《义务教育教科书英语(PEP)》的设计思路和教学建议(上)--以三年级上册为例

2024年秋季将全面启用英语新教材。对于教师而言,应先了解新教材的特点--以主题为引领、以问题为主线、以语篇为依托、以评价为导向,而后分析各板块的教学要点。以对话板块为例,教师应帮助学生感知对话语篇意义,提升学生对话理解和表达能力,培养学生倾听模仿和真实表达的习惯。

一种商用车PEPS系统及其无法启动问题分析改进

文章介绍了无钥匙进入和启动系统(以下简称:PEPS系统)的主要构成及工作流程,同时通过实际案例,介绍了一种商用车PEPS系统的组成、原理和功能实现,及其试制过程出现无法启动问题的分析与改进,提升产品可靠性。

汽车PEPS开关故障诊断与修复方法研究

本文详细介绍了PEPS开关的基本构造和工作原理,并分析了其在汽车中的具体应用及常见故障类型,探讨了包括故障码读取、物理检测、电路测试及诊断工具使用等多种故障诊断方法,提供了针对PEPS开关故障的具体修复方法,涵盖更换步骤、电路修复和保养建议。本文旨在为汽车维修技术人员提供有益的参考,以提升对PEPS开关故障的诊断与修复效率。

新能源汽车PEPS故障检测与维护技术研究

PEPS是Passive Entry Passive Start的英文缩写,中文意思是无钥匙进入及启动系统,它是由控制器、汽车端的接收器和汽车钥匙里面的射频发射器等组合而成的。当前主流的PEPS都加入了NFC和蓝牙元素。本文总结概括了PEPS系统常见故障,以吉利几何G6为例进行探究。

油菜农杆菌转基因体系的建立及转PEP反义基因油菜的获得

本研究建立了油菜农杆菌转基因技术体系，用根癌农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）共培养法将ＰＥＰ反义基因导入甘蓝型油菜（ＢｒａｓｉｃａｎａｐｕｓＬ．）主栽品种浙油７５８和浙优油１号，获得高含油量的油菜植株。实验所用外植体为培养８～１０ｄ的无菌苗下胚轴；农杆菌为ＥＨＡ１０１（含ＡｎｔｉＰＥＰ／ＰＩＧ１２１），外植体经农杆菌感染后共培养２ｄ，转入含５００ｍｇ／Ｌ羧青霉素的ＭＳ培养基上，１周后转入含羧青霉素及潮霉素的培养基上，以后每２周继代一次至出现抗性芽，转化频率为２７５％（浙优油１号）；分化的茎芽在含相同抗生素的生根培养基中生根并长成完整小植株，转入土壤成为正常植株。经ＧＵＳ组织化学染色及ＰＣＲ扩增检测，证明外源基因已插入油菜基因组并得到表达。

获得转反义PEP基因超高油大豆新材料

利用基因工程技术进行植物高油育种,是当前国际上植物基因工程研究的热点之一。大豆是世界上植物油和植物蛋白质最重要的来源,随着人们生活水平的不断提高和养殖业的迅速发展,我国高油大豆需求量急剧增加。在不增加大豆面积的前提下,提高单位面积含油量的重要手段之一就是培育栽培高油大豆品种。由此,从2000年作者利用农杆菌介导法将反义PEP基因导入大豆的基因组,相继获得了转基因大豆植株,经多代连续筛选、鉴定,获得了稳定的超高油(脂肪25%)大豆品系。本研究首次报道利用基因工程手段大幅度提高大豆含油量。

利用花粉管导入法获得转反义PEP基因大豆植株

近年来，大豆遗传转化技术发展非常迅速，用农杆菌介导法［１］将新霉素磷酸转移酶Ⅱ（ＮＰＴⅡ）、ＧＵＳ等报告基因玉米转座子ＡＣ，ＤＣ因子［４］及抗除草剂基因导入大豆细胞。此外，虽然可以采用电击法［２］、ＰＥＧ法［３］、基因枪法［４］进行大豆遗传转化研究，...

应用反义PEP基因表达技术提高稻米脂肪含量

以成熟种子为来源的胚性愈伤组织为受体材料,采用根癌农杆菌介导方法将反义磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvatecarboxylase,PEPCase)基因导入粳稻品种秀水11,获得一批转基因植株,并通过GUS组织化学染色、PCR检测和Southern杂交分析等方法进行了验证。对T1代的检测结果表明,所转基因已遗传给后代,且大多数株系的分离比符合3:1。T2代测定结果显示,转基因水稻株系的稻米脂肪含量比对照高出0.37±0.12个百分点,其差异大部分达到极显著水平。

干旱对玉米幼苗PEP羧化酶活性的影响

本文研究了土壤干旱过程中及复水后玉米幼苗ＰＥＰ羧化酶活性的变化。结果表明，当土壤含水量由２１．０％降至６．１％时，ＰＥＰ羧化酶活性由０．３５２μｍｏｌＣＯ２／ｍｇ·ｐｒｏ．ｍｉｎ降至０．０６３μｍｏｌＣＯ２／ｍｇ·ｐｒｏ·ｍｉｎ，复水后其活性恢复很慢，即使叶水势恢复到干旱前水平（－０．３ＭＰａ），此酶活性才恢复到０．１７μｍｏｌＣＯ２／ｍｇ·ｐｒｏ·ｍｉｎ，仅为干旱前的４７．４％。光合速率先升后降，叶绿素含量和叶片水势的变化与ＰＥＰ羧化酶相似，气孔阻力则随土壤干旱程度的加剧而逐渐升高。说明土壤干旱过程中玉米幼苗ＰＥＰ羧化酶活性的降低可能是光合作用下降的非气孔因素之一。

甘蓝型油菜pep基因片段的克隆和种子特异性反义表达载体的构建

丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个关键酶,抑制种子中pepc基因的表达,使其底物(丙酮酸)更多地朝生成油脂的方向流动,对提高种子的含油量,增加油菜的经济价值具有重要的意义.利用PCR技术从甘蓝型油菜湘油15号基因组中扩增了PEP基因片段,并将其克隆到pGEM-TEasy载体上进行测序.测序结果表明:扩增片段长576bp,与Yannai报道的PEP基因相应区域的同源性为95%.用扩增引物上设计的BamHI和SacI两位点酶将PEP基因片段切下,反向插入到pBI121.N质粒的Napin启动子之后,构建了种子特异性反义PEP表达载体,并通过农杆菌介导法将反义PEP基因转化到湘油15号中.

PEP聚醚型非离子表面活性剂复配体系的研究

主要讨论了聚氧丙烯 -聚氧乙烯 -聚氧丙烯 (PEP)嵌段共聚醚型非离子表面活性剂分别与十二烷基硫酸钠 (SDS)、十六烷基三甲基溴化铵 (C16TAB)复配体系的水溶液的表面张力随浓度的变化及其盐效应的影响 ,计算了二元复配体系水溶液的表面吸附层分子相互作用参数 ( βσ)及胶束中分子相互作用参数 ( βm)的值 ,比较了复配体系的协同效应 。

基于PepS的高温核一级管道蠕变疲劳分析方法研究

钍基熔盐堆(Thorium Molten Salt Reactor-Liquid Fuel,TMSR-LF1)回路管道最高运行温度达650℃,高温服役下的管道蠕变-疲劳损伤分析及评定至关重要。目前仅ASME-BPVC-III-5-HBB规范中有适用于高温核一级管道的蠕变-疲劳损伤暂行评定方法,但该方法对于复杂管道系统使用起来过于繁琐。本文旨在使用管道分析软件PepS软件实现高温核一级复杂管系的分析与结构完整性评估。首先结合管道结构在多种载荷组合作用下的截面应力状态解析解,进行管道截面应力分析及应力线性化,并将结果与有限元数值解进行对比分析,两者的误差结果基本一致。随后,利用PepS软件对TMSR-LF1回路管道进行了力学分析和结构完整性评估,结其蠕变疲劳损伤结果位于包络线以内,满足蠕变疲劳极限的要求。该研究将管道分析软件与ASME评定规范进行了有效衔接,明确了评定方法,实现了高温核一级复杂管系的蠕变疲劳评估。

PEP-PCR法及其在法医学中应用的可行性研究

提高微量检材的利用率 ,建立PEP方法并对其法医学应用进行可行性研究。用 15个随机寡核苷酸的序列作为引物 ,低特异性下扩增出微量DNA ,以此扩增物作为模扳 ,进行特异基因座扩增。经PMCT118,GABAR ,DYS19,D18S849,D3S1744,D12S10 90 ,D8S1179,D2 1S11,D18S5 1,D5S818,D13S3 17,D7S82 0 ,D3S13 5 8,vWA ,FGA ,TH0 1,CSF1PO ,TPOX ,D16S5 3 9及Amelogene等 2 0个基因座的PEP PCR与直接的PCR分析比较 ,二者分型结果一致 ,即使 1ngDNA也能得到正确分型。PEP方法可用于法医学检验 ,有利于微量物证的利用 。

转反义PEP基因油菜超油1号菜籽油毒理性评价

为评价转反义PEP基因油菜超油1号菜籽油的食用安全性,对该样品进行了急性毒性试验和致突变试验。结果表明,转反义PEP基因超高油油菜菜籽油属无毒级,无致突变作用。大鼠90d喂养试验结果显示,各试验组大鼠体重、进食量、食物利用率、血常规、脏体比及病理组织学观察等各项指标与阴性对照均无显著性差异,无作用剂量为10.0m l/kg体重。

PEP与阴离子表面活性剂复配体系泡沫性能的研究

研究了PEP型非离子表面活性剂分别与十二烷基苯磺酸钠 (DBS) ,十二烷基硫酸钠 (SDS)形成复配体系的泡沫性能 ,讨论了浓度及配比的变化对泡沫性能的影响 ,结果表明起泡性和稳泡性皆随混合表面活性剂的浓度的上升而增强 ;在一定浓度下 ,随着PEP比例下降 ,起泡性和稳泡性也随着增大 ,并达到稳定值。

C3植物绿色器官PEP羧化酶活性的比较研究

本文研究了小麦（Triticum aestivum L.）和大豆（Glycine max L.）的不同光合器官中的PEP羧化酶及其相关的酶类。在这些器官中均含有PEP羧化酶,其中以大豆的荚壳和种皮及小麦的内稃中PEP羧化酶活性最高。不同绿色器官在光下或暗中均能固定CO2,但是在黑暗条件下,小麦的内稃和大豆的荚壳及种皮所固定的CO2远高于叶片。此外,参与暗固定的NAD-苹果酸酶和NAD-苹果酸脱氢酶的活性,在这些器官中也最高,说明这些器官中PEP羧化酶的CO2 β-羧化作用主要在于固定呼吸作用所释放的CO2,只有少量的CO2是通过C4光合途径被固定。

干旱对小麦幼苗PEP羧化酶及细胞保护酶活性的影响

随着土壤含水量的降低，小麦幼苗的ＰＥＰ羧化酶活性逐渐升高，当土壤相对含水量降到２７．４％时，ＰＥＰ羧化酶活性升到最高，比干旱前提高３５％，此后ＰＥＰ羧化酶活性开始下降，复水后进一步下降，但未降至干旱前水平．ＳＯＤ、ＰＯＤ和ＣＡＴ活性亦有相似变化规律；叶绿素含量和叶水势降低，气孔阻力和ＭＤＡ含量增加，复水后除叶绿素含量进一步降低外，其余指标均有不同程度恢复．表明干旱深刻地影响小麦幼苗的光合作用和活性氧防御系统．

油菜PEP基因的克隆及PEP反义基因的构建

丙酮酸羧化酶（ Ｐ Ｅ Ｐ）是控制油菜蛋白质／油脂含量比例的一个关键酶⒚本研究用 Ｐ Ｃ Ｒ 法扩增出了 Ｐ Ｅ Ｐ 基因片段，并将其 克隆到 ｐ Ｂ Ｓ Ｓ Ｋ＋ 的 Ｓｍ ａ Ⅰ位点⒚ Ｄ Ｎ Ａ 序列分析表 明克隆片段 的长度为 ５３０ｂｐ，其序列与报道序列相同⒚将该 Ｐ Ｅ Ｐ基因 片段反向插入 ｐ Ｉ Ｇ１２１ 质粒，构建了带 Ｐ Ｅ Ｐ 反义基因的超级双元载体并进行油菜的转化。

苏云金芽孢杆菌生产菌株溶原性噬菌体pep基因的克隆、表达及功能分析

溶原性噬菌体的随机爆发是微生物杀虫剂苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,B.t)发酵生产的首要危害。【目的】本文的目的就是通过研究B.t生产菌株溶原性噬菌体的遗传背景,以便从分子水平上控制其在生产中的随机爆发。【方法】通过对广东梅州某公司的生产菌株MZ1采用Mitomycin C进行诱导,提取噬菌体颗粒MZTP01的基因组DNA,克隆和表达该噬菌体的pep基因,并进行了功能分析。【结果】诱导获得的溶原性噬菌体MZTP01斑点清晰,直径约1mm,成斑时间12h;从噬菌体基因组DNA双酶切(HindⅢ/EcoRⅠ)片段中回收长度为2362bp的D片段(Genbank登录号:AY639599),又从D片段中克隆了长度为1101bp、编码367aa、分子量为47kDa的pep基因,表达载体M15(pQE30pep)在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)中表达获得了47kDa的清晰表达带,在1h时开始产生蛋白并有逐步上升的趋势;Western blot也在47kDa处得到一条清晰的条带;可溶性分析表明PEP蛋白在重组菌株中是以不可溶的包含体形式存在的,该蛋白的产生明显地抑制了宿主的生长速度;噬菌体PEP氨基酸序列之间的同源性比较表明,噬菌体MZTP01PEP蛋白与来自E.coliK12噬菌体的PEP蛋白的同源性程度最大。【结论】我们获得了一种新的噬菌体MZTP01,并首次报道了该噬菌体D片段的核苷酸序列及pep基因的功能,试验证明PEP表达蛋白能够水解酪蛋白,其活力相当于0.3mg/mL的胰蛋白酶。

改良的PEP方法在无创性产前基因诊断中的应用

应用显微操作技术获取孕妇外周血中的单个有核红细胞 ,改良的PEP方法扩增单个有核红细胞的全基因组DNA ;在此基础上 ,应用荧光标记聚合酶链反应扩增 9个微卫星片段 ,进行基因型分析判定单个有核红细胞来源。综合性别和DMD基因内的数个STR位点连锁分析进行DMD基因诊断 ,应用PCR -STR连锁分析进行PKU基因诊断。结果显示 ,对 10例DMD高危胎儿中的 6例成功地进行了无创性产前基因诊断。同时对 1例PKU也成功地进行了无创性产前基因诊断。改良的PEP方法扩增单个细胞的全基因组可以满足基因诊断的要求 。