Antibacterial Effect of Herba paederiae and Kalimeris indica (L.) Sch.-Bip Combined with Antibiotics

[ Objective] TO observe the in-vitro antibacterial activity of Herba paederiae and Kalimeds indica （ L. ） Sch.-Bip and their antibacterial effect when being used with commonly used antibiotics. [ Method ] Staphylococcus aureus CMCC29178 and Escherichia coli ATCC25922 reference strains were used for the determination of minimal inhibitory concentration （MIC） and fractional inhibitory concentration （FIC） index using the broth microdilution method. [ Result] The aqueous extracts of Herba paederiae and Kalimeris indica （ L. ） Sch. -Bip had certain antibacterial effects on Staphylococcus aureus and Eschedchia coli. Synergistic effects or additive effects at different degrees were observed when they were applied with the commonly used antibiotics. [ Conclusion] Water extraction can be widely used to primarily screen medicinal plants with antibacterial activity.

基于网络药理学和分子对接探讨马兰对非酒精性脂肪性肝病的作用机制

基于网络药理学与分子对接探讨马兰对非酒精性脂肪性肝病的作用机制,为后期研究提供理论依据。通过文献检索马兰的化学成分,用Swiss target prediction进行靶点预测;利用OMIM、Gene Card、Drug bank获取非酒精性脂肪性肝病的疾病靶点,再利用Cytoscape 3.9.1构建药物-成分-靶点网络图;用String 11.5进行PPI分析,用R语言进行GO分析、KEGG分析。筛选出26个活性化合物,得到交集靶点55个,槲皮素、山柰酚和木犀草素可能是主要活性成分,关键靶点涉及ESR1、EGFR、AKT1等;GO分析和KEGG分析涉及多种生物途径以及PPAR、PI3K等信号通路。分子对接结果显示槲皮素、山柰酚和木犀草素与ESR1、EGFR、AKT1之间具有较好的结合能力。马兰可能通过多成分、多靶点、多途径对非酒精性脂肪性肝病发挥治疗作用。

高效液相色谱法同时测定马兰中香草酸、阿魏酸和芹菜素含量

目的建立同时测定马兰中香草酸、阿魏酸和芹菜素含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Supersil ODS2柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为30℃,进样量为5μL。结果香草酸、阿魏酸和芹菜素质量浓度分别在0.198~13.860μg/mL、1.500~105.000μg/mL、2.010~140.700μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9996,0.9996,0.9997,n=5);平均加样回收率分别为97.53%,101.30%,101.82%,RSD分别为2.73%,2.08%,2.59%(n=6);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于4%(n=5)。结论该方法操作简便、结果准确可靠,可用于马兰中香草酸、阿魏酸和芹菜素的含量测定。

马兰水溶性粗多糖提取工艺的研究

该文首次报导了马兰水溶性多糖的水提醇沉工艺。采用单因子试验和L9(34)正交试验设计,研究了料水比、提取时间、提取温度和乙醇浓度对马兰水溶性多糖提取的影响。结果表明,影响多糖得率的主次因素为乙醇浓度、料水比、提取时间及提取温度;马兰水溶性多糖最佳提取工艺条件为:料水比1∶30,提取时间2 h,提取温度100℃,95%乙醇醇析。在此最佳工艺条件下,马兰水溶性多糖的得率为4.12%。

马兰黄酮类化合物的提取及其抗氧化活性

为了探索以亚临界水萃取马兰黄酮类化合物的效果,以得率为指标,通过单因素和正交试验,优选其萃取工艺参数,并对所得黄酮类化合物的抗氧化性能进行测定。结果表明,在压力为5.0 MPa,温度160℃、提取时间25 min、水料比为20∶1 mL/g的条件下马兰黄酮类化合物的得率为9.01%。与水和乙醇回流提取法(马兰黄酮类化合物得率分别为5.12%和7.13%)相比,亚临界水萃取在提取时间和得率方面均有明显的优势,所得马兰黄酮类化合物在一定浓度范围内具有较强的清除自由基和抗氧化能力。研究结果为马兰黄酮类化合物的开发提供参考。

光强对马兰形态、生理及黄酮类化合物含量的影响

以马兰为实验材料,通过梯度遮光处理,研究不同光照强度(100%,62.29%和35.17%透光率)下不同处理时间对马兰形态、生理指标和黄酮类化合物的影响。结果显示,1)随着处理时间的延长,马兰节间长均呈增长趋势,但遮光抑制马兰的节间长度,尤其在透光率为62.29%时抑制更显著;在透光率为35.17%时能增强马兰的分枝能力,透光率为62.29%时作用不明显;遮光处理抑制了马兰的直立生长,在透光率为62.29%时对马兰株高产生显著抑制;在透光率为35.17%时更有利于马兰叶的长度、宽度和叶锯齿个数的增加,透光率为62.29%时作用不显著。2)透光率为35.17%时显著抑制叶片叶绿素a、b和叶绿素的总含量;随着处理时间的延长,O2-·含量呈先降后升再降的趋势,SOD活性和MDA含量呈先降后升的趋势,POD活性呈先升后降的趋势;随着光照强度的减弱,POD活性和MDA含量呈下降趋势,SOD活性呈先下降后升高趋势;在透光率为35.17%时CAT活性显著低于对照,抑制作用显著。3)随着光照强度的降低,黄酮含量在叶中呈下降趋势,根中呈上升趋势,透光率为62.29%时茎中含量最高,自然光照次之,透光率为35.17%时最低。

马兰总黄酮提取工艺优化及不同部位含量测定

以马兰全株为材料运用超声波辅助法进行黄酮类化合物的提取,采用正交试验法分析比较乙醇体积分数、料液比例、水浴温度和提取时间对总黄酮提取量的影响。结果表明:各因素的影响大小依次为:提取温度>乙醇体积分数>提取时间>料液比例;马兰中总黄酮提取的最佳工艺为,乙醇体积分数75%,料液比例(g∶mL)1∶30,水浴温度70℃,提取时间90min,在该工艺下测得马兰总黄酮含量为16.452%;从3月～7月,马兰同一部位总黄酮含量存在显著差异性(P<0.05),7月份达最高值,叶为37.076%;茎次之,为8.501%;根最少,为4.314%。同时,同一月份中马兰不同部位总黄酮含量也存在显著差异性(P<0.05),其中叶中总黄酮含量最高。

马兰化学成分研究

目的:研究马兰的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱和凝胶柱色谱Sephadex LH-20进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据分析进行结构鉴定。结果:从马兰80%乙醇提取物中分离鉴定了9个化合物,分别为:正三十三烷(Ⅰ)、hexadecanol(Ⅱ)、大黄酚(Ⅲ)、香草醛(Ⅳ)、大黄素甲醚(Ⅴ)、β-谷甾醇(Ⅵ)、豆甾醇(Ⅶ)、亚油酸(Ⅷ)、大黄素(Ⅸ)。结论:除化合物Ⅳ、Ⅵ外,其余化合物均为首次从该属植物中分得,化合物Ⅲ、Ⅳ对CC l4诱导的肝损伤有一定的保护作用。

马兰化学成分研究(Ⅱ)

采用冷渗漉提取的方法提取马兰的化学成分。经硅胶柱色谱和Sephadex LH-20进行分离纯化,通过理化方法和波谱数据分析进行结构鉴定。从80%乙醇冷渗漉提取物的水不溶物中分离并鉴定了12个化合物,分别为正十六烷酸(1)、6-羟基-桉烷-4(14)-烯(2)、β-谷甾醇(3)、α-菠菜甾醇(4)、香草醛(5)、β-20(21),24-二烯-达玛烷-3-酮(6)、豆甾醇(7)、木栓酮(8)、羽扇豆酮(9)、α-香树脂醇(10)、表木栓醇(11)、神经酰胺(12)。化合物2、6、9、12均为首次从该种植物中分得。

马兰中的五个酚性化合物

采用大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20等多种材料进行分离纯化,通过理化方法和波谱数据分析进行结构鉴定,从马兰全草80%乙醇提取物中分离并鉴定了5个酚性化合物,分别是汉黄芩素(1)、千层纸素A(2)、4-羟基苯乙酮(3)、7,4'-二羟基异黄酮(4)、芹菜素(5)。所有化合物均为首次从该属植物中分得。

响应曲面法优化野生马兰头总黄酮的提取工艺

以连云港花果山野生马兰头地上部分为原料,研究马兰头黄酮的提取工艺。在单因素试验基础上,根据Box-Behnken试验设计原理,选取提取温度、提取时间、液料比和乙醇体积分数四因素三水平进行中心组合试验,建立黄酮提取率的二次回归方程,确定提取工艺的优化组合条件。结果表明:提取工艺条件为提取温度71℃、提取时间105min、液料比26.5:1(mL/g)、乙醇体积分数63%,黄酮提取率达到最大值。该条件下黄酮提取率预测值为1.65%,验证值为1.62%。

脱水马兰加工特性的研究

通过在不同风温(52℃、56℃、60℃)和不同微波输出功率(150W、225W和300W)条件下对马兰进行脱水干燥试验,结果表明,热风干燥时间较长,效率较低,微波干燥随着输出功率的提高干燥率也相应增加,利用微波干燥可以从热风干燥可以从热风干燥所需的200～400min缩短到5～8min,同时,微波干燥能更好地保持马兰的色泽,并有更高的复水性。

马兰化学成分的研究

目的研究苗药马兰的化学成分。方法利用Sephadex LH-20，硅胶柱色谱和硅胶制备薄层色谱等分离方法反复分离纯化．用各种波谱数据分析鉴定化合物的结构。结果从马兰的乙醇提取部分分离得到6个化合物，分别鉴定为木栓酮（Ⅰ），木栓醇（Ⅱ），达玛二烯醇乙酸酯（Ⅲ），月桂酸（Ⅳ），β-谷甾醇（Ⅴ），脱镁叶绿甲酯酸（Ⅵ）。结论化合物Ⅰ～Ⅵ均首次从该植物中分离得到。

亚临界水萃取马兰挥发油及其抑菌活性的研究

以马兰挥发油提取得率为指标,通过单因素和正交试验,考察亚临界水萃取马兰挥发油的最佳实验条件,优选出马兰挥发油的亚临界水萃取工艺参数,并对马兰挥发油的抑菌活性进行研究。结果表明,当提取压力为5.0 MPa、提取温度160℃、水料比20∶1(mL/g)、提取时间30 min时,马兰挥发油提取得率达0.50%,与水蒸气蒸馏法和乙醚索氏提取法(挥发油提取得率分别为0.34%,0.23%)相比,亚临界水萃取马兰挥发油从时间和提取率上均具有明显的优势,而且马兰挥发油在一定浓度范围内对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌均有较强的抑制作用。

马兰化学成分研究

目的:研究马兰化学成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20、制备HPLC等多种色谱方法,根据波谱数据进行结构鉴定。结果:从马兰中共分离得到14个化合物,分别鉴别为:α-菠菜甾醇(1)、邻苯二甲酸二丁酯(2)、(22E,24R)-5α,8α-过氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(3)、齐墩果酸(4)、松柏醇(5)、伞形花内酯(6)、丁香脂素(7)、15-oxo-14,16H-strictic acid(8)、落叶松脂素(9)、(Z)-3,7,11-三甲基-1,6-十二烷二烯-3,10,11-三醇(10)、neoechinulin A(11)、松脂醇(12)、3,5-二甲氧基-4-羟基苯丙烯(13)、3,4,5-三甲氧基苯乙酮(14)。结论:除化合物1外,其余所有化合物均为首次从该属植物中分离得到。

马兰草高效液相色谱指纹图谱研究

目的建立贵州民族药材马兰草高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱分析方法。方法采用Diamonsil C18柱,0.5%甲酸-水∶乙腈溶液梯度洗脱,测定了10批马兰草药材的指纹图谱,应用相似度分析和聚类分析方法对药材进行分类,建立指纹图谱共有模式。结果建立了马兰草药材的指纹图谱测定方法及其特征图谱,不同产地药材图谱具有一定差异性。结论马兰草HPLC指纹图谱的建立为药材质量控制提供科学依据。

大孔树脂纯化马兰总黄酮树脂吸附特性及工艺的研究

研究大孔树脂纯化马兰总黄酮树脂吸附特性及工艺条件及参数。文中分别进行静态吸附、静态解吸、静态吸附动力学过程(Lagergren准一级动力学方程)、静态吸附等温曲线(Langmuir和Freundich等温吸附方程)、动态吸附实验,从7种大孔树脂中筛选用于马兰总黄酮分离的最佳树脂,并系统研究最佳大孔树脂分离纯化的吸附性能和最优洗脱参数。结果表明:D101型大孔树脂为分离马兰黄酮类组分最佳树脂,其分离的最佳工艺为总黄酮浓度为9.36 mg/mL的样液,以3 BV/h的流速,控制pH值为4～5上柱,用75%乙醇以3 BV/h用量进行洗脱,可获得样品总黄酮纯度达70%以上。

马兰籽油中脂肪酸的不同甲酯化方法与GC-MS分析

采用索氏提取法对马兰籽中马兰籽油进行提取,分别采用两种方法进行甲酯化处理,以气相色谱-质谱联用仪进行分析,对它们的脂肪酸组成和相对含量进行比较。结果表明:酯化方法l和酯化方法2分别鉴定出16种和6种脂肪酸,占马兰籽油总量的98.66%和63.68%,两种方法酯化的马兰籽油中鉴定出主要脂肪酸均为十八碳二烯酸、十八碳烯酸、十六酸。

马兰头多糖提取工艺的响应面法优化及不同部位多糖含量的测定

以连云港花果山野生马兰头地上部分为原料,研究马兰头多糖的提取工艺。在单因素试验基础上,根据Box-Behnken试验设计原理,选取液料比、提取时间和提取温度三因素三水平进行中心组合试验,通过响应面分析得到优化组合条件。结果表明提取工艺最佳条件为提取温度98℃、提取时间3.5h、液料比33:1(mL/g)、提取2次。该条件下多糖提取率预测值为4.2037%,验证值为4.1946%。对马兰头不同部位多糖含量测定的结果表明,马兰头不同部位多糖含量存在明显差异,叶中最高,为4.9407%,茎次之,为1.5356%,根最低,仅有0.6817%。

马兰提取物抗氧化性研究

目的:考查马兰中水提取物和乙醇提取物抗氧化活性。方法:分别以水和乙醇为提取液,探讨马兰中水提取物和乙醇提取物的抗氧化活性,包括还原能力以及清除DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基和H2O2的能力。结果:提取物主要成分为黄酮类化合物。马兰水提取物的抗氧化活性为:超氧阴离子自由基(IC502.2μg/mL)>H2O2(IC502.8μg/mL)>羟自由基(IC505.6μg/mL)>DPPH自由基(IC508.5μg/mL)>金属螯合性(IC5028.0μg/mL)。而马兰乙醇提取物的抗氧化活性为:H2O2(IC502.0μg/mL)>超氧阴离子自由基(IC502.1μg/mL)>羟自由基(IC502.5μg/mL)>DPPH自由基(IC505.6μg/mL)>金属螯合性(IC5051.2μg/mL)。结论:马兰提取物具有较强的抗氧化活性。