PTTG基因及Ki67抗原在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨PTTG基因和Ki6 7在胃癌发生、发展中的作用及二者的相关性。方法 采用免疫组织化学SP法检测了4 0例胃癌患者胃组织中PTTG基因和Ki6 7的表达情况。结果 PTTG基因和Ki6 7在胃癌组织中的阳性表达率分别为72 .5 %和95 % ,均与胃癌的病理组织学分级、临床分期及淋巴结转移有关(P<0 .0 5 ) ,而与组织学类型无关(P>0 .0 5 )。PTTG基因和Ki6 7表达强度呈显著正相关(P<0 .0 5 )。结论 PTTG基因和Ki6 7在胃癌的发生、发展中有协同作用,可作为反映胃癌生物学行为的指标。

PTTG和bFGF在垂体瘤中的表达及临床意义

目的探讨垂体瘤转化基因(PTTG)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在垂体瘤中的表达水平及临床意义。方法将43例垂体瘤患者分为侵袭组和非侵袭组,采用免疫组化方法检测瘤组织中PTTG蛋白和bFGF蛋白表达水平;应用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测瘤组织中PTTG-mRNA表达水平。结果PTTG蛋白在侵袭组显著高表达;PTTG-mRNA在侵袭组表达水平有不同程度的增高;PTTG和bFGF呈正相关。结论PTTG和bFGF与肿瘤侵袭生长密切相关,可以作为临床判定垂体肿瘤侵袭生长的分子标志。

PTTG表达与垂体腺瘤侵袭性关系

目的 探讨垂体瘤转化基因 (Pituitarytumortransforminggene ,PTTG)表达与腺瘤侵袭性的关系及其临床意义。方法 回顾近年我科经手术切除的 44例垂体腺瘤标本及 6例正常垂体组织 ,均经 10 %的福尔马林固定、石蜡包埋。联合运用Knosp影像学标准及任祖渊标准 ,参考术中情况 ,将肿瘤标本分为侵袭组与非侵袭组 ;运用免疫组化的方法检测这 5 0例标本中PTTG蛋白表达情况 ;分析PTTG表达与垂体腺瘤侵袭性的内在关系。结果 免疫组化实验结果显示PTTG蛋白在侵袭性垂体腺瘤组中显著高表达 ,在非侵袭性腺瘤组中有一定表达 ,在正常垂体组织中未见表达。结论 原癌基因PT TG表达水平和垂体腺瘤侵袭性密切相关 ,可作为腺瘤侵袭性的标志物。

类风湿性关节炎滑膜组织中PTTG1和MMP-2的表达及意义

目的检测类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑膜被覆细胞及滑膜下组织中垂体肿瘤转化基因1(pituitarytumor transforming gene 1,PTTG1)及MMP-2的表达及分布状况,探讨其在RA发病中的作用。方法采用免疫组化SP法检测68例RA患者,14例骨性关节炎(osteoarthritis,OA)患者滑膜被覆细胞及滑膜下组织中PTTG1及MMP-2的表达状况。结果 PTTG1在RA组、OA组阳性率分别为64.7%和21.4%;MMP-2在RA组、OA组阳性率分别为73.5%和28.6%,差异具有统计学意义(P<0.05),且PTTG1和MMP-2之间表达具有相关性(rs=0.776,P<0.05)。结论 PTTG1和MMP-2在RA组滑膜组织的表达均明显升高,且二者之间的表达具有相关性,从而证实其在RA的发病机制中可能具有一定的作用。

PTTG和VEGF-C在喉癌组织中的表达及其与微淋巴管生成的关系

目的探讨垂体肿瘤转化基因(PTTG)和血管内皮生长因子-C(VEGF-C)在喉癌组织中表达的相关性以及与喉癌发展的关系。方法应用免疫组织化学SP法分别检测60例喉癌组织和32例癌旁组织中PTTG和VEGF-C两种蛋白的表达情况,并用D2-40阳性产物定位淋巴管内皮细胞细胞质及细胞膜,计数微淋巴管密度(LMVD)。结果喉癌组织中PTTG和VEGF-C表达水平均显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);二者表达量与喉癌的分化程度、有无淋巴结转移及临床分期差异均有统计学意义(P<0.05),与临床分型、有无吸烟史、肿瘤大小、性别及年龄方面的差异均无统计学意义(P>0.05)。喉癌组织中LMVD表达水平明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05),与淋巴结转移显著相关(P<0.05),与分化程度、临床分期、临床分型、有无吸烟史、肿瘤大小、性别及年龄不相关(P>0.05)。PTTG和VEGF-C在喉癌组织中表达呈显著正相关(P<0.05)。LMVD分别与喉鳞癌组织中PTTG和VEGF-C蛋白表达正相关(P<0.05)。结论 PTTG和VEGF-C在喉癌的发展中起重要作用,二者的检测可作为喉癌转移及预后的预判指标,有望成为新的基因治疗靶点。

PTTG、bFGF、VEGF-C在大肠正常黏膜及大肠癌中的表达及意义

目的:探讨垂体肿瘤转化基因(PTTC)、碱性成纤维细胞生长因子(bFCF)、血管内皮生长因子-C(VECF-C)在大肠癌中的表达及以上指标与大肠癌临床病理因素之间的关系。方法:采用RT-PCR技术检测20例大肠正常黏膜、80例大肠癌组织中PTTC mRNA,应用免疫组织化学法检测20例大肠正常黏膜、80例大肠癌组织中PTTC、bFCF、VECF-C蛋白的表达。结果:大肠癌组织中PTTC、bFCF、VECF-C的表达明显高于大肠正常黏膜组织,且与大肠癌浸润深度、淋巴结转移、Duke’s分期呈正相关,PTTC、bFCF、VECF-C在大肠癌中的表达有显著正相关性。结论:PTTC、bFCF、VECF-C在大肠癌发生、发展、侵袭及转移过程中扮演着重要的角色,可作为判断大肠癌转移及预后的预测因素,且三者可能通过相互作用共同促进大肠癌的恶性进展。

反义PTTG真核表达载体对人卵巢癌细胞SK-OV-3恶性表型的抑制作用

背景与目的:垂体肿瘤转化基因(pituitarytumortransforminggene,PTTG)是一个新的原癌基因,具有多种促肿瘤生长与转移的作用。目前研究多集中于PTTG在各种肿瘤组织中的表达及其相关的调控机制,而针对其反义阻断可能性的报道较少。本研究中,我们通过构建携带能够表达全长反义PTTGmRNA的真核表达载体,观察其对人卵巢癌细胞株SK-OV-3的反义阻断效应。方法:利用含酶切位点的PCR引物克隆全长PTTG,反向插入真核表达载体pcDNA3.1;用脂质体将重组载体转染SK-OV-3细胞,G418筛选阳性克隆后,Westernblot检测PTTG蛋白和碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)表达的改变,MTT法检测细胞增殖情况,并利用软琼脂糖集落形成实验观察细胞生物学性状的变化。结果:筛选出稳定表达重组pcDNA3.1-PTTGas的SK-OV-3细胞;转染细胞组较未转染细胞组的PTTG、bFGF表达分别减少了61.5%和52.3%;转染细胞增殖明显增强;转染细胞在软琼脂中的集落形成数(2.4±0.8)明显低于未转染组和转染空白质粒对照组(23.3±5.7和21.5±7.9)(P<0.01)。结论:反义PTTG真核表达载体作为一种新的工具,为针对PTTG的肿瘤基因治疗提供了可能性。

PTTG、VEGF-C的表达及微淋巴管密度与非小细胞肺癌临床病理特征的关系

目的检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)、癌旁组织及肺良性病变组织中垂体瘤转化基因(pituitary tumortrans-forming gene,PTTG)及血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor,VEGF-C)的表达和微淋巴管密度(lymphatic microvessel density,LMVD)值,并探讨三者间的相互关系。方法应用实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法检测非小细胞肺癌组织中PTTG、VEGF-C mRNA和蛋白及LM-VD的表达,分析PTTG、VEGF-C及LMVD与NSCLC临床病理特征的关系,以及PTTG、VEGF-C和LMVD三者之间的相互关系。同时,对随访资料进行生存分析,绘制生存率曲线,探讨PTTG、VEGF-C对肺癌患者预后的影响。结果PTTG、VEGF-C mRNA和LMVD值在不同性质的肺病变组织中的表达均有显著性差异(P均<0.05),在不同年龄、性别、是否吸烟、肿瘤大小、组织学类型及分化程度间无显著性差异(P均>0.05),在TNM分期、淋巴结转移与否及预后组间有显著性差异(P均<0.05)。PTTG、VEGF-C蛋白表达在淋巴结转移与否及预后组间有显著性差异(P均<0.05)。生存率曲线显示PTTG、VEGF-C高表达者生存时间均短于低/无表达者(P=0.030,0.027,n=65)。PTTG在肺癌组织中的表达与VEGF-C、LMVD密切相关,随着PTTG强度增加,VEGF-C分级及LMVD值亦增加。结论PTTG、VEGF-C的过度表达促使肿瘤微淋巴管的生成,进而促进了肿瘤细胞淋巴结转移。PTTG和VEGF-C表达可作为判断NSCLC生物学行为及肺癌患者预后的良好指标,VEGF-C有望成为肺癌抗淋巴管治疗的新靶点。

PTTG、c-Myc及Ki67在胃癌中的表达及相关性研究

目的检测PTTG、c-Myc及Ki67在胃癌、慢性萎缩性胃炎及正常胃黏膜中的表达,研究三者在胃癌表达中的相关性,探讨三者对胃癌发生、发展、转移、预后的影响及机制。方法采用免疫组织化学SP法检测PTTG、c-Myc及Ki67在60例胃癌组织、20例慢性萎缩性胃炎和10例正常胃黏膜中的表达。结果PTTG、c-Myc及Ki67表达在正常胃黏膜、慢性萎缩性胃炎及胃癌组织中差异均有显著性(P<0.05);按胃癌的临床病理特征分类,三者的表达均与胃癌的病理组织学分级、临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05),而与组织学类型无关(P>0.05)。三者在胃癌中的表达强度呈显著正相关(P<0.05)。H.pylori阳性的慢性萎缩性胃炎中PTTG、c-Myc及Ki67的表达均强于H.pylori阴性者。结论PTTG、c-Myc及Ki67参与了正常胃黏膜、胃癌前病变至胃癌的转化过程,三者在胃癌的发生发展中可能有协同作用,均可作为判定胃癌恶性程度,评估其侵袭性及转移的分子生物学指标。三者的表达可能与H.pylori感染有关。

PTTG靶向siRNA表达载体构建及其沉默效率评价

目的:构建针对人脑胶质瘤细胞系U251的高效率沉默垂体瘤转化基因(PTTG)的小分子干扰RNA(siRNA)表达载体。方法:合成特异性干扰PTTG的siRNA片段,并与pGenesil2载体连接,构建PTTG干扰载体(pGenesil2-PTTG siRNA)。利用脂质体将其转染U251细胞,分为正常细胞对照组、HK阴性对照组和3个siRNA干扰组(pGenesil2-PTTG siRNA1、pGenesil2-PTTG siRNA2和pGenesil2-PTTG siRNA3),应用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法和流式细胞术对转染后U251细胞中PTTG的mRNA和蛋白表达水平进行分析。结果:酶切证实PTTG-siRNA表达载体构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致;转染pGenesil2-PTTG siRNA后,3个干扰组的U251细胞中PTTG基因和蛋白表达水平均较正常对照组显著降低(P<0.01)。结论:成功构建了能高效率沉默PTTG的RNAi表达载体;pGenesil2-PTTG siRNA高效地抑制了胶质瘤U251细胞中PTTG基因的表达。

PTTG、bFGF和endostatin在大肠癌中的表达

目的:探讨大肠癌组织中垂体肿瘤转化基因(PTTG),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和内皮抑素(endostatin)在大肠癌表达的意义。方法:应用免疫组化法测定57例大肠癌标本中的PTTG,bFGF和en-dostatin的表达水平。并对其与临床病理特征的关系进行分析。结果:PTTG,bFGF和endostatin在大肠癌组织中的表达均与Dukes分期,分化程度,有无淋巴结转移相关,与患者性别、病理类型无关。PTTG表达同bF-GF表达存在显著正相关,而endostatin表达与PTTG和bFGF呈负相关。结论:大肠癌的侵袭性可能与PTTG和bFGF表达增高及endostatin表达下调有关。

PTTG反义cDNA对胆囊癌细胞5-FU敏感性的影响

目的:探讨垂体肿瘤转化基因(PTTG)反义cDNA对胆囊癌GBC -SD细胞系5 -FU化疗敏感性的影响. 方法:脂质体法将PTTG反义cDNA转染胆囊癌细胞GBS- SD;G418筛选阳性克隆;Westernblot检测PTTG蛋白;MTT检测细胞增殖情况及不同浓度5- FU作用下各组细胞相对存活率差别,计算IC50值;流式细胞术检测各组细胞凋亡率. 结果:转染组细胞较未转染组PTTG表达明显减少;转染组细胞增殖与凋亡明显增强;转染组IC50值( 0. 605mmol/L)明显低于未转染组(1. 117mmol/L)和空载体转染组(0. 914mmol/L);转染组细胞的5 FU凋亡诱导作用( 26. 24% )明显高于未转染组(2. 67% )和空载体转染组(7. 62% ). 结论:转染PTTG反义cDNA可增强胆囊癌细胞对5- FU化疗敏感性,二者联合应用可能是一种治疗胆囊癌的有效方法.

Gal-3、PTTG和Ki-67在甲状腺良恶性肿瘤中的表达及其鉴别诊断意义

目的:研究甲状腺组织半乳糖凝素3(Gal-3)、垂体瘤转化基因(PTTG)和增殖指数(Ki-67)在甲状腺良恶性疾病中的表达及其鉴别诊断中的应用价值。方法:应用免疫组织化学EnVision法检测正常甲状腺组织10例、甲状腺滤泡性腺瘤13例、滤泡性癌14例、乳头状癌40例中Gal-3、PTTG和Ki-67的表达。结果:3种蛋白表达在正常甲状腺组织、甲状腺腺瘤与恶性病变(乳头状癌、滤泡性癌)间差异具有统计学意义(P<0.05);在甲状腺腺瘤、乳头状癌和滤泡性癌间差异均有统计学意义(P<0.05);两种蛋白同时表达在良性病变和恶性病变(乳头状癌、滤泡性癌)间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:Gal-3、PTTG和Ki-67免疫组化联合检测对甲状腺病变的诊断、鉴别诊断具有较高的实用价值。

胶质瘤组织中PTTG、MMP-2和Survivin的表达及意义

目的:检测脑胶质瘤组织中PTTG、MMP-2和Survivin的表达情况并探讨其意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测50例脑胶质瘤、10例正常脑组织中三者的表达情况。结果:脑胶质瘤组织中PTTG、MMP-2和Survivin表达定位于细胞浆,其阳性表达率分别为80.00%(40/50)、74.00%(37/50)和60.00%(30/50)与正常脑组织0、0和10%存在差异(P<0.05)。与胶质瘤患者的年龄、性别无明显相关性(P>0.05),但Ⅲ-Ⅳ组与Ⅰ-Ⅱ组之间表达有差异,具有统计学意义(P<0.05)。在脑胶质瘤组织中PTTG、MMP-2和Survivin的阳性表达呈正相关(P<0.05)。结论:PTTG、MMP-2和Survivin在脑胶质瘤组织中的表达情况,提示PTTG、MMP-2和Survivin高表达可能与胶质瘤发生有关,且与胶质瘤的浸润、发展、转移有关。

PTTG与C-MYC在非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义

目的:探讨原癌基因PTTG与C-MYC在非霍奇金淋巴瘤(NHL)中的表达及临床病理意义。方法:应用免疫组织化学S-P法检测PTTG和C-MYC在NHL与对照组织中的表达,分析它们的表达与NHL的组织类型、恶性程度,临床分期及PTTG与C-MYC两者间的相关性。结果:与对照组织相比,NHL中PTTG显著高表达(P<0.05),且T细胞淋巴瘤比B细胞淋巴瘤表达率高(P<0.01),两组淋巴瘤中侵袭性强亚型中表达率均高于其对应的惰性亚型组(P均<0.05);临床分期晚期组表达率高于早期组(P<0.05)。NHL中C-MYC表达率仅6.1%,且与PTTG之间无相关性(rs=-0.368,P>0.05)。结论:PTTG高表达但不通过活化C-MYC来参与NHL的发生、发展。

RNAi沉默PTTG基因对恶性胶质瘤U251细胞的影响

目的探讨垂体瘤转化基因(PTTG)siRNA干扰质粒对人脑胶质瘤细胞株U251体外增殖、周期和凋亡的影响。方法利用脂质体将pGenesil-2 PTTG siRNA干扰质粒转染U251细胞,通过MTT法观察转染后24h、48h和72h细胞增殖的变化、流式细胞术PI单染观察转染后48h细胞凋亡和细胞周期的变化。结果pGenesil-2PTTG siRNA干扰质粒转染U251细胞48h后,PTTG mRNA和蛋白的抑制率分别约为69%和71%;阻滞U251细胞由G1期进入S期,抑制细胞的生长,增加了细胞的凋亡。结论PTTG siRNA表达载体可以特异高效地抑制胶质瘤U251细胞PTTG基因的表达,从而调控肿瘤细胞周期,抑制肿瘤细胞增殖。

非小细胞肺癌中PTTG的表达及其与PTEN和Ki67蛋白表达的关系

目的探讨PTTG的表达在非小细胞肺癌(NSCLC)发生、发展中的作用及其与PTEN和Ki67蛋白表达的关系。方法应用免疫组化SP法检测PTTG、PTEN和Ki67三种蛋白在60例NSCLC和19例正常支气管黏膜上皮组织中的表达。结果NSCLC组织中PTTG蛋白表达的阳性率为73.33%(44/60),显著高于正常支气管黏膜上皮组织中的表达(P=0.000);PTTG的表达与肿瘤细胞的分化程度和有无淋巴结转移显著相关,但与患者的年龄、性别及肿瘤的组织学类型无关;NSCLC组织中PTTG表达与PTEN表达无相关关系,而与Ki67表达呈显著正相关。结论NSCLC中PTTG高表达,PTEN低表达,PTTG和Ki67在NSCLC的发生和发展中有协同作用,三者可作为反映NSCLC生物学行为的指标。PTTG将有望成为新的肿瘤分子标记与基因治疗的靶点。

PTTG ESP1在A549 SPC-A-1细胞株SG_2/M期的表达

目的 探讨PTTG (pituitarytumortransforminggene)、ESP1(estradiol stimulatedprotein 1)在A5 49、SPC A 1细胞S、G2 M期的表达。方法 用双胸苷同步化法同步化A5 49、SPC A 1细胞及MRC 5细胞,分别收集S、G2 M期总RNA ,做Real timePCR。结果 PTTG在A5 49细胞和SPC A 1细胞的S期表达比G2 M期表达高,在MRC 5细胞的在S、G2 M期中PTTG均无表达;ESP1在A5 49细胞与SPC A 1细胞及MRC 5细胞的S期表达均比G2 M期表达低。结论 PTTG在MRC 5的S、G2 M期都无表达,在A5 49、SPC A 1的S期比G2 M期表达增高,提示肿瘤细胞的染色体非整倍体与PTTG的表达增高有关;ESP1在MRC 5和A5 49、SPC A 1的S期比G2 M期表达低,说明细胞中姐妹染色体的分离主要依靠于ESP1在G2 M期被激活,而导致姐妹染色体的分离。

As_2O_3对NB4细胞PTTG和c-myc基因表达的影响

目的探讨As2O3对NB4细胞PTTG和c-myc基因表达的影响。方法用RT-PCR的方法检测As2O3对NB4细胞PTTG和c-myc的表达的影响。结果0.5、1.0、2.0μmo1/L的As2O3作用NB4细胞24、48h后PTTG基因的表达强度逐渐减弱;与未加As2O3的NB4细胞对照组比较P<0.05。c-myc基因的表达强度亦逐渐减弱,与未加As2O3干预的NB4对照组比较P<0.05。结论PTTG和c-myc在NB4细胞中也有高表达,提示PTTG和c-myc的高表达在急性早幼粒细胞白血病(APL)发病过程中可能起着重要作用,As2O3能有效地下调NB4细胞PTTG和c-myc的表达。

乳腺良恶性病变PTTG、VEGF-C和MMP-14表达及临床病理意义

目的研究乳腺浸润性导管癌、乳腺良性病变组织中垂体瘤转化基因(PTTG),基质金属蛋白酶-14(MMP-14)和血管内皮生长因子-C(VEGF-C)的表达水平,探讨其临床病理意义。方法 40例乳腺浸润性导管癌、20例乳腺良性病变手术切除标本常规石蜡包埋切片,PTTG、MMP-14和VEGF-C染色方法为免疫组化SP法。结果乳腺浸润性导管癌PTTG、VEGF-C和MMP-14表达阳性率(75.0%、85.0%和77.5%)明显高于乳腺良性病变(20.0%、30.0%和25.0%,P<0.01),有淋巴结转移病例PTTG、VEGF-C和MMP-14表达阳性率明显高于无淋巴结转移病例(P<0.01),而在不同年龄、肿瘤大小、分化程度组间差别无统计学意义(P>0.05)。乳腺浸润性导管癌中PTTG与VEGF-C和MMP-14表达呈高度一致性(r=0.586,0.657,P<0.01),VEGF-C与MMP-14表达亦呈高度一致性(r=0.649,P<0.01)。结论 PTTG、VEGF-C和MMP-14的表达可能是反映乳腺浸润性导管癌发生、发展、生物学行为及预后的重要生物学指标,三者有望成为乳腺癌抗淋巴管治疗的新靶点。