抗TYLCV口感型番茄新品种浙味2号的选育

浙味2号是以自交系T18-238AA为母本,以T20-055A为父本,结合分子标记辅助筛选技术,利用常规杂交育种方法育成的中果型口感番茄一代杂种。早熟,无限生长类型,果实圆形,成熟果粉红色,光泽度好,耐裂,商品性优良,口感丰富,风味浓郁,单果质量120 g左右;高抗番茄黄化曲叶病毒病(TYLCV),抗番茄花叶病毒病(ToMV)、枯萎病、灰叶斑病、根结线虫,可溶性固形物含量8.5%,番茄红素含量68.29 mg·kg^(-1),VC含量197 mg·kg^(-1),可溶性总糖含量58 g·kg^(-1),可滴定酸含量3.84 g·kg^(-1),糖酸比15.10,每667 m^(2)产量4000 kg左右,适宜浙江省及周边区域早春、秋延后保护地栽培。

抗TYLCV耐热型番茄杂交种“辽研165”的选育

“辽研165”是以自交系“336”为母本、自交系“345”为父本通过分子标记和有性杂交选育的抗黄化曲叶病毒病耐热型番茄新品种。植株长势旺盛,中早熟,果实圆形,粉红色,无绿果肩,平均单果质量约200 g。风味较好,商品性好,适于辽宁地区秋季保护地栽培。

抗TYLCV番茄新品种青恋1号的选育

青恋1号是以W44-3-1-16-7为母本,以KG52-2-5-2-6-8为父本配制而成的番茄一代杂种。无限生长类型,早熟,果实圆形,幼果有深绿果肩,果实完全成熟后为粉红色,单果质量120~150 g。糖酸比9.0,VC含量250 mg·kg^(-1),可溶性固形物含量5.7%,番茄红素含量52.0 mg·kg^(-1),含有ty-3a基因,抗番茄黄化曲叶病毒病,耐运输。每667 m^(2)前期产量1700 kg左右,总产量5300 kg左右,适合河南、山东等北方地区早春及越冬种植。

抗黄化曲叶病毒樱桃番茄新品种金宝的选育

金宝是以自交系hy15-1-5为母本,以10-4-6为父本配制而成的樱桃番茄一代杂种。无限生长类型,中熟,植株生长势强,叶量中等,坐果能力强,果实卵圆形,幼果有绿果肩,成熟果橘红色,果肉酥软,酸甜可口;单果质量25 g左右,可溶性固形物含量8.9%,总糖含量15.0%,番茄红素含量2.50 mg·kg^(-1),VC含量113.0 mg·kg^(-1);一般产量3 700 kg·(667m^(2))^(-1)左右,含有番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-2,田间对番茄黄化曲叶病毒病的抗性明显强于对照碧娇和金妃,适宜陕西地区早春保护地种植。

烟粉虱取食感染TYLCV番茄对其解毒酶和保护酶活性的影响

为了明确感染番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)的番茄对烟粉虱生理防御的影响,本文采用生化分析法研究了烟粉虱取食感染TYLCV的番茄植株后解毒酶和保护酶活性的变化。结果表明,B型烟粉虱在带毒番茄上取食72h及30d(长期饲养种群)后,其谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和羧酸酯酶(CarE)活性呈现先升高后下降的趋势,而P450酶活性则持续上升,取食30d种群是对照种群的1.99倍;三大保护酶系超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)则在取食72h后,酶活性高于对照,而在感染TYLCV番茄上取食30d后,保护酶活性则持续高于72h及对照处理,分别是对照种群的1.45倍、8.42倍和5.03倍,差异显著;Q型烟粉虱表现趋势与B型烟粉虱相似。研究结果为进一步明确入侵烟粉虱与双生病毒之间的互作、揭示烟粉虱的适应性机制等补充了资料。

转基因T_(1)代番茄对黄化曲叶病抗性分析

以转黄化曲叶病(TYLCV)编码外壳蛋白(capsid protein,CP)的V1、编码复制激发蛋白(replication-associated protein,Rep)C1基因的T_(1)代J6番茄为试材,采用盆栽法,研究转基因T_(1)代番茄接种TYLCV后不同时期的生长特性、抗病相关酶活性和抗病相关基因表达量的影响,以期明确转V1、C1基因的T_(1)代J6番茄植株对TYLCV的抗性。结果表明:通过RNAi技术获得的转V1、C1基因的T_(1)代转基因J6番茄植株成功转化且供试番茄材料转化率为87.5%;T_(1)代转基因植株抗病性研究发现:转基因番茄可以有效缓解病害对其生长的抑制,光合特性得到一定程度的恢复;其抗病相关酶PAL、PPO活性下降;MDA和抗氧化相关酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)和过氧化物酶(POD)活性显著降低;抗病相关基因的表达量Ty-1、Ty-2、Ty-3显著上调。说明T_(1)代转基因番茄对TYLCV具有一定的抗性,且J6+V1的抗病性强于J6+C1。

抗TYLCV番茄新品种西农2011的选育

西农2011是以R015自交系为母本,R019自交系为父本配制而成的番茄一代杂种。中早熟,植株生长势旺,连续坐果能力强。果实圆整,粉红色,单果质量260～280g;VC含量180.4mg·kg-1,可溶性固形物6.5%,总糖4.10%。果实硬度好,耐贮运。田间调查表明对番茄黄化曲叶病毒病(TYLCV)和枯萎病的抗性强于对照金棚1号。每株留4穗果,每667m2产量7500kg,适合秋延、越冬及早春的日光温室、塑料大棚等设施栽培。

ToCV和TYLCV复合侵染番茄后部分病毒基因序列分析及实时荧光定量PCR分析

番茄褪绿病毒病(ToCV)和番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)存在复合侵染的现象,其发病率逐年递增,成为一种新的威胁番茄产业的病毒病害。为了研究复合侵染样品中2种病毒的互作和基因变异情况,对天津番茄产区发生的TYLCV全基因组和ToCV的CP基因和HSP基因进行了克隆和序列分析。结果表明,与单独侵染样品进行比对,TYLCV的基因序列在复合侵染的样品中共有6处碱基发生了变异,分别为73位A→C、92位A→G、347位C→T、1 209位C→T、1 618位A→G、2 107位A→T,除73位和92位的变异未在编码区,其余的变异碱基均在ORF框内,其中1 209位为同义突变,其他均发生了错义突变。ToCV的CP基因有1处同义突变,ToCV的HSP基因共有4处碱基变异,其中826位由T→C和1 166位由G→A均为同义突变,1 395位和1 630位均由A→G,为错义突变。利用实时荧光定量PCR技术对单独侵染和复合侵染的番茄样品中TYLCV和ToCV病毒积累量进行分析。结果表明,在田间单独侵染和复合侵染的样品中, TYLCV的拷贝数差异不显著,ToCV的拷贝数在单独侵染和复合侵染的样品中差异也不显著。在复合侵染的样品中,TYLCV的拷贝数约为ToCV的262～436倍。

高抗TYLCV番茄新品种钻红1号的选育

钻红1号是以TM001a为母本,以TM012F为父本配制而成的番茄一代杂种。中早熟,无限生长型,果实近圆形,成熟果大红色,单果质量200g左右,果实横径7.2cm,纵径5.4cm,耐贮运,商品性好。鲜食风味佳,可溶性固形物含量5.82%,有机酸0.401%,总糖4.21%,VC312.1mg·kg-1(FW)。每667m2产量6500kg左右。高抗番茄黄化曲叶病毒病(TYLCV),抗青枯病、叶霉病。适合我国南北方保护地及露地种植。

番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)基因介导抗病性研究进展

番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)已经遍布世界各地,也是限制我国番茄主产区生产的主要因素,由于TYLCV易变异,常规育种单一基因抗性难以持久,本文总结了国内外利用TYLCV病毒来源基因(V1、C1等)介导抗性的研究,并且分析了其产生广谱抗性的原因。

一个受TYLCV诱导上调表达的番茄基因LeFLS2的功能分析

为了分析番茄鞭毛蛋白受体基因(LeFLS2)的功能,构建了LeFLS2的进化树,通过RNA-seq方法研究LeFLS2基因在番茄植株受番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)侵染时的响应情况,并通过荧光定量PCR对LeFLS2在番茄各个发育组织器官的表达量进行分析,进一步通过病毒诱导的基因沉默(VIGS)技术在番茄中沉默LeFLS2,对沉默植株接种TYLCV以及丁香假单胞菌番茄变种DC3000进行抗病性鉴定,并对沉默植株的表型进行观察。结果表明,LeFLS2基因与另外一个相似性达到83%的另一个番茄LeFLS2-2基因在一个独立分支上;受TYLCV侵染后LeFLS2基因上调表达;LeFLS2在番茄植株的各个组织器官中均表达,在根中表达量最高,在新叶中表达量最低;沉默LeFLS2后对TYLCV的抗性变化不大,而对DC3000的感病性增强,沉默植株比野生型植株生长明显加快。说明LeFLS2基因对抵抗细菌DC3000侵染以及番茄的生长发育起到重要作用。

TYLCV侵染对番茄叶片解剖结构和保护酶系统的影响

[目的]研究上海地区番茄黄化曲叶病毒侵染对番茄叶片解剖结构和保护酶系统的影响。[方法]采用石蜡切片法观察番茄感病叶片和正常叶片的解剖结构并进行比较;测定病毒感染后番茄叶片内SOD、POD以及CAT的活性变化。[结果]感染病毒的番茄叶片与正常植株叶片的解剖结构有一定的差异,患病植株叶的部分细胞遭到破坏,导致皱缩、卷曲等现象产生,影响了组织器官的正常生理功能;受病毒侵染植株的酶活性在前期均有小幅度的增加且活性大于对照,在中后期酶活性开始下降,活性低于对照。[结论]TYL-CV感染番茄后,叶片的解剖结构发生较大变化,保护酶系统遭到严重破坏,严重影响了番茄组织器官正常的生理代谢功能。

寿光地区感病辣椒TYLCV的分子鉴定和病毒DNA-A序列分析

由于TYLCV的宿主广泛,本试验对山东寿光地区的感病毒病辣椒进行了TYLCV感染的分子鉴定,发现寿光地区的辣椒感染了TYLCV病毒,且感染率较高。通过对病毒基因组DNA-A序列的克隆和序列分析发现,寿光感病辣椒的TYLCV序列与临沂和德州的TYLCV亲缘关系最近,并对具体突变点进行了分析。进化树分析显示,克隆得到的辣椒病毒与墨西哥的TYLCV病毒同源性较高,而与危害辣椒较严重的TYLCSV的遗传距离较远。

RNAi介导的转基因番茄抗TYLCV研究

本研究将TYLCV的AC1和AC2基因中的保守序列嵌合并构建反向重复序列的RNAi载体p BI121-AC1-AC2,通过农杆菌介导法转化番茄获得13株再生植株。结果表明,PCR及RT-PCR检测发现有3株转基因番茄成功表达T-DNA插入的外源基因片段。利用侵染性克隆农杆菌注射及烟粉虱传毒两种接种方法对其进行了抗性鉴定,表明2株转基因番茄植株对TYLCV表现抗性,为抗TYLCV育种提供了新的种质资源。

抗TYLCV樱桃番茄新品种浙樱粉3号的选育

浙樱粉3号是以自交系C24为母本,以自交系321A-51为父本配制而成的樱桃番茄一代杂种。中早熟,播种至始收120 d(天)左右,无限生长类型,植株生长势强,坐果能力强;果实椭圆形,成熟果粉红色,无绿果肩,单果质量25 g左右,可溶性固形物含量9.7%左右;抗番茄黄化曲叶病毒病(TYLCV)和枯萎病,每667 m2产量3500 kg左右,适宜全国各地保护地春、秋、越冬栽培。

TYLCV侵染对番茄叶绿素荧光猝灭和吸收光能分配的影响

研究了上海地区番茄黄化曲叶病毒侵染番茄后在不同时期对叶绿素荧光猝灭和吸收光能分配的影响。结果表明:病毒侵染后,叶绿素含量逐渐下降,后期虽有所提高,但一直低于健康对照;叶绿素荧光参数Fv/Fm、Fv′/Fm′、ETR、ФPSII、qP均低于对照,只有qN大于对照。与健康对照比,病毒侵染后导致了光化学反应速率的降低以及天线热耗散和反应中心过剩能量的增加。

番茄抗TYLCV新品系2019113选育

以抗番茄黄化曲叶病毒病自交系为抗病供体,以粉果优良自交系为轮回亲本,经过杂交、回交,结合分子标记辅助选择和四代田间自交分离选择,选育出抗番茄黄化曲叶病毒病、综合性状优良的粉果番茄新品系2019113。其果实圆形,成熟果粉红色,色泽鲜艳,平均单果质量160 g,上下层果实整齐均匀,耐贮运。分子水平检测基因型为TY-2/TY-2,含Ty-2纯合抗病基因,田间未发现黄化曲叶病毒病,抗叶霉病,综合性状优良。

番茄高抗TYLCV与敏感品种光合生理特性比较

以国外主推番茄品种好韦斯特(不抗TYLCV)为对照,比较了其与自育高抗TYLCV番茄品种———瓯秀806的叶绿素含量、植物学特性、光合特性等生理特性的差异,结果表明,Chla、Chlb、Chl(a+b)和Car含量均以瓯秀806较高(P<0.05);而Chla/Chlb则以好韦斯特较高(P<0.05);2个番茄品种的光合速率均随着CO2浓度的升高而增大,当CO2浓度大于450μmol·mol-1,其光合速率增加不显著(P>0.05)。在低CO2浓度(350μmol·mol-1)下,好韦斯特的最大光合速率较高(P<0.05);较高CO2浓度(450,550和650μmol·mol-1)下,好韦斯特的光饱和点均较低(P<0.05),分析认为主要由于其较低的叶绿素含量引起。而不同CO2浓度下,2个番茄品种表观量子效率(AQY)、暗呼吸速率(Rn)和光补偿点(LCP)差异较小。瓯秀806早期产量为1 456.8 kg·667 m-2,低于好韦斯特(P>0.05);而其总产量则高于好韦斯特,达7 245 kg,增产58.2%(P<0.05),分析其原因主要是由于好韦斯特后期发病率较高。

TYLCV外壳蛋白基因植物表达载体构建及转化番茄的研究

以"特大瑞光"番茄为受体植物,采用农杆菌介导法,将含有番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白(TYLCV-CP)基因的植物表达载体pCAMBIA3301转入番茄子叶外植体,对获得的13株草胺膦抗性番茄植株进行PCR和Southern Blot技术检测。结果表明:有10株呈阳性检测反应,说明TYLCV-CP基因已整合到番茄基因组中,阳性率为76.9%;番茄转基因植株较非转基因植株对番茄黄化曲叶病毒的抗性明显增强。