硬紫草细胞悬浮培养和紫草宁及其衍生物的形成

硬紫草细胞悬浮培养形成紫草宁及其衍生物时,细胞生长曲线呈扁平的S形。细胞停止生长后,紫草宁及其衍生物大量形成,二者的动态变化呈负相关。测定了此过程中培养液的无机元素和可溶性糖含量、溶氧、pH值以及细胞形态的变化情况,可作为硬紫草细胞大规模培养的参考。

多糖对紫草细胞生产紫草色素的影响

在紫草色素生产培养基中添加琼脂糖、人参多糖、海藻多糖、黄原胶、卡拉胶和淀粉等６种多糖类物质，接入紫草细胞后置于２５℃黑暗条件下振荡培养２０ｄ，结果表明：试验中所选用的６种多糖类物质对紫草色素的产生均具有一定的刺激作用，其中以０．０５％琼脂糖的作用效果为最佳，紫草色素含量为２０．７７％，比对照提高４６．８９％。此外试验亦对琼脂糖对紫草色素生产及分泌特征、培养液中蔗糖浓度变化以及ｐＨ值变化情况进行了研究。

细胞培养生产的紫草色素与天然紫草色素理化性质比较

对细胞培养生产的紫草色素与天然紫草色素进行了理化性质比较研究，结果表明，两者的耐热性、耐氧化性及不同ｐＨ值条件下颜色的变化无明显差异，而耐还原性则具显著差异。此外，还对细胞培养生产的紫草色素和天然紫草色素的组成成份进行了ＴＬＣ和ＨＰＬＣ分析，发现两者组成成份基本一致，只是相对含量具一定差异．

固定化紫草细胞生产紫草宁衍生物

用海藻胶包埋紫草细胞,在紫草色素生产培养基M_9中,常温、黑暗下培养不同时间,收集培养液并提取色素,进行紫外—可见全波长分光光度扫描和TLC分析。结果表明:固定化紫草细胞可连续分泌紫草色素,其主要成分与天然成分基本相同,产量已达到一定水平。此外对海藻胶包埋条件、固定化珠粒的稳定性以及1L固定化植物细胞反应器生产紫草色素工艺进行了讨论。

细胞固定化条件对紫草细胞生产紫草色素的影响

以海藻胶做包埋剂，研究了固化液构成、细胞包埋量和胞龄对紫草色素合成的影响。结果表明：固定化细胞合成紫草色素的合适固化液为含有０．１ｍｏｌ／ＬＣａＣｌ２的紫草色素生产培养基，该固化条件比较温和，并可长久保持固定化细胞活性；最适宜的细胞包埋质量分数为１０％２０％；用于细胞包埋的最佳细胞生长时间为１７ｄ。对紫草细胞固定化培养生产紫草色素过程的动力学特征进行了分析，建立了基质消耗和色素合成的动力学模型，并用该模型对实验数据进行了回归分析。

产物释放促进剂对固定化紫草细胞生产紫草色素的影响

研究了多种产物释放促进剂对海藻胶包埋的紫草细胞生产紫草色素的效果。结果表明，在色素生产培养基中加入合适的产物释放促进剂可显著地刺激紫草色素的分泌及合成，并且该种处理方式的作用效果明显优于细胞透性预处理方式的效果。将固定化紫草细胞培养在质量分数为０．０８％、０．２４％Ｔｗｅｅｎ８０和０．２％Ｔｗｅｅｎ２０培养基中，培养１２ｄ紫草色素产量分别为每克干细胞含４２．２０、６２．５２和３８．７３ｍｇ，比对照分别提高２．８２、４．６６和２．５１倍。在质量分数为０．２％Ｔｗｅｅｎ２０培养基中培养３５ｄ时，细胞合成色素总产量达每克干细胞含１８１．５ｍｇ，比对照提高４．２倍。