CD4^＋CD25^＋CD127^low识别人外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的优势

目的:探索可用于检测人外周血中CD4+CD25+Treg细胞的最佳标记物。方法:以52名健康人和47名非血液系统肿瘤患者为研究对象,采用多色免疫荧光素标记和多参数流式细胞术同时检测外周血中CD4+CD25high、CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127lowT细胞,并以经典指标CD4+CD25high和CD4+CD25+FoxP3+为标准,分析和比较CD4+CD25+CD127low作为识别CD4+CD25+Treg细胞的可行性及其优势。结果:健康人和肿瘤患者外周血CD4+CD25high、CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127lowT细胞占CD4+T细胞百分比分别为(1.769±0.682)和(2.958±1.392);(2.905±1.772)和(5.128±2.227)以及(5.396±1.306)和(7.175±2.565)。三者呈相同的趋势,即肿瘤患者组>健康人组,且三者之间呈显著正相关(P<0.05)。用两种不同标记法高纯度分选CD4+CD25high和CD4+CD25+CD127lowT细胞群后,FoxP3阳性率分别为90.9和92.7。结论:CD4+CD25+CD127low三标记法可以帮助识别CD4+CD25+Treg和部分激活的CD4+T细胞,提高CD4+CD25+Treg细胞的可检出数量,并且不影响细胞活性度,是反映CD4+CD25+Treg细胞更理想的指标。

再生障碍性贫血患者CD4^＋CD25^＋CD127^low调节性T细胞及Notch1表达水平的变化

目的测定再生障碍性贫血（AA）患者治疗前后外周血CD4^＋CD25^＋CD127^low调节性T细胞（Treg）的数量及叉头翼状螺旋转录因子（FOXP3）mRNA、Notch1 mRNA的表达水平，探讨Treg在AA发病中的作用及其机制。方法流式细胞术检测29例初发AA患者、14例环孢素（CsA）治疗后恢复期及11例治疗后未恢复期患者外周血中CD4^＋CD25^＋CD127^lowT细胞、CD4^＋CD25^T细胞的数量，并与正常对照比较；采用RT-PCR检测FOXP3 mRNA和Notch1 mRNA的表达水平，分析两者相关性。结果AA初发组及治疗后未恢复组患者外周血中活化CD4^＋CD25^T细胞占CD4^＋T细胞比例分别为（4．3±0．7）％、（4．2±0．6）％，明显高于正常对照组[（2．4±0．8）％]（P〈0．05）。CsA治疗后恢复组患者比例下降为（2．6±0．7）％（P〈0．05），与对照组比较差异无统计学意义。AA初发组及未恢复组CD4^＋CD25^＋CD127^lowT细胞在CD4^＋T细胞中的比例分别为（2．4±1．2）％、（2．5±1．1）％，较正常对照组[（7．1±2．7）％]及恢复组[（5．3±1．0）％]明显降低（P值均〈0．01）；但后两组比较差异无统计学意义。AA初发组患者FOXP3 mRNA及Notch1 mRNA分别为（0．260±0．011）和（0．018±0．005），较正常对照[（1．307±0．011）和（0．308±0．028）]表达明显下调（P值均〈0．01），治疗后分别为（1．287±0．012）和（0．281±0．013），表达较初发组显著提高（P值均〈0．01），与对照组比较差异无统计学意义（P值均〉0．05）。AA患者CD4^＋CD25^＋CD127^lowT细胞、FOXP3均与Notch1表达呈正相关性（P值均〈0．01）。结论AA患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lowTreg减少，其抑制作用减弱，导致自身反应性T细胞过度活化，抑制造血。其作用机制之一可能与靶细胞表面Notch1分子表达降低相关。

CD4^＋CD25^＋CD127^low/-T淋巴细胞在类风湿关节炎患者外周血中的表达及意义

目的检测调节性T淋巴细胞新旧标志在活动性类风湿关节炎（RA）患者外周血中的表达，探讨用CD127代替FOXP3对调节性T淋巴细胞进行研究的可能性。方法选取活动性RA患者32例，其中未经缓解病情抗风湿药（DMARDs）治疗者20例，经DMARDs治疗效果不佳者12例，以25例原发性干燥综合征（pSS）患者和24名健康人作为对照，采用流式细胞术检测外周血中CD4^＋CD25^high、CD4^＋CD25^＋CD127^low／-及CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T淋巴细胞的比例，同时检测外周血C反应蛋白（CRP）、红细胞沉降率（ESR）、免疫球蛋白、补体等水平并进行相关性分析。结果RA患者CD4^＋CD25^highT淋巴细胞百分率与健康对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05），其CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T淋巴细胞与CD4^＋CD25^＋CD127^low-T淋巴细胞的百分率均低于健康对照组（P〈O．05），但CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋、CD4^＋CD25^＋CD127^low-T淋巴细胞在RA患者与pSS患者中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）；这三群细胞的表达水平在RA未经治疗组和治疗效果不佳组之间差异均无统计学意义（P〉0．05）。RA患者CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T淋巴细胞与CD4^＋CD25^＋CD127^low-T淋巴细胞之间呈明显正相关（r=0．698，P=0．001），但这两群细胞与患者的CRP、ESR等水平及抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体、类风湿因子（RF）均无相关性（P〉0．05）。结论活动性RA患者外周血中，CD4^＋CD25^＋CD127^low-T淋巴细胞的百分率降低，并且与CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T淋巴细胞呈显著正相关性，提示CD127可能被作为Treg细胞中FOXP3的替代标记。

慢性B淋巴细胞白血病CD4^＋CD25^＋highCD127^Low和CD19^＋-CD23^＋的相关性研究

目的通过研究慢性B淋巴细胞白血病（chronic B cell lymphocytic leukemia，B—CLL）CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low和CD19^＋CD23^＋的相关性，探讨CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low在B—CLL发生发展过程中的作用。方法将20例初次发病的B—CLL患者按临床分期的不同分为O-II期组、III-IV期组，设立正常对照组，应用流式细胞仪检测各组的研究对象外周血中CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low、CD19^＋、CD19^＋CD23^＋的表达量，比较各组间的差异。结果B—CLL O-II期组、III-IV期组患者外周血中CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low、CD19^＋、CD19^＋CD23^＋的表达量均明显高于正常对照组；B—CLL患者III-IV期组的CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low、CDl9^＋、CDl9^＋CD23^＋表达量明显高于O-II期组；CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low、CDl9^＋CD23^＋有明显的正相关性。结论B—CLL患者外周血中CD4^＋CD25^＋highCD127^Low的表达量增高，与CD19^＋、CD19^＋CD23^＋的表达量增高明显相关，可能是B—CLL患者CD19^＋CD23^＋克隆性增生原因之一．

CD4^＋ CD25^ ＋CD127^low/-调节性T细胞在乳腺癌患者外周血的表达及临床意义

目的探讨CD4^＋ CD25^ ＋CD127^low/-调节性T细胞（regulatory Tcells，Treg）、T细胞亚群在乳腺癌患者外周血的表达及临床意义，并进行手术前、手术后、TNM分期的对比分析。方法应用流式细胞术检测57例乳腺癌患者、60例正常妇女外周血CD4^＋ CD25^ ＋CD127^low/-调节性T细胞和淋巴细胞亚群表达百分率。其中乳腺癌患者于手术前、手术后两个时间点分别采血。结果乳腺癌患者、健康志愿者外周血CD4’CD25’CDl27““。调节性T细胞占CD4^＋淋巴细胞的比例分别为（6．92±1．51）％、（4．38±1．31）％。乳腺癌患者CD4^＋ CD25^ ＋CD127^low/-调节性T细胞表达高于健康对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），CD3^＋CD4^＋细胞低于健康对照组，差异有统计学意义（P〈0．05），NK细胞（CD3-／CD16＋56＋）明显降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。Treg细胞与CD3^＋CIM^＋细胞、NK（CD3-/CD16^＋56^＋）细胞呈明显负相关。乳腺癌患者手术前外周血CD4^＋ CD25^ ＋CD127^low/-调节性T细胞水平升高，手术后外周血Treg细胞水平降低，CD3^＋CD4^＋细胞比例升高，NK细胞比例增高。不同TNM分期乳腺癌患者外周血Treg表达比例不同，Ⅳ期CD4^＋ CD25^ ＋CD127^low/-Treg表达比例明显高于Ⅰ、Ⅱ期，疾病越严重，CD4^＋ CD25^ ＋CD127^low/-Treg表达水平越高。结论CD4^＋ CD25^ ＋CD127^low/-调节性T细胞对乳腺癌患者具有肿瘤免疫抑制作用，可作为评估乳腺癌患者疾病严重程度的一项指标。

血小板输注无效与CD4^+CD25^+CD127^low /-Treg、TGF-β1和IL-17相关性分析

目的探讨CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞比例及血清TGF-β1和IL-17水平,与血小板输注无效的相关性及其潜在机制。方法对照(健康体检者)组14例,PTR(platelet transfusion refractoriness,PTR)组14例。流式细胞仪检测CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞比例。ELISA检测血清TGF-β1和IL-17水平。结果 PTR组和对照组CD4+CD25+CD127low/-Treg细胞比例分别为(3.55±2.46)%、(2.61±1.25)%,两者无显著性差异。PTR组和对照组血清TGF-β1分别为(1 093.06±784.84)pg/mL、(4 870.49±755.13)pg/mL,两者有显著性差异(P<0.000 1)。PTR组和对照组血清IL-17分别为(5.17±2.07)pg/mL、(6.88±5.66)pg/mL,两者无显著性差异。结论免疫性血小板输注无效患者血清TGF-β1表达降低,可能参与免疫性血小板输注无效的发生。

血清IL-18、IL-22、CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg水平联合检测对狼疮性肾炎患者活动期的诊断效能

目的:分析血清白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-22(IL-22)、CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)调节性T细胞(Treg)水平联合检测对狼疮性肾炎患者活动期的诊断效能。方法:回顾性分析2022年1月至2023年9月该院收治的64例狼疮性肾炎患者的临床资料,设为研究组,并根据病情严重程度将其分为活动期、稳定期,另选取同期64名健康体检者设为对照组。比较两组及不同病情严重程度患者血清IL-18、IL-22、CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg水平,并分析各指标水平与狼疮性肾炎患者病情严重程度的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标水平单项及联合检测对狼疮性肾炎患者活动期的诊断效能。结果:研究组血清IL-18、IL-22水平均高于对照组,CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);活动期患者血清IL-18、IL-22水平均高于稳定期患者,CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg水平低于稳定期患者,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,血清IL-18、IL-22水平与狼疮性肾炎患者病情严重程度均呈正相关(r>0,P<0.05),CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg水平与狼疮性肾炎患者病情严重程度呈负相关(r<0,P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清IL-18、IL-22、CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg水平单项及联合检测诊断狼疮性肾炎患者活动期的曲线下面积分别为0.828、0.817、0.788、0.921,联合检测诊断效能高于三者单项检测。结论:IL-18、IL-22、CD4^(+)CD25^(+)CD127^(low)Treg水平联合检测诊断狼疮性肾炎患者活动期的效能高于三者单项检测。

替比夫定对慢性乙型肝炎患者外周血CD4＋ CD25＋ CD127(low) T和CD8＋ CD25＋ T细胞频率的影响及临床意义

目的探讨核苷类药物替比夫定对慢性乙肝患者(CHB)外周血中CD4+CD25+CD127lowT细胞和CD8+CD25+T细胞比例的影响,并结合临床指标分析其临床意义。方法替比夫定抗病毒治疗22例CHB患者,在治疗前及治疗后3,6个月时,分别以流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+CD127lowT细胞和CD8+CD25+T细胞比例,实时荧光定量RT-PCR检测Foxp3 mRNA的表达水平,荧光定量PCR检测血清HBV DNA水平,酶联免疫吸附法检测HBV标志物,全自动生化分析仪检测ALT水平。结果 CHB患者外周血中CD4+CD25+CD127lowT细胞和CD8+CD25+T细胞比例显著高于对照组。替比夫定治疗3个月时,这两群细胞比例显著下降,Foxp3 mRNA的表达也显著下降;HBV DNA水平降至检测水平以下的CHB患者,其CD4+CD25+CD127lowT细胞也降至正常水平。治疗3、6个月时,HBeAg阴转率分别为9.1%和18.2%,发生HBeAg血清学转换者的CD4+CD25+CD127lowT细胞和CD8+CD25+T细胞比例均降至正常水平。结论替比夫定能快速有效抑制CHB患者的病毒复制,同时CD4+CD25+CD127lowT细胞和CD8+CD25+T细胞比例显著下调,可能降低了Treg对HBV特异性T淋巴细胞的抑制作用,改善了机体的免疫应答。

CD4^+CD25^+CD127^(low/-)调节性T细胞在寻常型银屑病发病机制中的作用

目的:探讨CD4^+CD25^+CD127^(low/-)调节性T细胞(Treg)在寻常型银屑病(PV)发病机制中的作用。方法:利用流式细胞仪检测外周血Treg细胞的数量;MTT法检测Treg细胞对自身CD4^+CD25-T细胞增殖的抑制作用;采用酶联免疫吸附试验法检测血清中白介素-10(IL-10)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量。结果:PV患者外周血Treg细胞数量与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05),但对自身CD4^+CD25-T细胞增殖的抑制百分率降低(P<0.01);PV患者血清IL-10含量较正常对照组低(P<0.01),血清TGF-β1的含量较正常对照组高(P<0.01)。结论:PV患者Treg细胞的功能缺陷及分泌IL-10的降低可能参与PV的发病机制。

五味温通除痹胶囊联合中药熏蒸对AS患者外周血CD4^+CD25^+CD127^(low/-)Treg表达的影响

目的:观察五味温通除痹胶囊联合中药熏蒸对督寒型强直性脊柱炎(AS)患者的临床疗效及对外周血CD4^+CD25^+CD127^(low/-)Treg表达的影响。方法:将78例督寒型AS患者按随机数字表法分为治疗组和对照组,治疗组给予五味温通除痹胶囊口服并联合中药熏蒸治疗;对照组给予柳氮磺胺吡啶口服,2组疗程均为8周。对2组中医证候评分、总体疗效评价、中医证候疗效评价及CD4^+CD25^+Treg等实验室指标进行观察。结果:治疗组第4、8周有效率明显高于对照组,中医证候显效率及总有效率高于对照组;与对照组比较,治疗组患者治疗后中医证候积分、总体以及腰背痛VAS评分、BASDAI、BASFI功能评分、ASDAS评分均显著降低。结论:五味温通除痹胶囊联合中药熏蒸能显著上调督寒型AS外周血CD4^+CD25^+CD127^(low/-)Treg表达,有效改善AS患者临床症状。

CD4^+CD25^+CD127^(low)调节性T细胞在结核性及恶性胸腔积液患者中的表达及意义

目的探讨CD4+CD25+CD127low调节性T细胞(Treg细胞)在结核性及恶性胸腔积液患者外周血及胸腔积液中的表达及其临床意义。方法收集初诊结核性及恶性胸腔积液患者各20例,采用流式细胞仪检测两组患者外周血及胸腔积液中CD4+CD25+CD127lowTreg细胞的表达;另外选择正常健康体检人员20例记为对照组,测定其外周血CD4+CD25+CD127lowTreg细胞的表达。结果结核性及恶性胸腔积液患者外周血CD4+CD25+CD127low占CD4+细胞比例分别为:(7.88±2.16)%、(10.46±1.37)%,较对照组(4.74±0.74)%明显升高(P<0.05);结核性和恶性胸腔积液中CD4+CD25+CD127low占CD4+细胞比例分别为:(8.45±1.39)%、(18.98±5.24)%,均高于同组别及对照组外周血水平(P<0.05),并且恶性胸腔积液中CD4+CD25+CD127low占CD4+细胞比例明显高于结核性胸腔积液(P<0.05)。结论 CD4+CD25+CD127lowTreg细胞在结核性及恶性胸腔积液患者的外周血及胸腔积液中表达比例的升高,表明其可能通过对机体免疫力的调节而参与疾病的发生发展,且其在胸腔积液中表达的高低变化可能作为结核性及恶性胸腔积液诊断的一项辅助性指标。

中国健康人外周血中具有CD4^+CD25^(nt/hi)CD127^(lo)特征的调节性T细胞频率

目的:初步确定健康人外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo特征的调节性T细胞(Treg)频率,为临床相关疾病的研究及Treg的分选提供参考。方法:采集312名8~60岁(5个年龄组)、不同性别健康人的静脉血,经三重免疫荧光染色,用流式细胞术分析CD4+CD25nt/hiCD127loTreg细胞频率,并观察细胞内Foxp3转录因子的表达。结果:健康人CD4+CD25nt/hiCD127loTreg细胞在外周血中约占CD4+T细胞的(6.55±0.11)%,各年龄组之间有差异(P=0.015),组内性别之间也存在统计学意义(P<0.05);CD25nt/hiCD127lo细胞特异性地表达Foxp3转录因子。结论:初步确定了中国健康人外周血中具有CD4+CD25nt/hiCD127lo表达特征的细胞频率,为Treg细胞的临床研究奠定了基础;CD25nt/hiCD127lo作为CD4+CD25+Treg细胞表面的特征性标志,可在分选时排除其他细胞干扰,获得较完整的Treg细胞。

慢性乙型肝炎肝纤维化患者外周血CD4^+CD25^+CD127^(low/-) T细胞与人肝星状细胞共培养的实验研究

目的探讨CD4+CD25+CD127low/-T细胞在慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化发病机制中的作用。方法按肝纤维化S分期将慢性乙型肝炎肝纤维化患者分为S1~S2期6例和S3~S4期7例;采用磁激活细胞分选法(MACS)提取13例患者和6例健康对照者外周血CD4+CD25+CD127low/-T细胞;分别将CD4+CD25+CD127low/-T细胞以不同比例与人肝星状细胞株(hepaticstellate cell,HSC)共培养5天,检测各组HSC的增殖及TGF-β1的分泌。结果 CD4+CD25+CD127low/-T细胞与HSC之比,当健康对照组和S1~S2期组为1.5∶1,S3~S4期组为2∶1时,HSC的增殖速度和TGF-β1分泌量均在同组不同比例中达最高值。各组同比例之间,当比例为1.5∶1时,健康对照组HSC的增殖速度显著高于S3~S4期组(P<0.05);在比例为1∶1~2∶1范围内,S1~S2期组和S3~S4期组HSC的TGF-β1分泌量远高于同比例健康对照组(P<0.05)。结论 CD4+CD25+CD127low/-T细胞可能通过自身细胞数量和功能的双重调节,影响肝星状细胞的增殖和分泌,参与了慢乙肝肝纤维化的进展。

浆细胞性乳腺炎患者外周血CD4^+CD25^+CD127^-调节性T细胞变化

目的:观察浆细胞性乳腺炎(Plasma cell mastitis,PCM)患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(CD4+CD25+CD127-Treg)数量和功能变化,以探讨PCM免疫病理机制。方法:将58例浆细胞乳腺炎患者分成三组:其中急性组13例(22%)、亚急性组25例(43%)和慢性组20例(34%)。并设正常对照组20例及乳腺癌对照组16例。以流式细胞术检测各型PCM患者外周血中CD4+CD25+CD127-Treg细胞百分率;实时荧光定量RT-PCR检测转录因子Foxp3表达及ELISA检测TGF-β水平。结果:三组PCM组与正常组相比,外周血CD4+CD25+CD127-Treg数量,外周血PBMC中Foxp3表达及血浆TGF-β水平均下降(P<0.05),其中急性PCM组下降最为明显(P<0.01),乳腺癌组三项指标均升高(P<0.05)。结论:浆细胞性乳腺炎患者的CD4+CD25+CD127-Treg数量及功能有所下降。

儿童咳嗽变异性哮喘外周血CD4^+CD25^+CD127^(lo/-)Treg及IL-17表达水平与肺炎支原体DNA的关系

儿童咳嗽变异性哮喘（cough variant asthma,CVA）是一种潜在、隐匿形式哮喘,临床常无感染征象。近年来有学者提出该病可能与某些病原体感染密切相关[1]。研究发现,肺炎支原体（Mycoplasma pneumonia,MP）感染可诱发哮喘,且与哮喘发作及恶化有关。CVA是由多种细胞和细胞因子共同参与的气道慢性炎症性疾病,CD4＋CD25＋调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）有可能在支气管哮喘的发生发展中发挥着重要作用。

结核性胸膜炎患者外周血及胸水中CD4^+ CD25^+ CD127^-调节性T细胞表达水平的临床意义

目的:探讨结核性胸膜炎外周血和胸水中CD4+ CD25+ CD127-调节性T细胞表达水平及其临床意义。方法:收集住院收治的初治结核性胸膜炎患者30例和非结核性胸膜炎患者20例,另选择健康体检人员20例为正常对照组。流式细胞术检测外周血及胸水中CD4+ CD25+ CD127-调节性T细胞的百分率。结果:结核性胸膜炎组外周血中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+T细胞总数的百分比显著高于正常对照组和非结核性胸膜炎组(P<0.05)。结核性胸膜炎组胸水中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+T细胞总数的百分比明显高于非结核性胸膜炎组(P<0.05)。结核性胸膜炎组患者在规则治疗1、3、7、14 d时,外周血和胸水中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+T细胞总数的百分比均逐渐下降,外周血中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+ T细胞总数的百分比于治疗3 d时显著低于入院时水平(P<0.05),胸水中CD4+ CD25+ CD127- Treg细胞占CD4+ T细胞总数的百分比于治疗7 d时显著低于入院时水平(P<0.05)。结论:CD4+ CD25+ CD127-调节性T细胞参与了结核性胸膜炎的发病机制,且可作为判断肺结核患者的免疫状态、指导用药、疗效观察的指标。

小鼠调节性T细胞的CD4^+ CD25^+ CD127^(low/-)标记分析

新的特异性细胞表面标记的发现是提高调节性T细胞(Treg)测量和分选技术的重要环节,Foxp3是公认的天然Treg的标记,却不能作为分选细胞的标记,CD127是新发现低表达于Treg细胞表面的标记。本实验测定CD4+CD25+CD127low/-和CD4+CD25+Foxp3+标记的小鼠外周血及脾脏Treg细胞的数量,并测定CD4+CD25+CD127low/-细胞内Foxp3转录因子的表达水平,分析CD4+CD25+CD127low/-标记在小鼠Treg细胞测定及分选的价值。收集BALB/c小鼠外周血及制备脾细胞悬液,分别三重荧光染色CD4、CD25、CD127及CD4、CD25、Foxp3后应用流式细胞仪检测,得出CD4+CD25+CD127low/-、CD4+CD25+Foxp3+这两种标记的小鼠外周血和脾脏Treg细胞的比例;再在CD4、CD25、Foxp3基础上加CD127染色(四重荧光染色),检测CD4+CD25+CD127low/-细胞Foxp3转录因子的表达情况。结果显示:①BALB/c小鼠外周血CD4+T细胞的分布:在总T细胞中CD4+TCD4+CD25+T细胞的中位表达水平分别为39.02%、5.35%;在CD4+T细胞中CD4+CD25+CD127low/-、CD4+CD25+Foxp3+细胞的中位表达水平分别为7.13%、3.97%;②BALB/c小鼠脾脏CD4+T细胞的分布:在总T细胞中CD4+T、CD4+CD25+T细胞的中位表达水平分别为23.49%、3.86%;在CD4+T细胞中CD4+CD25+CD127low/-、CD4+CD25+Foxp3+细胞的中位表达水平分别为12.8%、8.23%;③BALB/c小鼠外周血和脾脏CD4+CD25+CD127low/-细胞比例高于CD4+CD25+Foxp3+细胞,以脾脏更为明显(P<0.01);④小鼠外周血及脾脏CD4+CD25+CD127low/-细胞高表达Foxp3转录因子,CD4+CD25+Foxp3+细胞低表达CD127。结论:BALB/c小鼠外周血和脾脏CD4+CD25+CD127low/-较CD4+CD25+Foxp3+能定量更多的Treg细胞;CD127low/-作为CD4+CD25+Treg细胞表面的特征性标志,在细胞分选时受其他细胞的干扰最小,是定量和纯化小鼠Treg细胞的更好标记选择。

CD4^+CD25^+CD127^(low)调节T细胞在非霍奇金淋巴瘤中的表达

目的研究CD4+CD25+CD127low调节T细胞(Tregs)在非霍奇金淋巴瘤(NHL)外周血中的表达,初步探讨Tregs的表达与NHL常用预后相关因素的关系。方法选择58例NHL患者,流式细胞术检测外周血中CD4+CD25+CD127lowTregs百分比,分析NHL组与健康对照组,初发组与化疗后组Tregs比例有无差异,并将Tregs比例与年龄、性别、临床分期、病理类型、LDH、IPI和β2-微球蛋白等常规预后指标进行相关性分析。结果①B细胞NHL(B-NHL)组CD4+CD25+CD127lowTregs的百分比为(3.89±2.49)%,明显高于健康对照组(P=0.003);②B-NHL组中,侵袭性淋巴瘤(DLBCL,MCL)组与非侵袭性淋巴瘤组(FL和边缘区淋巴瘤等)Tregs表达差异具有统计学意义(P=0.002);T细胞NHL(T-NHL)组中,高度侵袭性淋巴瘤组(T-LBL和NK/TCL组)与侵袭性淋巴瘤组(ALCL和PTLL组)Tregs表达差异具有统计学意义(P=0.006);③B-NHL中,初发组Tregs的百分比为(5.73±2.77)%,明显高于健康对照组(P=0.004)和化疗后组[(2.63±1.33)%,P=0.034],化疗后组与健康对照组相比无统计学意义;④B-NHL初发组患者Tregs比例与患者国际预后指数、β2-微球蛋白和乳酸脱氢酶之间具有相关性(P值分别为0.003,0.003和0.038),但与年龄、性别、PS状态、临床分期、病理类型之间相关性不具有统计学意义。结论 B-NHL患者尤其初发组患者外周血Tregs比例明显升高,检测其水平对于判断NHL的预后可能有一定的临床价值。

CD4^+CD25^(high)CD127^(low)调节性T细胞在乳腺癌患者外周血中的临床意义

目的探讨CD4+CD25highCD127low调节性T细胞(RegulatoryTcell,Treg)在乳腺癌患者外周血中的水平及临床意义。方法采用流式细胞术检测31例乳腺癌患者和11例健康体检者外周血中CD4+CD25highCD127lowTreg、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞和NK细胞的表达水平。结果 31例乳腺癌患者外周血中CD4+CD25highCD127lowTreg占总CD4+T细胞的(10.60±1.11)%,高于健康体检者([6.96±0.94)%,t=5.974,P<0.05)],与NK细胞呈负相关(r=-0.468,P<0.05);CD3+CD4+T、CD3+CD8+T细胞占总T细胞的比例与健康体检者比较,均无显著性差异;随疾病进展,乳腺癌患者外周血中CD4+CD25highCD127lowTreg水平升高,Ⅱ期+Ⅲ期患者外周血中CD4+CD25highCD127lowTreg占总CD4+T细胞的(11.48±0.80)%,明显高于Ⅰ期患者([9.42±0.34)%,P<0.05]和健康体检者([6.96±0.94)%,P<0.05)]。结论乳腺癌患者外周血CD4+CD25highCD127lowTreg水平可能是一个较好的反映乳腺癌患者免疫功能状态的参考指标,其在外周血的升高程度与肿瘤TNM分期有关,可能参与了乳腺癌的发生发展。

多耐药肺结核患者特异性细胞免疫失衡与调节性T细胞CD4^+CD25^+CD127^(low)有关

目的:探讨调节性T细胞CD4+CD25+CD127low、CD4+及CD8+T细胞在多耐药结核患者中的免疫调节作用。方法:采取30例健康体检者(HD)、30例非耐药初治肺结核(S-TB)患者及30例多耐药结核病(MDR-TB)患者2 ml肝素抗凝外周静脉血,经CD3、CD4、CD8、CD25、CD127流式抗体标记后Beckman流式细胞仪计数各组CD4+CD25+CD127low、CD3+、CD4+、CD8+百分比含量,计算CD4/CD8值。结果:MDR-TB组CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比含量明显高于HD组与S-TB组(P=0.000),MDR-TB组CD4+T细胞百分比含量明显低于HD组与S-TB组(P<0.05),MDR-TB组CD8+T细胞百分比含量与HD组与STB组相比明显上升(P<0.05),MDR-TB组CD4/CD8值明显低于HD组与S-TB组(P<0.001);线性回归分析发现:HD组中CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比含量与CD3+、CD4+、CD8+T细胞及CD4/CD8值均无相关性(P>0.05),非耐药初治肺结核患者CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比含量与CD3+、CD4+T细胞无相关性(P>0.05)、与CD8+T细胞存在正相关(r=0.419,P=0.011)、与CD4/CD8值存在负相关(r=-0.519,P=0.002),耐药结核病患者CD4+CD25+CD127low调节性T细胞百分比含量与CD3+T细胞无相关性(P>0.05)、与CD4+存在负相关(r=-0.476,P=0.004)、与CD8+T细胞存在正相关(r=0.638,P=0.000)、与CD4/CD8值存在负相关(r=-0.776,P=0.000)。结论:随着肺结核病程的发展,外周血中CD4+CD25+CD127low调节性T细胞逐渐上调,特异性细胞免疫水平下调,二者之间存在相关性,调节性T细胞可能通过抑制结核患者特异性细胞免疫应答来影响肺结核病的进程。