状均以精神症状为主,儿童组尤为显著,儿童组9例(81.8%),成人组18例(51.4%)。主要临床症状:儿童中枢性低通气的发生明显少于成人组[9.1%(1/11)比25.7%(9/35)],儿童较成人患者更容易出现锥体外系症状[36.4%(4/11)比11.4%(4/35)],差异均有统计学意义(χ^(2)=3.36、3.62,均P<0.05)。辅助检查:所有患者的脑脊液都存在异常;成人腹部B超或CT阳性率高于儿童[14.3%(5/35)比0],差异有统计学意义(χ^(2)=2.16,P<0.05)。结论抗NMDA受体脑炎临床症状多样,但儿童和成人都多以精神症状为首发症状,且儿童尤为显著。与成人相比,儿童较少发生中枢性低通气症状,但更易出现锥体外系症状。本研究提示儿童抗NMDA受体脑炎与成人的存在差异,对于临床医师在临床儿童脑炎的诊治时,需要敏锐和审慎鉴别,加强该病认识,以达到尽早诊断治疗,改善预后。

前脑缺血再灌流后大鼠海马NMDA受体亚单位NR2A和NR2B蛋白质表达的变化

用免疫组织化学和图像处理方法 ,观察分析了大鼠前脑缺血 15 min后再灌流 2 h～ 7d的海马结构各区域 NMDA受体亚单位 NR2 A和 NR2 B的表达变化规律及其差异 ,藉以探讨二者在缺血性脑损伤中的作用。结果显示 :( 1) NR2 A在 CA1 区和CA3 区的表达于再灌早期表现为小幅度下降 ( P<0 .0 5 ) ,此趋势在 CA3 区可以逆转 ;但在 CA1 区逐渐加剧 ,第 7d时降至 2 1% ,NR2 A在齿状回的表达几无改变 ;( 2 )与 NR2 A不同 ,再灌后 2 h,NR2 B在 CA1 区的表达即较对照组增高 ( P<0 .0 5 ) ,并持续到再灌后 2 4h,之后转而急剧下降 ,至第 7d仅余 11% ;在 CA3 区及齿状回 ,再灌后 6～ 48h,NR2 B的表达也较对照组增高 ( P<0 .0 5 ) ;在再灌后 72 h则恢复至对照组水平。结果提示 ,缺血性脑损伤后 NR2 A和 NR2 B表达变化的不同可能是造成 CA1 区。

慢性复合应激对大鼠学习与记忆及海马NMDA受体亚基NR2A和NR2B表达的影响

为了观察慢性复合应激对大鼠学习与记忆的影响和海马内 NMDA受体亚基 NR2 A、NR2 B表达的变化。本研究将成年雄性 Wistar大鼠分为实验组和对照组 ,实验组动物每天交替暴露于复合应激原环境中达 6周 ,用 Morris水迷宫和 Y迷宫作业测试其空间学习与记忆成绩 ,再采用免疫组织化学和图像处理方法分析海马 CA1 、CA3、齿状回区的 NR2 A和 NR2 B的表达。结果显示 :( 1) Morris水迷宫测试 :慢性复合应激组大鼠寻找平台的潜伏期较对照组明显缩短 ,Y迷宫测试 :慢性复合应激组大鼠学会躲避电击的正确次数较对照组明显增多 ;( 2 )慢性复合应激组海马内 NMDA受体亚基 NR2 B表达水平较对照组明显上调 ,NR2 A表达水平无显著变化。结论 :慢性复合应激可增强学习与记忆能力 。

氯胺酮、丙泊酚和羟丁酸钠遗忘作用与NMDA受体的关系

目的观察氯胺酮、丙泊酚和羟丁酸钠的遗忘作用与NMDA受体的关系。方法小鼠分别腹腔注射(intraperito-neal injection,ip)氯胺酮(20 mg.kg-1)、丙泊酚(10 mg.kg-1)或羟丁酸钠(100 mg.kg-1)建立遗忘模型,在跳台实验和避暗实验中分别观察NMDA侧脑室注射(intracerebrov-entricular injection,icv)对遗忘小鼠错误次数(error times,ETs)、跳台潜伏期(step down latency,SDL)、步入潜伏期(step through latency,STL)的影响。结果侧脑室注射NM-DA可减少氯胺酮所致遗忘小鼠的ETs,延长SDL和STL;对丙泊酚或羟丁酸钠所致遗忘小鼠的ETs、SDL和STL无影响。结论 NMDA受体可能是氯胺酮所致遗忘作用的重要靶位,不是丙泊酚或羟丁酸钠所致遗忘作用的靶位。

枸杞多糖对NMDA致大鼠视网膜损伤保护作用的研究

目的探讨枸杞多糖对N-甲基-D天门冬氨酸(NM-DA)诱导大鼠视网膜损伤的保护作用及其机制。方法采用玻璃体内注射NMDA建立大鼠视网膜损伤模型。枸杞多糖(100、200和400 mg.kg-1)于NMDA注射前7天灌胃给药,共14 d。取大鼠眼组织进行病理学观察,同时采用West-ern blot法测定相关蛋白的表达。结果枸杞多糖(100、200和400 mg.kg-1)明显抑制NMDA所致视网膜神经节细胞的减少和内丛状层的变薄。枸杞多糖(100、200和400 mg.kg-1)抑制NMDA诱导视网膜NMDAR2A蛋白表达的升高;提高eNOS蛋白表达降低的同时,抑制iNOS蛋白表达的升高。结论枸杞多糖对NMDA诱导损伤的大鼠视网膜具有保护作用,其机制与调控视网膜中NMDAR2A表达,以及平衡eNOS/iNOS水平有关。

鞘内注射NOS反义寡核苷酸抑制吗啡戒断大鼠脊髓和脑干NMDA_(1A)受体mRNA表达的增加

运用逆转录 多聚酶联反应 (RT PCR)、鞘内注射和反义技术 ,研究脊髓水平一氧化氮 (NO)对大鼠吗啡戒断反应和脊髓及脑干NMDA1A受体mRNA (NMDA1ARmRNA)表达的影响。结果表明 ,鞘内注射NOS反义寡核苷酸能明显减轻吗啡戒断反应 ,且脑型NOS (nNOS)反义寡核苷酸的作用强于内皮型NOS (eNOS)反义寡核苷酸。吗啡依赖大鼠脊髓和脑干NMDA1ARmRNA表达增加 ,纳洛酮催促戒断 ,使其进一步增加 ;鞘内注射nNOS反义寡核苷酸 ,能明显抑制吗啡戒断大鼠脊髓和脑干NMDA1ARmRNA表达的增加 ;eNOS反义寡核苷酸也可抑制吗啡戒断大鼠脊髓NM DA1ARmRNA表达的增加 ,但作用弱于nNOS反义寡核苷酸 ,对脑干NMDA1ARmRNA表达无明显影响。上述结果提示

NMDA受体亚单位NR1、NR2A和NR2B在大鼠海马的免疫组织化学表达

目的 :观察N 甲基 D 门冬氨酸受体亚单位 1 (N methyl D aspartatereceptorsubunit 1 ,NR1 )、亚单位 2A(NR2A)和亚单位 2B(NR2B)在成年大鼠海马结构各区的表达特点 ,为研究三者在海马生理和病理过程中的作用提供形态学资料。方法 :大鼠脑 2 0 μm厚冰冻切片 ,免疫组织化学ABC法显色 ,图像分析。结果 :NR1、NR2A和NR2B在海马CA1～CA3区锥体细胞以及齿状回颗粒细胞普遍表达 ,三者中以NR1免疫组织化学反应最强 ,NR2A最弱 ,NR2B居中。NR1与NR2A在海马各区间的表达水平都无显著差异 ;NR2B在海马CA1区的表达明显强于其在CA3区及齿状回的表达 ,尤其是CA1区锥体细胞的顶树突在贯穿辐射层及腔隙分子层的全长中都呈高表达。结论 :NR1、NR2A和NR2B在正常海马结构各区的表达强度和形式存在差异 ,提示各区间天然N 甲基 D 门冬氨酸(N methyl D aspartate ,NMDA)

音乐对大鼠海马NMDA受体表达的作用

目的:研究音乐刺激对大鼠海马组织NMDA受体及其受体蛋白mRNA表达的影响。方法:用免疫组织化学和PCR技术,定量检测了:NMDA受体蛋白和编码该受体的mRNA表达。结果:音乐刺激后,NMDA受体蛋白及其mRNA表达,在持续音乐刺激组分别高出对照组40％和58％,生后音乐组高出33％和42％,而胎期音乐组与对照组相比不显著(4％和6％)。结论:音乐刺激能显著增强大鼠海马组织NMDA受体和mRNA表达,而且其增强效应具有音乐刺激时间依赖性,且生后的作用较为明显。

帕金森病模型大鼠内侧前额叶皮层锥体神经元NMDA受体敏感性下降

目的研究6-羟多巴胺(6-OHDA)损毁大鼠黑质致密部(SNc)后内侧前额叶皮层(mPFC)中锥体神经元NMDA受体敏感性的变化。方法应用在体细胞外电生理学记录的方法观察6-OHDA损毁大鼠SNc后,全身应用NMDA受体阻滞剂MK-801后锥体神经元放电频率的变化。结果全身应用NMDA受体阻滞剂MK-801后,PD组大鼠锥体神经元放电频率无明显变化(P>0.05)。结论帕金森病模型大鼠内侧前额叶皮层锥体神经元的NMDA受体敏感性下调。

低压低氧对大鼠海马神经元NMDA受体发育影响的研究

目的 观察低压低氧环境对海马发育过程中学习记忆、NMDA受体 1和生长抑素mRNA表达的影响。方法 采用模拟高原低氧模型 ,运用原位杂交及行为学技术。结果 低压低氧环境使NMDA受体 1和生长抑素mRNA的表达发生改变 ,大鼠的主动回避反应和空间学习记忆能力下降。结论 低压低氧环境可以通过改变NMDA受体和生长抑素的表达而对学习记忆产生一定的影响。

微波辐照对大鼠海马脑区NMDA受体亚基基因表达的影响

目的从亚基基因表达方面探讨NMDA受体在微波辐照所致的学习记忆功能障碍中的作用。方法采用平均功率密度为65mW/cm2的微波全身一次辐照大鼠20min(SAR12.0W/kg),在辐照后0h、3h、12h、24h和3d时相点,大鼠腹腔麻醉断头,分离海马,用RT-PCR技术分别检测NMDA受体功能亚基NR1和调节亚基NR2A、NR2B、NR2C、NR2D在基因表达水平上的变化。结果微波辐照后大鼠海马脑区NMDA受体功能亚基NR1和调节亚基NR2A、NR2C、NR2D基因表达异常。表现为功能亚基NR1mRNA表达在辐照后3h、24h、3d时相分别比对照组下降21.1%(P<0.05)、14.2%(P<0.05)、30.3%(P<0.01);辐照后0h、3h、12h,NR2AmRNA表达较对照组分别降低37.0%(P<0.01)、35.9%(P<0.05)、35.3%(P<0.05);NR2BmRNA表达与对照组比无统计学差异;辐照后0h和24h,NR2CmRNA表达较对照组分别降低24.3%(P<0.05)和27.1%(P<0.05);辐照后0h、12h、24h、3d,NR2DmRNA表达较对照组分别升高67.9%(P<0.05)、45.7%(P<0.05)、49.7%(P<0.01)、75.4%(P<0.01)。结论微波辐照后大鼠海马脑区NMDA受体结构组成发生改变,NMDA受体自身的复杂调节功能下降,从而影响受体介导的LTP的产生。