活性染料S、E、F、R值测试与配伍性能研究

本文采用活性染料特征值S、E、F、R(S-直接性值,E-吸尽值,F-固色值,R-固色速率)来评价染料的配伍性,选择双活性基型活性染料,按一定工艺处方,浸染纯棉织物,测定各染料S、E、F、R值。通过测试出的S、E、F、R值选择一些染料进行组合、拼色和研究,通过实验证明,用S、E、F、R值相近的染料拼色,染色时均匀上色,色相变化很小,而用S、E、F、R值相差大的染料拼色,染色过程中色差变化很大,染色难以控制。

核转录因子E2F2在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨核转录因子E2F2在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测33例卵巢浆液性囊腺癌、11例卵巢交界性浆液性囊腺瘤、13例卵巢浆液性囊腺瘤以及12例正常卵巢组织中E2F2蛋白的表达。结果:E2F2蛋白在卵巢浆液性囊腺癌、交界性浆液性囊腺瘤、浆液性囊腺瘤以及正常卵巢组织中的阳性表达率分别为72.73%(24/33)、54.55%(6/11)、15.38(2/13)%和8.3%(1/11),E2F2蛋白在卵巢浆液性囊腺癌组织、交界性浆液性囊腺瘤组织中的阳性表达率明显高于在浆液性囊腺瘤、正常卵巢组织中的阳性表达率(P均<0.05),卵巢浆液性囊腺癌组的阳性表达率值虽然高于交界性浆液性囊腺瘤组,但是两组之间差异无统计学意义(P>0.05),浆液性囊腺瘤的阳性表达率接近正常卵巢组的2倍,但是两组之间的阳性表达率差异也无统计学意义(P>0.05);在卵巢浆液性囊腺癌组织中,E2F2蛋白的阳性表达率随手术病理分期的增加而增加(P<0.05),但与病理分级以及有无淋巴结转移无关(P均>0.05);在卵巢浆液性囊腺癌组织中,E2F2蛋白的表达水平随手术病理分期的增加、病理分级降低而增加(P均<0.05),与有无淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:在卵巢浆液性囊腺癌组织、交界性浆液性囊腺瘤组织中核转录因子E2F2呈现明显的高表达,且其表达水平与手术分期、病理分级相关,提示E2F2在卵巢癌的发生发展中起到促进作用。

温针灸联合四逆汤加味治疗寒凝血瘀型原发性痛经的疗效及对患者中医证候、血清PGE2和PGF2a水平的影响

目的观察温针灸联合四逆汤加味治疗寒凝血瘀型原发性痛经的疗效,并探讨其对患者中医证候、血清前列腺素E2(PGE2)和前列腺素F2a(PGF2a)水平的影响。方法选择2017年5月至2020年7月北京中医药大学孙思邈医院收治的100例寒凝血瘀型原发性痛经患者为研究对象,采用随机数表法分为观察组和对照组,每组50例。对照组给予布洛芬治疗,观察组给予温针灸联合四逆汤加味治疗。治疗2个月经周期后比较两组患者的治疗效果,治疗前后中医证候积分和血清PGE2和PGF2a水平、视觉模拟疼痛量表(VAS)评分以及不良反应发生情况。结果观察组患者的治疗总有效率为94.0%,明显高于对照组的78.0%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组患者的小腹冷痛、肛门坠胀、肢体畏寒、腰骶酸痛等积分均降低,且观察组各项积分[(1.03±0.16)分、(1.59±0.32)分、(1.22±0.36)分、(1.21±0.19)分]明显低于对照组[(1.58±0.21)分、(1.98±0.33)分、(1.72±0.28)分、(1.52±0.27)分],差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后两组患者的PGE2升高,且观察组的PGE2为(29.67±3.87)g/mL,明显高于对照组的(25.87±3.19)g/mL,而PGF2a及VAS评分降低,且观察组患者的PGF2a及VAS评分分别为(28.34±3.11)g/mL、(2.11±0.51)分,明显低于对照组的(34.76±2.98)g/mL、(2.99±0.47)分,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者的不良反应发生率为4.0%,明显低于对照组16.0%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温针灸联合四逆汤加味治疗寒凝血瘀型原发性痛经疗效显著,其可有效降低患者的中医证候积分,调节血清PGE2和PGF2a水平,缓解疼痛,安全性高。

原发性高血压患者血清血栓素B2、6-酮-前列腺素F_(1α)和前列腺素E_2变化研究

目的 探讨原发性高血压 (EH)患者血清血栓素 B2 (TXB2 )、6 -酮 -前列腺素 F1α(6 - K- PGF1α)和前列腺素 E2 (PGE2 )水平的变化及其临床意义。方法 采用放射免疫法测定 88例 EH患者和 30例非高血压患者的血清TXB2 、6 - K- PGF1α和 PGE2 水平 ,进行对照统计分析。结果 EH组血清 TXB2 水平显著高于对照组 (t=2 .0 31,P<0 .0 5 ) ,6 - K- PGF1α水平显著低于对照组 (t=2 .5 36 ,P<0 .0 1) ,PGE2 差异无显著性 (P>0 .0 5 )。三者之间及三者与平均动脉压 (MAP)间均无显著相关性 (P>0 .0 5 )。 期组 TXB2 显著高于 期组 (t=2 .137,P<0 .0 5 ) ,但 、 、 期组间血清 TXB2 、6 - K- PGF1α和 PGE2 变化无特殊规律 (方差检验示 :FTXB2 =1.973,P>0 .0 5 ;F6- K- PGF 1α=0 .2 71,P>0 .0 5 ;FPGE2 =0 .838,P>0 .0 5 )。有无心脑血管并发症组间血清 TXB2 、6 - K- PGF1α和 PGE2 差异无显著性 (t=1.778,t=1.0 0 6 ,t=0 .30 1;P均 >0 .0 5 )。结论 EH组血清 TXB2 水平显著高于对照组 ,6 - K- PGF1α水平显著低于对照组 , 期组 TXB2 显著高于 期组 ;通过对 EH患者血清 TXB2 、6 - K- PGF1α和 PGE2 变化的观察 ,为基础与临床研究提供了一组数据 ,有助于其病理机理的研究。

转录因子E2F1在上皮性卵巢癌中的表达及其意义

目的:探讨上皮性卵巢癌中E2F1的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化的技术对正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤、交界性卵巢肿瘤、原发上皮性卵巢癌中E2F1的表达进行检测,并结合临床病理资料通过统计学方法分析其表达情况,以及其与正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤、交界性卵巢肿瘤及与原发上皮性卵巢癌的分期、病理分型、淋巴结转移、远处转移之间的相互关系。结果:在正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤组织、交界性卵巢肿瘤及原发上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率分别为16·7%(1/6)、40%(4/10)、60%(6/10)、81·3%(26/32),差异有显著性(P<0·05)。原发上皮性卵巢癌组织中E2F1的表达在不同的临床病理特征之间差异无显著性(P>0·05)。结论:原发上皮性卵巢癌中E2F1属于癌基因,其超表达和反常表达与原发上皮性卵巢癌的发生有关。

肝癌细胞系中miR-9和转录因子E2F1的表达及其与药物敏感性的关系

目的:研究肝癌细胞系中微小RNA(microRNA,miR)-9和转录因子E2F1的表达及其与药物敏感性的关系。方法:体外培养肝细胞系HL-7702,肝癌细胞系HepG2、Hep3B2.1-7,处理细胞分miRNA NC组、miR-9 inhibitor组、顺铂(CDDP)组、CDDP+miRNA NC组、CDDP+miR-9 inhibitor组。实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测miR-9表达水平;免疫印记(Western blot,WB)法检测E2F1蛋白水平;CCK-8法检测miR-9对细胞存活的影响;克隆计数检测miR-9对细胞数量的影响。结果:与正常肝细胞系HL-7702相比,肝癌细胞系HepG2、Hep3B2.1-7中miR-9、E2F1蛋白水平升高(P<0.05)。在HepG2、Hep3B2.1-7细胞系中,与miRNA NC组相比,miR-9 inhibitor组、CDDP+miR-9 inhibitor组miR-9、E2F1蛋白表达水平、细胞克隆数量降低(P<0.05)。与miR-9 inhibitor组相比,CDDP组、CDDP+miRNA NC组miR-9、E2F1蛋白表达水平、细胞克隆数量升高(P<0.05);CDDP+miR-9 inhibitor组细胞克隆数量、48 h细胞OD450降低(P<0.05);与CDDP组、CDDP+miRNA NC组相比,CDDP+miR-9 inhibitor组miR-9、E2F1蛋白表达水平、细胞克隆数量降低(P<0.05)。在HepG2细胞系中,与miRNA NC组、CDDP组、CDDP+miRNA NC组相比,miR-9 inhibitor组、CDDP+miR-9 inhibitor组(12、24、48 h)细胞OD450降低(P<0.05)。在Hep3B2.1-7细胞系中,与miRNA NC组相比,miR-9 inhibitor组(12、24、48 h)、CDDP+miR-9 inhibitor组(6、12、24、48 h)细胞OD450降低(P<0.05);与CDDP组相比,miR-9 inhibitor组(12、24、48 h)、CDDP+miR-9 inhibitor组(3、6、12、24、48 h)细胞OD450降低(P<0.05);与CDDP+miRNA NC组相比,miR-9 inhibitor组(24、48 h)、CDDP+miR-9 inhibitor组(12、24、48 h)细胞OD450降低(P<0.05)。结论:肝癌细胞系HepG2、Hep3B2.1-7中miR-9和E2F1表达上调;干扰miR-9可抑制E2F1表达,抑制细胞增殖、抑制细胞克隆形成,提高药物敏感性。

基于生信数据库探究E2F3在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的探讨转录因子E2F3在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达及临床意义。方法在癌症基因组图谱(TCGA)数据库及基因表达数据库(GEO)中分析E2F家族成员在EOC组织与正常组织中的表达差异及临床意义,同时借助生物信息数据库预测E2F3的转录调控靶点。应用RT-qPCR和Western blot检测EOC及对照组中转录因子E2F3及其靶基因的mRNA及蛋白表达水平。结果TCGA数据信息结合GEO测序结果提示,与对照组相比在EOC中E2F1、E2F3呈现显著高表达(P<0.05),且均具有良好的诊断价值(AUC=0.964、AUC=0.967),E2F3高表达组中患者预后较差。联合JASPAR及Cistrome DB数据库预测E2F3转录调控靶基因ERCC1,且二者呈负相关(R=-0.243、P<0.001)。与对照组相比,EOC中E2F3与ERCC1的mRNA及蛋白表达水平均显著增高(P<0.05)。结论转录因子E2F3可靶向调控ERCC1,在EOC中呈现高表达,且与预后不良相关,可作为EOC早期诊断和治疗的潜在靶点。

SBF2-AS1在食管鳞癌中的表达变化及其对肿瘤细胞KYSE410增殖、放疗敏感性的影响

目的观察长链非编码RNA SBF2-AS1在食管鳞癌中的表达变化及其对食管鳞癌细胞增殖、放疗敏感性的影响,并探索可能的机制。方法采用qRT-PCR法检测食管鳞癌组织和食管鳞癌细胞KYSE410中的SBF2-AS1,分析食管鳞癌组织中SBF2-AS1表达与肿瘤临床病理参数的关系。培养KYSE410细胞并分为siRNA-SBF2-AS1组、NC组,分别转染siRNA-SBF2-AS1、NC,分别于转染24、48、72、96 h后检测细胞增殖能力。对两组细胞给予X线照射,测算不同照射条件下的细胞增殖率和凋亡率;绘制单击多靶模型拟合细胞存活曲线得出D0(终斜率的倒数)、Dq(准阈剂量)、SF2(离体肿瘤培养细胞经2 Gy照射后的SF),计算放射增敏比;检测细胞中的E2F转录因子1(E2F1)蛋白。结果食管鳞癌组织和细胞中SBF2-AS1表达高于癌旁正常组织和食管正常上皮细胞(P均<0.05)。肿瘤直径>5 cm者、T3~T4期者SBF2-AS1相对表达量分别高于直径≤5 cm者、T1~T2期者(P均<0.05)。转染24、48、72、96 h后siRNASBF2-AS1组细胞增殖能力低于NC组(P均<0.05)。不同X线照射条件的siRNA-SBF2-AS1组细胞增殖率、E2F1蛋白表达均低于NC组,细胞凋亡率高于NC组;照射后细胞增殖率和E2F1蛋白表达低于未照射细胞,细胞凋亡率高于未照射细胞(P均<0.05)。siRNA-SBF2-AS1组细胞D0、Dq、SF2低于NC组(P均<0.05),放射增敏比为2.00±0.10。结论SBF2-AS1在食管癌组织和细胞中高表达;下调SBF2-AS1表达可抑制食管鳞癌细胞增殖,提高放疗敏感性,其机制可能与调控E2F1蛋白表达有关。

中药熏蒸疗法对气滞血瘀型原发性痛经患者PGE2、PGF2α、β-EP的影响

目的 研究中药熏蒸疗法对气滞血瘀型原发性痛经患者血清前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2α(PGF2α)、β-内啡肽(β-EP)的影响.方法 选取苏州大学医院妇科2018年1月至2019年6月收治的68例气滞血瘀型原发性痛经患者为研究对象,按照数字表法随机分为参照组和观察组,各34例.参照组予以布洛芬口服进行治疗,观察组在参照组的基础上加用中药熏蒸疗法进行治疗,治疗周期为2个月.比较2组治疗后临床疗效,比较2组治疗前后的中医症状积分及血清PGE2、PGF2α、β-EP水平变化,并观察2组治疗过程中不良反应发生情况.结果 观察组总有效率为91.17%,显著高于参照组的(67.65%,P<0.05);与治疗前比,治疗后2组食欲不振、头晕头痛、乳房胀痛、腰骶酸痛及四肢发冷积分均降低,且观察组显著低于参照组(P<0.05);与治疗前比,治疗后2组血清PGE2、β-EP水平均升高,且观察组显著高于参照组,血清PGF2α水平均降低,且观察组显著低于参照组(P<0.05);观察组不良反应发生率为2.94%,显著低于参照组的(17.64%,P<0.05).结论 中药熏蒸疗法可有效调节气滞血瘀型原发性痛经患者血清PGE2、PGF2α、β-EP水平,缓解临床症状,疗效显著,且不良反应少,安全可靠.

E2F⁃3、E2F⁃4蛋白在透明细胞性肾细胞癌中的表达及临床意义

目的通过检测E2F3、E2F4蛋白在透明细胞性肾细胞癌(ccRCC)及相应癌旁组织中的表达情况,探讨E2F3、E2F4蛋白与ccRCC发生发展的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测147例ccRCC及相应癌旁组织中E2F3、E2F4蛋白的表达情况,进一步分析与ccRCC患者临床病理特征的关系。结果E2F3蛋白在ccRCC组织中的阳性率(76.19%)明显高于癌旁组织(18.37%),差异具有显著统计学意义(P<0.001)。E2F4在ccRCC组织中的阳性率(68.71%)明显高于相应的癌旁组织阳性率(28.57%),差异具有显著统计学意义(P<0.001)。E2F3的表达强度与WHO/ISUP分级、临床分期、肿瘤大小、肿瘤性坏死、肾静脉内癌栓相关(P<0.05);而与年龄、性别、有无淋巴结转移、有无远处转移无关(P>0.05)。E2F4的表达强度与WHO/ISUP分级、肿瘤大小、肾静脉内癌栓相关(P<0.05);而与年龄、性别、临床分期、有无淋巴结转移、远处转移、肿瘤性坏死无关(P>0.05)。E2F3、E2F4蛋白表达的相关性检验显示,二者表达无明显相关性(rs=0.105,P=0.206)。结论E2F3、E2F4可能参与了ccRCC的发生及进展,二者表达无明显协同作用。

消化性溃疡并发上消化道出血的危险因素及其与血清PGE 2、6-Keto-PGF 1α的关系

目的分析消化性溃疡(PU)并发上消化道出血(UGIB)的危险因素,并探讨其与血清前列腺素E 2(PGE 2)、6-酮前列腺素F 1α(6-Keto-PGF 1α)水平变化的关系。方法选取PU患者298例,其中并发UGIB 69例;收集并对比PU并发与未并发UGIB患者基线资料,对有意义的资料进一步行Logistic多因素回归分析;采用ELISA法检测患者血清PGE 2、6-Keto-PGF 1α水平,分析其与危险因素的相关性及预测PU并发UGIB的价值。结果PU并发与未并发UGIB患者基线资料比较,在家族史、婚姻情况、溃疡位置方面差异无统计学意义,在性别、年龄、病程、职业、有无非甾体类抗炎药(NSAIDs)使用、有无幽门螺旋杆菌(Hp)感染、是否长期吸烟、是否嗜酒、是否喜好刺激性食物、是否生活不规律、溃疡直径、溃疡分期、有无不良情绪方面差异有统计学意义(P均<0.05);Logistic多因素回归分析显示,NSAIDs使用、Hp感染、长期吸烟、嗜酒、喜好刺激性食物、溃疡直径≥20 mm、溃疡处于活动期、不良情绪均为PU并发UGIB危险因素(P均<0.05)。与PU未并发UGIB患者比较,并发UGIB患者血清PGE 2、6-Keto-PGF 1α水平均降低(P均<0.05);血清PGE 2、6-Keto-PGF 1α水平与Hp感染呈负相关,与NSAIDs使用呈正相关(P均<0.05);二者联合检测预测PU并发UGIB的曲线下面积均大于血清单一指标,灵敏度为71.01%,特异度为91.70%。结论NSAIDs使用、Hp感染、长期吸烟、嗜酒、喜好刺激性食物、溃疡直径≥20 mm、溃疡处于活动期、不良情绪均为PU并发UGIB的独立危险因素;PU并发UGIB患者血清PGE 2、6-Keto-PGF 1α水平降低,且与NSAIDs使用、Hp感染有关,二者联合检测对预测PU并发UGIB有一定价值。

肝细胞性肝癌中E2F8基因受表观遗传学调控的特征

目的研究在肝细胞性肝癌中表观遗传性调控E2F8基因表达的特征,包括E2F8基因启动子区域甲基化状态、靶向调控E2F8基因的微小RNA(microRNA)在肝细胞性肝癌中的表达谱。方法分析E2F8基因启动子区域DNA序列的CpG位点分布特征,亚硫酸氢盐修饰DNA后,测序检测肝细胞性肝癌患者的癌组织与癌旁组织中E2F8基因转录起始点处DNA甲基化修饰状态的差异;利用3种不同方法预测靶向结合E2F8基因mRNA的3'-非翻译区域(3'-UTR)的microRNAs,结合肝细胞性肝癌microRNAs芯片表达数据,初步推测肝细胞性肝癌中异常表达microRNAs调控E2F8基因表达的可能性。结果在E2F8高表达的肝细胞性肝癌病例中,癌组织中E2F8基因转录起始位点附近的DNA甲基化程度显著低于癌旁组织中(P<0.05);采用3种不同的方法独立预测靶向调控E2F8的microRNAs,其中7个microRNAs在3种方法中的靶基因均为E2F8,12个microRNAs在两种方法中的靶基因为E2F8。分析肝细胞性肝癌microRNAs表达芯片数据,发现与正常肝脏相比,miR-23b、miR-340、miR-448、miR-499-3p、miR-520d-5p在肝细胞性肝癌组织中的表达量显著下调。结论肝细胞性肝癌中的异常表观遗传学事件可引起E2F8基因的表达上调。

隔药灸关元穴对原发性痛经大鼠疼痛反应与血清β-EP、子宫PGE2/PGF2α、脾脏NK细胞活性的影响

目的观察隔药灸关元穴对原发性痛经大鼠扭体反应、血清β-内啡肽(β-EP)、子宫组织前列腺素E2(PGE2)/前列腺素F2α(PGF2α)、脾脏NK细胞活性的影响,探讨隔药灸关元治疗原发性痛经的效应机制以及与直接灸关元的效应差异。方法32只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、隔药灸关元组、直接灸关元组,每组8只;皮下注射苯甲酸雌二醇联合腹腔注射缩宫素建立原发性痛经大鼠模型。隔药灸关元组采用艾炷隔药灸"关元"穴,直接灸关元组采用艾炷直接灸"关元"穴,均每日1次,每次7壮,连续10 d。末次治疗结束后,记录30 min内各组大鼠扭体次数,ELISA测定各组大鼠血清β-EP、子宫组织PGE2、PGF2α含量,MTT比色法检测脾脏NK细胞活性。结果与空白对照组比较,模型组大鼠30 min内扭体次数明显增加(P<0.01),提示造模成功;血清β-EP与子宫组织PGE2含量均显著降低(P<0.01),子宫组织PGF2α含量显著升高(P<0.01),脾脏NK细胞活性显著降低(P<0.01)。治疗结束后,与模型组比较,隔药灸关元组与直接灸关元组30 min内扭体次数明显减少(P<0.01),血清β-EP与子宫组织PGE2含量明显增加(P<0.01),子宫组织PGF2α含量明显降低(P<0.01),脾脏NK细胞活性明显升高(P<0.01)。与直接灸关元组比较,隔药灸关元组脾脏NK细胞活性更高(P<0.05)。结论隔药灸关元治疗原发性痛经作用显著,其机制可能是通过提高血清β-EP、子宫PGE2含量与脾脏NK细胞活性,降低子宫PGF2α含量实现;隔药灸关元穴与直接灸关元穴镇痛效应相当,但隔药灸对PD大鼠NK细胞活性影响优于直接灸,可能与隔药灸中药物的参与等因素有关。

人乳头瘤病毒感染与宫颈病变患者C反应蛋白、辅助性T17细胞、前列腺素E2及E2F转录因子-1的关系研究

目的研究人乳头瘤病毒(HPV)感染与宫颈病变患者C反应蛋白(CRP)、辅助性T(Th)17细胞、前列腺素E_(2)(PGE_(2))及E2F转录因子-1(E2F-1)的关系。方法选取2017年1月至2020年1月承德市第三医院收治的120例HPV感染宫颈病变患者设为观察组,根据HPV感染类型分为低危型组(n=55)和高危型组(n=65)。选择同期60例无HPV感染的宫颈病变患者设为对照组。比较各组CRP、Th17细胞及PGE_(2)水平,分析HPV感染与宫颈病变患者CRP、Th17细胞、PGE_(2)及E2F-1的相关性。结果低危型组、高危型组CRP、Th17细胞、PGE_(2)水平及E2F-1蛋白阳性表达率均高于对照组,且高危型组均高于低危型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Pearson检验结果显示,HPV感染与宫颈病变患者CRP、Th17细胞、PGE_(2)水平及E2F-1蛋白阳性表达率呈正相关(P<0.05)。结论HPV感染与宫颈病变患者CRP、Th17细胞、PGE_(2)水平及E2F-1蛋白阳性表达密切相关,随着疾病的进一步深入变化,CRP、Th17细胞、PGE_(2)水平及E2F-1蛋白阳性表达率不断升高,或与患者免疫调节失衡有关。

环加氧酶-2碱性成纤维细胞生长因子及E2F1基因在急性髓性白血病中的表达及其与预后的关系

急性髓性白血病是一种髓系造血干/祖细胞的恶性疾病,以骨髓与外周血中原始和幼稚髓性细胞异常增生为主要特征,临床表现为贫血、出血、感染和发热、脏器浸润、代谢异常等[1]。环加氧酶-2(COX-2)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、E2F1基因与白血病的发生发展及预后密切相关[2,3]。本研究旨在分析COX-2、bFGF及E2F1基因在急性髓性白血病中的表达及其与患者预后的关系。

E2F3a功能域缺失对细胞柔红霉素敏感性的影响

目的探讨E2F3a功能域缺失与细胞柔红霉素(daunorubicin)敏感性的关系。方法将E2F3a的野生型及4种缺失突变体分别转入293T细胞,同时转染空载作为阴性对照,4种突变体分别缺失N端、DNA结合域(DNA-binding domain,DBD)、异二聚化域(heterodimerization domain,HD)和反式激活域(trans-activation domain,TA)。在E2F3a表达到峰值时,经不同浓度柔红霉素作用36 h,采用MTS[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-car-boxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,inner salt]方法检测细胞存活率和半数抑制浓度(IC_(50))。结果MTS结果显示,过表达E2F3a野生型以及4种缺失突变体的293T细胞在柔红霉素作用后的存活率明显低于转染空载体的细胞,IC_(50)值显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与WT-E2F3a相比,过表达E2F3a-ΔN细胞的存活率明显升高(P=0.012),IC_(50)值也显著增高。相反,过表达E2F3a-ΔTA细胞的存活率明显低于过表达WT-E2F3a(P=0.031),IC_(50)值也显著降低。而过表达突变体E2F3a-ΔDBD、E2F3a-ΔHD的细胞存活率与WT-E2F3a比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论过表达野生型及缺失突变体的E2F3a可提高293T细胞对柔红霉素的敏感性。E2F3a的N端缺失可下调293T细胞对柔红霉素的敏感性,而TA功能域的缺失可上调细胞对柔红霉素的敏感性。

miR-26a通过NRAS和E2FE途径增强胃癌细胞对顺铂敏感性的研究

目的探讨mi R-26a通过NRAS和E2FE途径增强胃癌细胞对顺铂的敏感性。方法实时定量PCR检测mi R-26a在顺铂耐药细胞株SGC-7901/DDP和非耐药SGC-7901细胞株中的表达;MTS法分析mi R-26a对顺铂敏感性的影响;膜联蛋白/碘化丙啶(PI)双染色法和流式细胞仪检测调亡。荧光素酶报告性分析和基因检测鉴定mi R-26a靶标;另外,MTS和细胞凋亡分析评估NRAS和E2F2化疗的敏感性。结果与SGC-7901细胞比,mi R-26a在SGC-7901/DDP中的表达降低。运用功能获得和失活实验分析,证实了mi R-26a能增强胃癌细胞对顺铂的敏感性。同时发现NRAS和E2F2的3′-UTR端存在mi R-26a靶位点,且mi R-26a能下调NRAS和E2F2的表达。此外,敲除NRAS或E2F2可增加胃癌细胞对顺铂敏感。结论通过mi R-26a的靶标NRAS和E2F2能增强胃癌细胞对基于顺铂化疗的敏感性;同时,证明了mi R-26a可作为胃癌化疗的潜在增敏剂。

壮医药线点灸治疗寒湿凝滞型痛经临床疗效及对PGF_(2α)、PGE_2的影响

目的:观察壮医药线点灸治疗寒湿凝滞型原发性痛经的临床疗效及对前列腺素(PG)的影响。方法:将120例确诊为原发性痛经,中医辨证属寒湿凝滞型的患者随机分为2组各60例,治疗组采用壮医药线点灸的方法治疗,对照组采用口服温经颗粒治疗,观察2组临床疗效,并随机对2组各60例患者治疗前后及无痛经的正常组30例行经期血清前列腺素F2α(PGF2α)、前列腺素E2(PGE2)含量进行检测。结果:2组临床疗效比较,差异有非常显著性意义(P<0.01),治疗组优于对照组。2组治疗后痛经症状积分均较治疗前下降,差异有非常显著性意义(P<0.01),且治疗组痛经症状积分低于对照组,差异有非常显著性意义(P<0.01),2组痛经症状积分治疗前后差值比较,差异有非常显著性意义(P<0.01)。2组治疗后PGE2含量增高,PGF2α及PGF2α/PGE2下降,与治疗前比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。2组3个指标治疗前后差值分别比较,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论:壮医药线点灸治疗寒湿凝滞型原发性痛经疗效显著,其作用机制可能与调节患者异常的PGF2α和PGE2水平,降低PGF2/PGE2有关。

E2F1介导8-氯-腺苷引起的人肺癌细胞H1299的凋亡

8-氯-腺苷(8-Cl-adenosine,8-Cl-Ado)可诱导人非小细胞性肺癌细胞H1299发生凋亡,但其分子机制还没有阐明.首先用四唑盐(MTT)比色法检测了8-Cl-Ado对H1299细胞的生长抑制作用.进一步采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测了8-Cl-Ado处理H1299细胞后,procaspase-3的激活情况以及E2F1的蛋白水平.通过用pcDNA-HA-E2F1表达载体和pSUPER-E2F1 RNA干扰载体分别转染H1299细胞,研究在E2F1过表达和RNA干扰(RNAinterference,RNAi)两种情况下对凋亡的影响.实验结果表明,8-Cl-Ado可抑制H1299细胞的生长,激活凋亡关键执行蛋白procaspase-3,升高E2F1蛋白水平.当E2F1过表达后,同时伴有procaspase-3的激活,而E2F1表达受到抑制后,与对照相比,8-Cl-Ado引起的procaspase-3的激活被明显抑制,说明E2F1介导8-Cl-Ado引起的人肺癌细胞H1299的凋亡.

原癌基因Pokemon及核转录因子E2F3在喉鳞癌中的表达及其临床意义

目的探讨POK红系髓性致癌因子(POK erythroid myeloid ontogenic factor,Pokemon)及核转录因子E2F3(E2Ftranscrip tion factor 3)在喉鳞癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化Max Vision二步法观察61例喉鳞癌组织及46例癌旁正常喉黏膜组织中Pokemon及E2F3的表达,并结合患者年龄、性别、原发部位、TNM分期、临床分期及预后之间的关系进行分析。结果 Pokemon及E2F3在喉鳞癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常喉黏膜组织中的阳性表达率(P<0.001);颈淋巴结转移(N+)、中低分化、临床晚期(Ⅲ+Ⅳ)喉鳞癌患者中Pokemon及E2F3表达强度增强(P<0.05);Pokemon及E2F3阳性表达患者的5年累积生存率较阴性表达患者低(P<0.05)。结论 Pokemon与E2F3在喉鳞癌组织中高表达,并与其预后不良相关。两者可能在喉鳞癌发生及恶性进展过程中发挥重要作用,有望成为喉鳞癌发病机制及分子靶向治疗的新指标。