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马传染性贫血病毒p26蛋白单克隆抗体的制备 被引量:1
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作者 韩秀娥 张萍 +4 位作者 王雪峰 李萌 魏萍 周建华 尹杰超 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期565-567,共3页
为制备马传染性贫血病毒(EIAV)的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的EIAVp26蛋白作为免疫原免疫8周龄的BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,建立抗EIAV衣壳蛋白p26抗体的杂交瘤细胞。应用重组p26蛋白为抗原建立ELISA筛选方法,获... 为制备马传染性贫血病毒(EIAV)的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的EIAVp26蛋白作为免疫原免疫8周龄的BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,建立抗EIAV衣壳蛋白p26抗体的杂交瘤细胞。应用重组p26蛋白为抗原建立ELISA筛选方法,获得两株能够稳定分泌特异性MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为E11和F8。经试验证明,这些抗p26MAb均能够与感染驴胎皮肤细胞的EIAV和经SDS-PAGE分离的EIAV总蛋白中的p26蛋白结合。这两株p26蛋白MAb的获得将为EIAV的检测及鉴别诊断奠定基础。 展开更多
关键词 马传染性贫血病毒 p26蛋白 单克隆抗体
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家蚕核型多角体病毒p26基因及部分hr5区的克隆和序列分析 被引量:1
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作者 张耀洲 吴祥甫 +1 位作者 李载平 李德葆 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期271-277,共7页
家蚕核型多角体病毒p26基因及部分hr5区的克隆和序列分析张耀洲,吴祥甫,李载平,李德葆(浙江农业大学生物技术研究所,杭州310029)关键词家蚕核型多角体病毒,核苷酸序列,p26基因,hr5家蚕核型多角体病毒(Bo... 家蚕核型多角体病毒p26基因及部分hr5区的克隆和序列分析张耀洲,吴祥甫,李载平,李德葆(浙江农业大学生物技术研究所,杭州310029)关键词家蚕核型多角体病毒,核苷酸序列,p26基因,hr5家蚕核型多角体病毒(Bombyxmorinuclearpo... 展开更多
关键词 家蚕 核型 多角体病毒 核苷酸 序列
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一株抗马传染性贫血病毒p26蛋白单克隆抗体识别差异表位鉴定
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作者 常浩 胡哲 +3 位作者 戈曼 郭继珂 王晓钧 周建华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期152-154,共3页
为研究本实验室制备的抗马传染性贫血病毒(EIAV)p26蛋白单克隆抗体(MAb)1G11的B细胞表位识别特性,本研究通过对不同EIAV株p26蛋白进行系统进化分析,将其划分为3大分支群。根据已经鉴定的线性表位(命名为1G11),通过对3个分支群中的... 为研究本实验室制备的抗马传染性贫血病毒(EIAV)p26蛋白单克隆抗体(MAb)1G11的B细胞表位识别特性,本研究通过对不同EIAV株p26蛋白进行系统进化分析,将其划分为3大分支群。根据已经鉴定的线性表位(命名为1G11),通过对3个分支群中的8株代表性病毒株p26蛋白1G11表位区域分析,并原核表达8株病毒1G11表位区域多肽P26-(1~8),经SDS-PAGE和western blot鉴定,结果表明除表位多肽P26-7以外,其他多肽均能够被MAb 1G11所识别。分析显示P26-7多肽序列同时发生N^200S和M^215L变异。由于N^200S和M^215L单独改变并不影响MAb 1G11识别,因此我们推测N^200与M^215同时改变可能影响两侧末端半胱氨酸(C)及附近氨基酸所形成的表位构象,进而影响MAb 1G11识别;同时,其他氨基酸差异并不影响MAb 1G11识别,表明该抗体对1G11表位区域识别具有广谱性。这为进一步应用该MAb作为检测抗体和开发广谱性诊断检测方法提供了依据。 展开更多
关键词 马传染性贫血病毒 p26蛋白 单克隆抗体1G11 1G11表位
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Structural Characters and Isolated Stability of Phosphorus Polyanions
4
作者 LIPing 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第4期467-477,共11页
The optimized geometries at the RHF/6-311++G** level, the relatively stable energy at the MPW1PW91/6-311++G** level and the structural characters of anions have been acquired, indicating the stability is related to ... The optimized geometries at the RHF/6-311++G** level, the relatively stable energy at the MPW1PW91/6-311++G** level and the structural characters of anions have been acquired, indicating the stability is related to the chemical bonding of μ2?P atoms and the distri- bution of negative charges. The configurations of cage units P8 4- and P9 5- are stable due to the less torsion, but their ES values are relatively higher than that of P7 3- with more μ2?P atoms and the isolated stability is lower than that of P7 . They potentially play an important role as intermediate 3- in chemical reaction of producing complicated polyphosphides. Based on the related electronic properties, a stable polyanion must have low valence electron concentration, no (μ2?P)?(μ2?P) bond and a little dispersive charge. The earmark IR frequencies of cage units have been assigned to the vibration models in the end. 展开更多
关键词 phosphorus polyanions p8 ~p26 stereo configuration cage units 4- 4- relatively stable energy vibration frequencies STABILITY
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绵羊肺炎支原体Y98 P26-P40融合基因的表达及免疫原性 被引量:2
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作者 刘文青 范琼瑛 +2 位作者 赵红艳 车腾飞 赵宝华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1552-1558,共7页
根据猪肺炎支原体(Mycoplasma Hyopneumoniae,Mhp)外膜蛋白P30基因和P46基因序列设计引物,通过PCR克隆了绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)标准株Y98膜蛋白P26基因和P40基因片段。通过对该序列的同源性分析表明MO P26基因与M... 根据猪肺炎支原体(Mycoplasma Hyopneumoniae,Mhp)外膜蛋白P30基因和P46基因序列设计引物,通过PCR克隆了绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)标准株Y98膜蛋白P26基因和P40基因片段。通过对该序列的同源性分析表明MO P26基因与Mhp P30基因核酸序列同源性为79%,MO P40基因与Mhp P46基因核酸序列同源性为74%。分别将MO P26基因、MO P40基因以及P26-P40融合基因与原核表达载体pET28a连接构建了表达质粒pET28a-P26,pET28a-P40,pET28a-P26-P40,并转化受体菌BL21(DE3)得到重组菌株BL21(DE3)(pET28a-P26),BL21(DE3)(pET28a-P40),BL21(DE3)(pET28a-P26-P40)。经IPTG诱导后SDS-PAGE表明有26 000,40 000和66 000左右的目的条带出现;Western blotting表明表达的目的蛋白具有良好的反应原性;小鼠免疫试验表明重组菌株BL21(DE3)(pET28a-P26),BL21(DE3)(pET28a-P40),BL21(DE3)(pET28a-P26-P40)表达的蛋白对小鼠的保护率分别为90%,90%和100%;重组菌株BL21(DE3)(pET28a-P26-P40)表达的蛋白对绵羊的保护率为85%。本试验结果为研制绵羊肺炎支原体基因工程疫苗奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体Y98 p26 p40融合基因 基因表达 免疫原性
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DNA甲基化对大肠癌相关基因表达的调控意义 被引量:2
6
作者 李庚 千新来 +4 位作者 崔静 王中群 冶亚平 杨晓煜 李永真 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2006年第17期1699-1703,共5页
目的:探讨大肠癌发生与演进中p16,Rb,cyclin D1甲基化状态与蛋白表达的关系及意义.方法:提取正常黏膜、腺瘤、癌旁组织及癌组织基因组DNA,应用MSP法检测不同病变阶段组织中各基因的甲基化状态,并对其与蛋白表达及临床病理参数的关系进... 目的:探讨大肠癌发生与演进中p16,Rb,cyclin D1甲基化状态与蛋白表达的关系及意义.方法:提取正常黏膜、腺瘤、癌旁组织及癌组织基因组DNA,应用MSP法检测不同病变阶段组织中各基因的甲基化状态,并对其与蛋白表达及临床病理参数的关系进行分析.结果:在大肠癌发生与演进过程中,p16,Rb 基因甲基化率呈增高趋势,cyclin D1基因甲基化率呈下降趋势,p16(切缘:r=-0.185,P =0.173;腺瘤:r=-0.381,P=0.013:癌旁:r= -0.419,P=0.001;癌:r=-0.516,P=0.000)、 cyclin D1(切缘:r=-0.282,P=0.035;腺瘤:r= -0.329,P=0.033;癌旁:r=-0.298,P=0.026; 癌:r=-0.618,P=0.000)基因甲基化程度分别与其蛋白表达呈明显负相关,且在癌组织分化程度(p16:X2=11.232,P=0.002,cyclin D1:X2 =9.144,P=0.015)、浸润深度(p16:X2=6.229, P=0.013;cyclin D1:X2=8.023,P=0.006)和淋巴结转移(p16:X2=5.707,P=0.016;cyclin D1: X2=7.794,P=0.005)上有显著性差异.Rb基因的甲基化状态在Rb表达抑制上不起主要作用.结论:大肠癌p16高甲基化和cyclin D1低甲基化可能是p16失活和cyclin D1过表达的主要机制,在大肠癌的发生、发展中发挥重要作用, 对于大肠癌的早期诊断、恶性程度及预后判断有重要意义. 展开更多
关键词 大肠癌 DNA甲基化 p16 RB CYCLIN D1
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牛免疫缺陷病毒(BIV)核心蛋白在大肠杆菌中的表达和鉴定 被引量:1
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作者 耿运琪 杨丽珠 +4 位作者 纪永刚 陈启民 马明 孙庆 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期281-283,共3页
牛免疫缺陷病毒(Bovine immunodeficiency-like virus,BIV)是近年来分离的一株慢病毒,可引起牛的淋巴结病、淋巴细胞增多症、中枢神经系统损伤和进行性消瘦等多种疾病,并可能干扰免疫系统的正常功能。BIV通过接触感染,但不传染人。BIV... 牛免疫缺陷病毒(Bovine immunodeficiency-like virus,BIV)是近年来分离的一株慢病毒,可引起牛的淋巴结病、淋巴细胞增多症、中枢神经系统损伤和进行性消瘦等多种疾病,并可能干扰免疫系统的正常功能。BIV通过接触感染,但不传染人。BIV感染在美国和西欧流行较广,并造成较大的经济损失。 展开更多
关键词 免疫缺陷病毒 核心蛋白
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bcl-2,MDR1基因及编码蛋白在儿童急性白血病骨髓单个核细胞中表达的研究 被引量:1
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作者 何莉 侯克佐 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期463-465,共3页
目的 :探讨bcl 2 ,MDR1基因及编码蛋白p2 6 ,p170表达与多药耐药的关系。方法 :RT PCR技术、S P免疫组化方法检测 36例白血病患儿及 10例血小板减少性紫癜患儿骨髓单个核细胞bcl 2 ,MDR1基因及蛋白表达。结果 :bcl 2基因的表达初治组、... 目的 :探讨bcl 2 ,MDR1基因及编码蛋白p2 6 ,p170表达与多药耐药的关系。方法 :RT PCR技术、S P免疫组化方法检测 36例白血病患儿及 10例血小板减少性紫癜患儿骨髓单个核细胞bcl 2 ,MDR1基因及蛋白表达。结果 :bcl 2基因的表达初治组、完全缓解组低于复发组 (P <0 .0 5 ) ;MDR1基因的表达复发组高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,p2 6 ,p170阳性率初治组、完全缓解组、对照组低于复发组 (P <0 .0 5 )。p170阳性率初治组高于对照组 (P <0 .0 5 )。化疗后p170阳性率明显高于化疗前 (P <0 .0 1)。bcl 2 ,MDR1基因的表达与临床生物学特征无相关性。bcl 2与MDR1基因之间、p170和p2 6蛋白之间均无相关性。结论 :bcl 2和MDR1基因、蛋白通过不同的机制与白血病的耐药有关。 展开更多
关键词 白血病 BCL-2基因 MDR1基因 p170 p26 耐药
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汉赛巴尔通体P26蛋白基因克隆、分子特征及重组蛋白抗原特性分析
9
作者 李重阳 孟庆玲 +5 位作者 乔军 贡莎莎 王立霞 伍晔晖 才学鹏 陈创夫 《生物技术》 北大核心 2017年第5期422-427,共6页
[目的]研究汉赛巴尔通体(Bartonella henselae,Bh)P26蛋白的抗原特性。[方法]根据GenBank中Bh P26基因DNA序列设计特异性引物,对阳性猫血液样品进行PCR扩增,克隆测序后进行分子特征分析。构建表达载体pETP26,转化至感受态细胞E.coli BL2... [目的]研究汉赛巴尔通体(Bartonella henselae,Bh)P26蛋白的抗原特性。[方法]根据GenBank中Bh P26基因DNA序列设计特异性引物,对阳性猫血液样品进行PCR扩增,克隆测序后进行分子特征分析。构建表达载体pETP26,转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3)进行诱导表达;将重组蛋白纯化后免疫小鼠,用间接ELISA抗体检测试剂盒检测抗体,分析其免疫学特性。[结果]P26基因全长738 bp,编码246个氨基酸。推导的P26蛋白氨基酸序列含有4个潜在的N-糖基化位点、4个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、2个N-豆蔻酰化位点和1个信号肽序列;抗原表位主要集中在106~190位。SDS-PAGE和Western Blot分析结果表明,表达的分子量为35 kDa,可与B h阳性血清发生反应;重组蛋白免疫小鼠后其血清样本Bh抗体检测结果为阳性。[结论]P26重组蛋白在大肠杆菌的高效表达且具有良好的反应和免疫原性,为进一步探讨P26蛋白在Bh感染诊断研究中的潜在价值提供前期基础。 展开更多
关键词 汉赛巴尔通体 p26蛋白基因 分子特征 抗原特性
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山羊KRTAP26-1基因鉴定及其遗传特征研究 被引量:6
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作者 车陇杰 王继卿 +6 位作者 Huitong Zhou 李涛 赵孟丽 胡江 刘秀 李少斌 罗玉柱 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期710-717,共8页
角蛋白关联蛋白(keratin-associated proteins,KAPs)是羊毛和羊绒的主要结构成分,决定了它们的理化性质。在人类、家犬、小鼠和大鼠中已描述了高硫蛋白KAP26-1的编码基因,但在山羊中该基因尚未被鉴定。本研究以人类KRTAP26-1基因编码... 角蛋白关联蛋白(keratin-associated proteins,KAPs)是羊毛和羊绒的主要结构成分,决定了它们的理化性质。在人类、家犬、小鼠和大鼠中已描述了高硫蛋白KAP26-1的编码基因,但在山羊中该基因尚未被鉴定。本研究以人类KRTAP26-1基因编码区序列为模板,利用BLAST软件,在山羊基因组中发现了与人类KRTAP26-1基因具有高度同源性的序列并被假定为山羊的KRTAP26-1基因。PCR-SSCP分析发现,在5个山羊群体的605个个体中有4条不同的核苷酸变异序列(定义为A-D)。序列同源性和进化树研究结果表明,这4条序列与已鉴定的其它山羊KRTAPs基因序列有较低的同源性,但与人类、家犬、小鼠和大鼠的KR-TAP26-1基因序列具有最高的同源性。这说明发现的这4条序列是山羊KRTAP26-1基因的等位基因。4个等位基因的编码区内,共发现了6个SNPs位点,其中3个是非同义突变,造成了氨基酸序列的变化。4条多肽链含有36-38个磷酸化位点。5个山羊群体均处于中度多态,但是等位基因频率分布在不同群体间有差异。等位基因A、B和D在5个山羊群体中均出现,但C在中卫山羊中没有出现。结果表明,山羊KR-TAP26-1基因有较为丰富的核苷酸序列变异,这些变异可能与绒山羊的产绒性能有关。 展开更多
关键词 KRTAp26-1 核苷酸序列变异 遗传特征 pCR-SSCp 山羊 产绒性能
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棉铃虫核型多角体病毒朝鲜分离株BamHI-Ⅰ片段的核苷酸序列分析
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作者 赵光日 张珈敏 胡远扬 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期491-496,共6页
对在朝鲜首次分离得到的棉铃虫核型多角体病毒朝鲜株 (HaSNPV KO)基因组BamHI Ⅰ片段的全序列进行了测序与分析 .该片段全长 1.895kb ,包括 p2 6基因 ,p10基因及 p74基因的 3′末端序列 .p2 6基因位于p10基因的上游 .排列方向与p10基因... 对在朝鲜首次分离得到的棉铃虫核型多角体病毒朝鲜株 (HaSNPV KO)基因组BamHI Ⅰ片段的全序列进行了测序与分析 .该片段全长 1.895kb ,包括 p2 6基因 ,p10基因及 p74基因的 3′末端序列 .p2 6基因位于p10基因的上游 .排列方向与p10基因相同 ,该基因的编码区大小为 80 3bp ,编码 2 6 7个氨基酸 .p10基因的编码区大小为 2 6 1bp ,编码 87个氨基酸 .p74基因的排列方向与 p10和p2 6基因相反 .棉铃虫核型多角体病毒朝鲜株与棉铃虫核型多角体病毒中国株 (HaSNPV G4株 )的p2 6基因序列的同源性为 99.8% ,两个分离株的 p10基因序列完全相同 ,而 p74基因 3′末端序列的结果有 99.4 %的同源性 .朝鲜株与美洲株 (HzSNPV)的 p2 6和 p10基因序列的同源性分别为 98.8% ,98.7% ,而 p74基因 3′末端序列有 97. 展开更多
关键词 棉铃虫核型多角体病毒朝鲜株 p26基因 p10基因 p74基因 BamHI-Ⅰ 核苷酸 序列分析
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DNA sequence comparative analysis of the 3pter-p26 region of human genome
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作者 LUO Chunqing, LI Yan, ZHANG Xiaowei, ZHANG Yilin, ZHANG Haiqing, CHEN Chong, XU Zuyuan, CUI Peng, HU Songnian, YANG Huanming & DONG Wei Institute of Genetic and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China Beijing Genomics Institute, Chinese Academy of Sciences, Beijing 101300, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2005年第1期34-40,共7页
Most proterminal regions of human chromosomes are GC-rich and gene-rich. Chromosome 3p is an exception. Its proterminal region is GC-poor, and likely to lose heterozygosity, thus causing a number of fatal diseases. Ex... Most proterminal regions of human chromosomes are GC-rich and gene-rich. Chromosome 3p is an exception. Its proterminal region is GC-poor, and likely to lose heterozygosity, thus causing a number of fatal diseases. Except one gap left in the telomeric position, the proterminal region of human chromosome 3p has been completely sequenced. The detailed sequence analysis showed: (i) the GC content of this region was 38.5%, being the lowest among all the human proterminal regions; (ii) this region contained 20 known genes and 22 predicted genes, with an average gene size of 97.5 kb. The previously mapped gene Cntn3 was not found in this region, but instead located in the 74 Mb position of human chromosome 3p; (iii) the interspersed repeats of this region were more active than the average level of the whole human genome, especially (TA)n, the content of which was twice the genome average; (iv) this region had a conserved synteny extending from 104.1 Mb to 112.4 Mb on the mouse chromosome 6, which was 8% larger in size, not in accordance with the whole genome comparison, probably because the 3pter-p26 region was more likely to lose neocleitides and its mouse synteny had more active interspersed repeats. 展开更多
关键词 COMpARATIVE analysis 3pter-p26 HUMAN genome.
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党组织参与民营企业治理的效果与机制研究 被引量:4
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作者 程磊 郑前宏 《经济评论》 北大核心 2023年第5期53-70,共18页
在经济“新常态”下,民营企业建立党组织是大势所趋,形成了“中国特色”的公司治理机制。本文基于2003—2021年中国A股民营上市公司数据,手工收集兼任上市公司董事、监事和高管的党组成员信息,实证考察党组织参与公司治理对民营企业绩... 在经济“新常态”下,民营企业建立党组织是大势所趋,形成了“中国特色”的公司治理机制。本文基于2003—2021年中国A股民营上市公司数据,手工收集兼任上市公司董事、监事和高管的党组成员信息,实证考察党组织参与公司治理对民营企业绩效的影响。研究发现,党组织参与民营企业治理程度的提高会使得企业资产回报率显著上升。在采取多种方法控制内生性问题后,这一正向促进作用依然存在。机制分析发现,党组织参与公司治理通过缓解企业信贷约束、提升企业政策认知水平以及保护企业员工合法权益提高民营企业的经济绩效。本文全面系统地研究了民营企业党组织建设的效果及作用机制,不仅为“中国特色”公司治理机制的有效性提供了证据支持,还为非公有制企业进一步开展党建工作提供了政策依据。 展开更多
关键词 党组织 企业绩效 公司治理 民营企业
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