柴贝止痫汤对癫痫—抑郁共病模型大鼠大脑皮层及海马中5-HTT、5-HT_(1A)R、5-HT_(2A)R和DA_(2)R表达的影响

目的 观察柴贝止痫汤对氯化锂—匹罗卡品慢性颞叶癫痫—抑郁共病模型大鼠大脑皮层及海马中5-羟色胺转运体(5-hydroxytryptamine transporter, 5-HTT)、5-羟色胺受体(5-hydroxytryptamine repreceptor, 5-HTR)(5-HT_(1A)R、5-HT_(2A)R)和多巴胺(dopamine, DA)受体(DA_(2)R)表达的影响,探讨柴贝止痫汤对癫痫—抑郁共病的干预机制。方法 建立氯化锂—匹罗卡品慢性颞叶癫痫—抑郁共病大鼠模型。造模成功后,将大鼠随机分为6组:正常组、模型组、西药组(西酞普兰给药)和柴贝止痫汤低、中、高剂量组,连续灌胃给药14天,每天2次。干预后,通过糖水偏好及强迫游泳实验进行抑郁行为学监测;酶联免疫吸附法检测大鼠大脑皮层及海马中5-HT、DA含量;实时定量PCR法检测大鼠大脑皮层及海马中5-HTT、5-HT_(1A)R、5-HT_(2A)R和DA_(2)R基因的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法检测大鼠大脑皮层及海马中5-HTT、5-HT_(1A)R、5-HT_(2A)R和DA_(2)R的蛋白表达水平。结果 药物干预后,与模型组相比,柴贝止痫汤中、高剂量组大鼠糖水消耗量显著增加(P<0.01),不动时间显著减少(P<0.01);与模型组比较,柴贝止痫汤中(P<0.05)、高剂量组(P<0.01)大鼠大脑皮层及海马中5-HT含量、皮层中DA含量升高,高剂量组(P<0.05)大鼠大脑海马中DA含量升高;与模型组相比,柴贝止痫汤高剂量组大鼠大脑皮层5-HTT mRNA表达降低(P<0.01),而海马中5-HTT mRNA表达升高(P<0.05);同时,柴贝止痫汤高剂量组大鼠大脑皮层和海马中5-HT_(1A)R mRNA表达明显升高(P<0.05),蛋白表达水平与mRNA水平表达一致。5-HT_(2A)R和DA_(2)R的mRNA和蛋白表达水平在处理前后均无变化。结论 柴贝止痫汤能够通过下调慢性颞叶癫痫—抑郁共病模型大鼠大脑皮层5-HTT,上调海马5-HTT,以及上调大脑皮层和海马中5-HT_(1A)R的表达水平,改善抑郁行为。

miR-181a靶向Bcl-2调控氧糖剥夺/再灌注模型诱导的SH-SY5Y神经细胞凋亡

目的皮层是响应脑缺血缺氧最为敏感的组织之一,基于前期深度测序技术,我们筛选获得响应脑缺血缺氧应激的皮层区目标基因miR-181a及Bcl-2。本研究旨在SH-SY5Y细胞株氧糖剥夺/复糖复氧模型验证二者靶向调控关系及功能,明确miR-181a—Bcl-2调控网络在OGD/R诱导的神经细胞凋亡中的作用。方法采用线栓法构建大鼠缺血缺氧再灌注损伤模型,脑切片TTC染色及行为学评分法评估模型。应用qRT-PCR及Western Blot验证目标基因的表达。生物信息学分析miR-181a与Bcl-2的靶向结合位点并比对结合位点的保守性,双荧光素酶报告基因实验验证miR-181a与Bcl-2靶向结合的特异性。采用OGD/R细胞模型体外模拟脑缺血再灌注损伤,检测凋亡相关蛋白表达及Hoechst荧光染色评估细胞凋亡。结果大鼠大脑中动脉阻塞后miR-181a、Bcl-2表达变化趋势相反。RNA hybird软件预测miR-181a可结合Bcl-2的3′-UTR区,且结合区域高度保守。双荧光素酶报告基因实验发现,相对于Bcl-23′UTR-WT与mimic-NC共转染组,Bcl-23′UTR-WT与miR-181a mimic共转染后的荧光活性更低(P<0.001),而Bcl-2-Mut与miR-181a mimic共转染组,荧光活性无显著差异(P>0.05)。分别用miR-181a的模拟物及抑制物转染OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞,miR-181a可以抑制Bcl-2 mRNA及其蛋白的表达水平(P<0.001)。过表达miR-181a显著增加了SH-SY5Y细胞的凋亡(P<0.001),而抑制miR-181a表达可使SH-SY5Y细胞凋亡显著降低(P<0.001)。结论miR-181a可靶向结合Bcl-2,下调miR-181a可通过促进Bcl-2的表达进而抑制SH-SY5Y神经细胞OGD/R损伤诱导的细胞凋亡。

肺癌患者放疗前后外周血DC细胞和血清sIL-2R、HMGB-1变化及其与预后的关系研究

目的 探讨肺癌患者放疗前后外周血DC细胞和血清sIL-2R、HMGB-1水平变化及临床意义。方法 收集肺癌患者124例,采用适形调强放疗(intensity modulated radiation therapy, IMRT)技术治疗,于放疗前、放疗后抽取空腹状态下静脉血4 ml,采用免疫磁珠法检测外周血DC细胞(DC1、DC2)水平,采用双抗体夹心酶联免疫法检测血清sIL-2R、HMGB-1水平。统计不同性别、年龄、是否吸烟、病理类型、是否手术、KPS评分、临床分期的肺癌患者外周血DC细胞和血清sIL-2R、HMGB-1水平,并分析患者预后与血清sIL-2R、HMGB-1水平的关系,单因素和多因素COX回归分析影响肺癌患者预后因素。结果 肺癌患者放疗前后外周血DC细胞水平比较,P>0.05。肺癌患者治疗后血清sIL-2R、HMGB-1水平与治疗前比较,P<0.05。治疗前,血清sIL-2R水平在不同性别、年龄、是否吸烟、病理类型方面比较,P>0.05,在是否手术、不同KPS评分、临床分期、淋巴结转移方面比较,P<0.05;血清HMGB-1水平在不同病理类型方面比较,P>0.05,在不同性别、年龄、是否吸烟、是否手术、不同KPS评分、临床分期、淋巴结转移方面比较,P<0.05;治疗后,血清sIL-2R水平在不同性别、年龄、是否吸烟、病理类型方面比较,P>0.05,在是否手术、不同KPS评分、临床分期、淋巴结转移方面比较,P<0.05;血清HMGB-1水平在不同性别、年龄、是否吸烟、病理类型、是否手术、KPS评分、临床分期、淋巴结转移方面比较,P<0.05。死亡组患者血清sIL-2R、HMGB-1水平均高于生存组(P<0.05)。死亡组DC2低于生存组(P<0.05)。经单因素、多因素COX回归分析显示,临床分期(Ⅲ~Ⅳ期)、淋巴结转移、sIL-2R、HMGB-1水平异常上升、DC2比例下降均是导致肺癌患者预后差的独立危险因素。结论 肺癌患者放疗前后外周血DC细胞无明显变化,但血清sIL-2R、HMGB-1水平治疗后较治疗前均明显降低,其sIL-2R、HMGB-1水平异常上升及DC2比例下降均为患者预后独立危险因素,可预测预后。

基于SE-R(2+1)D网络的自然环境下的奶牛行为识别

智能行为识别对于奶牛健康的自动诊断和精准养殖具有重要意义。由于接触式传感器会损害动物福利,对奶牛产生应激反应。因此,本文设计了R(2+1)D模型对奶牛进行行为识别。3D网络作为1种时空卷积网络,可以有效识别奶牛的基本时序行为,但该模型针对奶牛的进食行为与反刍行为不易区分,因此对残差网络中的残差映射部分进行改进,在残差网络中添加注意力机制,将SE模块加入到残差映射部分。首先,利用Kinect相机采集奶牛的行为视频;其次,将采集到的奶牛视频分解成连续帧输入到改进后的模型中,连续帧经过二维空间特征和一维时间特征提取,经过残差网络的注意力模块,忽略一些无关的特征;最后,经过模型的Softmax层进行行为分类。实验证明,和原模型比较,准确率提高了2.36%。本文方法实现了精准的奶牛行为识别,可为智慧畜牧业的发展提供技术支持。

5-HT_(2A)R异源二聚体功能研究进展

血清素2A受体(5-HT_(2A)R)作为致幻剂、抗抑郁药、抗焦虑药和非典型抗精神病药物等许多精神活性药物的作用靶点,受到人们的广泛关注。5-HT_(2A)R属于G蛋白偶联受体(GPCRs),与mGluR2、D_(2)R和CB_(1)R等多种GPCRs形成异源二聚体。二聚体中的mGluR2、D_(2)R与CB_(1)R影响5-HT_(2A)R偶联的信号通路和诱导的动物行为,并且3种受体分别被敲除后,致幻性5-HT_(2A)R激动剂诱导产生的甩头反应次数明显降低。基于5-HT_(2A)R/mGluR2、5-HT_(2A)R/D_(2)R和5-HT_(2A)R/CB_(1)R异源二聚体的重要性,该文将3种受体与5-HT_(2A)R形成异源二聚体的发现与功能进行详细综述,为探寻以5-HT_(2A)R为靶点的精神活性药物作用机制提供参考。

(R)-3-氨基-3,4-二氢-1-甲氧基喹啉-2(1H)-酮的合成

首先,以D-苯丙氨酸和二碳酸二叔丁酯为起始原料,经过Boc氨基保护合成N-叔丁氧羰基苯丙氨酸;然后N-叔丁氧羰基苯丙氨酸在甲氧氨盐酸盐的作用下生成缩合物2-(N-叔丁氧羰基)-N-甲氧基-3-苯丙酰胺;然后缩合物在催化剂二(三氟乙酸)碘苯的作用下成环生成3-(N-叔丁氧羰基)-3,4-二氢-1-甲氧基喹啉-2(1H)-酮;最后后者经过脱保护合成目标产物。该方法具有操作简单、成本低等优点,四步总收率15.1%,产物经过1H-NMR和MS确认。

血清乳酸脱氢酶、β_(2)-微球蛋白及铁蛋白水平与侵袭性B细胞淋巴瘤患者预后的关系

目的探讨血清乳酸脱氢酶(LDH)、β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)及铁蛋白水平与侵袭性B细胞淋巴瘤患者预后的关系。方法选取60例侵袭性B细胞淋巴瘤患者,均接受利妥昔单抗+环磷酰胺+表柔比星+长春新碱+泼尼松(R-CHOP)方案化疗,治疗4个疗程后评估临床疗效,检测治疗前后患者血清LDH、β_(2)-MG、铁蛋白水平。随访3年,比较不同预后侵袭性B细胞淋巴瘤患者治疗4个疗程后血清LDH、β_(2)-MG、铁蛋白水平,其与患者预后的相关性采用Spearman秩相关分析。结果60例侵袭性B细胞淋巴瘤患者化疗4个疗程后,完全缓解38例,部分缓解7例,疾病稳定4例,疾病进展11例,疾病控制率为81.67%(49/60)。治疗4个疗程后,侵袭性B细胞淋巴瘤患者血清LDH、β_(2)-MG、铁蛋白水平均明显低于治疗前,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。随访3年,所有患者均无失访,生存43例,死亡17例。生存患者治疗4个疗程后血清LDH、β_(2)-MG、铁蛋白水平均明显低于死亡患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Spearman秩相关分析结果显示,血清LDH、β_(2)-MG、铁蛋白水平与侵袭性B细胞淋巴瘤患者的预后生存均呈负相关(r=-0.718、-0.823、-0.753,P﹤0.05)。结论血清LDH、β_(2)-MG、铁蛋白水平与侵袭性B细胞淋巴瘤患者的预后生存均呈负相关,有助于临床对患者的预后进行客观评价。

修正二元Gauss-Weierstrass算子线性组合在L_(p)(R^(2)+)空间中的逼近

借助K-泛函、广义Minkowski不等式、极大函数的定义及其性质,给出修正二元Gauss-Weierstrass算子线性组合在L_(p)(R^(2)+)空间中的逼近定理,并对此定理进行了证明.

功能化活性炭固定化脂肪酶高选择性催化拆分(R,S)-1-苯基-2-丙炔醇

手性1-苯基-2-丙炔醇(酯)是合成精细有机化学品的重要中间体,在医药、农药和化工等领域有着广泛的应用。研究表明,脂肪酶CAL-B固定化于聚甲基丙烯酸缩水甘油酯功能化活性炭,获得的颗粒状固定化脂肪酶在有机溶剂中能够高选择地催化(R,S)-1-苯基-2-丙炔醇发生转酯化拆分反应,(S)-1-苯基-2-丙炔醇的对映体过量值(ees)和(R)-1-苯基-2-丙炔醇乙酸酯的对映体过量值(eep)均达到99%,同时获得了高光学纯度的手性醇及其乙酸酯,固定化酶呈现出优异的催化活性和对映体选择性。

银杏叶提取物通过ERK1/2信号通路降低OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞凋亡

目的:探究银杏叶提取物(EGb761)经细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法:将SH-SY5Y细胞随机分为control、OGD/R和EGb761(25、50、100和200μg/ml)组,OGD/R组细胞置于无糖无氧环境中探究最佳氧糖剥夺(OGD)时间,OGD/R组和EGb761组细胞在氧糖剥夺后迅速复糖复氧培养24 h, EGb761组于复糖复氧后给予不同浓度的EGb761培养24 h,并加入ERK1/2通路抑制剂PD98059进行干预,利用CCK-8法检测SH-SY5Y细胞活力;流式细胞术检测SH-SY5Y细胞凋亡情况;Western Blot检测cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平变化以及p-ERK1/2/ERK1/2比值的变化。结果:SH-SY5Y细胞随着缺氧时间的延长形态逐渐变圆,活力逐渐下降,最佳OGD时间为4 h(P<0.05)。与OGD/R组相比,EGb761组细胞活力显著提高,p-ERK1/2/ERK1/2比值升高,cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平降低,细胞凋亡率降低,EGb761发挥作用的最有效浓度为50μg/ml(P<0.05)。加入PD98059后,p-ERK1/2/ERK1/2比值降低,cleaved caspase-3、cleaved caspase-9水平升高,细胞活力降低(P<0.05)。结论:EGb761可经ERK1/2信号通路抑制OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,发挥神经保护作用。

副产对映体(R)-N-甲基-3-(1-萘氧基)-3-(2-噻吩)-丙胺的消旋工艺研究

研究盐酸度洛西汀关键手性中间体(S)-N-甲基-3-(1-萘氧基)-3-(2-噻吩)-丙胺的副产对映体(R)-N-甲基-3-(1-萘氧基)-3-(2-噻吩)-丙胺消旋工艺。方法:考察溶剂、消旋试剂、反应温度、反应时间对反应结果的影响,得到优化反应条件。结果:通过浓盐酸对手性副产(R)-N-甲基-3-(1-萘氧基)-3-(2-噻吩)-丙胺的消旋得到盐酸度洛西汀前端中间体N-甲基-3-(1-萘氧基)-3-(2-噻吩)-丙胺。结论:最佳反应条件为:采用底物1倍质量的水作溶剂,温度35~40℃,反应时间48 h,37%盐酸用量为底物质量比2倍时,底物的消旋转化率可达97%以上,消旋产物的粗品得率达92.2%。

酿酒酵母B5不对称还原制备手性药物中间体R-2′-氯-1-苯乙醇的研究

从 11株微生物中筛选出 4株具有不对称还原 2′ 氯 苯乙酮能力的酵母 ,其中酿酒酵母B5的还原产率与对映体选择性最佳。确定了酿酒酵母B5对 2′ 氯 苯乙酮还原的最佳反应时间为 2 4h ;最佳pH 8 0 ;最佳反应温度为2 5℃ ;最佳共底物为 5 % (体积比 )乙醇。同时研究了底物浓度、微生物的量、微生物的培养条件等对反应产率和立体选择性的影响。细胞浓度为 10 75mg mL(细胞干重 反应体积 )的酿酒酵母B5可将 6 47mmol L的 2′ 氯 苯乙酮10 0 %地转化为R 2′ 氯 1 苯乙醇 ,其对映体选择性为 10 0 %。酿酒酵母B5可重复利用的特点可提高产物的产量。

CAS-R-2型机器人导航下射频治疗三叉神经痛的基础与临床研究

目的为临床提供三叉神经节穿刺术的应用解剖学资料,探讨机器人导航下卵圆孔定位在三叉神经节热凝术中的临床应用价值。方法对颅骨标本卵圆孔的解剖学观察、测量,对其形态、大小、位置及变异性进行描述;并对21例患者进行卵圆孔导航定位,射频热凝治疗,对其疗效进行评估。结果卵圆孔的解剖结构变异性很大,位置不恒定,经验定位可靠性低,手术创伤大,效果不满意;利用CASR2型机器人导航,精确度高,可获个性化治疗,疗效满意。结论CASR2型机器人导航定位卵圆孔精确度高,提高了三叉神经痛的射频热凝效果,减少并发症,在三叉神经痛治疗中具有重要的临床应用价值。

(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯的合成

综述了血管紧张素转化酶抑制剂类治疗高血压和充血性心力衰竭药物的关键中间体 ( R) -2 -羟基 -4 -苯基丁酸乙酯的合成方法。参考文献 2

R-(+)-2-(4-羟基苯氧基)丙酸的不对称合成

以具光活性的L-乳酸为起始原料,经酯化、磺酰化及醚化三步反应,醚化反应中发生构型反转,最终得到R-(+)-2-(4-羟基苯氧基)丙酸.在磺酰化反应中,以三乙胺作缚酸剂,TEBAC为催化剂,投料比为n(L-乳酸乙酯)∶n(对甲苯磺酰氯)∶n(三乙胺)=1∶1∶1.2,反应温度为0℃,反应时间为5 h,中间体S-(-)-2-(4-甲苯磺酰氧基)丙酸乙酯质量分数为98.0%,收率为96.5%.在醚化反应中,氮气氛下,以水作溶剂,投料比为n(对苯二酚)∶n(S-(-)-2-(4-甲苯磺酰氧基)丙酸乙酯)=1.2∶1,反应温度为30℃,反应时间为6 h,产物R-(+)-2-(4-羟基苯氧基)丙酸的质量分数为99.5%,收率为72.4%(以L-乳酸计),光学纯度97.9%.产物结构经1H NMR,IR和MS表征确认.

采用通透性处理的安大略假丝酵母全细胞高效合成(R)-2-氯-1-(3-氯苯基)乙醇(英文)

考察了利用安大略假丝酵母(Candida ontarioensis)静息细胞不对称催化2-氯-1-(3-氯苯基)乙酮合成(R)-2-氯-1-(3-氯苯基)乙醇的转化反应条件.结果表明,当底物浓度为10g/L时,在最适转化条件下反应72h,产物的ee值和产率分别达到99.9%和99.0%.采用4g/L十六烷基三甲基溴化铵对Candida ontarioensis细胞于4℃通透性处理20min后,全细胞的酶活提高2倍以上.当底物浓度提高为30g/L,转化24h后,产物的ee和产率分别达到99.9%和97.5%.该研究为高效制备(R)-2-氯-1-(3-氯苯基)乙醇提供了可行途径,并为生物催化合成芳基手性醇类手性中间体提供了理论指导。

不对称催化合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯

用 Pt-Cinchona 生物碱体系催化加氢合成(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯。进行了催化剂的制备和比较研究,并考察了修饰剂用量、2-氧代-4-苯基丁酸乙酯的初始浓度、反应氢压和温度对转化率和(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯得率的影响,得到了适宜的反应条件,在此条件下产物中(R)-2-羟基-4-苯基丁酸乙酯得率可达70%以上。实验结果表明,本研究中不对称加氢速率与光学收率呈良好线性关系,对研究不对称合成反应的规律有一定的意义。

(R)-四氢噻唑-2-硫酮-4-羧酸的合成及其晶体结构

由L-半胱氨酸盐酸盐与二硫化碳在NaOH及CuSO4·H2O存在下反应得到（R）-四氢噻唑-2-疏酮-4－羧酸，[α]20D—87．5°，产率66％．用X射线衍射法测得其晶体结构，属正交晶系，Pz1z1z1空间群，晶体学参数：α＝0．5029（2）nm，b＝0．7749（5）nm，c＝1．6300（5）nm，V＝0．6350（5）nm3，Z＝4．用分子轨道（PM3）方法研究了该化合物的电子结构，得到其前线轨道性质．电荷和键序分布，并讨论了活性部位．

N-炔丙基-R-2-庚胺的合成工艺研究

以2-庚酮和甲酸铵为原料合成了2-庚胺,收率76.8%,然后经D-二苯甲酰酒石酸拆分后得到R-2-庚胺,拆分率41.4%。最后R-2-庚胺和乙炔、甲醛在碘化亚铜催化下合成N-炔丙基-R-2-庚胺,收率82.2%。并对反应可能的机理进行了探讨。

2 R-羟甲基-5 S-(5′-氟胞嘧啶-1′-)-1,3-氧硫杂环戊烷的合成

报道了 2R 羟甲基 5S (5′ 氟胞嘧啶 1′ ) 1,3 氧硫杂环戊烷 (FTC)及其关键中间体 5R 乙酰氧基 1,3 氧硫杂环戊烷 2 羧酸 (1′R ,2′S ,5′R) 薄荷酯的合成 ,并对文献报道的路线进行了改进 ,特别是避免使用昂贵而敏感的三甲基碘硅烷 ,易于工业化生产。