时间分辨荧光免疫分析法检测游离F-βHCG的方法学评价

目的对时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)定量检测F-βHCG的各种性能指标进行方法学评价,验证其临床适用性。方法通过灵敏度、批内和批间精密度、标准曲线稳定性参数等指标评价TRFIA检测F-βHCG的性能,同时通过回收试验分析其准确度。结果 F-βHCG的最小测定值为0.09ng/ml,低、中、高3种质控品批内和批间变异系数均小于10%,标准曲线稳定性参数各变异系数小于5%,回收试验结果在97%～104.7%之间。结论 TRFIA法检测F-βHCG具有准确性好、灵敏度高、特异性强、能自动化分析等优点,能充分满足临床检测的需求。

NT联合F-βhCG及PAPP-A在妊娠早期唐氏综合征诊断中的临床研究

目的探讨分析NT联合F-βhCG及PAPP-A在妊娠早期唐氏综合征(Down’s syndrome,DS)诊断中的应用价值。方法取2008年4月-2012年12月于我院进行产前检查的5574例孕妇,测定所有孕妇血清F-βhCG与PAPP-A的水平,并采用超声检测胎儿的NT值,比较血清学检查与血清学检查联合NT测定对唐氏综合征早期评估的准确性。结果共10例患者被确诊为DS,血清学检查联合NT测定诊断DS的ROC曲线下面积要大于单一的血清学检查(0.963vs 0.897);DS组与非DS组平均年龄、F-βhCG、PAPP-A及NT的测定中位数值的差异比较有统计学意义(P<0.05);非条件多因素Logistic回归分析结果显示随着孕妇年龄(β=1.364,OR=3.912)、F-βhCG水平(β=1.294,OR=3.647)及NT水平(β=1.408,OR=0.488)的升高,胎儿患DS的风险增加,而随着PAPP-A水平(β=-1.117,OR=0.327)的升高,胎儿患DS的风险降低。结论 NT联合F-βhCG及PAPP-A在妊娠早期唐氏综合征诊断中的准确性较高,值得推广。

pCR-HBc-X6-βhCG CTP37 DNA疫苗的构建及体外转染实验

本文选取βhCG羧基端37肽(βhCG CTP37)的序列和βhCG109-118十肽重复6次的多聚表位,插入到真核表达质粒载体pCR-HBc乙肝核心抗原的第80位氨基酸中,构建重组质粒pCR-HBc-X6-βhCGCTP37,将其转染CHO细胞,在转染细胞裂解物中发现存在特异性表达产物,说明构建的DNA疫苗具有进一步动物免疫的价值.

孕中期妇女血清AFP、F-βhCG测定筛查唐氏综合征

目的探讨检测孕中期妇女(14～20w)外周血清中甲胎蛋白(AFP)的游离绒毛膜促性腺激素(F-βhCG)的含量对于筛查唐氏综合征患儿的有效性.方法应用磁性分离酶免疫测定技术测定血清中AP、F-βhCG的含量,结合孕妇临床资料用分析软件进行分析,并通过羊水细胞染色体核型分析给予确诊.结果在接受血清筛查的2849例孕妇中,筛出唐氏综合征高危312例,筛查阳性率为10.95%,其中有174例接受羊水染色体检查,发现2例唐氏综合征患儿.筛出神经管缺损高危61例,全部做了B超检查,发现2例神经管缺损患儿.结论测定孕中期妇女血清AFP、F-βhCG的含量并进行风险分析,对筛查唐氏综合征患儿,降低其出生机率具有重要意义.

血β-HCG的变化趋势对异位妊娠保守治疗结局的影响

目的观察血β-HCG的变化趋势对异位妊娠保守治疗的影响。方法将168例异位妊娠患者按入院时血β-HCG的变化趋势分为血β-HCG下降趋势组(A组)和血β-HCG上升趋势组(B组)。A组(n=72)采用米非司酮及中药治疗,B组(n=96)采用氨甲喋呤、米非司酮及中药治疗。结果A组成功率(100.0%)高于B组(72.0%)(P<0.05)。A组在治疗过程中血β-HCG下降,B组在治疗过程中血β-HCG先上升再下降;A组在治疗过程中盆腔包块缩小,B组在治疗过程中盆腔包块先增大后缩小,2组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。A组不良反应发生率(11.1%)低于对照组(69.8%)(P<0.05)。结论血β-HCG的变化趋势与治疗结局直接挂钩。

β-HCG值用于指导异位妊娠治疗方式的价值分析

异位妊娠是妇产科最常见的急腹症之一,它的特点是发病急,病情凶险,而且具有隐匿性,如发现不及时或者患者重视度不足,会严重危害育龄女性生命健康。尽管大家对医学知识越来越重视,健康意识也有所提升,但异位妊娠的发病率并没有随之而降低,反而在一定程度上有所提高。这不仅与附件炎、盆腔炎、内膜异位症等因素有关,也与现在人工流产术、剖腹产术等一些妇科手术增多有关。既往有输卵管手术史、盆腔感染是最明显的高危因素。也有一部分人过早进入社会生活，对性知识认识不足，缺乏自身保护意识，也是导致异位妊娠发病率增高的原因之一。

孕妇血清AFP、F-βhCG对孕中期孕妇进行产前筛查胎儿染色体异常与神经管缺陷的作用分析

目的探讨分析孕妇血清甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,简称AFP)、血清β-亚单位绒毛膜促性腺激素(Free-βhCG,简称F-βhCG)对孕中期孕妇进行产前筛查胎儿染色体异常与神经管缺陷的作用。方法选取2018年1月-2019年1月在我院行产前筛查的孕妇2210例,所有孕妇均接受血清AFP、血清F-βhCG检测,然后再与孕妇的一般资料如孕周、年龄及体重等的相结合,通过随机分析软件来得到胎儿发生染色体异常和发生神经管缺陷的风险。结果本次研究进行产前筛查的孕妇2210例当中,共筛查高危孕妇98例(4.4%);其中,NTD高危:35例,18三体综合征高危:11例,21三体综合征高危:52例。(P>0.05)。<35岁年龄段筛查得到的高危风险比例低于≥35岁年龄段(P<0.05)。随着妊娠孕周的不断增加,低危风险孕妇血清AFP水平逐渐增加,而血清F-βhCG水平逐渐降低;不同孕周下的孕妇在血清AFP水平和血清F-βhCG水平方面差异显著(P<0.05)。63例染色体高危孕妇当中,有60例(95.2%)接受进一步的羊水穿刺检查,共确诊4例,全部为染色体异常,在确诊之后即引产,异常率为6.7%。35例NTD高危孕妇当中,有26例接受羊水穿刺检查,共确诊1例,异常率为3.8%。结论在孕妇妊娠中期联合检测孕妇血清AFP、血清F-βhCG,对预测及筛查胎儿是否出现染色体异常及神经管缺陷具有十分重要的参考作用;可最大程度的降低分娩缺陷新生儿的风险及比率。

mGM-CSF/βhCG融合蛋白的制备及其致敏树突状细胞疫苗抗小鼠RM-1前列腺癌的作用

利用分子生物学方法设计并构建含有βh CG基因和m GM-CSF基因的表达载体p ET-28a-m GM-CSF-X10-βh CGCTP37质粒。乳糖诱导表达该融合蛋白,通过硫酸铵分级沉淀和阴离子交换柱DEAE-cellulose进行纯化,并以此融合蛋白致敏从C57BL/6J小鼠体内提取的树突状细胞(DC)从而获得DC疫苗。将DC疫苗回输至接种前列腺癌RM-1的C57BL/6J小鼠体内,分组检测。结果显示,DC组和DC与紫杉醇(Pac)联用(DP)组与Pac组相比抗肿瘤效果具有极显著性差异(P<0.01);且DP组的抗肿瘤效果优于DC组。可见构建的新型DC疫苗可抑制前列腺癌的生长,且与紫杉醇联合使用具有协同抗肿瘤作用。

孕早期体重指数、β-HCG对巨大儿预测意义

目的：探讨孕早期（10-11周）孕妇体重指数、HCG与巨大儿发生有无明显关系。方法：收集记录2008年1月-2009年12月我院800例孕10~11周、单胎孕妇的体重指数（BMI）、游离β-HCG数值、记录分娩胎儿足月体重,其中57例胎儿体重≥4 000g,743例体重〈4 000g,但≥2 500g。回顾性分析孕早期孕妇体重指数、游离β-HCG与巨大儿的关系。结果：巨大儿组孕妇早期体重指数、β-HCG均均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：巨大儿产妇较非巨大儿产妇孕早期体重指数、β-HCG、GF值显著升高,提示孕早期体重指数、游离β-HCG增高对预测巨大儿有意义。

用染色体原位杂交技术定位猪βHCG基因同类物于14q^(11)-q^(16)

本研究以点渍法和原位杂交技术为主要方法,以人类绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Go-nadotropin)β链的克隆基因为探针,开展猪的基因定位研究。证明猪的基因组中存在βHCG基因同类物,并将其定位于染色体14q^(11)-q^(16).本文还对一些相关问题进行了讨论。

βhCG-CTP/pcDNA3重组真核表达载体的构建及表达

目的 克隆并表达 βhCG CTP基因片端 ,探讨采用 βhCG CTP基因片段免疫小鼠进行免疫避孕的可能性。 方法 采用化学合成法得到含有 βhCG CTP基因片段 ,亚克隆至真核表达载体pcDNA3中 ,然后转化大肠杆菌DH5α ,利用脂质体介导将pcDNA3 /βhCG CTP重组质粒表达载体转染到COS 7细胞 ,免疫组化法检测 βhCG CTP基因在哺乳动物细胞中的表达情况。结果 重组质粒经EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切和测序证实插入序列与预期设计完全一致 ;利用脂质体介导将pcDNA3 /βhCG CTP重组质粒表达载体导入COS 7细胞 ,获得了 βhCG CTP的瞬时表达。 结论 成功构建了 βhCG CTP真核表达载体pcDNA3 /βhCG CTP ,该载体能在哺乳动物细胞中正确表达 ,表达产物 βhCG CTP能够被抗 βhCG抗体所识别。

抗人绒毛膜促性腺激素(hCG)避孕疫苗的研制

从人绒毛膜促性腺激素（hCG）中分离β亚单位（βhCG），用异质双功能交联剂SPDP将βhCG与破伤风类毒素偶联，形成生物大分子抗原，脂质体包被后制成hCG避孕疫苗。按生物制品规程要求检定，安全试验合格。用此疫苗免疫小白鼠和恒河猴，小白鼠免后21天的血清抗体可中和22ng／mlβhCG，其抗体峰在免后35天。猴的抗体峰在免后60天（112．3ng／ml）。恒河猴在10个月之后接种第2针，其抗体峰值为90ng／ml。

孕中期血清学产前筛查的临床意义分析

目的研究孕中期产前筛查中血清标志物甲胎蛋白(AFP)、游离雌三醇(uE3)、人绒毛膜促性腺激素游离β-亚单位(f-βhCG)的临床意义。方法用时间分辨荧光免疫分析技术测定孕妇血清中AFP、UE3、f-βhCG水平,由PE公司提供的唐氏筛查内嵌软件得出产前筛查的风险值。以唐氏综合征(DS)风险大于1∶270为筛查阳性,18-三体综合征,即爱德华综合征(ES)风险大于1∶350为阳性,对筛查出的高危孕妇进行羊水穿刺或B超进行确诊,随访孕妇的妊娠经过及妊娠结果。结果 6379例孕妇中筛查出高危妊娠共576例,其中35岁以下孕妇筛查阳性率为5.19%(285/5484);35岁以上孕妇筛查阳性32.5%(291/895)。对高危组孕妇行羊水穿刺和B超检查共确诊10例,其中5例DS患儿,18-三体综合征患儿3例,NTDs患儿2例。DS检出率达83.3%。结论孕中期血清学筛查是一种较理想的产前检查模式,为了减少假阳性率,要密切随访观察,提高产前筛查的覆盖率能有效降低漏诊率。

甲氨蝶呤局部注射联合米非司酮口服治疗剖宫产切口瘢痕妊娠的临床研究

目的：探讨甲氨蝶呤（MTX）局部注射联合米非司酮口服治疗剖宫产切口瘢痕妊娠的临床疗效。方法：选取2008–2016年在我院超声诊断科行甲氨蝶呤局部注射联合米非司酮口服治疗的瘢痕妊娠患者,共计62例,行超声引导下病灶局部注射MTX（50~75 mg）,术后联合口服米非司酮（25 mg,bid,连服3 d）。治疗后每周观察患者血βHCG值下降情况,病灶大小及血流情况,病灶处肌壁厚度,阴道出血情况及肝功能指标等。结果：62例患者均于治疗后复查血βHCG逐渐下降至正常,病灶周边血流信号逐渐减少,病灶大小逐渐缩小至消失,病灶处肌壁厚度逐渐增厚,部分患者出现少量阴道出血后逐渐好转,仅1例出现阴道大量出血,未见肝功能受损现象。结论：甲氨蝶呤局部注射联合米非司酮口服治疗剖宫产切口瘢痕妊娠具有良好的临床疗效,该法简便、安全、有效,可作为瘢痕妊娠有效的微创治疗方法。

黑龙江地区15549例孕中期母体血清产前筛查及结果分析

目的：探讨孕妇孕中期（15～20＋6周）血清标志物甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）、人绒毛膜促性腺激素游离的β亚基（f-βHCG）和游离雌三醇（uE3）在胎儿唐氏综合征（DS）、18-三体综合征和开放性神经管畸形（ open neural tube malformation，NTD）筛查中的应用。方法采用时间分辨免疫荧光技术检测孕妇血清中AFP、F-βHCG和uE3的浓度（三联法），结合孕妇年龄、孕周、体重、是否双胎、有无糖尿病史、吸烟史等因素，采用评估软件计算胎儿患DS、18-三体综合征和NTD的风险概率。结果对15549例孕妇筛查结果进行分析，DS高危孕妇782例，阳性率5.03％；18-三体综合征高危孕妇59例，阳性率0.38％；开放性神经管缺陷高危孕妇84例，阳性率0.54％。经羊水穿刺细胞培养确诊DS 9例，18-三体综合征7例，其他染色体异常10例，经超声确诊NTD 6例。结论对孕中期孕妇进行AFP、f-βHCG和uE3联合筛查能够提高唐氏综合征、18-三体综合征和开放性神经管缺陷患儿的检出率，显著降低需要进行创伤性产前诊断的孕妇比例，是预防唐氏综合征患儿出生的重要途径。

江苏地区中期妊娠母血清筛查胎儿开放性神经管缺陷的结果分析

目的评价江苏省中期妊娠母血清筛查胎儿开放性神经管缺陷（NTD s）的效率。方法采用分层抽样和整群抽样相结合的多阶段抽样方法,在江苏省苏南、苏中、苏北地区以乡（镇）或街道为单位,抽取95个项目点,抽样时间为1年。项目点所有妊娠15~20周的妇女接受母血清AFP、f-βHCG检测,同时B超确定孕龄,在孕妇体重校正的基础上,计算胎儿患开放性神经管缺陷的风险值。同时加强孕期超声胎儿结构畸形筛查,尤其对高风险者进行进一步超声检查。对超声检查出胎儿开放性神经管缺陷者及时引产,随访所有妊娠结局,活产儿至出生后的6个月~4岁。结果95个项目点1年中共有妊娠妇女27313位,参与产前筛查者26803例,占同期总妊娠妇女的98%。孕妇平均年龄25.1岁,≥35岁者占1.7%。母血清筛查为开放性神经管缺陷高风险者220例,筛查阳性率占筛查人群的0.82%。最终妊娠结局显示开放性神经管缺陷儿共20例,其中孕早期流产缺乏筛查数据4例、开放性神经管缺陷筛查高风险9例、唐氏综合征筛查高风险3例、筛查低风险4例。本组中期妊娠母血清AFP、f-βHCG联合筛查开放性神经管缺陷的检出率为75%（12/16）,NTD高风险检出率为56.25%（9/16）。结论在严格质量控制的基础上,妊娠中期母血清AFP、f-βHCG二联筛查胎儿开放性神经管缺陷有较高的检出率。

超声检测胎儿颈项透明层厚度、血清孕酮、甲胎蛋白、游离β人绒毛促性腺激素与妊娠不良结局的相关性分析

目的探讨超声检测胎儿NT厚度、血清P、AFP、F-βHCG与不良妊娠结局的相关性。方法1000例行早孕期胎儿NT超声筛查的孕妇分为NT正常组(772例)及NT异常组(228例),比较两组的血清标志物水平以及妊娠不良结局发生率。结果NT正常组的血清P、AFP水平均高于NT异常组,F-βHCG水平、不良妊娠结局发生率均低于NT异常组(P<0.05)。NT组中,不良妊娠结局与血清P及AFP呈负相关,与F-βHCG呈正相关(P<0.05)。结论超声检测胎儿NT厚度及血清标志物水平有助于预测不良妊娠结局,且不良妊娠结局与血清P及AFP呈负相关,与F-βHCG呈正相关。

7076例孕中期唐氏综合征产前筛查结果临床分析

目的 探讨孕中期唐氏综合征（DS）等筛查对检出胎儿出生缺陷和不良妊娠结局的实用价值.方法 用时间分辨荧光分析法对日照市7076名15 ～20孕周孕妇的血清甲胎蛋白（AFP）和游离绒毛膜促性腺激素（F-βHCG）进行检测,结合孕妇年龄、体重、孕周等因素,利用配套孕期胎儿唐氏综合征产前筛查分析软件,分析胎儿患DS、开放性神经管缺陷（NTD）、18-三体综合征的发病风险率,并对高风险孕妇行羊水胎儿细胞染色体核型分析或B超跟踪检查.结果 7076名孕妇中筛出高风险孕妇396例,阳性率为5.6％,在接受羊水检查的56名DS高风险孕妇中,检出唐氏胎儿3例,死胎3例,其它异常3例;对57例神经管缺陷高危孕妇进行B超检查,发现1例无脑儿;在43例18-三体高危的孕妇中,6例做羊水染色体检查,结果均正常.结论 孕中期以唐氏综合征（Ds）产前筛查作为对胎儿先天缺陷,尤其是胎儿染色体异常的筛查是行之有效方法,筛查结果呈高危孕妇须进行羊水染色体核型分析或B超检查.

789例孕母血清唐氏综合征产前筛查初步分析

目的探讨孕中期妇女(14～20周)外周血甲胎蛋白(AFP)和游离β绒毛膜促性腺激素(F-βhCG)在胎儿唐氏综合征产前筛查中的作用。方法采用酶联免疫吸附法检测孕妇血清AFP与F-βhCG浓度,结合孕妇年龄、孕周,利用配套软件计算胎儿患唐氏综合征的风险。结果筛查的789例孕妇中,唐氏综合征高危孕妇26例(阳性率3.3%);神经管缺损高危孕妇5例(阳性率0.6%)。结论血清标记物检测能显著降低需要进行创伤性产前诊断的孕妇比例,降低唐氏综合征患儿出生机率。

贝克曼4代和5代总β亚单位人绒毛膜促性腺激素测定试剂的分析性能验证及比较

目的对Beckman第5代化学发光法检测总β亚单位人绒毛膜促性腺激素(totalβ-human chorionic gonadotropin,totalβhCG)试剂分析性能进行评估。方法参照CLSI EP15-A、EP6-A、EP9-A2方案,使用Beckman Uni Cel Dxi-800全自动免疫分析仪评估Beckman第4代和第5代TotalβhCG试剂盒的精密度、分析测量范围、稀释回收率、携带污染率及第4代和第5代试剂的可比性。选择335名表观健康女性建立5代βhCG的参考区间(年龄19~84岁,其中绝经后162名)。结果第4代和第5代试剂检测低、中、高水平质控物的批内CV分别为2.2%~5.0%和2.0%~2.5%,总CV分别为3.5%~5.1%和2.4%~2.6%;定量下限分别为0.337和0.275 IU/L;2种试剂携带污染率均小于3%;分别使用wash buffer、蒸馏水、生理盐水对样本进行1∶1~1∶199倍稀释后,使用第4代和第5代试剂分别测定,稀释回收率分别为92%~114%和99%~113%。第5代与第4代试剂比对试验的回归方程为Y=1.144X+10.61(R^2=0.990),百分偏差为-10.34%~35.62%。绝经后女性的βhCG水平显著高于绝经前女性(P<0.01),第95百分位数分别为2.10和5.60 IU/L。结论第5代试剂的各项指标能够满足临床需求,但两种试剂之间存在一定的系统偏差,实验室应重新建立和使用新的参考区间,并做好临床沟通。