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重庆地区RhD变异型无偿献血者的基因多态性及其表型研究
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作者 刘静怡 崔丹荔 +7 位作者 王芳 黎美君 刘东 谢晓艳 陈敏 付威义 杨冬燕 张巧琳 《中国输血杂志》 CAS 2024年第8期879-885,共7页
目的对重庆地区22例RhD变异型无偿献血者标本进行Rh血型血清学检测和三代基因测序,了解重庆地区RhD变异型的表型分布及其基因分型。方法选择2023年1—8月本中心参与无偿献血的人群作为研究对象。使用传统血清学方法对其进行RhD表型鉴定... 目的对重庆地区22例RhD变异型无偿献血者标本进行Rh血型血清学检测和三代基因测序,了解重庆地区RhD变异型的表型分布及其基因分型。方法选择2023年1—8月本中心参与无偿献血的人群作为研究对象。使用传统血清学方法对其进行RhD表型鉴定,确定为RhD变异型后使用D-screen试剂盒对其进行RhD不同抗原表位的检测。此外,提取其基因组DNA,使用叠瓦式引物设计进行多段扩增、拼接获得RHD基因全长序列进行三代测序检测,并用SnapGene软件对序列结果进行分析。结果在22例RhD变异型中,8例为DVI 3型(36.36%),其存在RHD-CE(3-6)-D杂交等位基因;6例部分弱D15型(27.27%),主要发生的突变为c.845G>A;6例亚洲型Del(27.27%),主要发生的突变为c.1227G>A,还有1例弱D17型发生的突变为c.340C>T和1例推测为部分D(c.491A>T,p.Asp164Val,错义突变)。结论重庆地区无偿献血人群中最常见的RhD变异型为DVI 3型,使用SMRT三代测序技术可以获得RhD变异型单倍体全长。 展开更多
关键词 RhD变异型 RHD基因 smrt 三代测序技术 血清学 重庆
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基于SMRT技术的水杉全长转录组分析及基因功能注释 被引量:2
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作者 刘小红 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期27-32,共6页
以水杉原生种为材料,提取其幼嫩植株的根、茎和叶的总RNA,经mRNA纯化、反转录、全长转录组文库构建等过程,再采用SMRT技术测定其全长转录本序列,运用生物信息学对获得的原始转录组数据进行分析。结果显示:提取的总RNA符合建库要求;全长... 以水杉原生种为材料,提取其幼嫩植株的根、茎和叶的总RNA,经mRNA纯化、反转录、全长转录组文库构建等过程,再采用SMRT技术测定其全长转录本序列,运用生物信息学对获得的原始转录组数据进行分析。结果显示:提取的总RNA符合建库要求;全长转录组测序共获得了包含5914711个亚读段(subreads)的14.0 Gb的数据,质量控制处理后包括236130个全长非嵌合读段(reads)和97626个一致性reads;转录本经去冗余处理后共获得61057个全长一致性读段(unigenes),其中有54099个被成功注释到7个数据库中,注释比达88.60%;对水杉unigenes作CDS(coding sequence)长度分布及转录因子分析,其CDS长度范围为144~6477 nt,平均长度约为679 nt;共检测到2386个转录因子,这些转录因子可以归类为29个家族。 展开更多
关键词 水杉 单分子测序技术 全长转录组 基因 功能注释
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SMRT测序技术及其在微生物研究中的应用 被引量:8
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作者 唐勇 刘旭 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期48-53,共6页
高通量测序技术的发展为研究者深入探索微生物世界提供可能。随着以Pacific Bio Sciences(PacBio)公司的单分子实时测序(Single molecule real time sequencing,SMRT)为代表的第三代测序(Third generation sequencing,TGS)技术逐渐发展... 高通量测序技术的发展为研究者深入探索微生物世界提供可能。随着以Pacific Bio Sciences(PacBio)公司的单分子实时测序(Single molecule real time sequencing,SMRT)为代表的第三代测序(Third generation sequencing,TGS)技术逐渐发展成熟,微生物研究方法正面临又一次新的变革。SMRT测序技术凭借其特殊建库方式(SMRTbell)和超长的测序读长等特点,为微生物16S rRNA基因全长测序提供新的选择。同时,为组装完整可靠的宏基因组和微生物全基因组提供新方法。随着PacBio测序平台的成本大幅下降,SMRT测序技术的PacBio系列平台开始逐渐被应用于微生物16S rRNA基因测序、宏基因组测序和全基因组测序研究中。综述了SMRT测序技术的技术原理和特点及其在微生物16S rRNA基因全长测序、宏基因组测序等方面的应用,并分析了目前SMRT测序技术在微生物各方面研究中的优势和存在的问题,提出基于SMRT测序技术获得的长片段在后期分析中存在的问题。SMRT测序技术将越来越多地引入到微生物研究中,期望为将要选择使用SMRT测序技术研究微生物的研究人员提供一定参考。 展开更多
关键词 第三代测序 单分子实时测序 微生物
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油茶基因组SMRT数据的统计分析 被引量:9
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作者 赵松子 《南方林业科学》 2018年第2期1-3,共3页
利用PacBio SMRT技术对普通油茶(Camellia oleifera)良种"赣无1号"进行全基因组测序,获得40.1 G的酶读段数据,共计3 862 324条酶读段。亚读段的数据量为40.06 G,共计4 730 681条亚读段。对亚读段数据及茶树(C.sinensis)基因... 利用PacBio SMRT技术对普通油茶(Camellia oleifera)良种"赣无1号"进行全基因组测序,获得40.1 G的酶读段数据,共计3 862 324条酶读段。亚读段的数据量为40.06 G,共计4 730 681条亚读段。对亚读段数据及茶树(C.sinensis)基因组进行比对分析,结果表明,测序正确率为91.41%,普通油茶与茶树基因组序列的相似度为93.38%。 展开更多
关键词 油茶 单分子实时测序 基因组 茶树
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人SMRT基因真核和原核表达载体的构建及鉴定
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作者 王春美 盛光耀 +5 位作者 卢洁 郝庆飞 谢垒 白松婷 许松涛 薛乐勋 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2010年第6期914-917,共4页
目的:构建人SMRT基因真核和原核表达载体。方法:体外人工合成SMRT-C645bp对应的基因片段,克隆至pUC57载体,酶切,测序正确后,PCR扩增目的基因片段,酶切后亚克隆至pCMV-myc载体和pGEX-6p-1载体,并酶切和测序鉴定。结果:成功构建了人pCMV-m... 目的:构建人SMRT基因真核和原核表达载体。方法:体外人工合成SMRT-C645bp对应的基因片段,克隆至pUC57载体,酶切,测序正确后,PCR扩增目的基因片段,酶切后亚克隆至pCMV-myc载体和pGEX-6p-1载体,并酶切和测序鉴定。结果:成功构建了人pCMV-myc-SMRT真核表达载体和pGEX-6p-1-SMRT原核表达载体。结论:成功构建了人SMRT真核和原核表达载体,为下一步蛋白间相互作用的证实提供了基础。 展开更多
关键词 smrt 真核表达载体 原核表达载体
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基于PacBio SMRT技术的婴幼儿配方奶粉微生物安全性评价 被引量:3
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作者 边燕飞 席晓霞 +3 位作者 郑艺 侯强川 孙天松 孙志宏 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第10期212-220,共9页
目的:婴幼儿配方奶粉中的大量细菌已被灭活,然而灭活微生物仍影响产品品质和货架期。现行纯培养技术只能对食品基质中活菌进行检测,无法全面评估污染微生物组成,而基于宏基因组学策略能够对婴幼儿配方奶粉加工过程中污染微生物进行全面... 目的:婴幼儿配方奶粉中的大量细菌已被灭活,然而灭活微生物仍影响产品品质和货架期。现行纯培养技术只能对食品基质中活菌进行检测,无法全面评估污染微生物组成,而基于宏基因组学策略能够对婴幼儿配方奶粉加工过程中污染微生物进行全面客观的评价。方法:采集6份婴幼儿配方奶粉,使用细菌纯培养、单分子实时测序技术(PacBio SMRT)和微滴式数字PCR(ddPCR)联用技术对其污染微生物组成进行评价。结果:采用纯培养技术在样品中均未检测到大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、阪崎肠杆菌和芽孢。使用PacBio SMRT测序技术,在婴幼儿配方奶粉中共鉴定出14个细菌门、138个细菌属和255个细菌种。其中6份样品均存在过嗜冷菌蜡样芽孢杆菌,其平均相对含量高达23.54%,这一灭活的细菌也会影响产品货架期。此外,在IF3、IF4、IF5和IF6样品中,检测到相对含量较低的致病菌大肠杆菌,其相对含量分别为0.06%,0.01%,0.15%和0.05%。采用ddPCR技术对SMRT测序方法检测到的致病菌蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌进行定量分析,发现每克奶粉样品中蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌的平均拷贝数取对数后分别为5.45和4.89。结论:在6份婴幼儿配方奶粉中均未检出致病菌,符合食品安全国家标准,然而奶粉中被灭活的蜡样芽孢杆菌和大肠杆菌可能增加产品腐败的风险,影响产品的货架期。本研究结合多个技术全面评价婴幼儿配方奶粉的微生物污染情况,初步建立婴幼儿配方奶粉的微生物检测技术。 展开更多
关键词 婴幼儿配方奶粉 污染微生物 纯培养 ddPCR PacBio smrt测序
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利用SMRT英语互联网教学平台构建大学英语听说新模式
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作者 杨玉茹 《山东商业职业技术学院学报》 2019年第2期47-50,共4页
英语听说能力是大学英语的重要能力。在互联网+时代,传统的听说教学模式已经不适合现代学生发展的需要智能手机的普及,利用网络教学平台进行学生英语听说训练,对提高学生英语听说能力起到重要作用。主要从SMRT英语互联网教学平台的基本... 英语听说能力是大学英语的重要能力。在互联网+时代,传统的听说教学模式已经不适合现代学生发展的需要智能手机的普及,利用网络教学平台进行学生英语听说训练,对提高学生英语听说能力起到重要作用。主要从SMRT英语互联网教学平台的基本结构及应用优势、建立大学英语听说新模式的要点、利用SMRT英语互联网教学平台构建大学英语听说新模式阐述利用SMRT英语互联网教学平台构建大学英语听说新模式。 展开更多
关键词 smrt英语 互联网教学平台 大学英语听说新模式
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表面机械滚压处理(SMRT)316L不锈钢梯度纳米层在腐蚀介质下的摩擦学行为研究 被引量:7
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作者 沈明学 容康杰 +3 位作者 刘德佳 熊光耀 李春红 王效贵 《摩擦学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第6期746-753,共8页
采用表面机械滚压处理(surface mechanical rolling treatment,SMRT)技术在316L奥氏体不锈钢表面构筑了梯度纳米结构层.利用透射电子显微镜(TEM)和纳米压痕仪等分析其微观组织、力学性能等基础上,重点探讨了SMRT前后316L在1 mol/L HCl溶... 采用表面机械滚压处理(surface mechanical rolling treatment,SMRT)技术在316L奥氏体不锈钢表面构筑了梯度纳米结构层.利用透射电子显微镜(TEM)和纳米压痕仪等分析其微观组织、力学性能等基础上,重点探讨了SMRT前后316L在1 mol/L HCl溶液(以纯水环境作为对比组)中的摩擦学行为.结果表明:经SMRT加工后316L表面梯度纳米晶层厚度达200μm以上,表面硬化层厚度超过1.5 mm,表面硬度提升至基体近2倍;SMRT大大减缓了材料磨损,与基体试样相比,SMRT试样在腐蚀介质下减摩效果比纯水环境更明显,且在腐蚀环境下表现出优异的耐腐蚀性能,其磨损机制由处理前伴随严重剥落特征的疲劳磨损和磨粒磨损转变为轻微疲劳磨损.因此,316L不锈钢机械滚压梯度纳米层在腐蚀服役环境下具有较高的潜在工程应用价值. 展开更多
关键词 表面机械滚压处理 腐蚀磨损 摩擦学行为 梯度纳米化结构 316L不锈钢
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自然发酵酸马奶对人体肠道菌群的影响——基于PacBio SMRT测序技术 被引量:6
9
作者 温永平 侯强川 张和平 《中国乳品工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期4-7,共4页
采用PacBio SMRT测序技术研究了内蒙古锡林郭勒盟地区一名健康志愿者在连续饮用酸马奶60 d前后肠道菌群的变化。结果表明,连续饮用酸马奶可以增加志愿者肠道菌群的丰度和多样性,使志愿者肠道菌群更加趋于健康化。此外,志愿者肠道中存在... 采用PacBio SMRT测序技术研究了内蒙古锡林郭勒盟地区一名健康志愿者在连续饮用酸马奶60 d前后肠道菌群的变化。结果表明,连续饮用酸马奶可以增加志愿者肠道菌群的丰度和多样性,使志愿者肠道菌群更加趋于健康化。此外,志愿者肠道中存在大量的"肠道核心微生物群",饮用酸马奶会使志愿者肠道中硬壁菌门的相对含量升高。在种的水平上,饮用酸马奶可以促进部分有益生菌如柔嫩梭菌群、多形拟杆菌的生长,这可能是酸马奶具有众多益生作用的原因之一。 展开更多
关键词 酸马奶 肠道菌群 PacBiosmrt测序技术
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交直流大电网混合实时仿真(SMRT)平台研发与工程应用 被引量:8
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作者 郭琦 曾勇刚 +4 位作者 李伟 祁达才 饶宏 韩伟强 韩英铎 《南方电网技术》 北大核心 2015年第1期33-38,共6页
为更准确、高效地研究南方电网受端多回直流换相失败、交直流复杂电网交直流相互影响、受端电网电压稳定和交直流电网稳定控制等问题,提出了研发基于RTDS实时仿真器与并行计算机联合闭环运行的电磁暂态-机电暂态混合实时仿真平台(super ... 为更准确、高效地研究南方电网受端多回直流换相失败、交直流复杂电网交直流相互影响、受端电网电压稳定和交直流电网稳定控制等问题,提出了研发基于RTDS实时仿真器与并行计算机联合闭环运行的电磁暂态-机电暂态混合实时仿真平台(super mixed real-time simulation,SMRT)。系统阐述了SMRT平台的架构和关键技术,即大规模电网实时机电暂态仿真技术、电磁与机电暂态全序量交互技术、RTDS与计算机仿真接口的数字化高速通信技术等。介绍了其在南方交直流互联大电网复杂系统运行分析、控制研究及运行人员培训中的应用。 展开更多
关键词 交直流电网 混合实时仿真平台 smrt 平台架构 应用前景
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SMRT英语教学平台下大学英语教学改革的体系构建
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作者 林虹 《佳木斯职业学院学报》 2018年第2期289-290,共2页
国内高校对大学英语的学科建设日趋重视,但是我国现行的大学英语教学体系仍然存在很大不足。教师和学生都习惯于传统的教学模式,想要做出全面的改革有很大困难。一些高校虽然提出了大学英语教学的改革方法,侧重点也多放在听说训练方面,... 国内高校对大学英语的学科建设日趋重视,但是我国现行的大学英语教学体系仍然存在很大不足。教师和学生都习惯于传统的教学模式,想要做出全面的改革有很大困难。一些高校虽然提出了大学英语教学的改革方法,侧重点也多放在听说训练方面,而传统的听说课程设计并不能很好地提高学生的语言应用能力。哈尔滨广厦学院作为国内唯一一所将加拿大SMRT英语教学平台应用于大学英语课堂教学的高校,用全新的教学理念和课堂模式进行大学英语教学改革,旨在全面提高学生口语水平及实践应用能力,成效显著。 展开更多
关键词 大学英语 smrt教学平台 教学改革
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采用SMRT测序技术考察莲子的真菌群落多样性
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作者 张寅 陈恒文 何轩辉 《中南药学》 CAS 2022年第11期2527-2532,共6页
目的 考察莲子中真菌群落的多样性。方法 采用单分子实时(SMRT)测序技术对莲子(红莲和白莲)中真菌的ITS全长扩增片段进行测序分析。通过评估测序数据、分析其α和β多样性,剖析真菌的组成、考察组间差异及菌属间的相关关系,剖析莲子的... 目的 考察莲子中真菌群落的多样性。方法 采用单分子实时(SMRT)测序技术对莲子(红莲和白莲)中真菌的ITS全长扩增片段进行测序分析。通过评估测序数据、分析其α和β多样性,剖析真菌的组成、考察组间差异及菌属间的相关关系,剖析莲子的真菌群落结构。结果 共检测到1界、10门、30纲、75目、158科、247属和342种真菌,优势菌为Botryosphaeria wangensis(0~79.57%)、Lasiodiplodia laeliocattleyae(0.32%~49.18%)和Colletotrichum aenigma(0~31.76%)和Wallemia canadensis(0~22.86%)。有潜在致病风险的真菌为Colletotrichum aenigma、Aspergillus vitricola、Rhizomucor pusillus,存在产毒风险的真菌为Fusarium pernambucanum。红莲和白莲样品的真菌组成在组间存在显著性差异,差异菌主要是Botryosphaeria wangensis和Wallemia canadensis。结论 SMRT测序技术对研究莲子中真菌的多样性具有较好的适用性,并可通过分析产毒真菌的种类为莲子的安全使用提供风险预警。 展开更多
关键词 莲子 单分子实时测序(smrt)技术 ITS全长序列 真菌群落 多样性
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传统清香型白酒发酵过程中细菌群落演替及自组装机理 被引量:1
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作者 乔美灵 任宇婷 +5 位作者 张桂莲 杨玉珍 刘梦宇 孙子羽 陈忠军 满都拉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第22期139-148,共10页
基于PacBio SMRT测序技术对传统清香型白酒发酵过程中细菌物种组成和群落结构开展研究,进一步利用iCAMP模型探究发酵过程中细菌群落自组装机制。结果表明,在发酵过程中细菌多样性随发酵过程呈现先降低后升高趋势,其中乳杆菌属(Lactobaci... 基于PacBio SMRT测序技术对传统清香型白酒发酵过程中细菌物种组成和群落结构开展研究,进一步利用iCAMP模型探究发酵过程中细菌群落自组装机制。结果表明,在发酵过程中细菌多样性随发酵过程呈现先降低后升高趋势,其中乳杆菌属(Lactobacillus)、醋酸菌属(Acetobacter)、片球菌属(Pediococcus)和魏斯氏菌属(Weissella)等为优势属,桥乳杆菌(L. pontis)、类消化乳杆菌(L. paralimentarius)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)和耐酸乳杆菌(L. acetotolerans)等为优势种。根据不同发酵时间细菌群落间差异,可将整个发酵过程分为阶段Ⅰ(0 d)、阶段Ⅱ(3~10 d)和阶段Ⅲ(12~28 d)。其中,苹果醋杆菌(A. malorum)、L. paralimentarius和L. pontis分别是阶段Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ的差异菌种,且不同阶段差异菌种之间呈显著负相关,同一发酵阶段差异菌种之间呈显著正相关。此外,替换是细菌群落变化的主要过程,随机性过程中的漂移是驱动细菌群落自组装的最重要过程。同时,淀粉含量、温度和水分含量可能是发酵过程中细菌群落自组装的主要影响因素。以上结果深入揭示传统清香型白酒发酵过程中细菌物种组成,群落演替规律及自组装机制,可为调节清香型白酒发酵过程中微生物群落及进一步优化多种微生物在混合发酵过程中的作用提供基础理论。 展开更多
关键词 清香型 酒醅 PacBio smrt 群落演替 群落自组装
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九里香全长转录组测序分析
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作者 梁细妹 梁莹 +6 位作者 韦坤华 秦双双 胡营 韦桂丽 韦筱媚 韦范 缪剑华 《中国现代中药》 CAS 2023年第7期1505-1514,共10页
目的:获得九里香Murraya exotica L.Mant.全长转录组数据库,为深入挖掘其全长基因信息提供参考。方法:利用Pacino Sequel平台的第三代测序技术,对九里香的根、茎、叶、花、果混合样品进行全长转录组测序,并对原始转录组数据进行分析。结... 目的:获得九里香Murraya exotica L.Mant.全长转录组数据库,为深入挖掘其全长基因信息提供参考。方法:利用Pacino Sequel平台的第三代测序技术,对九里香的根、茎、叶、花、果混合样品进行全长转录组测序,并对原始转录组数据进行分析。结果:共获得94435个转录本,平均长度为76476.23 bp,80583条环形一致性序列,通过聚类、校正和去冗余后最终得到108443个高质量的isoforms,其中在非冗余蛋白(NR)、核苷酸序列(NT)、基因本体(GO)、真核生物相邻类的聚簇(KOG)、蛋白家族(Pfam)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)和SwissProt共注释了100219个isoforms,同时检测出34182个简单序列重复(SSR)位点,其中18482个单核苷酸数量占主导位置;检测了2574个转录因子,29592个长链非编码RNAs(lncRNAs)和30322个mRNAs。结论:获得了较为可靠的九里香全长转录组数据,为深入研究九里香的生长发育、相关代谢途径、功能基因利用、基原物种鉴定等提供数据参考。 展开更多
关键词 九里香 单分子实时测序技术 简单序列重复标记 功能注释
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基于纯培养方法和PacBio三代测序技术研究蒙古国传统酸马奶中乳酸菌多样性 被引量:21
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作者 刘文俊 多拉娜 +3 位作者 刘亚华 任冬艳 张和平 孟和毕力格 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期27-37,共11页
通过纯培养方法结合PacBio三代测序技术对采自蒙古国的12份传统酸马奶中的乳酸菌多样性进行研究。应用传统的纯培养技术从12份传统酸马奶样品中分离出62株乳酸菌,通过16S rRNA基因序列分析和系统进化关系研究,62株乳酸菌被鉴定为5个属,... 通过纯培养方法结合PacBio三代测序技术对采自蒙古国的12份传统酸马奶中的乳酸菌多样性进行研究。应用传统的纯培养技术从12份传统酸马奶样品中分离出62株乳酸菌,通过16S rRNA基因序列分析和系统进化关系研究,62株乳酸菌被鉴定为5个属,6个种,分别是:25株瑞士乳杆菌、20株植物乳杆菌、7株产马乳酒乳杆菌、5株屎肠球菌、3株嗜热链球菌和2株粪肠球菌。采用PacBio SMRT测序技术研究其中8份样品中乳酸菌的多样性,宏基因组测序得到的优势菌为乳酸菌,同时也检测到一些痕量的其它种属细菌。共检测到5个乳酸菌的属,分别是:乳杆菌属、乳球菌属、链球菌属、明串珠菌属和肠球菌属,20个乳酸菌的种,即:瑞士乳杆菌、乳酸乳球菌、副乳链球菌、棉子糖乳球菌、肠膜阴串珠球菌和产马乳酒乳杆菌。宏基因组测序相对含量表明:蒙古国酸马奶样品中乳酸菌优势属为乳杆菌属(95.56%),优势种为瑞士乳杆菌(94.64%),纯培养方法和宏基因组三代测序方法都表明瑞士乳杆菌为蒙古国传统酸马奶中的优势菌种。宏基因组测序技术除检测到纯培养获得的菌株外,还获得14个低丰度乳酸菌,如棉籽糖乳球菌、肠膜明串珠球菌和开菲尔乳杆菌等,这些菌在酸马奶中含量较少。通过PacBio SMRT测序技术可以全面了解酸马奶中乳酸菌的多样性,为通过纯培养方法获得低丰度乳酸菌提供指导。 展开更多
关键词 酸马奶 乳酸菌 PacBio smrt测序技术 生物多样性
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新加坡地铁公司经营管理体制及其启示 被引量:8
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作者 钟峻青 《城市轨道交通研究》 北大核心 2010年第11期3-5,共3页
从新加坡地铁公司的经营环境出发,探讨了其经营管理体制、公司治理结构、盈利模式。在此基础上,对我国地铁公司的管理体制提出了建议。
关键词 新加坡地铁 公司治理 经营管理体制 盈利模式
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Complete genome of Cobetia marina JCM 21022T and phylogenomic analysis of the family Halomonadaceae 被引量:1
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作者 TANG Xianghai XU Kuipeng +2 位作者 HAN Xiaojuan MO Zhaolan MAO Yunxiang 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2018年第2期528-536,共9页
Cobetia marina is a model proteobacteria in researches on marine biofouling. Its taxonomic nomenclature has been revised many times over the past few decades. To better understand the role of the surface-associated li... Cobetia marina is a model proteobacteria in researches on marine biofouling. Its taxonomic nomenclature has been revised many times over the past few decades. To better understand the role of the surface-associated lifestyle of C. marina and the phylogeny of the family Halomonadaceae, we sequenced the entire genome of C. marina JCM 21022T using single molecule real-time sequencing technology (SMRT) and performed comparative genomics and phylogenomics analyses. The circular chromosome was 4 176 300 bp with an average GC content of 62.44% and contained 3 611 predicted coding sequences, 72 tRNA genes, and 21 rRNA genes. The C. marina JCM 2102U genome contained a set of crucial genes involved in surface colonization processes. The comparative genome analysis indicated the significant differences between C. marina JCM 21022T and Cobetia amphilecti KMM 296 (formerly named C. marina KMM 296) resulted from sequence insertions or deletions and chromosomal recombination. Despite these differences, pan and core genome analysis showed similar gene functions between the two strains. The phylogenomic study of the family Halomonadaceae is relationships were well resolved among every genera Cobetia, Kushneria, Zymobacter, and Halotalea. reported here for the first time. We found that the tested, including Chromohalobacter, Halomonas, 展开更多
关键词 Cobetia marina JCM 21022r Halomonadaceae complete genome sequence comparativegenomics PHYLOGENOMICS surface colonization single molecule real-time sequencingtechnology (smrt)
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雄激素受体与核受体辅助抑制因子的关系
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作者 廖国庆 汤恢焕 吕新生 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期157-162,共6页
目的 :探讨雄激素受体 (AR)与核受体辅助抑制因子 (SMRT)是否能相互作用及其作用部位。方法 :重组构建AR ,SMRT基因或其基因片段的质粒 ,体外转录 ,合成3 5S标记融合蛋白 ,采用转染试验及哺乳动物细胞双杂交实验 (transienttransfection... 目的 :探讨雄激素受体 (AR)与核受体辅助抑制因子 (SMRT)是否能相互作用及其作用部位。方法 :重组构建AR ,SMRT基因或其基因片段的质粒 ,体外转录 ,合成3 5S标记融合蛋白 ,采用转染试验及哺乳动物细胞双杂交实验 (transienttransfection ,mammaliantwo hybridtest) ,GST沉淀试验 (GSTpull downassay) ,间接免疫荧光观察(indirectimmunofluorescencestaining)的方法 ,观察AR与SMRT的关系。结果 :AR具有内在的转录抑制活性 ,可与SMRT直接作用 ,其作用部位 :在AR分子上位于配体结合区 (LBD) ,而DNA结合区能增强这种作用 ;在SMRT分子上则位于羧基端核受体作用区 (IDs) ,在这个区域的LXXXIXXXI/L功能基团突变后将会影响AR与SMRT的结合。结论 展开更多
关键词 雄激素受体 核受体辅助抑制因子 体外试验 间接免疫荧光 HELA细胞
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单分子实时测序技术的原理与应用 被引量:40
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作者 柳延虎 王璐 于黎 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期259-268,共10页
单分子DNA测序技术是近10年发展起来的新一代测序技术,也称为第三代测序技术,包括单分子实时测序、真正单分子测序、单分子纳米孔测序等技术。文章介绍了单分子实时(Single-molecule real-time,SMRT)测序技术的基本原理、性能以及应用。... 单分子DNA测序技术是近10年发展起来的新一代测序技术,也称为第三代测序技术,包括单分子实时测序、真正单分子测序、单分子纳米孔测序等技术。文章介绍了单分子实时(Single-molecule real-time,SMRT)测序技术的基本原理、性能以及应用。与Sanger测序法和下一代测序技术相比,SMRT测序具有超长读长、测序周期短、无需模板扩增和直接检测表观修饰位点等特点,为研究人员提供了新选择。同时,SMRT测序的低准确率备受争议(约85%),其中约93%的错误是插入缺失,因此,其数据应用于基因组组装前需先对数据进行纠错处理。目前,SMRT测序在小型基因组从头测序和完整组装中已有良好应用,并且已经或将在表观遗传学、转录组学、大型基因组组装等领域发挥其优势,促进基因组学的研究。 展开更多
关键词 单分子测序 PacBio smrt测序
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阿尤恩地区自然发酵牛乳中乳酸菌分离鉴定及多样性研究 被引量:5
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作者 史迪 党娜 +3 位作者 武岳 马腾 刘文俊 张和平 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2021年第3期4-9,41,共7页
为了分离、保藏自然发酵乳中乳酸菌菌种,丰富自然发酵乳中乳酸菌多样性信息。本文采用传统的纯培养分离方法和宏基因组16S rRNA基因测序技术对阿尤恩地区自然发酵牛乳的乳酸菌多样性进行研究。纯培养结果表明:5份自然发酵牛乳中共分离出... 为了分离、保藏自然发酵乳中乳酸菌菌种,丰富自然发酵乳中乳酸菌多样性信息。本文采用传统的纯培养分离方法和宏基因组16S rRNA基因测序技术对阿尤恩地区自然发酵牛乳的乳酸菌多样性进行研究。纯培养结果表明:5份自然发酵牛乳中共分离出111株乳酸菌,鉴定为5个属10个种,其中Lactococcus lactis,占总分离株的45.95%;宏基因组测序结果发现,5份样品中的细菌归属于8个门、66个属和131个种,其中优势菌门为Firmicutes(69.63%),优势菌属为Lactococcus(31.80%),优势菌种同样为Lactococcus lactis(22.95%),另外还检测到含量较高的Streptococcus thermophilus(17.12%)、Lactobacillus helveticus(14.44%)等菌种。通过分析发现,Lactococcus lactis为阿尤恩地区5份自然发酵牛乳样品的优势菌种,并且自然发酵牛乳样品中细菌种类丰富,样品间细菌组成存在相似性和差异性。 展开更多
关键词 乳酸菌 自然发酵 纯培养方法 PacBio smrt
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