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Highly efficient synthesis of(R)-1,3-butanediol via anti-Prelog reduction of 4-hydroxy-2-butanone with absolute stereoselectivity by a newly isolated Pichia kudriavzevii
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作者 Han Zu Hui Zhang +4 位作者 Anwen Fan Jie Gu Yao Nie Pengjie Luo Yan Xu 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2020年第8期2160-2166,共7页
(R)-1,3-butanediol is an important pharmaceutical intermediate, and the synthesis of(R)-1,3-butanediol using green biological methods has recently been of interest for industrial application. Here, a novel strain QC-1... (R)-1,3-butanediol is an important pharmaceutical intermediate, and the synthesis of(R)-1,3-butanediol using green biological methods has recently been of interest for industrial application. Here, a novel strain QC-1 that efficiently transforms 4-hydroxy-2-butanone to(R)-1,3-butanediol was isolated from soil samples. Based on morphological, physiological, and biochemical tests and 5.8 S-internal transcribed spacer sequencing, the strain was identified as Pichia kudriavzevii QC-1. The reaction conditions were optimized to 35 ℃, pH 8.0, rotation speed 200 rpm, and 6:5 mass ratio of glucose to 4-hydroxy-2-butanone. Evaluation of the effects of 4-hydroxy-2-butanone concentrations on yield and cell survival rate showed that 85.60 g·L^-1 product accumulated, with an enantiomeric excess of more than 99%, when 30 g·L^-14-hydroxy-2-butanone was added at 0, 10, and 30 h in a 3-L bioreactor. Thus, strain QC-1 showed excellent catalytic activity and stereoselectivity for the synthesis of(R)-1,3-butanediol from 4-hydroxy-2-butanone. 展开更多
关键词 Asymmetric reduction STErEOSELECTIVITY (r)-1 3-butanediol 4-Hydroxy-2-butanone Whole-cell catalysis
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多粘类芽孢杆菌同步糖化发酵玉米粉生产(R,R)-2,3-丁二醇 被引量:6
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作者 李亿 李检秀 +4 位作者 刘海余 黄艳燕 陆琦 谢能中 黄日波 《广西科学》 CAS 2016年第1期41-46,共6页
【目的】对多粘类芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa的玉米粉同步糖化发酵工艺进行优化,以获得低成本、高效的(R,R)-2,3-丁二醇生产技术。【方法】研究玉米粉浓度、氮源种类和氮源浓度对菌体生长、耗糖能力以及(R,R)-2,3-丁二醇产量、产... 【目的】对多粘类芽孢杆菌Paenibacillus polymyxa的玉米粉同步糖化发酵工艺进行优化,以获得低成本、高效的(R,R)-2,3-丁二醇生产技术。【方法】研究玉米粉浓度、氮源种类和氮源浓度对菌体生长、耗糖能力以及(R,R)-2,3-丁二醇产量、产率、得率和转化率的影响,并在此基础上进一步考察培养基中其它成分对(R,R)-2,3-丁二醇发酵的影响。【结果】优化后的培养基组分为玉米干粉140g/L,酵母粉30g/L,Na_2HPO_4 3g/L,KH_2PO_43g/L,(NH_4)2SO_42g/L,MgSO_40.8g/L,微量元素溶液2mL/L。使用优化后的培养基进行同步糖化发酵,发酵50h后(R,R)-2,3-丁二醇产量达到56.28g/L(光学纯度为98.3%),对葡萄糖的得率为0.44g/g,产率为1.13g/(L·h)。【结论】(R,R)-2,3-丁二醇生产技术低价高效,可为其工业化生产提供参考。 展开更多
关键词 (r r)-2 3-丁二醇 多粘类芽孢杆菌 同步糖化 发酵工艺 低价碳源
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2R,3R-丁二醇和2,3-丁二醇诱导匍匐翦股颖抗病性的比较 被引量:6
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作者 马源 马晖玲 刘兴菊 《草原与草坪》 CAS CSCD 2017年第1期79-83,91,共6页
以2R,3R-丁二醇和2,3-丁二醇作为诱抗剂,在诱导匍匐翦股颖产生对褐斑病抗性的过程中,重点比较了不同施用方式的诱抗效果,筛选出了诱抗剂的最佳作用方式和浓度。结果表明:匍匐翦股颖接菌后第15d,2R,3R-丁二醇根部注射处理下,100μmol/L... 以2R,3R-丁二醇和2,3-丁二醇作为诱抗剂,在诱导匍匐翦股颖产生对褐斑病抗性的过程中,重点比较了不同施用方式的诱抗效果,筛选出了诱抗剂的最佳作用方式和浓度。结果表明:匍匐翦股颖接菌后第15d,2R,3R-丁二醇根部注射处理下,100μmol/L的病情指数最低,诱导效果最佳;而与叶面喷施相比,叶面喷施的诱导效果不明显;2,3-丁二醇根部注射处理下,250μmol/L的病情指数最低,诱导效果最佳,而与叶面喷施相比,叶面喷施的诱导效果不明显。结果表明,100μmol/L的2R,3R-丁二醇与250μmol/L的2,3-丁二醇根部注射可有效诱导匍匐翦股颖产生对褐斑病的抗性。 展开更多
关键词 匍匐翦股颖 2r 3r-丁二醇 2 3-丁二醇 褐斑病
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不对称二羟化反应制备(2R,3S)-2,3-二羟基-3-苯丙酸乙酯 被引量:1
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作者 陈惠 罗晶 +1 位作者 赵安东 孙晓莉 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期526-528,共3页
合成了两种可回收利用的小分子配体,并在两种不同体系的Sharpless不对称二羟化反应中用于催化肉桂酸乙酯,以合成紫杉醇的重要中间体(2R,3S)-2,3-二羟基-3-苯丙酸乙酯。结果表明,两种配体在叔丁醇-水(1∶1)和丙酮-水(10∶1)体系中的催化... 合成了两种可回收利用的小分子配体,并在两种不同体系的Sharpless不对称二羟化反应中用于催化肉桂酸乙酯,以合成紫杉醇的重要中间体(2R,3S)-2,3-二羟基-3-苯丙酸乙酯。结果表明,两种配体在叔丁醇-水(1∶1)和丙酮-水(10∶1)体系中的催化性能均良好,收率85%~95%,ee可达95%以上,且重复使用3次后收率和ee基本不变。 展开更多
关键词 (2r 3S)-2 3-二羟基-3-苯丙酸乙酯 Sharpless不对称二羟化反应 手性配体 不对称催化 紫杉醇 中间体 合成
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(2R,3R)-2,3-二甲氧基-1,1,4,4-四苯基-1,4-丁二醇的一种实用制备方法(英文)
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作者 胡晓允 尹忠友 +1 位作者 唐艳柳 吴腊梅 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2019年第1期22-26,共5页
基于(2R,3R)-1,1,4,4-四苯基丁四醇的区域选择性2,3-二甲基化反应,建立了一种制备C_2手性二醇即(2R,3R)-2,3-二甲氧基-1,1,4,4-四苯基-1,4-丁二醇的实用方法.结果表明:与文献相比,该合成避免了酸的使用,减少了多取代THF衍生物的生成,提... 基于(2R,3R)-1,1,4,4-四苯基丁四醇的区域选择性2,3-二甲基化反应,建立了一种制备C_2手性二醇即(2R,3R)-2,3-二甲氧基-1,1,4,4-四苯基-1,4-丁二醇的实用方法.结果表明:与文献相比,该合成避免了酸的使用,减少了多取代THF衍生物的生成,提高了产率,不仅是制备(2R,3R)-2,3-二甲氧基-1,1,4,4-四苯基-1,4-丁二醇的便捷方法,也为(2R,3R)-1,1,4,4-四取代丁四醇的区域选择性衍生化提供了重要信息. 展开更多
关键词 选择性甲基化 (2r 3r)-1 1 4 4-四苯基丁四醇 (2r 3r)-2 3-二甲氧基-1 1 4 4-四苯基-1 4-丁二醇 环醚化
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(2R,3R)-1,4-二甲氧基-1,1,4,4-四苯基-2,3-丁二醇的合成——推荐一个大学有机化学综合实验
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作者 胡晓允 马玲 +3 位作者 尹欣然 陈丹 周忠强 张道洪 《大学化学》 CAS 2022年第12期170-175,共6页
“(2R,3R)-1,4-二甲氧基-1,1,4,4-四苯基-2,3-丁二醇的合成与表征”是“化学综合实验”课程的一个创新实验。(2R,3R)-1,4-二甲氧基-1,1,4,4-四苯基-2,3-丁二醇是一种应用广泛的手性二醇,但其合成方案制备成本较高、合成操作繁琐且具有... “(2R,3R)-1,4-二甲氧基-1,1,4,4-四苯基-2,3-丁二醇的合成与表征”是“化学综合实验”课程的一个创新实验。(2R,3R)-1,4-二甲氧基-1,1,4,4-四苯基-2,3-丁二醇是一种应用广泛的手性二醇,但其合成方案制备成本较高、合成操作繁琐且具有一定的危险性,不适合作为本科教学实验开设。该综合实验以天然酒石酸酯为手性源,与苯基格氏试剂反应制得(2R,3R)-1,1,4,4-四苯基丁四醇;基于其高度区域选择性2,3-环亚硫酸酯化反应,利用甲醇与卤代烃的亲核取代反应引入甲氧基,避开MeI/NaH的羟基醚化方案,制得(2R,3R)-1,4-二甲氧基-1,1,4,4-四苯基-2,3-丁二醇,降低了制备成本,简化了实验操作步骤。该实验涵盖了格氏反应、亲核取代、水解反应等经典反应类型,涉及无水操作、萃取、重结晶及薄层色谱检测等合成操作和熔点、比旋光度测定、核磁共振等表征手段。该综合实验和基础有机化学实验紧密衔接,培养和提高了学生的综合实验能力,加深了学生对有机化学理论知识的理解,让学生深刻认识到高度区域选择性反应的设计在有机合成中的重要性,激发了学生的科研兴趣和创新意识,适合作为大学综合化学实验开设。 展开更多
关键词 综合实验 区域选择性反应 (2r 3r)-1 4-二甲氧基-1 1 4 4-四苯基-2 3-丁二醇 绿色化学
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(-)-(2R,3S)-3-苯基-2,3-环氧丙酸甲酯的不对称合成
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作者 林汉森 《广东药学院学报》 CAS 2004年第2期97-98,共2页
以反式肉桂醇为原料,经Sharpless不对称环氧化,产生所需的两个手性碳(2S,3S)后,产物经氧化、酯化即得标题产 物(-)-(2R,3S)-3-苯基-2,3-环氧丙酸甲酯(1),三步总收率28.4%,所得产物的ee值>95%。
关键词 (-)-(2r 3S)-3-苯基-2 3-环氧丙酸甲酯 中间体 合成
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Paenibacillus polymyxaZJ-9混合发酵菊粉和葡萄糖合成R,R-2,3-丁二醇 被引量:1
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作者 徐尤勇 高健 +2 位作者 徐虹 曹灿 黄巍巍 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期8-13,共6页
在7.5 L发酵罐上考察了Paenibacillus polymyxa ZJ-9混合发酵菊粉和葡萄糖合成R,R-2,3-丁二醇的工艺条件。选用菊芋菊粉粗提液为发酵前期底物,分析比较不同初始菊粉浓度下的细胞比生长速率(μ)和产物比合成速率(qp),进而研究了补糖种类... 在7.5 L发酵罐上考察了Paenibacillus polymyxa ZJ-9混合发酵菊粉和葡萄糖合成R,R-2,3-丁二醇的工艺条件。选用菊芋菊粉粗提液为发酵前期底物,分析比较不同初始菊粉浓度下的细胞比生长速率(μ)和产物比合成速率(qp),进而研究了补糖种类和不同补料方式对合成R,R-2,3-丁二醇的影响。结果表明,初始菊粉75.0g/L,当发酵到24 h、31 h时,分别添加15.0 g/L的葡萄糖,发酵效果最佳,44 h时,产物产量达到最高值47.8 g/L,与分批发酵相比,糖转化率由原来的34.9%提高到45.5%,生产强度由原来的0.70 g/(L·h)提高到1.09 g/(L·h),并且副产物乙偶姻、残糖浓度相对较低。 展开更多
关键词 r r-2 3-丁二醇 PAENIBACILLUS polymyxa ZJ-9 补料分批发酵
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(R,R)-(+)-2,3-二甲氧基-N,N,N’,N’-四环己丁二酰胺的合成与表征 被引量:1
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作者 黄颜炯 薛冬桦 吴作林 《长春工业大学学报》 CAS 2008年第6期637-642,共6页
以L-(+)-酒石酸为起始原料,经过酯化、甲基化、水解、酰化合成(R,R)-(+)-2,3-二甲氧基-N,N,N’,N’-四环己丁二酰胺化合物,其结构和(R,R)-(+)-2,3-二甲氧基-1,4-丁二酰氯的结构通过IR,1HNMR进行分析确证,对合成条件和纯化方法进行探讨。
关键词 重结晶 纯化 合成 2 3二甲氧基-L(+)-1 4-丁二酰氯 (r r) (+)-2 3-二甲氧基-N N N’ N’-四环己丁二酰胺
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新型(3R,3aR,6aS)六氢呋喃并[2,3-b]呋喃烟碱类化合物的合成及活性研究 被引量:1
10
作者 罗元伍 吕英慧 +1 位作者 刘鹏飞 徐浩 《精细化工中间体》 CAS 2017年第1期18-23,共6页
以(3R,3aS,6aR)六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-醇(8)为原料通过酯化反应、SN_2亲核取代反应、Pd/C催化还原以及缩合反应制备一系列新型的(3R,3aS,6aR)六氢呋喃并[2,3-b]呋喃烟碱类化合物。对路线中酯化试剂的选择、亲核反应的溶剂、温度和反... 以(3R,3aS,6aR)六氢呋喃并[2,3-b]呋喃-3-醇(8)为原料通过酯化反应、SN_2亲核取代反应、Pd/C催化还原以及缩合反应制备一系列新型的(3R,3aS,6aR)六氢呋喃并[2,3-b]呋喃烟碱类化合物。对路线中酯化试剂的选择、亲核反应的溶剂、温度和反应时间进行了优化;并且对化合物以蚕豆蚜为靶标进行了活性测试,其中化合物4的活性较好,浓度为1.0×10^(-5)mg/L时死亡率为65.96%。 展开更多
关键词 (3r 3aS 6ar)六氢呋喃并[2 3-b]呋喃-3- 酯化反应 亲核取代反应 催化反应 活性测试
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(R)-5-二苯甲基-2-苯基-5,6-二氢噁唑并[2,3-c][1,2,4]-2-三唑盐酸盐的合成 被引量:1
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作者 王霆 张雅文 《苏州大学学报(自然科学版)》 CAS 2009年第2期72-74,共3页
设计了用于催化不对称安息香缩合的手性卡宾催化剂(1).以L-丝氨酸为起始原料,经过七步反应合成了其前体(R)-5-二苯甲基-2-苯基-5,6-二氢噁唑并[2,3-c][1,2,4]-2-三唑盐酸盐(9).
关键词 (r)-5-二苯甲基-2-苯基-5 6-二氢噁唑并[2 3-c][1 2 4]-2-三唑盐酸盐 三唑 含氮杂环卡
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利用菊芋菊粉制备R,R-2,3-丁二醇发酵工艺条件的优化
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作者 杨欢欢 高健 +1 位作者 徐虹 邵荣 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期6-10,共5页
为了提高Paenibacillus polymyxa ZJ-9发酵菊芋菊粉制备R,R-2,3-丁二醇的产量、减少生产成本,考察了发酵温度、pH、接种量和溶氧(搅拌转速)对菌体生长繁殖、菊粉的利用率和R,R-2,3-丁二醇合成的影响。实验结果表明,Paenibacillus polymy... 为了提高Paenibacillus polymyxa ZJ-9发酵菊芋菊粉制备R,R-2,3-丁二醇的产量、减少生产成本,考察了发酵温度、pH、接种量和溶氧(搅拌转速)对菌体生长繁殖、菊粉的利用率和R,R-2,3-丁二醇合成的影响。实验结果表明,Paenibacillus polymyxa ZJ-9发酵的最适温度、pH和接种量分别为30℃、6.0和8%。通过对不同搅拌转速条件下的菌体比生长速率μ_x和产物比合成速率μ_p分析,制定了一种两步溶氧控制策略发酵生产R,R-2,3-丁二醇:在发酵前24h,控制搅拌转速调控为240r/min有利于菌体生长,而24h后,控制发酵液搅拌转速调控为160r/min,能有效促进R,R-2,3-丁二醇合成,在上述条件下,R,R-2,3-丁二醇的产量高达27.83g/L,比恒定搅拌转速条件的最大值提高了10.15%。 展开更多
关键词 r r-2 3-丁醇 多粘类芽孢杆菌 发酵工艺条件
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A new free recoverable and reusable mono-alkaloid-type ligand and its use in preparation of ethyl(2R,3S)-2,3-dihydroxy-3-phenylpropionate
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作者 Qiao Feng Wang Hui Chen Yan Zhao Xiao Ye Li Sheng Yong Zhang 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2009年第7期763-766,共4页
A new free recoverable and reusable mono-alkaloid-type ligand has been synthesized by a simple method. With highly polar groups, the ligand can be recycled and reused eight times to prepare ethyl (2R,3S)-2,3-dihydro... A new free recoverable and reusable mono-alkaloid-type ligand has been synthesized by a simple method. With highly polar groups, the ligand can be recycled and reused eight times to prepare ethyl (2R,3S)-2,3-dihydroxy-3-phenylpropionate with high yield and ee via asymmetric dihydroxylation (AD) reaction. C 2009 Sheng Yong Zhang. Published by Elsevier B.V. on behalf of Chinese Chemical Society. All rights reserved. 展开更多
关键词 Cinchona alkaloid recoverable and reusable ligand Ethyl 2r 3S)-2 3-dihydroxy-3-phenylpropionate
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(S)-6-苄氧基-5-羟基-3-氧代-己酸叔丁酯合成新方法 被引量:2
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作者 徐刚 孙丰来 +1 位作者 吴坚平 杨立荣 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第6期768-771,共4页
研究了一条新的路线用于(S)-6-苄氧基-5-羟基-3-氧代-己酸叔丁酯的合成.以廉价、易得的R-环氧氯丙烷为起始原料,经过几步比较温和的反应得到目标化合物.在此基础上,通过对催化剂三氟化硼乙醚用量的考察以及两条反应路线优缺点的比较,找... 研究了一条新的路线用于(S)-6-苄氧基-5-羟基-3-氧代-己酸叔丁酯的合成.以廉价、易得的R-环氧氯丙烷为起始原料,经过几步比较温和的反应得到目标化合物.在此基础上,通过对催化剂三氟化硼乙醚用量的考察以及两条反应路线优缺点的比较,找到了一条适合大规模制备的工艺路线.该路线具有收率高、原料易得、反应条件温和、产物容易分离、提纯等特点. 展开更多
关键词 (S)-6-苄氧基-5-羟基-3-氧代-己酸叔丁酯 r-环氧氯丙烷 (r)-1-苄氧基-3--2-丙醇 (S)-3-羟基-4-苄氧基丁腈 (S)-1-苯甲氧基-2 3-环氧丙烷
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Crystal Structure of Isoquinoline Derivatives
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作者 罗梅 张家海 +3 位作者 周仕明 孙杰 尹浩 胡克 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2011年第11期1672-1674,共3页
The chiral compound 5H-imidazol[2,3-b]isoquinoline-l-ethanol-5-one-1,2, 3, 10b-tetrahydro- β(S)-phenyl-3(S)-phenyl was synthesized from the direct condensation of 2- cyanophenyacetonitrile with optically active ... The chiral compound 5H-imidazol[2,3-b]isoquinoline-l-ethanol-5-one-1,2, 3, 10b-tetrahydro- β(S)-phenyl-3(S)-phenyl was synthesized from the direct condensation of 2- cyanophenyacetonitrile with optically active (S)-(+)-2-phenylglycinol in chlorobenzene under dry, anaerobic conditions. ZnCl2 was used as a Lewis acid catalyst in this reaction, and the structure of this compound was determined by X-ray diffraction, NMR, MS and IR. Crystal data of the title compound: C25H22N2O2, Mr = 382.45, P 21 21 21, a = 5.341(5), b = 16.735(5), c = 22.129(5) A, γ = 90°, V = 1978(2)A^3, Z = 4, Dc = 1.284 g/cm^3, the final R = 0.0321 for 2269 observed reflections with I 〉 2 σ(I) and Rw = 0.0771 for all data. 展开更多
关键词 5H-imidazol[2 3-b]isoquinoline-l-ethanol-5-one-1 2 3 10b-tetrahydro- β(S)-phenyl-3(S)-phenyl (r)--)-2-phenylglyeinol Lewis acid eatalyst
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微生物法合成(R,R)-2,3-丁二醇的研究进展与展望 被引量:4
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作者 王青艳 谢能中 +2 位作者 黎贞崇 陈东 黄日波 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1367-1373,共7页
2,3-丁二醇是重要的生物基化学品和液体燃料,广泛应用在化工、食品、能源、医药等领域。单一构型的(R,R)-2,3-丁二醇不仅具有混旋型2,3-丁二醇的基本功能,而且在不对称合成方面优势突出,是合成手性试剂和手性配体的重要前体,在高价值手... 2,3-丁二醇是重要的生物基化学品和液体燃料,广泛应用在化工、食品、能源、医药等领域。单一构型的(R,R)-2,3-丁二醇不仅具有混旋型2,3-丁二醇的基本功能,而且在不对称合成方面优势突出,是合成手性试剂和手性配体的重要前体,在高价值手性液晶材料、医药和农药中间体的合成方面具有重要应用。本文全面综述了近年来生物法制备(R,R)-2,3-丁二醇的最新研究成果,总结了多粘类芽孢杆菌合成高光学纯(R,R)-2,3-丁二醇的分子机理、代谢途径、发酵底物和发酵工艺。同时介绍了利用代谢工程技术对天然微生物代谢网络进行重新设计和合理改造,以及利用合成生物学先进技术在模式菌株中重建(R,R)-2,3-丁二醇合成途径等方面所取得的研究进展。综述最后讨论了各种生物法存在的主要问题和重点研究方向,并提出了利用后基因组时代的系统生物学与合成生物学手段,通过合理设计和多途径优化的方法构建高效细胞工厂的指导性建议。 展开更多
关键词 (r r)-2 3-丁二醇 手性合成 代谢工程 合成生物学 微生物细胞工厂
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氟烷基磺酰氟和(2S,3R)-2,3-二羟基-3-苯基丙酸甲酯的脱水环氧化反应的研究 被引量:4
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作者 严兆华 魏萌 +1 位作者 田伟生 官程波 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1269-1272,共4页
考察了(2S,3R)-2,3-二羟基-3-苯基丙酸甲酯和几种常用的氟烷基磺酰氟试剂在有机碱存在下的脱水环氧化反应.实验结果表明,氟烷基磺酰氟能够诱导(2S,3R)-2,3-二羟基-3-苯基丙酸甲酯发生脱水环氧化反应而生成(2R,3R)-2,3-环氧-3-苯基丙酸甲... 考察了(2S,3R)-2,3-二羟基-3-苯基丙酸甲酯和几种常用的氟烷基磺酰氟试剂在有机碱存在下的脱水环氧化反应.实验结果表明,氟烷基磺酰氟能够诱导(2S,3R)-2,3-二羟基-3-苯基丙酸甲酯发生脱水环氧化反应而生成(2R,3R)-2,3-环氧-3-苯基丙酸甲酯,得率80%~92%,且产物的不对映过量(ee)值大于97%.该方法具有工业化应用前景. 展开更多
关键词 氟烷基磺酰氟 (2S 3r)-2 3-二羟基-3-苯基丙酸甲酯 (2r 3r)-2 3-环氧-3-苯基丙酸甲酯 脱水环氧化反应
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高产光学纯(R,R)-2,3-丁二醇工程菌株构建与发酵优化
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作者 黄艳燕 陈先锐 +5 位作者 彭龙云 叶柳健 李检秀 蒙健宗 张云开 谢能中 《生物技术》 CAS 2018年第2期178-184,共7页
[目的]构建能够专一性合成光学纯(R,R)-2,3-丁二醇的大肠杆菌工程菌,并进行发酵条件优化。[方法]将来源于多粘芽孢杆菌的(R,R)-2,3-丁二醇脱氢酶基因bdh,来源于阴沟肠杆菌的α-乙酰乳酸合成酶基因bud B和α-乙酰乳酸脱羧酶基因bud A与... [目的]构建能够专一性合成光学纯(R,R)-2,3-丁二醇的大肠杆菌工程菌,并进行发酵条件优化。[方法]将来源于多粘芽孢杆菌的(R,R)-2,3-丁二醇脱氢酶基因bdh,来源于阴沟肠杆菌的α-乙酰乳酸合成酶基因bud B和α-乙酰乳酸脱羧酶基因bud A与表达载体p Tr C99A连接,导入大肠杆菌中构建人工合成途径。筛选最适的培养基和发酵条件,提高(R,R)-2,3-丁二醇的产量、产率和得率。[结果]获得高效合成(R,R)-2,3-丁二醇的工程菌株GXASB,筛选到最适碳源及其浓度为120 g/L木薯淀粉,最适pH为6.5,最适接种量为10%,在发酵罐中进行同步糖化法发酵,(R,R)-2,3-丁二醇产量达到105.28 g/L,光学纯为99.1%,得率为0.47 g/g,生产强度为1.95 g/(L·h)。[结论]在大肠杆菌中表达基因簇bud B-bud A-bdh能够专一性合成光学纯(R,R)-2,3-丁二醇,经优化发酵条件后,能够显著提高(R,R)-2,3-丁二醇的合成效率。同时工程菌能够利用非粮原料木薯淀粉高效生产(R,R)-2,3-丁二醇,补料发酵产量达到105.28 g/L,为使用廉价原料工业化生产(R,R)-2,3-丁二醇提供参考。 展开更多
关键词 (r r)-2 3-丁二醇 人工合成途径 合成生物学 大肠杆菌基因工程菌 非粮原料 发酵条件优化
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代谢工程改造多粘芽孢杆菌及合成光学纯(R,R)-2,3-丁二醇 被引量:1
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作者 莫棋文 陈先锐 +4 位作者 李燕婷 彭龙云 黄艳燕 李检秀 黄日波 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1643-1649,共7页
(R,R)-2,3-BD是一种重要的四碳平台化合物,在液晶材料、高附加值手性化合物,尤其是不对称合成光学纯药物等方面有天然优势。将来源于多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa) DSM 365的α-乙酰乳酸合成酶(α-acetolactate synthase)基因a... (R,R)-2,3-BD是一种重要的四碳平台化合物,在液晶材料、高附加值手性化合物,尤其是不对称合成光学纯药物等方面有天然优势。将来源于多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa) DSM 365的α-乙酰乳酸合成酶(α-acetolactate synthase)基因alsS、α-乙酰乳酸脱羧酶(α-acetolactate decarboxylase)基因alsD和(R,R)-2,3-丁二醇脱氢酶(2,3-butanediol dehydrogenase)基因R,R-bdh与表达载体pMA5连接,导入多粘芽孢杆菌P. polymyxa DSM 365中加强(R,R)-2,3-丁二醇的主代谢途径,构建可高效合成(R,R)-2,3-丁二醇的多粘芽孢杆菌工程菌株DM-5。利用工程菌株DM-5补料分批发酵60 h,(R,R)-2,3-丁二醇产量达54.91 g/L,得率为0.52 g/g,生产强度为0.92 g·L^(-1)·h^(-1),与野生菌株相比(R,R)-2,3-丁二醇产量增加19.66%,且副产物甲醇浓度不变,乙醇、乙偶姻积累下降。本研究结果表明,在多粘芽孢杆菌中过量表达关键基因alsS、alsD和R,R-bdh能够显著提高(R,R)-2,3-丁二醇的产量和生产强度,为多粘芽孢杆菌的代谢工程改造和工业化生产(R,R)-2,3-丁二醇提供参考。 展开更多
关键词 (r r)-2 3-丁二醇 代谢工程 补料分批发酵 多粘芽孢杆菌
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毛细管电泳法测定(S)-2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯中R异构体
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作者 潘文燕 闫玉刚 +2 位作者 侯准 杨新颖 方浩 《现代药物与临床》 CAS 2017年第5期776-779,共4页
目的建立毛细管电泳法测定(S)-2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯中R异构体的方法。方法采用毛细管电泳法。以磺酸-β-环糊精(S-β-CD)为选择剂;25 mmol/L硼酸盐缓冲液(pH 8.9,含S-β-CD 1.8%)为运行缓冲液;运行电压为25 kV;柱... 目的建立毛细管电泳法测定(S)-2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯中R异构体的方法。方法采用毛细管电泳法。以磺酸-β-环糊精(S-β-CD)为选择剂;25 mmol/L硼酸盐缓冲液(pH 8.9,含S-β-CD 1.8%)为运行缓冲液;运行电压为25 kV;柱温为15℃;检测波长:214 nm;3.4 kPa压力进样10 s。结果 (S)-2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯与R异构体的分离度为2.9。R异构体在2~30μg/m L与峰面积线性关系良好(r=0.999 5),平均回收率为96.6%,RSD值为4.9%(n=6)。结论建立的毛细管电泳法操作简便,结果准确可靠,可用于(S)-2-(6-羟基-2,3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯中R异构体的控制。 展开更多
关键词 (S)-2-(6-羟基-2 3-二氢苯并呋喃-3-基)乙酸甲酯 r异构体 毛细管电泳
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