乳腺癌改良根治术后患者血清PRL、CA125、VEGF的表达及复发转移的预测价值

目的:探讨乳腺癌改良根治术后患者血清泌乳素(PRL)、糖类抗原125(CA125)、内皮生长因子(VEGF)的表达及复发转移的预测价值。方法:选取2020年8月至2023年1月本院收治的行乳腺癌改良根治术70例乳腺癌患者作为观察组,纳入同期70例良性乳腺疾病患者作为对照组。对比两组PRL、CA125、VEGF表达水平,对观察组患者跟踪随访12个月,根据乳腺癌是否复发转移将观察组分为复发转移组(n=15)和未复发转移组(n=55),对比两组患者临床资料及PRL、CA125、VEGF表达水平,绘制ROC曲线,分析乳腺癌改良根治术后患者血清PRL、CA125、VEGF对复发转移的预测价值。结果:观察组PRL、CA125、VEGF水平高于对照组(P<0.05)。观察组中出现复发转移15例(21.43%)、未出现复发转移55例(78.57%);复发转移组HER2阳性、P53阳性患者人数占比高于未复发转移组,血清PRL、CA125、VEGF水平高于未复发转移组(P<0.05)。ROC曲线显示,PRL、CA125、VEGF3项指标联合预测乳腺癌改良根治术后复发转移的效能高于单一指标(AUC:0.857,95%CI:0.748~0.966)。结论:血清PRL、CA125、VEGF在乳腺癌患者及乳腺癌改良根治术后复发转移中均呈高表达,三项联合检测对乳腺癌改良根治术后复发转移具有较高预测价值。

依镜PRL植入术矫正超高度近视的临床疗效观察

目的:观察依镜有晶状体眼后房屈光晶体(phakic refractive lens,PRL)植入术矫正超高度近视的疗效和安全性。方法:纳入自2018年1月—2020年9月在深圳市眼科医院行依镜PRL植入术的超高度近视患者共24例39眼,进行自身对照研究。其中,男8例13眼,女16例26眼,平均年龄(31.15±6.33)岁。观察术后屈光度、视力[裸眼视力(uncorrected visual acuity,UCVA)、最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)]、眼压、角膜内皮细胞计数、拱高、手术并发症等指标。结果:中位随访时间为5.5(3.0,11.0)月。屈光度从术前(-22.29±4.96)D降低至术后(-0.28±1.01)D(t=24.421,P<0.001),其中术后球镜度数±0.5 D占28眼(82.4%),±1.0 D占31眼(91.2%)。LogMAR UCVA从术前1.40(1.30,1.70)改善至术后(0.28±0.20)D,LogMAR BCVA由术前0.40(0.22,0.70)改善至术后0.15(0.00,0.30),差异均有统计学意义(均P<0.001)。术后BCVA较术前提高3.00(1.00,5.00)行,所有患者均无BCVA丢失。术前、术后1 d、末次随访眼压值比较差异有统计学意义(F=8.779,P=0.012),其中术后1 d较术前眼压增高(Z=-3.401,P=0.001),而末次随访较术后1 d眼压降低(Z=-2.685,P=0.007),末次随访与术前眼压之间比较差异无统计学意义(Z=-0.894,P=0.371)。角膜内皮细胞计数从术前(2782.20±296.30)个/mm^(2)降低至术后(2472.54±394.32)个/mm^(2)(t=-5.437,P<0.001),平均丢失角膜内皮细胞数11.2%。末次随访33眼平均拱高值为(379.00±283.27)μm,其中0~250μm占12眼(36.4%),250~750μm占19眼(57.6%),大于750μm占2眼(6%)。21眼PRL术后3个月拱高值为(269.81±194.67)μm,较术后1个月拱高值(373.62±195.75)μm降低(t=-2.917,P=0.009)。术后并发症包括激素性青光眼(1例2眼)、PRL光学面裂痕(1眼)、黄斑出血(1眼)、PRL偏位(2例3眼)。结论:对于超高度近视患者,依镜PRL植入术是一种可供选择的安全、有效的眼内屈光手术方式,但其远期疗效及安全性仍需更长时间和更大样本量进一步观察。

OPN5-TSH-DIO2/DIO3和VIP-PRL在短光照抑制公山麻鸭睾丸活性中的表达规律

旨在探究短光照抑制公山麻鸭繁殖机能的过程中,OPN5-TSH-DIO2/DIO3通路和VIP-PRL通路主要相关因子表达规律及可能存在的相互关系。本试验选取80只正常繁殖期(220日龄)、体重相近且健康的山麻鸭公鸭作为研究对象,试验前15 d维持正常繁殖期的长光照(18L∶6D),从d16开始每天缩短光照2 h,到每天光照时间为8 h(8L∶16D)后持续至试验结束(d45);于d15、d21、d30、d45采集血液样本和下丘脑、垂体、睾丸等组织样,通过HE染色、ELISA、qRT-PCR、Western blot技术检测睾丸发育情况及下丘脑、垂体、睾丸中相关基因和蛋白表达水平。结果显示,与长光照条件相比,短光照导致公鸭睾丸萎缩,生精细胞和精子数量显著减少(P<0.05);血液LH、PRL、睾酮水平均显著降低(P<0.05);下丘脑GnRH表达下降,GnIH表达上升,但差异均不显著(P>0.05);垂体GnIHR呈上升趋势,FSH呈下降趋势,但均无显著差异(P>0.05),GnRHR试验后期明显上升(P<0.05),LH无明显变化趋势;睾丸中FSHR、LHR的基因表达均下降,但无显著差异(P>0.05)。在OPN5-TSH-DIO2/DIO3通路中,OPN 5基因和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),DIO2、TSH-β基因表达水平显著降低(P<0.05),DIO2蛋白水平降低(P>0.05),DIO3基因表达趋势则与DIO 2相反,缩短光照导致基因表达水平上升(P>0.05),DIO3蛋白水平显著上升(P<0.05);VIP-PRL通路中,下丘脑VIP和垂体PRL的基因表达均显著下降(P<0.05),垂体PRLR的基因表达显著上升(P<0.05),睾丸PRLR的基因表达显著下降(P<0.05)。结果表明,在短光照抑制公山麻鸭繁殖性能的过程中,OPN5-TSH-DIO2/DIO3通路和VIP-PRL通路均参与其中,介导了短光照对生殖轴的抑制作用;与正常繁殖期所需光照条件相比,短光照均会抑制两通路的效率,从而实现对生殖轴活性的下调,但其中两通路间的相互调控关系仍有待进一步研究。

PRL-3基因对胶质母细胞瘤替莫唑胺敏感性的影响

目的研究PRL-3基因在胶质母细胞瘤中的表达及其对胶质母细胞瘤替莫唑胺敏感性的影响。方法通过TCGA数据库分析PRL-3基因在胶质母细胞瘤及正常组织中表达情况,进一步选取空军军医大学第一附属医院诊治的15例胶质母细胞瘤患者术后肿瘤组织(原发性10例,复发性5例),采用免疫组织化学法检测PRL-3阳性细胞在胶质母细胞瘤中的表达情况。选取人胶质母细胞瘤LN229细胞系及替莫唑胺耐药的LN229/TMZ-R细胞系,采用qRT-PCR、Western blot检测PRL-3 mRNA及蛋白的表达情况。选取LN229、SHG44细胞系及对替莫唑胺不敏感的U87细胞系,分别设置正常组、对照组、空载质粒组、PRL-3过表达组、PRL-3下调组。比较正常组、空载质粒组、PRL-3过表达组、PRL-3下调组PRL-3 mRNA表达情况以验证PRL-3过表达及下调是否成功。然后将对照组、PRL-3过表达组、PRL-3下调组采用替莫唑胺(LN229、SHG44细胞系加入替莫唑胺100μmol/L,U87细胞系加入替莫唑胺500μmol/L)进行处理,正常组不处理,72 h后采用CCK-8法测定细胞活性。结果数据库分析显示,原发性胶质母细胞瘤中PRL-3表达高于正常组织,且随肿瘤级别增高而升高(P<0.05)。复发性胶质母细胞瘤组织中PRL-3阳性细胞免疫组织化学法评分高于原发性胶质母细胞瘤组织(P<0.05)。LN229/TMZ-R细胞系中PRL-3 mRNA表达高于LN229细胞系(P<0.05),PRL-3蛋白在LN229/TMZ-R细胞系中高表达。PRL-3过表达组PRL-3 mRNA高于正常组,PRL-3下调组PRL-3 mRNA低于正常组(P<0.05)。在LN229、SHG44、U87细胞系中,对照组细胞活性低于正常组,PRL-3过表达组细胞活性高于对照组,PRL-3下调组细胞活性低于对照组(P<0.05)。结论PRL-3基因低表达可以增强胶质母细胞瘤对替莫唑胺治疗的敏感性,有望成为协同替莫唑胺化疗的有益靶点。

PRL-3在急性髓系白血病中的表达变化及其临床预后价值分析

目的:探讨PRL-3在AML中的表达及其临床预后价值。方法:使用GEPIA2分析PRL-3在AML患者中的表达变化;利用UALCAN进一步进行亚组分析;采用OncoLnc分析PRL-3表达水平与AML患者总生存期的关系并验证,评估预后;通过STRING分析PRL-3相关基因及其蛋白互作网络,并采用Metascape进行GO和KEGG富集分析。结果:PRL-3在AML患者中的表达较正常人低(P<0.05)。各亚型中,PRL-3在MO和M6中的表达相对较高,在M3和M5中的表达较低;且在61~80岁患者中的表达明显高于41~60岁(P<0.05)。PRL-3高表达患者的总体生存期较低表达明显缩短(P<0.05)。此外,在AML中与PRL-3相互作用蛋白且低表达的主要是BCAR1、MAPK1、RHOC。PRL-3及其相关基因参与的生物学功能和通路涉及肿瘤细胞黏附、迁移、运动等方面。结论:PRL-3可能通过参与髓外浸润影响AML患者预后,可成为AML诊断和预后的潜在靶点。

PRL和POU1F1基因及基因聚合对白耳鸡产蛋数的效应分析

以PRL和POU1F1为影响鸡产蛋数的候选基因,采用PCR-SSCP方法检测白耳鸡PRL基因调控区和POU1F1基因外显子3区域的单核苷酸多态性,并分析PRL、POU1F1基因多态位点和两基因聚合基因型与72周龄产蛋数的关联。结果表明:PRL调控区的插入/缺失基因型AA型和POU1F1基因exon3的突变(A5331T)基因型CC型与72周龄产蛋数显著相关(P<0.05),AA、CC型对产蛋数的加性效应分别为3.65和3.57。聚合基因型AACC型个体72周龄产蛋数(除AACD型外)与对照组比较差异显著(P<0.05)。两基因间的互作效应并不显著(P>0.05)。

光照时间对兴国灰鹅产蛋和PRL、FSHβ、LH mRNA表达的影响

为研究光照时间对兴国灰鹅产蛋量及产蛋性状相关基因在下丘脑-垂体-性腺轴表达水平的影响,对兴国灰鹅分别进行长光照处理(试验组)和自然光照处理(对照组)。结果发现,整个试验阶段,对照组持续产蛋,产蛋率维持在10%以上,处理组在接受递增式长光照至40 d左右时,产蛋率下降到8%左右,并于试验第47天停产。基因表达水平方面,相对于对照组产蛋期鹅,试验组鹅下丘脑中催乳素(PRL)的mRNA表达水平与输卵管和卵巢中促卵泡素(FSHβ)的表达水平均显著升高,而卵巢中黄体生成素(LH)的mRNA表达水平显著降低。这些结果表明长光照可通过影响PRL的mRNA表达,从而导致FSHβ和LH表达比例失调,最终影响FSHβ和LH的协同作用,从而抑制兴国灰鹅的产蛋活动。

反季节调控对鹅PRL和PRLR基因表达的影响

为研究反季节生产期鹅催乳素(PRL)和催乳素受体(PRLR)基因表达情况,选取经反季节调控处于产蛋期(试验组)和未调控处于正常休产期(对照组)母鹅,采集垂体、下丘脑和卵巢组织,应用实时荧光定量PCR技术研究PRL和PRLR基因mRNA在下丘脑-垂体-性腺轴中的表达水平变化。结果表明:PRL和PRLR基因在垂体、下丘脑和卵巢组织均有表达,在垂体中表达量最高;PRL基因在试验组鹅垂体中表达量极显著高于对照组,而PRLR基因在试验组鹅垂体中表达量极显著低于对照组;PRL基因在试验组鹅下丘脑中表达量显著高于对照组,而PRLR基因在两组鹅下丘脑中表达元显著差异;PRL基因在两组鹅卵巢中表达量无显著差异,而PRLR基因在试验组鹅卵巢组织中表达量极显著高于对照组。反季节调控可增加鹅垂体和下丘脑中PRL基因表达,抑制垂体PRLR基因表达,增加卵巢中PRLR基因表达。

大熊猫垂体泌乳素(PRL)cDNA的克隆与表达

从大熊猫脑垂体中提取总RNA ,利用RT PCR技术 ,首次扩增出大熊猫垂体泌乳素 (PRL)cDNA序列 (GenBank登录号 :AY16 12 85 )。结果表明 ,大熊猫PRLcDNA的开放阅读框为 6 87bp ,编码含 2 2 9个氨基酸残基的前体蛋白。将克隆的PRLcDNA片段构建到表达质粒pGEX 4T 1中 ,转化大肠杆菌BL2 1,在异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)的诱导下表达PRL蛋白。SDS PAGE电泳结果表明 ,表达的PRL蛋白为不可溶蛋白。蛋白质同源性比较显示 ,大熊猫与猪、猫的同源性大于 95 % ,与人、牛、山羊的在 70 %～ 80 %之间 ,与小鼠、大鼠的分别为 4 5 9%和 5 2 %。大熊猫aa64为丝氨酸 ,是亲水性氨基酸 ;而猫、牛、山羊 (脯氨酸 )和人 (丙氨酸 )aa64是疏水性氨基酸。在二级结构上 ,aa64在第一α螺旋与第二α螺旋之间 ,极性的差别可能导致蛋白空间结构的不同。

高邮鸭PRL基因内含子1的SNP检测及其与产蛋性状的相关分析

利用PCR-RFLP技术对高邮鸭催乳素(Prolactin,PRL)基因内含子1进行了SNP检测和测序分析,并对该基因与高邮鸭产蛋性状的相关性进行了研究。结果表明:PRL基因内含子1存在两个DraI酶切位点,其中1个位点具有DraI多态性。该位点由于在1 326位点发生了T→C的碱基突变,产生了AA、AB和BB 3种基因型。基因型BB和等位基因B的频率最高;BB基因型个体30周龄蛋重极显著高于AB基因型个体(P<0.01);AB基因型个体的双黄率显著高于BB基因型个体(P<0.05);3种基因型间产蛋数、最长连产天数和开产体重无显著差异。

老年人群血清LH、PRL及睾酮变化规律的研究

应用RIA方法．检测627例血清睾酮（T）、促黄体生成素（LH）和泌乳素（PRL）水平．探讨各激素的增龄性变比。结果表明：血清T水平对照组为32．07±14．25nmol／L其它各组随增龄呈进行性降低．且与对照组相比存在显著差异（P＜005）：血清LH水平是随龄增高趋势．且与T变比呈显著负相关（r=－0．21，P＜0．01）。血清PRL水平亦呈现随龄增高趋势。PRL与T（r=－0．12．P＜0.05）、PRL与LH（r=0．11．P＜0．05）呈微弱相关关系。上述结果提示．在男性衰老过程中．T水平逐渐降低．对LH负反馈抑制作用减弱，而引致LH分泌增高．血清PRL对性腺轴激素水平有影响．但其具体作用及作用方式有待进一步研究。

太湖鸡PRL、PRLR和FSHβ基因多态与前期产蛋性状关系研究

采用PCR-SSCP法对太湖鸡催乳素（PRL）、催乳素受体（PRLR）和促卵泡激素β亚基（FSHβ）基因进行多态性检测，并分析其与开产50%后20周产蛋性状的关系。结果表明：PRL和FSHβpro2的基因型频率都是AA型最高，BB型最低，等位基因频率也是A高于B，FSHβ基因exon3位点没有多态；PRLR只有两种基因型，外显子3是AA型频率高于BB型，外显子6是CC型频率高于DD型，且等位基因A和C的频率分别高于等位基因B和D的频率。太湖鸡PRL、PRLR和FSHβ基因开产50%后20周产蛋性状的不同基因型间差异均不显著（P〉0.05），但是PRLR基因外显子3的开产50%后9~11周蛋重平均数基因型间差异接近显著（P=0.08）。基因间交互作用分析发现，催乳素受体基因外显子3和外显子6有极显著的交互作用（P〈0.01），产蛋量较高的合并基因型AADD可以作为太湖鸡选育的参考。

中国荷斯坦牛POU1F1基因与PRL基因的多态性及其聚合效应对产奶性状的影响

文章采用DNA测序、PCR-RFLP和CRS-PCR技术对979头中国荷斯坦牛POU1F1基因与PRL基因进行研究,发现了3个新SNPs,分别是POU1F1基因第二外显子G1178C、PRL基因5侧翼区A906G和A1134G。采用SAS统计软件GLM程序,利用最小二乘法拟合线性模型,分析基因多态性与产奶性状的关系。结果表明:POU1F1基因1178位点GC基因型在产奶量、乳蛋白量、乳脂量方面均为优良基因型。PRL基因5侧翼区906位点AG基因型在产奶量方面为优良基因型,1134位点不同基因型产奶性状差异不显著。对PRL基因5侧翼区的906位点和POU1F1基因的1178位点进行基因互作分析,结果在乳脂率、乳蛋白率、产奶量、乳蛋白量和乳脂量方面各基因型组合之间均未观察到显著差异,说明基因聚合效应并不是单基因效应的简单相加,基因聚合效应在分子育种中具有更重要的意义。

白色杜洛克×二花脸F_2资源群体中催乳素(PRL)和催乳素受体(PRLR)基因与母猪杀婴行为和产仔数关联性研究

【目的】研究PRL、PRLR基因在白色杜洛克×二花脸F2资源群体中的遗传变异及其与母猪杀婴行为和产仔数的关联性。【方法】PRL基因的g.1317T>A、g.8905C>T、g.9056C>T位点,PRLR基因的g.1217C>T、g.1283C>A、g.1439G>A、g.1528G>A和g.1600T>A位点采用SNaPshot法对资源群体所有F0、F1和288头F2母猪进行基因型判定,分别利用传递不平衡检测(TDT)和最小二乘法分析这些位点与母猪杀婴行为和产仔性状的关联性。【结果】TDT分析发现,PRL和PRLR基因所有检测SNP位点,无论基因型还是单倍型均与母猪杀婴行为无显著相关。与母猪产仔数相关性分析表明:PRLR基因5个SNP位点的基因型及单倍型与总产仔数、产活仔数、产死胎数、断奶仔猪数和断奶窝重均未达到显著相关;PRL基因的3个SNP位点与母猪的总产仔数和产活仔数达到显著相关(P<0.05),单倍型ACC个体的总产仔数(P=0.0005)和产活仔数(P=0.001)极显著低于其它单倍型个体;单倍型TTT个体的产活仔数显著高于其它单倍型个体(P=0.003)。【结论】白色杜洛克×二花脸F2资源群体中,PRL、PRLR基因与母猪杀婴行为无关联性,PRL基因与母猪总产仔、产活仔数显著相关。

补肾活血方对卵巢早衰患者血清FSH、LH、E_2及PRL的影响

目的探讨补肾活血中药对卵巢早衰患者生殖内分泌的影响。方法采用随机、对照原则,将60例患者分成西药组和中药组,西药组口服信美力治疗,中药组口服补肾活血方治疗。采用酶联免疫吸附法检测治疗前后血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)以及催乳素(PRL)浓度。结果西药组及中药组治疗后血清E2含量均明显升高,但西药组E2含量显著高于中药组(P<0.05);西药组及中药组治疗后血清FSH含量均明显降低,但中药组明显低于西药组(P<0.05);中药组治疗后血清LH明显降低(P<0.05),但西药组未有显著变化。结论补肾活血中药主要通过纠正紊乱的生殖内分泌轴和恢复部分卵巢功能,对免疫性卵巢早衰发挥防治作用。

非小细胞肺癌中PRL-3与RhoC的表达及相关性意义

背景与目的PRL-3是新近发现的酪氨酸蛋白磷酸酶,尚属于肝再生磷酸酶家族,具有促进肿瘤转移作用;RhoC属于小分子G蛋白超家族中的Rho亚家族,二者作用机制不清楚。本研究通过检测非小细胞肺癌(non-small celllung cancer,NSCLC)中PRL-3和RhoC的表达,分析二者表达的相关性及在不同分组之间的差异,为进一步研究PRL-3在肿瘤发生发展中的作用机理提供实验依据。方法采用免疫组化SP法检测PRL-3和RhoC在92例NSCLC中的表达,用统计学方法检验分析二者在不同分组间的表达差异性及二者的相关性。结果在NSCLC中PRL-3和RhoC的表达阳性率分别为69.6%(64/92)、73.9%(68/92),二者的表达在不同的TNM分期、淋巴结及胸膜是否转移的分组之间差异有统计学意义(P<0.01),同时二者的表达具有相关性(r=0.754,P<0.001)。结论在NSCLC中PRL-3和RhoC在TNM分期较高以及合并淋巴结、胸膜转移的分组中表达较高,同时二者的表达具有相关性,提示PRL-3可能通过RhoC及其下游因子促进癌细胞的远处转移。

基因工程人催乳素(rhPRL)对人NK细胞免疫活性的调节作用

目的:探讨rhPRL对NK细胞系增殖状态及细胞毒活性的调节作用。方法:利用MTT比色法结合细胞计数法观测了rhPRL对三种NK细胞系（NKL、NK-92、YT）增殖活性和细胞毒活性的影响;RT-PCR法、直接免疫荧光法和FACS技术检测了PRL-R和CD25在不同细胞系的表达状况以及rhPRL对CD25表达强度的影响。结果:MTT结果表明,在低剂量IL-2存在的条件下,rhPRL浓度为12和100ng/ml时对NK-92和NKL表现出最佳刺激效应,该反应呈双峰型曲线。相反,YT细胞的增殖状态和细胞毒效应均无明显改变。当有足量IL-2（100 U/ml）存在时,rhPRL对三种 NK细胞系均无明显刺激作用。RT-PCR和直接免疫荧光结果显示,三种细胞系均有PBL-R表达,其表达量以NKL细胞最高,NK-92和YT荧光强度较弱。FACS结果表明CD25在NKL表达量最高约90％,NK-92次之约为50％,YT最低为10％,rhPRL刺激后其表达明显上调。结论:rhPRL能促进NK细胞系（NK-92和NKL）的增殖活性和杀伤活性,该效应可能部分是通过IL-2受体表达并参与其下游信号呈递通路实现的。

PRL-3调节PI3K信号通路在促进结肠癌细胞增殖侵袭中的作用

【目的】研究肝再生磷酸酶-3(PRL-3)的过表达与PI3K信号通路的调节及其与结肠癌细胞增殖侵袭的关系。【方法】构建稳定转染PRL-3基因和空白对照质粒的结肠癌细胞株LoVo-PRL-3和LoVo-VC,用qRT-PCR和Western blot的方法对miR-21及其靶蛋白PTEN的表达进行检测,在稳转细胞株中转染miR-21或对其进行敲除,用CCK-8、Tanswell实验对细胞的增殖侵袭能力的变化进行研究。【结果】LoVo-PRL-3细胞的增殖侵袭能力要强于对照组LoVo-VC细胞。在结肠癌细胞株LoVo-PRL-3中miR-21的表达上调而PTEN的表达被下调,在LoVo-VC细胞中过表达miR-21促进了细胞的增殖侵袭并降低PTEN的表达,而在LoVo-PRL-3细胞中敲除miR-21抑制了细胞的增殖侵袭并能部分恢复PTEN的表达。【结论】PRL-3通过上调miR-21抑制PTEN的表达,调节了PI3K信号通路,从而促进了结肠癌细胞的增殖侵袭。

狮头鹅PRL基因的克隆及原核表达

为了进一步研究PRL对狮头鹅繁殖性能的生理调节机制,采用RT-PCR方法从狮头鹅脑垂体组织扩增获得PRL基因的cDNA序列,克隆至pMD18-T载体获得重组质粒pMD18-PRL,并进行序列测定和分析。将测序正确的cDNA序列定向克隆到pET32a(+),构建表达载体pET32a-PRL,并转化至BL21(DE3)大肠杆菌表达目的蛋白,经IPTG诱导后进行SDS-PAGE检测和Western Blot分析。狮头鹅PRL基因编码区含有600个核苷酸,编码199个氨基酸(GenBank No.GQ856665),与其它禽类PRL具有高度保守性;狮头鹅PRL蛋白二级结构由多个α螺旋和β转角及无规卷曲构成,推测N端70～76、95～102、150～155和207～213区段为其抗原表位的优势区。SDS-PAGE检测表明狮头鹅PRL基因在大肠杆菌中获得了高效表达,可溶性表达产物约占全菌总蛋白的53.6%,融合蛋白分子量约41ku,并用镍柱亲和层析法分离纯化融合蛋白。Western Blot分析证实了所获的融合蛋白具有较强抗原性。试验结果为进一步研究PRL基因的生物功能及其对狮头鹅就巢、产蛋等生产性状的影响奠定了基础。

石斛酚通过NF-κB/PRL-3通路抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探讨石斛酚对人成骨肉瘤U20S细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用及其分子机制。方法:用不同质量浓度(10、25、50、75、100、150μmol/L)的石斛酚处理U20S细胞24、48h后,用CCK-8法检测石斛酚对U20S细胞增殖能力的影响。Transwell实验检测25、50μmol/L的石斛酚对U20S细胞迁移、侵袭能力的影响,在脂多糖(LPS)诱导U20S细胞炎症反应的基础上,再以石斛酚处理,qPCR、WB法分别检测U20S细胞中NF-κB(p65)、TNF-α、IL-6、PRL-3mRNA和蛋白的表达水平。结果:不同质量浓度的石斛酚作用不同时间对肉瘤细胞U20S增殖均具有抑制作用(P<0.05或P<0.01);25、50μmol/L的石斛酚能够明显抑制骨肉瘤U20S细胞的迁移及侵袭能力(均P<0.01),同时能够抑制细胞中NF-κB、TNF-α、IL-6、PRL-3等蛋白的表达(P<0.05或P<0.01);LPS诱导后,U20S细胞中NF-κB、TNF-α、IL-6、PRL-3mRNA和蛋白表达水平均显著升高(均P<0.01),25、50μmol/L的石斛酚处理后均能够降低U20S细胞中NF-κB、TNF-α、IL-6、PRL-3mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论:石斛酚对骨肉瘤U20S细胞增殖、迁移和侵袭具有抑制作用,其作用机制可能与调控NF-κB/PRL-3信号通路有关。