期刊文献+
共找到44篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
高产莫能菌素肉桂地链霉菌的透明颤菌vgb基因异源表达 被引量:1
1
作者 李欣颖 张善飞 +2 位作者 刘旻炜 黄子瑄 孙付保 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1-9,共9页
肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis)发酵产生的聚醚类抗生素莫能菌素(Monensin)因其环保且高效的特性而被广泛应用在医药、农业等领域,但莫能菌素实际生产中普遍的低氧条件严格限制了肉桂地链霉菌发酵莫能菌素水平。该文在前期... 肉桂地链霉菌(Streptomyces cinnamonensis)发酵产生的聚醚类抗生素莫能菌素(Monensin)因其环保且高效的特性而被广泛应用在医药、农业等领域,但莫能菌素实际生产中普遍的低氧条件严格限制了肉桂地链霉菌发酵莫能菌素水平。该文在前期整合表达莫能菌素生物合成基因簇中途径特异性正向调控基因(monH、monRⅡ)基础上,尝试通过异源整合表达透明颤菌血红蛋白基因vgb,以期通过改善菌株摄取溶氧能力来提高莫能菌素产量。结果显示,在40 mmol/L Ca^(2+)、供受体菌比例100∶1和培养18 h覆盖抗生素条件下,接合转移效率提高3倍;成功将基因vgb与莫能菌素生物合成途径特异性调控基因monH/monRⅡ进行串联整合,得到工程菌2110-monH-vgb和2110-monH-monRⅡ-vgb,其摇瓶生物量在高限氧条件下稍有提高(6%),但发酵效价分别较异源表达前提高18.0%和21.3%;后者在5 L罐水平生物量较异源表达前略有提高,发酵效价高达11.5 kU/mL,较出发菌提高47.3%。通过优化遗传操作系统并用于肉桂地链霉菌发酵产莫能菌素基因工程改造,成功获得有效提高莫能菌素发酵效价的vgb异源串联整合表达菌,为其后续的工业应用奠定基础。 展开更多
关键词 肉桂地链霉菌 莫能菌素 接合转移 异源表达 透明颤菌血红蛋白基因vgb
下载PDF
转vgb基因银腺杂种杨的耐涝性 被引量:6
2
作者 李义良 苏晓华 +2 位作者 张冰玉 黄秦军 张香华 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第7期26-31,共6页
对导入透明颤菌血红蛋白(vitreoscilla hemoglobin,VHb)基因vgb银腺杂种杨进行Southern印记杂交和RT-PCR检测,证实vgb基因已整合到杨树基因组中,并在转录水平上得到表达。在温室对4个转基因株系及对照盆栽扦插苗进行模拟持续淹水胁迫试... 对导入透明颤菌血红蛋白(vitreoscilla hemoglobin,VHb)基因vgb银腺杂种杨进行Southern印记杂交和RT-PCR检测,证实vgb基因已整合到杨树基因组中,并在转录水平上得到表达。在温室对4个转基因株系及对照盆栽扦插苗进行模拟持续淹水胁迫试验,研究淹水条件下植株的生长及生理性状。结果表明,随着淹水时间的延长苗木逐渐死亡,对照植株在淹水17天后死亡率达66.67%,而4个转基因株系死亡率均低于50.00%,其中T81最低,只有25.00%;同时4个转基因株系在淹水胁迫时能够保持较高的叶绿素含量,并且膜质过氧化物MDA含量均低于对照植株;涝渍胁迫下转基因株系生长受抑制程度低于对照植株。说明在淹水胁迫下vgb基因的表达增强了银腺杂种杨叶绿素含量的积累,进而促进了转基因植株的生长,提高了转基因株系对淹水的忍受能力。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因(vgb) 耐涝性 银腺杂种杨
下载PDF
在兽疫链球菌中表达vgb基因和HA合成基因提高透明质酸产量 被引量:11
3
作者 郝宁 张晋宇 陈国强 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期56-60,共5页
透明质酸(HA)是一种在医药及化妆品领域具有广泛应用的天然粘多糖。兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)是工业上生产透明质酸的菌种之一。透明颤菌血红蛋白(VHb)具有增强细胞摄氧的作用。对生产透明质酸的兽疫链球菌进行了基因改... 透明质酸(HA)是一种在医药及化妆品领域具有广泛应用的天然粘多糖。兽疫链球菌(Streptococcus zooepidemicus)是工业上生产透明质酸的菌种之一。透明颤菌血红蛋白(VHb)具有增强细胞摄氧的作用。对生产透明质酸的兽疫链球菌进行了基因改造:将兽疫链球菌HA的合成基因hasABC以及合成透明颤菌血红蛋白的vgb基因(Vitreoscilla hemoglobin gene,vgb)分别或同时插入阳性菌表达质粒pEU308中,通过电转化导入兽疫链球菌中。通过一氧化碳(CO)差光谱检测到了VHb的表达。在摇瓶实验中,同时带有hasABC和vgb基因的重组菌比野生菌的透明质酸产量提高了30%。而在发酵罐中,带有这2个基因的重组菌的透明质酸产量达到了6.9g/L,高于重组菌5.5g/L的产量。实验结果表明,vgb基因的存在促进了细胞的生长,hasABC操纵子的过表达增强了透明质酸的合成。首次将VHb导入兽疫链球菌中,获得了表达,并证明其对菌体生长及透明质酸合成有促进作用。通过研究,VHb将可以在阳性菌中获得更广泛的应用。 展开更多
关键词 兽疫链球菌 vgb基因 HA合成基因 基因转化 透明质酸 发酵 产量
下载PDF
将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)转移到链霉菌染色体整合载体的构建 被引量:4
4
作者 张桂敏 周秀芬 +1 位作者 邓子新 庄永红 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期602-605,共4页
链霉菌抗生素的生物合成对培养环境中氧的供应相当敏感 ,为了改善这一溶氧问题 ,本研究通过将透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)克隆到含ФC31int,attP基因的诱导型表达载体pIJ86 0 0上 ,构建了可接合转移到链霉菌的整合型表达vgb基因的质粒 p... 链霉菌抗生素的生物合成对培养环境中氧的供应相当敏感 ,为了改善这一溶氧问题 ,本研究通过将透明颤菌血红蛋白基因 (vgb)克隆到含ФC31int,attP基因的诱导型表达载体pIJ86 0 0上 ,构建了可接合转移到链霉菌的整合型表达vgb基因的质粒 pHZ12 76。pHZ12 76通过接合转移导入变铅青链霉菌 (Streptomyceslivi dans) ,所得重组子经Southern杂交验证后 ,进行诱导表达 ,菌体经破碎后所得蛋白粗提物经Western杂交和CO结合试验表明vgb基因在该菌中表达出了有活性的VHb蛋白。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因 变铅青链霉菌 整合型 基因表达
下载PDF
透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在大肠杆菌中的高效表达 被引量:4
5
作者 祁艳霞 杨明明 +3 位作者 高文 祝发明 樊俊华 陈玉林 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2005年第8期7-9,共3页
利用PCR技术将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体pET28 a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达。重组蛋白在30℃诱导获得可溶表达。利用N i2+亲和层析对重组蛋白进行了纯化,得到重组的透明颤菌血红蛋白,蛋白呈红色。实验现象显示重组蛋... 利用PCR技术将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体pET28 a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达。重组蛋白在30℃诱导获得可溶表达。利用N i2+亲和层析对重组蛋白进行了纯化,得到重组的透明颤菌血红蛋白,蛋白呈红色。实验现象显示重组蛋白与血红素相结合。紫外光区和可见光区波长扫描分析显示:蛋白粗提物和纯化后的血红蛋白在230 nm和413 nm都有强吸收峰,初步表明,尽管重组蛋白比天然蛋白多36个氨基酸,重组蛋白仍然具有生理活性。诱导后4 h和6 h的培养液氨基乙酰丙酸含量分别达到17 mg/L和21 mg/L,说明重组蛋白的表达明显促进了体内hem e合成途径。 展开更多
关键词 透明颠菌 血红蛋白基因 表达
下载PDF
vgb在红色糖多孢菌表达及生物活性的研究 被引量:2
6
作者 吴益民 王洪军 +4 位作者 孙艳 王立强 张志强 冯立 杨青 《药物生物技术》 CAS CSCD 2007年第2期90-93,共4页
利用基因工程技术对红色糖多孢菌进行改造,提高红霉素产率。用PCR技术克隆vgb,采用电穿孔法与红色糖多孢发酵菌染色体整合,鉴定采用Western blot与Southern blotting分析。VHb活性分析采用一氧化碳(CO)差示光谱法,红霉素效价测定采用管... 利用基因工程技术对红色糖多孢菌进行改造,提高红霉素产率。用PCR技术克隆vgb,采用电穿孔法与红色糖多孢发酵菌染色体整合,鉴定采用Western blot与Southern blotting分析。VHb活性分析采用一氧化碳(CO)差示光谱法,红霉素效价测定采用管碟法。结果克隆了含vgb的红色糖多孢菌表达质粒(pBlueV),筛选了重组红色糖多孢菌株。与原始菌株比较,重组菌株细胞发酵密度分别为1.37与2.82,红霉素效价分别为3.8与5.1,相当于重组菌株提高红霉素体积产率约29%。重组红色糖多孢发酵菌提高了红霉素产率,对解决抗生素工业和基因工程菌高密度发酵有良好的应用前景。 展开更多
关键词 血红蛋白基因 红色糖多孢菌 红霉素 高密度发酵
下载PDF
透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在阿维链霉菌的整合表达 被引量:4
7
作者 张桂敏 周秀芬 邓子新 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期138-142,共5页
pHZ1276是透明颤菌血红蛋白基因(vgb)的诱导型表达载体,携带有硫链丝菌素诱导的强启动子PtipA和ФC31int,attP基因使载体整合在染色体上。本研究利用组成型启动子ermP1P2替代pHZ1276上的诱导型启动子PtipA构建了组成型表达血红蛋白基因... pHZ1276是透明颤菌血红蛋白基因(vgb)的诱导型表达载体,携带有硫链丝菌素诱导的强启动子PtipA和ФC31int,attP基因使载体整合在染色体上。本研究利用组成型启动子ermP1P2替代pHZ1276上的诱导型启动子PtipA构建了组成型表达血红蛋白基因的质粒pHZ1291。将vgb基因去掉后构建了组成型链霉菌表达载体pHZ1294。将pHZ1276,pHZ1291导入阿维链霉菌(Streptomycesavermitilis)NRRL8165,所得重组子经Southern杂交验证后,蛋白粗提物经Western杂交和CO结合实验表明vgb基因在该菌中表达出了有活性的VHb蛋白。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因 阿维链霉菌 整合表达
下载PDF
Vitreoscilla hemoglobin gene(vgb)improves lutein production in Chlorella vulgaris 被引量:5
8
作者 马瑞娟 林祥志 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2014年第2期390-396,共7页
Vitreoscilla hemoglobin is an oxygen-binding protein that promotes oxygen delivery and reduces oxygen consumption under low oxygen conditions to increase the effi ciency of cell respiration and metabolism.In this stud... Vitreoscilla hemoglobin is an oxygen-binding protein that promotes oxygen delivery and reduces oxygen consumption under low oxygen conditions to increase the effi ciency of cell respiration and metabolism.In this study,we introduced a Vitreoscilla hemoglobin gene(vgb)into Chlorella vulgaris by Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation(ATMT).PCR analysis confi rmed that the vgb gene was successfully integrated into the Chlorella vulgaris genome.Analysis of biomass obtained in shake fl asks revealed transformant biomass concentrations as high as 3.28 g/L,which was 38.81% higher than that of the wild-type strain.Lutein content of transformants also increased slightly.Further experiments recovered a maximum lutein yield of 2.91 mg/L from the transformants,which was 36.77% higher than that of the wild-type strain.The above results suggest that integrated expression of the vgb gene may improve cell growth and lutein yield in Chlorella vulgaris,with applications to lutein production from Chlorella during fermentation. 展开更多
关键词 Chlorella vulgaris Vitreoscilla hemoglobin gene (vgb) genetic engineering LUTEIN
下载PDF
透明颤菌vgb基因整合型大肠杆菌的培养特性 被引量:1
9
作者 陈新爱 徐志南 +1 位作者 王芳 岑沛霖 《浙江大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第1期124-128,共5页
透明颤菌血红蛋白(VHb)是一种氧调节、氧结合蛋白,其基因vgb的表达在转录水平上受氧调控.大肠杆菌E.coliBV是采用基因同源重组方法将vgb基因整合到基因工程常用宿主菌E.coliBL21中构建得到的.研究了不同价态的铁离子对同源重组菌的生长... 透明颤菌血红蛋白(VHb)是一种氧调节、氧结合蛋白,其基因vgb的表达在转录水平上受氧调控.大肠杆菌E.coliBV是采用基因同源重组方法将vgb基因整合到基因工程常用宿主菌E.coliBL21中构建得到的.研究了不同价态的铁离子对同源重组菌的生长特性及VHb合成的影响,研究表明,0.2mmol/L的二价铁离子具有促进VHb表达从而刺激菌体细胞生长的作用.在0.1L/h低通气量条件下,E.coliBV分别进行间歇培养和流加培养,低溶氧刺激VHb在短时间内迅速大量合成,改善了细胞内氧的传递性能,使生长期分别延长到25h和45h,生物量(DCW)分别达到9.6g/L和26g/L. 展开更多
关键词 透明颤菌 vgb基因 基因同源重组 血红蛋白 大肠杆菌 基因表达 基因工程 微生物培养
下载PDF
透明颤菌vgb基因在枯草芽孢杆菌中的整合表达 被引量:1
10
作者 张西锋 李万芬 郭蔼光 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2009年第9期199-203,共5页
【目的】将透明颤菌血红蛋白(VHb)基因(vgb)在枯草芽孢杆菌中进行整合表达,提高β-半乳糖苷酶的产量。【方法】用枯草芽孢杆菌整合载体pA01和启动子P43构建vgb基因的整合表达载体pA-vgb,通过双交叉整合方式,将vgb基因整合到枯草芽孢杆菌... 【目的】将透明颤菌血红蛋白(VHb)基因(vgb)在枯草芽孢杆菌中进行整合表达,提高β-半乳糖苷酶的产量。【方法】用枯草芽孢杆菌整合载体pA01和启动子P43构建vgb基因的整合表达载体pA-vgb,通过双交叉整合方式,将vgb基因整合到枯草芽孢杆菌DB104:bga的染色体上,构建枯草芽孢杆菌DB104:vbga。采用PCR和Southern blot对DB104:vbga进行检测,并通过发酵摇瓶试验研究VHb对β-半乳糖苷酶产量的作用。【结果】PCR与Southern blot检测结果表明,枯草芽孢杆菌DB104:vbga中vgb基因整合位置正确,且表达的VHb蛋白具有生物学活性。摇瓶试验结果表明,在转速250 r/min条件下,枯草芽孢杆菌DB104:vbga与DB104:bga的β-半乳糖苷酶活性无显著差异;在150 r/min的限氧条件下,vgb基因的表达促使DB104:vbga的β-半乳糖苷酶活性较DB104:bga提高了14.9%。【结论】vgb基因可用于提高枯草芽孢杆菌目的蛋白的产量。 展开更多
关键词 透明颤菌 枯草芽孢杆菌 vgb基因 同源重组
下载PDF
透明颤菌血红蛋白基因(vgb)表达载体的构建及其诱导表达
11
作者 吴迪 杨明明 +3 位作者 张亚妮 张炜炜 周乍琴 樊俊华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2005年第6期6-8,共3页
利用PCR技术将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达。重组蛋白分别在30℃和37℃诱导表达,30℃诱导获得可溶性表达。结果表明:在30℃,1.5mmol/L和2.5mmol/LIPTG诱导下,诱导4~8h透明颤菌血红蛋... 利用PCR技术将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)克隆到融合表达载体pET28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达。重组蛋白分别在30℃和37℃诱导表达,30℃诱导获得可溶性表达。结果表明:在30℃,1.5mmol/L和2.5mmol/LIPTG诱导下,诱导4~8h透明颤菌血红蛋白可获得高表达透明颤菌血红蛋白的表达量分别占菌体总蛋白的18.7%和27.7%。 展开更多
关键词 透明颤菌血红蛋白基因 诱导表达 表达载体 构建 PCR技术 可溶性表达 融合表达 大肠杆菌 重组蛋白 总蛋白 表达量 高表达 克隆
下载PDF
根癌农杆菌介导透明颤茵血红蛋白基因(vgb)在短密青霉菌中的克隆表达 被引量:2
12
作者 董玉国 王丽华 +3 位作者 徐瑞 张舰 孙爱友 魏东芝 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第1期133-137,共5页
利用根癌农杆菌LBA4404介导,将编码透明颤菌血红蛋白的结构基因(Vitreoscilla Hemoglobin gene,vgb)导入到短密青霉ATCC16024中,用于改善菌体对氧的摄取能力,提高霉酚酸(Myhophenoilc Acid,MPA)的发酵水平,降低生产成本。通过潮霉素抗... 利用根癌农杆菌LBA4404介导,将编码透明颤菌血红蛋白的结构基因(Vitreoscilla Hemoglobin gene,vgb)导入到短密青霉ATCC16024中,用于改善菌体对氧的摄取能力,提高霉酚酸(Myhophenoilc Acid,MPA)的发酵水平,降低生产成本。通过潮霉素抗性筛选、PCR分子鉴定和MPA发酵验证等结果表明,vgb基因在短密青霉中成功获得了表达;vgb基因的表达提高了短密青霉的菌体密度,转化子MPA产量达到2.18 g·L?1,比原始菌株提高了27.5%。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 短密青霉 vgb 霉酚酸 发酵
下载PDF
同源重组整合vgb基因提升枯草芽孢杆菌亚麻脱胶能力 被引量:3
13
作者 张懿翔 丁若垚 +2 位作者 陈婷 郁崇文 张兴群 《中国麻业科学》 2015年第2期87-94,共8页
【目的】将透明颤菌血红蛋白(VHb)基因(vgb)在枯草芽孢杆菌中进行整合表达,以改善枯草芽孢杆菌的呼吸强度,通过高密度培养提高果胶酶的表达量,最终明显改善脱胶效果。【方法】构建含有vgb基因、amy E基因以及启动子P43的p SK-vgb(+)质粒... 【目的】将透明颤菌血红蛋白(VHb)基因(vgb)在枯草芽孢杆菌中进行整合表达,以改善枯草芽孢杆菌的呼吸强度,通过高密度培养提高果胶酶的表达量,最终明显改善脱胶效果。【方法】构建含有vgb基因、amy E基因以及启动子P43的p SK-vgb(+)质粒,通过同源重组的方法,将vgb基因整合到枯草芽孢杆菌A5的染色体上,得到稳定表达透明颤菌血红蛋白的枯草芽孢杆菌A5-vgb(+)。分别采用PCR和CO差光谱分析法检测vgb基因的整合状态与血红蛋白的稳定表达,并通过发酵摇瓶试验研究VHb对菌株果胶酶产量的影响。将构建好的A5-vgb(+)菌株进行脱胶试验,通过XRD结晶度与电镜扫描分析鉴定脱胶效果。【结果】PCR与CO差光谱检测表明,vgb基因成功整合在A5菌株中,且正确表达的VHb具有生物学活性,在150 rpm,37℃,p H=8.0,16小时发酵的条件下,vgb基因的表达促使A5-vgb(+)菌株的果胶酶产量较不含vgb基因的菌株提升了29.5%。XRD与电镜扫描结果表明,构建的A5-vgb(+)菌株的脱胶效果相较于不含vgb的菌株,在结晶度上提高了0.55%,表面更光滑。【结论】将vgb基因整合至枯草芽孢杆菌A5菌株中,可提高A5菌株的脱胶效果。 展开更多
关键词 生物脱胶 果胶酶 枯草芽孢杆菌 vgb基因 同源重组
下载PDF
透明颤菌血红蛋白基因vgb的表达对杨树氮素利用能力的影响
14
作者 刘淳洋 褚延广 +4 位作者 丁昌俊 张伟溪 崔树俊 沈应柏 苏晓华 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期164-169,共6页
以转透明颤菌血红蛋白基因(vgb)京2杨为材料,采用qRT-PCR分析方法确认其外源基因在转基因无性系中可以正常表达。盆栽试验结果显示,在正常生长条件下转基因无性系的株高和地径显著提高,同时叶片全氮质量分数上升。进而利用非损伤微测技... 以转透明颤菌血红蛋白基因(vgb)京2杨为材料,采用qRT-PCR分析方法确认其外源基因在转基因无性系中可以正常表达。盆栽试验结果显示,在正常生长条件下转基因无性系的株高和地径显著提高,同时叶片全氮质量分数上升。进而利用非损伤微测技术(Non-invasive Micro-test Technique,NMT)对植株根部NO3-吸收情况的检测发现,在含有0.5mmol/L NO3-测试液中转基因无性系NO3-吸收速率大于非转基因植株。此外,研究还发现,转基因无性系的硝酸还原酶(nitrate reductase,NR)活性显著提高。可见:vgb的表达能提高杨树的氮素利用能力。 展开更多
关键词 京2杨 透明颤菌血红蛋白基因 非损伤微测技术 氮素利用
下载PDF
转vgb基因油菜的耐涝性
15
作者 李培玉 张锐 +4 位作者 孙国清 马林 薛计雄 林芹 郭三堆 《生物技术进展》 2014年第4期280-285,F0003,共7页
油菜是我国重要的油料作物和蛋白质饲料作物,涝害严重影响了我国油菜产业的发展,提高油菜的耐涝能力对于我国油菜可持续发展具有非常重大的意义。本研究采用PCR、Southern杂交等方法对转vgb基因油菜植株进行鉴定,15 d淹涝实验结果显示,... 油菜是我国重要的油料作物和蛋白质饲料作物,涝害严重影响了我国油菜产业的发展,提高油菜的耐涝能力对于我国油菜可持续发展具有非常重大的意义。本研究采用PCR、Southern杂交等方法对转vgb基因油菜植株进行鉴定,15 d淹涝实验结果显示,转基因油菜的超氧化物歧化酶、丙二醛和脯氨酸含量在淹涝前后的变幅显著低于对照。对淹水后的农艺性状进行调查,转vgb基因的油菜相比较对照抗涝性明显得到增强,证明vgb基因在油菜中的表达对油菜的抗涝性具有显著作用。 展开更多
关键词 转基因 油菜 透明颤菌血红蛋白基因 耐涝
下载PDF
透明颤菌vgb基因的整合对生物法发酵香兰素的影响 被引量:1
16
作者 侯强波 刘昌东 嘉晓勤 《工业微生物》 CAS 2018年第5期8-12,共5页
在以阿魏酸为底物生物法转化香兰素过程中,通过Red重组技术用外源的透明颤菌血红蛋白基因(vgb)取代大肠杆菌基因组icdA基因,使菌株可以适应高密度、低溶氧发酵,为香兰素的发酵生产提供新的尝试。CO差光谱分析显示整合的vgb基因表达产生... 在以阿魏酸为底物生物法转化香兰素过程中,通过Red重组技术用外源的透明颤菌血红蛋白基因(vgb)取代大肠杆菌基因组icdA基因,使菌株可以适应高密度、低溶氧发酵,为香兰素的发酵生产提供新的尝试。CO差光谱分析显示整合的vgb基因表达产生了VHb,且该蛋白具有活性。发酵结果显示表达了vgb基因的新菌株与原重组菌株相比在低氧环境下仍能维持较高的生物量,且香兰素产量由原来的1 668 mg/l上升到2 240 mg/l,提高了约34. 2%。 展开更多
关键词 阿魏酸 香兰素 Red重组技术 vgb基因 CO差光谱
下载PDF
透明颤菌血红蛋白基因在红色糖多孢菌株中表达及对红霉素产量的影响 被引量:6
17
作者 吴益民 王洪军 +5 位作者 孙艳 吴琼 冯立 张志强 杨青 杨国平 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期599-601,614,共4页
目的利用已含有血红蛋白基因(vgb)的红色糖多孢基因工程重组菌,探讨vgb表达产物对重组糖多孢红霉菌提高红霉素产率的影响。方法用SDS-PAGE、Western blot方法鉴定血红蛋白,用葡萄糖浓度与总蛋白质含量比较原始菌株与重组菌株的差别。结... 目的利用已含有血红蛋白基因(vgb)的红色糖多孢基因工程重组菌,探讨vgb表达产物对重组糖多孢红霉菌提高红霉素产率的影响。方法用SDS-PAGE、Western blot方法鉴定血红蛋白,用葡萄糖浓度与总蛋白质含量比较原始菌株与重组菌株的差别。结果红色糖多孢基因工程重组菌与原始菌株比较,重组菌株发酵过程葡萄糖浓度的变化出现在第二时段(约38h),原始菌株达到了0.4g/L,而重组菌株只有0.25g/L;第三时段原始菌株出现了游离葡萄糖浓度高峰而重组菌株未出现。在两个菌株中生物物质浓度[以总蛋白质(g/L)表示]存在不同,重组菌株比原始菌株约低27%。红霉素效价,原始菌株和重组菌株分别为3.98和5.15g/L,相当于重组菌株提高红霉素体积产率约29%。结论重组红色糖多孢菌表达了透明颤菌血红蛋白,提高了红霉素产率,对解决抗生素工业和基因工程菌高密度发酵有良好的应用前景。 展开更多
关键词 透明颤菌 血红蛋白基因 红色糖多孢菌 基因重组
下载PDF
透明颤菌血红蛋白基因在苏云金杆菌中的表达 被引量:5
18
作者 周艳芬 赵晓瑜 +2 位作者 张玉 冯书亮 王容燕 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2006年第1期33-37,共5页
采用大肠杆菌与枯草杆菌的穿梭质粒pMK4作为载体,构建了含有果聚糖酶基因(sacB)启动子和vgb基因的重组质粒pMK-SV.通过原生质体和电转化,将pMK-SV转入苏云金杆菌中,经影印筛选得到转化子Bt4.对Bt4诱导表达,与原菌株相比Bt4的生长量增加... 采用大肠杆菌与枯草杆菌的穿梭质粒pMK4作为载体,构建了含有果聚糖酶基因(sacB)启动子和vgb基因的重组质粒pMK-SV.通过原生质体和电转化,将pMK-SV转入苏云金杆菌中,经影印筛选得到转化子Bt4.对Bt4诱导表达,与原菌株相比Bt4的生长量增加了20.2%. 展开更多
关键词 苏云金杆菌 vgb基因 表达 原生质 电转化
下载PDF
透明颤菌血红蛋白基因在吸水链霉菌NND-52-C中的克隆与表达 被引量:6
19
作者 江曙 陈代杰 +1 位作者 戈梅 黄为一 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期60-63,共4页
将透明颤菌血红蛋白基因 (vgb基因 )克隆至链霉菌的质粒载体pIJ70 2中 ,构建成表达载体pLY70 2 ,并将pLY70 2质粒转化阿扎霉素B的高产菌株———吸水链霉菌NND 5 2 C的原生质体 ,获得转化子H。经发酵实验表明 ,在限氧的条件下 ,可以使N... 将透明颤菌血红蛋白基因 (vgb基因 )克隆至链霉菌的质粒载体pIJ70 2中 ,构建成表达载体pLY70 2 ,并将pLY70 2质粒转化阿扎霉素B的高产菌株———吸水链霉菌NND 5 2 C的原生质体 ,获得转化子H。经发酵实验表明 ,在限氧的条件下 ,可以使NND 5 2 C菌株的生物量提高 14 4 % ,阿扎霉素B的产量提高 30 8%。 展开更多
关键词 vgb基因 吸水链霉菌NND-52-C 阿扎霉素B 溶解氧
下载PDF
透明颤菌血红蛋白基因的克隆及其在林可链霉菌中的表达 被引量:6
20
作者 杨洪涛 刘瑞华 +1 位作者 何建勇 曾红 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期657-662,共6页
目的通过将透明颤菌血红蛋白基因vgb克隆到林可链霉菌染色体黑色素生物合成基因m elC位点,使m elC基因被破坏失活,vgb基因实现表达同时提高林可霉素产量。方法构建大肠杆菌-链霉菌重组质粒pYHT04,通过接合转移实验将重叠延伸PCR得到的... 目的通过将透明颤菌血红蛋白基因vgb克隆到林可链霉菌染色体黑色素生物合成基因m elC位点,使m elC基因被破坏失活,vgb基因实现表达同时提高林可霉素产量。方法构建大肠杆菌-链霉菌重组质粒pYHT04,通过接合转移实验将重叠延伸PCR得到的具有红霉素抗性基因启动子的透明颤菌血红蛋白基因,以双交换的方式整合进林可链霉菌黑色素生物合成基因m elC中。采用不同装瓶量摇瓶发酵,HPLC检测发酵液中林可霉素含量。结果重组菌株颜色变浅,CO结合差光谱显示在420 nm处有明显吸收峰,随着装瓶量的增加重组菌株发酵液中林可霉素效价与对照菌株相比降低幅度较小。结论重组菌株m elC基因失活不能继续合成黑色素,vgb基因得到表达并表现出生物学功能,限氧条件下重组菌株发酵液中林可霉素效价高于对照菌株,有希望应用于工业发酵生产。 展开更多
关键词 林可链霉菌 林可霉素 透明颤菌血红蛋白基因vgb 黑色素
下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部