虎纹捕鸟蛛（Selenocosimia huwena）粗毒对蟾蜍神经肌肉接头传递的影响

１０－５～１０－４ｇ／ｍｌ虎纹捕鸟蛛粗毒对蟾蜍坐骨神经肌肉标本有阻遏作用，１×１０－４ｇ／ｍｌ粗毒发生阻断的时间为３８ｍｉｎ，但不改变神经干动作电位，不影响肌肉对直接刺激的反应。阻断后肌肉对间接强直刺激仍可发生强直收缩；粗毒对蟾蜍坐骨神经肌肉标本的阻断作用表现为：初期４～５０秒的收缩增强继而转向抑制；粗毒可对抗箭毒的阻断作用；蟾蜍在体坐骨神经肌肉标本可被粗毒阻断，但阻断后可以恢复；粗毒不改变蛙腹直肌对Ａｃｈ的敏感性，粗毒中含有拟胆碱成份。箭毒可以阻止粗毒对蛙腹直肌的拟胆碱效应；该粗毒对蟾蜍坐骨神经肌肉标本的阻遏作用发生在神经肌肉接头，粗毒中含有拟胆碱组份，此组份可能通过后膜去极化阻断神经肌肉接头。

虎纹捕鸟蛛毒的生物学活性鉴定

本文报道了采集广西产虎纹捕鸟蛛(Selenocosmia huwena)毒液的方法,并对粗毒进行了部分生物学活性的测定。该粗毒对小鼠和蜚蠊的LD_(50)分别为1.16mg/kg和300μg/g。该粗毒具有透明质酸酶、碱性磷酸酶、蛋白水解酶和脱氧核糖核酸酶活性。未测到磷脂酶A和胆碱脂酶活性。通过电生理实验发现该粗毒含有阻断蟾蜍神经肌肉接头传递的毒素,并观察到当小鼠接受腹腔注射致死剂量(5mg/kg)粗毒后便迅速出现呼吸麻痹。

虎纹捕鸟蛛毒素提取的研究

为探索提取广西产虎纹捕鸟蛛(Selenocosmia huwena)毒素的新方法,选取雌性虎纹捕鸟蛛225只,根据提取方法(直接咬软管法、直接咬瓶法、激怒咬渐法激怒咬瓶冲洗法)分为4组,结果表明,采用直接咬软管法提取虎纹捕鸟蛛毒素,平均每只蜘蛛可以获得冻干毒素2.28 mg,与采用直接咬瓶法所获得的2.19 mg没有显著差异(P>0.05)。采用激怒咬瓶冲洗法提取虎纹捕鸟蛛毒素,平均每只蜘蛛可以获得冻干毒素重量明显高于激怒咬瓶法[(3.41±0.40)mg,(2.99±0.35)mg,P<0.05],亦明显高于直接咬软管法和直接咬瓶法。该试验结果表明,激怒咬瓶冲洗法是一种提取虎纹捕鸟蛛毒素的有效方法。

虎纹捕鸟蛛的生物学特性

简要介绍了虎纹捕鸟蛛的生物学特性,包括它的形态特征、生活习性、捕食行为和食谱,以及生长特点和繁殖习性等.

虎纹捕鸟蛛毒素对人结肠癌SW480细胞体外增殖的影响

目的探讨虎纹捕鸟蛛毒素对结肠癌SW480细胞体外增殖的影响。方法以体外培养的人结肠癌SW480细胞株为实验模型,以不同浓度的虎纹捕鸟蛛毒素对SW480细胞进行体外干预,通过MTT药物敏感实验检测其抑制率及计算IC50;镜下观察经Hoechst 33342染色后的细胞形态变化;流式细胞仪观测经AnnexinⅤ-FITC/PI双染的细胞状态的变化;分光光度法测定Caspase-3的相对活化倍数的变化。结果 MTT药物敏感实验显示,5～100 mg/ml虎纹捕鸟蛛粗毒对人结肠癌SW480细胞有抑制作用,且呈一定剂量效应关系。其48 h半抑制浓度(IC50)为43.68 mg/ml;显微镜下可见虎纹捕鸟蛛粗毒干预后的SW480细胞数量明显减少,细胞形态各异,并出现细胞碎片;流式细胞结果显示:10 mg/ml虎纹捕鸟蛛粗毒诱导的SW480细胞凋亡率最高,达(57.66±20.44)%;50 mg/ml虎纹捕鸟蛛粗毒干预后,SW480细胞坏死率最高,达(25.36±15.03)%;100 mg/ml虎纹捕鸟蛛粗毒干预后Caspase-3活化最明显。结论虎纹捕鸟蛛粗毒对人结肠癌SW480细胞体外增殖具有抑制作用。

虎纹捕鸟蛛体表扫描电镜观察

对虎纹捕岛蛛 (Ornithoctonushuwena)的眼、生殖球、颚叶、听毛、触毛、琴形器、跗节器、发音器。

虎纹捕鸟蛛(蜘蛛目:狒蛛科:捕鸟蛛亚科)的分类研究

研究了狒蛛科 (Theraphosidae)虎纹捕鸟蛛SelenocosmiahuwenaWangetal.,1993的分类地位 ,认为该种应隶属于捕鸟蛛亚科OrnithoctoninaePocock,1895的捕鸟蛛属OrnithoctonusPocock,1892。对虎纹捕鸟蛛Ornithoctonushuwena(Wangetal.,1993)

虎纹捕鸟蛛毒素的提取及毒力的测定

报道了提取广西产虎纹捕鸟蛛 (Selenocosm ia huw ena) 毒素的方法。用冻干蛛毒对小鼠进行腹腔注射, 测定出虎纹捕鸟蛛毒素的LD50 为0.77 m g/kg, LD50的95% 可信限为0.72～0.82 m g/kg, 表明该毒素有很强的毒力。并观察到当用0.30 m g/kg 冻干蛛毒注射小鼠颅内时, 小鼠迅速抽搐5

硬膜外虎纹镇痛肽-I(HWAP-I)注射对大鼠慢性神经病理痛的影响

目的 :已有的研究表明HWAP I对大鼠的生理痛、急性和亚急性病理痛均有良好的镇痛效应。本文以吗啡作为阳性对照 ,主要研究了硬膜外注射HWAP I对大鼠慢性神经病理痛的镇痛作用。方法 :本实验以不同内径的单套束缚大鼠单侧坐骨神经造成慢性神经病理性痛模型 ,该模型与慢性束缚性损伤模型 (ChronicConstrictionInjuryModel,CCI模型 )极为相似。对术后第五天的大鼠从其硬膜外注入不同剂量的HWAP I、盐酸吗啡 ,运用光热辐射测痛和非伤害性机械刺激测痛两种测痛方法比较了二者给药后 30、6 0和 12 0分钟的作用效果。结果 :2 0 μg/kg、4 0 μg/kgHWAP I对模型侧足的热痛过敏反应和机械触诱发痛觉超敏反应均有明显的镇痛作用 ,并维持 2个小时以上 ;盐酸吗啡 4 0 μg/kg对大鼠双侧脚的热痛过敏产生即时而短暂的阻断效应 ,对机械触诱发痛觉超敏无影响。结论 :硬膜外注入HWAP I能有效的缓解坐骨神经束缚性损伤大鼠的神经病理性痛。

广西宁明虎纹捕鸟蛛的种群结构及食性

对广西宁明的虎纹捕鸟蛛的栖息环境、种群结构及食性进行了调查研究,结果表明,当雌蛛体长＞42.00 mm,雄蛛体长＞31.00 mm时,卵巢和精巢分别开始明显发育;繁殖时期为每年的5～8月份;该蛛主要食饵为鞘翅目、直翅目和半翅目等节肢动物.

虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ天然突变体的分离纯化与鉴定

通过离子交换及反相HPLC,从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离得到一种虎纹毒素-Ⅰ天然突变体,MALDI-TOF质谱仪分析表明该多肽天然突变体分子量为3 636 Da.Edman测序结合串联质谱和氨基酸组成分析鉴定出该天然突变体的序列为H2N-ACKGV FDACT PGKNE CCPNR VCSDK HKWCK WQ-COOH.其中6个Cys形成3对二硫键.小鼠脑室注射实验表明,该天然突变体能使小鼠致死,但不能阻断小鼠膈神经-膈肌标本的神经肌肉接头传递.本研究结果表明,K32残基对于HWTX-Ⅰ的生物学活性有关键性作用.

病态虎纹捕鸟蛛器官元素特点分析

采用火焰原子吸收分光光度计,对不同病症的虎纹捕鸟蛛Selenocosmiahuwena(Wangetal.,1993)的4种器官组织中的6种元素(铁(Fe)、铜(Cu)、锌(Zn)、锰(Mn)、镁(Mg)、钙(Ca))的含量进行了测定。结果表明:这6种元素在病症蜘蛛中的含量与正常蜘蛛相比均有很大差异。本文首次从元素的缺乏或过多积累方面分析了蜘蛛的致病原因。为其人工繁育、开发利用和资源保护提供基础资料。

雌性和雄性虎纹捕鸟蛛粗毒蛋白质含量比较分析

自然界虎纹捕鸟蛛雌蛛数量远多于雄蛛数量,为了探究雌、雄蛛粗毒的差异,用不同方法比较了单个虎纹捕鸟蛛雌、雄蛛粗毒的特征.雌蛛单次螫毒量为(26.5±2.47)μL,冻干后粗毒质量为(5.01±0.78)mg,明显高于雄蛛单次螫毒量(10.83±1.35)μL,冻干后粗毒质量(2.05±0.17)mg;用Lowry法和Bradford法测定雌蛛和雄蛛粗毒的蛋白质含量,两种方法均表明雄蛛粗毒中蛋白含量高于雌蛛.用反相高效液相色谱分离雌蛛和雄蛛粗毒蛋白,并215 nm检测色谱图,发现大部分洗脱峰重叠,而雄蛛色谱图中多两个主峰.Tricine SDS-PAGE电泳分析表明雌蛛粗毒相对分子质量小于10 kD的蛋白质含量较高;而Tris SDS-PAGE电泳分析表明雌蛛粗毒相对分子质量大于10 kD的蛋白质含量较低,基于雌蛛和雄蛛粗毒蛋白含量的差异,有必要对虎纹捕鸟蛛雌、雄蛛粗毒进行独立研究.

温度和光照时间对虎纹捕鸟蛛的捕食影响

为寻找人工饲养繁殖虎纹捕鸟蛛最适宜的生态因子,采用正交试验法,研究了温度和光照时间对虎纹捕鸟蛛捕食作用的综合影响。依据捕食数量进行正交设计的方差分析得知,最有利于虎纹捕鸟蛛捕食的因子组合为温度27℃,光照时间12 h。

不同饲养方法对虎纹捕鸟蛛生物学特征的影响

为探明不同饲养方法对虎纹捕鸟蛛取食、死亡和产毒量的影响,应用缸养法和篓养法对虎纹捕鸟蛛进行室内人工饲养.结果表明:虎纹捕鸟蛛产毒和取食率方面,篓养要显著优于缸养(P<0.01);在死亡率方面,两种饲养方法差异不显著(P>0.05).篓养更适合室内人工饲养虎纹捕鸟蛛.

虎纹镇痛活性肽在毕赤酵母中的分泌表达

虎纹镇痛活性肽HWAP Ⅰ是从虎纹捕鸟蛛初毒中分离纯化 ,具有镇痛活性的多肽类神经毒素 .为了在P .pastoris中高效分泌表达HWAP Ⅰ ,依照RT PCR的结果 ,人工合成编码虎纹镇痛活性肽的基因片段 ,与酵母表达载体 pPIC9K重组 ,构建表达质粒pPIC9K HWAP Ⅰ .转化GS115宿主菌后 ,筛选出整合型His+ MutS 表达菌株 .经诱导培养后 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)证明HWAP Ⅰ在毕赤酵母中能有效分泌表达 ,产物的分子质量为 4ku左右 ,产量达 80mg/L .

蜘蛛神经节的解剖与神经细胞的分离培养

报道了虎纹捕鸟蛛（Ornithoctonus huwena）食道下神经节的解剖以及神经细胞的分离培养方法。为开展蜘蛛神经生物学实验方法的研究，创立了一种蜘蛛神经细胞解剖方法——去胸甲解剖法。神经节细胞培养基为：NaCl 223 mmol／L；KCl 6．8mmol／L；CaCl2 8mmol／L；MgCl2 5．1mmol／L；Sucrose 5mmol／L；Hepes 10mmol，L；谷氨酰胺1mmol／L；青霉素200IU/ml；链霉素200μg／ml；小牛血清20％；pH7．4。在温度（27±2）℃的培养箱中培养2～4h。实验结果表明：与传统方法相比较，去胸甲解剖法具有取材简便、准确、快捷和高效的特点。改进的培养基非常适合蜘蛛离体神经细胞的培养。培养的细胞状态好、数量多，细胞体呈椭圆形，细胞形状近似汤勺，有一个长的单极突起，其大小为10～30μm。

虎纹捕鸟蛛实验种群的生态观察

对虎纹捕鸟蛛在人工饲养条件下的各种生态条件进行了多方面的实验、观察和分析。结果表明 ,该蛛对低温的耐受能力较差 ,对强光呈负趋性 ,土壤湿度最适范围为 1 6%～ 2 2 % ,土壤pH值最适范围为5 1～ 5 5。对噪声敏感 。

虎纹捕鸟蛛卵巢发育的组织学

根据卵巢的组织学和形态特征分析,虎纹捕鸟蛛的卵巢为若干由生殖上皮向卵巢腔内突起的卵巢小体构成.在卵细胞发育过程中,一直有滋养细胞形成的托柄向其供应养分.卵巢发育可分为5个时期:形成期、生长期、成熟期、排卵期和恢复期.在生殖季节里可多次产卵,为多次产卵类型.卵巢的大小重量与蛛体重量成正相关,而成熟的蜘蛛性腺指数仅随卵细胞的发育而变化,不随蛛体大小改变.

虎纹捕鸟蛛毒素的抗菌活性探讨

从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离得到 2种多肽毒素 ,huwentoxin -Ⅰ和huwentoxin -Ⅱ。抗菌实验结果表明 ,这 2种多肽毒素能抑制革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌及啤酒酵母菌的生长 。