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益肾活血清利方对HK2细胞TEMT过程中Smad4及RhoA mRNA表达作用的实验研究 被引量:3
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作者 孙世竹 孙伟 +2 位作者 刘丽 朱萱萱 赖仁胜 《中华中医药学刊》 CAS 2010年第10期2084-2087,共4页
目的:以益肾活血清利为法组方通过中药含药血清观察中药对HK-2细胞(人肾近端小管上皮细胞)TEMT(肾小管上皮细胞向间质肌成纤维细胞转分化)过程中的信号因子表达的影响。方法:制备中药含药血清,观察含药血清对HK-2细胞在TGF-β1诱导下EM... 目的:以益肾活血清利为法组方通过中药含药血清观察中药对HK-2细胞(人肾近端小管上皮细胞)TEMT(肾小管上皮细胞向间质肌成纤维细胞转分化)过程中的信号因子表达的影响。方法:制备中药含药血清,观察含药血清对HK-2细胞在TGF-β1诱导下EMT过程的阻抑作用。随机分为正常组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组、苯那普利组。观察在TGF-β1诱导下转分化过程中对Smad4及RhoA mRNA表达作用的影响。结果:中药低剂量组、苯那普利组与模型组Smad4的mRNA表达比较有显著差异;中药高剂量组RhoA的mRNA表达与模型组比较P<0.05,差异有显著性;而中药低剂量组、苯那普利组与模型组比较差异不显著。结论:在Smad4 mRNA的表达上中药低剂量组与洛汀新均显示出抑制作用,但洛汀新对RhoA mRNA的表达上无明显作用,而中药高剂量组则有明显的抑制RhoA mRNA表达的作用,说明中药的可探讨性较大,单纯通过剂量调整或许可以达到多信号途径的抑制作用而发挥拮抗EMT的过程。 展开更多
关键词 益肾活血清利方 人肾近端小管上皮细胞 肾小管细胞上皮向间质肌成纤维细胞转分化 SMAD4 RHOA
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通过基因芯片研究苯那普利对HK-2细胞TEMT过程的影响作用
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作者 孙世竹 陈燕 +4 位作者 鲍军 秦雪梅 蒋娟娟 申志祥 高雪燕 《实用老年医学》 CAS 2012年第1期26-30,52,共6页
目的通过基因芯片探讨苯那普利对人肾近端小管上皮细胞(HK-2细胞)向间质肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中的影响作用。方法制备苯那普利含药血清,将HK-2细胞随机分为正常组、模型组、苯那普利(洛丁新)组。采用Illumina Bead Chip的人全... 目的通过基因芯片探讨苯那普利对人肾近端小管上皮细胞(HK-2细胞)向间质肌成纤维细胞转分化(TEMT)过程中的影响作用。方法制备苯那普利含药血清,将HK-2细胞随机分为正常组、模型组、苯那普利(洛丁新)组。采用Illumina Bead Chip的人全基因组基因表达芯片(Human HT-12 v4),提取总RNA分离纯化后,经过逆转录、合成、杂交、洗片和扫描获得差异表达基因,并进行差异基因相关分析。结果通过基因芯片技术成功筛选差异表达基因,模型组与正常组比较差异表达基因80个,其中上调表达53个,下降表达27个;洛丁新组与模型组比较差异表达基因227个,其中上调表达118个,下降表达109个。通过基因GO分析,洛丁新组较模型组在细胞增殖、移动、转分化、连接酶活化等生物过程中有更多参与。结论本实验为更加全面阐明苯那普利对TEMT的调控作用提供了实验依据。 展开更多
关键词 苯那普利 人肾近端小管上皮细胞(HK-2细胞) 肾小管细胞上皮细胞向间质肌成纤维细胞转分 化(temt) 基因芯片 差异表达基因 基因GO分析
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红景天甙对低氧诱导肾小管上皮细胞转分化的作用研究 被引量:12
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作者 张蕾 谢席胜 +3 位作者 李飞燕 张和平 刘畅 樊均明 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期43-48,共6页
目的观察红景天甙(salidroside,Sal)对氯化钴(cobaltous chloride,CoCl2.6 H2O,Co)诱导的低氧状态下正常大鼠近端肾小管上皮细胞(normal rat kidney tubular epithelia cell,NRK52E)转分化的影响并分析其可能的机制。方法体外培养NRK52... 目的观察红景天甙(salidroside,Sal)对氯化钴(cobaltous chloride,CoCl2.6 H2O,Co)诱导的低氧状态下正常大鼠近端肾小管上皮细胞(normal rat kidney tubular epithelia cell,NRK52E)转分化的影响并分析其可能的机制。方法体外培养NRK52E细胞,分为正常对照组,氯化钴低氧组,10、50、100μmol/L不同浓度红景天甙组。观察低氧标志蛋白低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible foctor-1α,HIF-1α)的表达。倒置相差显微镜观察细胞形态变化;荧光免疫及细胞免疫法检测NRK52E细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达情况;RT-PCR检测NRK52E细胞α-SMA、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)mRNA的表达;Western blot蛋白印迹检测HIF-1α和α-SMA蛋白的表达;酶联免疫吸附法检测细胞上清液胶原Ⅰ(collagenⅠ,Col-Ⅰ)和纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)的含量。结果100μmol/L Co诱导NRK52E细胞表达HIF-1α。Co组细胞明显肥大、拉长,呈肌成纤维细胞外观。不同浓度Sal组细胞形态介于正常与Co组之间。Co组α-SMA基因、蛋白和TGF-β1mRNA表达量较对照组升高(P<0.05),不同浓度Sal组α-SMA基因、蛋白和TGF-β1mRNA表达量较Co组减少(P<0.05)。Co组细胞上清液Col-Ⅰ和FN的含量较对照组增加(P<0.05),不同浓度Sal组Col-Ⅰ和FN的含量明显下降(P<0.05),以高剂量组最为明显。结论Sal可在一定程度上改善Co诱导的低氧状态和细胞转分化,减少细胞外基质的增加。其机制可能是通过抑制TGF-β1和HIF-1α的表达实现的。 展开更多
关键词 低氧 红景天甙 肾小管上皮细胞转分化 低氧诱导因子-1α转化生长因子-β1
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Influence of ginsenoside Rg1, a panaxatriol saponin from Panax notoginseng, on renal fibrosis in rats with unilateral ureteral obstruction 被引量:34
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作者 Xi-sheng XIE Man YANG +4 位作者 Heng-cuang LIU Chuan ZUO Zi LI Yao DENG Jun-ming FAN 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2008年第11期885-894,共10页
Total saponins of Panax notoginseng (PNS) have been shown to ameliorate renal interstitial fibrosis. Ginsenoside Rg 1, a panaxatriol saponin, is one of the major active molecules from PNS. The present study was unde... Total saponins of Panax notoginseng (PNS) have been shown to ameliorate renal interstitial fibrosis. Ginsenoside Rg 1, a panaxatriol saponin, is one of the major active molecules from PNS. The present study was undertaken to investigate the effect of ginsenoside Rgl on renal fibrosis in rats with unilateral ureteral obstruction (UUO). The rats were randomly divided into 3 groups: sham-operation (n=15), UUO (n=15) and UUO with ginsenoside Rgl treatment (n=15, 50 mg per kg body weight, intraperitoneally (i.p.) injected). The rats were sacrificed on Days 7 and 14 after the surgery. Histological examination demonstrated that ginsenoside Rgl significantly inhibited interstitial fibrosis including tubular injury as well as collagen deposition, u-smooth muscle actin (α-SMA) and E-cadherin are two markers of tubular epithelial-myofibroblast transition (TEMT). Interestingly, ginsenoside Rgl notably decreased α-SMA expression and simultaneously enhanced E-cadherin expression. The messenger RNA (mRNA) of transforming growth factor-β1 (TGF-β1), a key mediator to regulate TEMT, in the obstructed kidney increased dramatically, but was found to decrease significantly after administration of ginsenoside Rg 1. Further study showed that ginsenoside Rgl considerably decreased the levels of both active TGF-β1 and phosphorylated Smad2 (pSmad2). Moreover, ginsenoside Rgl substantially suppressed the expression of thrombospondin-1 (TSP-1), a cytokine which can promote the transcription of TGF-β1 mRNA and the activation of latent TGF-β1. These results suggest that ginsenoside Rgl inhibits renal interstitial fibrosis in rats with UUO. The mechanism might be partly related to the blocking of TEMT via suppressing the expression of TSP-1. 展开更多
关键词 Ginsenoside Rgl Renal fibrosis Tubular epithelial-myofibroblast transition (temt) Thrombospondin-1 (TSP-1) Transforming growth factor-β1 (TGF-β1)
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陕西一次持续性大雾天气特征分析 被引量:3
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作者 刘瑞芳 陈小婷 屈丽玮 《安徽农业科学》 CAS 2016年第2期231-233,共3页
利用常规探测资料、自动站资料,对陕西2007年11月12~16日大范围持续性大雾产生的天气背景、温湿条件和大气层结等特征进行分析。结果表明,前期500 h Pa陕西为西西北气流,地面为均压场控制,辐射降温有利于近地层水汽凝结成雾;后期陕西处... 利用常规探测资料、自动站资料,对陕西2007年11月12~16日大范围持续性大雾产生的天气背景、温湿条件和大气层结等特征进行分析。结果表明,前期500 h Pa陕西为西西北气流,地面为均压场控制,辐射降温有利于近地层水汽凝结成雾;后期陕西处于高压前部等压线较密集区,形成锋前雾;1~4 m/s的地面风速、低层弱的垂直速度是这次雾形成的动力条件;上干下湿的高低空配置是大雾发生的水汽条件;大气层结稳定,低层有逆温、稳定少动的暖盖,阻碍低层水汽向上扩散,有利于大雾发生。 展开更多
关键词 大雾 环流形势 温湿条件 探空资料
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实时荧光定量PCR仪原理与技术关键点分析 被引量:8
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作者 郑沁春 《中国医疗器械信息》 2012年第6期55-58,共4页
本文主要阐述实时荧光定量PCR技术的基本构成、测量原理,以及实时荧光定量PCR仪的部件构成、质量控制和影响其检测精密度的因素。
关键词 荧光定量PCR仪 荧光阈值 温控系统
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引经药物介导三七抗肾间质纤维化及肾靶向作用研究 被引量:12
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作者 谢席胜 左川 +5 位作者 张紫媛 刘衡川 冯胜刚 张程珑 苑薇 樊均明 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期28-33,共6页
目的观察三七和引经药物介导的三七复方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化及肾靶向作用的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为5组:UUO组、假手术(SOR)组、三七(RN)组、引经药物介导的三七复方(CRN)组和氯沙坦(ARB)组。每组纳入18只进... 目的观察三七和引经药物介导的三七复方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化及肾靶向作用的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为5组:UUO组、假手术(SOR)组、三七(RN)组、引经药物介导的三七复方(CRN)组和氯沙坦(ARB)组。每组纳入18只进行检测。HE、Masson和PAS染色观察肾间质病理学改变;化学比色法测定肾组织匀浆中羟脯氨酸的含量;Real-time PCR从mRNA水平观察α-SMA、collagenⅠ和fibronectin的表达。采用Western blot、免疫组化技术观察α-SMA蛋白的表达。结果 UUO组呈进行性肾间质纤维化改变,包括小管的萎缩、扩张、炎细胞浸润、肾间质胶原的沉积以及α-SMA、collagenⅠ、fibronectin mRNA水平的升高(P<0.05)。偏相关分析显示α-SMA的表达与肾小管损伤指数呈正相关(r=0.55;P<0.05)。RN组、CRN组、ARB组与UUO组比较均不同程度地减轻了胶原在肾间质的沉积,改善了肾脏病理损害,抑制了肾小管间质α-SMA的表达(P<0.05),且CRN作用强于RN(P<0.05)。结论三七和引经药物介导的三七复方对UUO所致的大鼠肾间质纤维化的形成均有抑制作用,且CRN作用强于RN。引经药物介导的三七复方对肾间质纤维化更具靶向治疗作用。 展开更多
关键词 三七 三七复方 肾间质纤维化 肾小管上皮细胞转分化 肾靶向治疗
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