N-(4-吡啶甲基)-L-丝氨酸铜配合物的合成、晶体结构和磁性

氨基酸还原希夫碱HL(N-(4-吡啶甲基)-L-丝氨酸)与CuCl_2·2H_2O在室温条件通过扩散法合成了配位聚合物{[Cu_2(L)_2(Cl)_2]·H_2O}_n(I)。采用元素分析、红外光谱、X-射线单晶衍射、粉末衍射和热重分析进行了表征。两个结晶学独立Cu(Ⅱ)包含于其晶体结构中,Cu1为变形八面体CuO_2N_2Cl_2几何构型;Cu2则呈现略有变形的四方锥结构。Cu1和Cu2通过配体L-的吡啶氮原子以及氯离子的桥连作用连接为2D网状结构。变温磁化率实验表明在温度为2~300 K,配合物I表现为铁磁性耦合。

L-丝氨酸分离提取的研究进展

总结了L-丝氨酸分离提取过程中常用的方法,如纸层析法、离子交换法、等点电位沉淀法、膜分离法,介绍了各种方法的基本原理、特点和发展动态。

改进的离子交换法提取l-丝氨酸

l-丝氨酸为我国氨基酸工业生产配套缺乏的主要品种之一,国外日本1969年产量4t,1979年50t,1990年70t,1996年仅100t。国内以蛋白质水解法提取,因分离困难,始终未能形成生产规模。进口l-丝氨酸价格最高,亟待开发新的提取工艺,提高提取收率。

姜黄素对胃癌MGC-803细胞磷酸化-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶表达的影响

目的探讨姜黄素对胃癌MGC-803细胞磷酸化-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)表达的影响。方法将MGC-803细胞分为空白对照组和四个药物实验组,各组姜黄素浓度分别为5μmol/L,10μmol/L,20μmol/L,40μmol/L。经不同浓度的姜黄素作用24 h、48 h、72 h后,应用CCK8法检测姜黄素对MGC-803细胞增殖的影响;应用Annexin V-FITC/PI双染色法测定不同浓度的姜黄素作用24 h后胃癌MGC-803细胞凋亡情况;应用蛋白免疫印迹法检测不同浓度姜黄素作用24 h对MGC-803细胞内p-AKT蛋白表达水平的影响。结果姜黄素对MGC-803细胞增殖有抑制作用,且呈剂量依赖性和时间依赖性。在5~40μmol/L浓度范围内,姜黄素呈浓度依赖性地促进MGC-803细胞的凋亡,并下调MGC-803细胞中p-AKT的水平。结论姜黄素可能是通过抑制p-AKT蛋白的表达和AKT信号通路促进MGC-803细胞凋亡并抑制其增殖。

精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸序列在生物活性玻璃对人牙髓细胞生物作用中的影响

目的:生物活性玻璃(bioactive glass,BG)对人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)的增殖及矿化有积极的作用,本研究目的是研究精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸序列(Arg-Gly-Asp-Ser,RGDS)在BG对hDPCs的黏附、增殖及矿化作用中的影响。方法:用含不同质量浓度RGDS(12.5 mg/L、25.0 mg/L、50.0 mg/L、100.0 mg/L、200.0 mg/L)的BG浸提液培养hDPCs,对照组为不含RGDS的BG浸提液。采用细胞活性噻唑蓝(MTT)比色法于接种后4 h检测细胞黏附数量,于第1、3、5、7、9天测定细胞增殖,第14、28天对细胞进行茜素红染色检测矿化活性。结果:BG浸提液加RGDS组与单纯BG浸提液组相比,hDPCs黏附数目降低,呈RGDS浓度依赖性;BG浸提液加RGDS组的增殖活性早期低于单纯BG浸提液组,但后期两组之间差异无统计学意义;BG浸提液能够促进hDPCs的矿化,加入RGDS组的矿化活性与单纯BG浸提液组差异无统计学意义。结论:游离态RGDS不影响BG对hDPCs的增殖和矿化促进作用,但会与hDPCs结合进而影响hDPCs向培养皿底的黏附。

N-(2-吡啶甲基)-L-丝氨酸铜配合物的合成、晶体结构及抑制蛋白酪氨酸磷酸酶活性

在甲醇溶液中,还原希夫碱HL[N-(2-吡啶甲基)-L-丝氨酸]与CuCl_2·2H_2O以摩尔比1∶1反应,得到1个新的中性单核铜配合物[CuLCl(H_2O)](Ⅰ).通过X射线单晶衍射、元素分析、红外光谱、电喷雾质谱和粉末X射线衍射分析等对其进行了表征.晶体结构分析表明,在该配合物中还原希夫碱以三齿双螯合环配位到中心铜离子,同时氯离子和溶剂水分子也参与配位,形成1个具有四方锥构型的五配位铜(Ⅱ)配合物,该配合物通过分子间弱相互作用连接成二维超分子结构.生物活性测试结果表明,配合物Ⅰ能有效抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)和T细胞蛋白酪氨酸磷酸酶(TCPTP),IC_(50)值分别为0.32和0.45μmol/L.

甘氨酸铜法制备DL-丝氨酸的研究

通过对甘氨酸铜法制备DL 丝氨酸中α 羟甲基丝氨酸生成机理的研究 ,确定了控制丝氨酸生成的条件 :n(铜 )∶n(甘氨酸 )∶n(甲醛 ) =1∶10 0∶80 0 ,pH =8.5～ 9.5 ,反应 40min ,丝氨酸质量浓度为 13.6 7mg

O-酰基-L-丝氨酸衍生物和S-酰基-L-半胱氨酸衍生物的合成研究

目的寻找能将氨基酸侧链的羟基、巯基与二元羧酸连接成酯的方法。方法分别以L 丝氨酸和L 半胱氨酸为起始物 ,采用叔丁氧羰基、苄酯或二苯甲酯形式保护 ,分别与丁二酸单苄酯、草酸单苄酯、丁二酸单叔丁酯缩合成酯 ,合成了 3个未见文献报道的化合物O (4 苄氧丁二酰基 ) N 叔丁氧羰基 L 丝氨酸苄酯 (4 )、O (2 苄氧草酰基 ) N 叔丁氧羰基 L 丝氨酸苄酯 (8)、S (4 叔丁氧丁二酰基 ) N 叔丁氧羰基 L 半胱氨酸二苯甲酯 (12 )。化合物 4经氢解合成未见文献报道的化合物O 丁二酰基 N 叔丁氧羰基 L 丝氨酸 (5 )。化合物 5经酸解得到O 丁二酰基 L 丝氨酸(6)。结果与结论目标化合物的结构经光谱确证。通过这种方法二元羧酸能与氨基酸的羟基。

HPLC法监测DL-丝氨酸的合成研究

采用HPLC方法 ,以OPA为柱前衍生化试剂 ,对常压下甘氨酸铜法合成DL 丝氨酸的过程进行了监控 ,通过改变加料方式及调节 pH值 ,提高了丝氨酸的含量 ,得出了常压下丝氨酸的最佳合成条件为 :n铜离子∶n甘氨酸∶n甲醛=1∶2 78∶973,pH =8 5～ 9 5 ,反应时间 1 5h ,丝氨酸最高质量浓度为 18 86 g/L。

雷公藤甲素通过丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶/糖原合成酶激酶-3β通路对MGC803细胞增殖、侵袭与迁移的影响

目的 探讨雷公藤甲素通过丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶/糖原合成酶激酶-3β(AKT/GSK-3β)通路对MGC803细胞增殖、侵袭与迁移的影响。方法 体外培养MGC803细胞,确定雷公藤甲素的干预剂量和干预时间。将细胞分为阴性对照组(A组,不进行处理),阳性对照组(B组,10μmol/L顺铂),雷公藤甲素高、中、低剂量组(C组、D组、E组)。干预48 h,采用Transwell法检测细胞侵袭能力,采用划痕试验法检测迁移能力,采用免疫印迹(Western blot)法检测检测相关蛋白的表达。结果 随着雷公藤甲素浓度的增加,MGC803细胞增殖率降低(P <0.05);48 h时半数抑制浓度(IC50)最小,选择干预时间为48 h,C组、D组、E组的干预剂量分别为80,40,20 nmol/L。与B组比较,C组、D组、E组侵袭细胞数、细胞迁移距离及波形蛋白(vimentin),snail,p-AKT/AKT,p-GSK-3β/GSK-3β表达水平均显著升高(P <0.05),上皮钙黏素(E-cadherin)、β-联蛋白(β-catenin)表达水平均显著降低(P <0.05),且呈剂量依赖关系。结论 雷公藤甲素可通过抑制AKT/GSK-3β信号通路而抑制MGC803细胞增殖、侵袭与迁移。

富二十二碳六烯酸-磷脂酰丝氨酸缓解环磷酰胺导致的小鼠肾损伤机制

目的:研究富二十二碳六烯酸-磷脂酰丝氨酸(docosahexaenoic acid-enriched phosphatidylserine,DHAPS)对环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)诱导小鼠肾损伤的改善作用及其机制。方法:32只雄性ICR小鼠随机分为正常组(CON组)、模型组(MOD组)、50 mg/kg mb DHA-PS组(50 DHA-PS组)和100 mg/kg mb DHA-PS组(100 DHA-PS组),每组8只。腹腔注射80 mg/kg mb CTX建立小鼠肾损伤模型,5 d后,MOD组和DHA-PS组分别灌胃等量生理盐水或DHA-PS,7 d后处死小鼠。测定各组小鼠肾脏指数、血清生化指标、肾脏氧化应激和炎症因子表达水平,分析组织病理变化及肾脏组织非靶向代谢组学。结果:与MOD组相比,DHA-PS可显著降低小鼠肾脏指数以及肌酐、尿素氮、胱抑素C和肾损伤分子-1水平(P<0.05);显著提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶等抗氧化酶活性(P<0.05),并显著降低丙二醛含量(P<0.05);显著下调白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α等促炎细胞因子的表达(P<0.05),显著上调抗炎细胞因子IL-10的含量(P<0.05)。染色结果显示,DHA-PS组小鼠肾脏组织结构明显恢复。此外,肾脏组织代谢组学分析结果表明,DHA-PS主要通过影响甘油磷脂代谢、嘌呤代谢及其代谢物缓解CTX导致的小鼠肾脏代谢紊乱。结论:DHAPS可通过减轻氧化应激和炎症反应、调节甘油磷脂代谢和嘌呤代谢等途径缓解CTX导致的小鼠肾损伤。

脯氨酸-丝氨酸-苏氨酸磷酸酶相互作用蛋白1相关的髓样相关蛋白血症性炎症综合征1例

脯氨酸-丝氨酸-苏氨酸磷酸酶相互作用蛋白1(PSTPIP1)相关的髓样相关蛋白血症性炎症(PAMI)综合征是一种罕见的常染色体显性自身炎症性疾病, 通常表现为儿童期反复发作的无菌性关节炎、全血细胞减少、皮肤炎症等。PAMI综合征临床罕见, 易被误诊, 且目前尚无有效根治方法。现报告1例18岁男性PAMI综合征患者, 并对相关文献进行复习, 以期提高广大临床医师对该疾病的认识。

磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B信号通路在呼吸道过敏性疾病中对嗜酸性粒细胞的作用研究进展

近年来,呼吸道过敏性疾病已成为全球性疾病,尤其是变应性鼻炎和哮喘。嗜酸性粒细胞及其释放的炎症介质的作用是呼吸道过敏性疾病的主要发病机制。磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(Akt)信号通路对细胞的存活、增殖、生长和代谢有多效性作用,也影响着炎症反应的进程。针对PI3K/Akt信号通路在呼吸道过敏性疾病中对嗜酸性粒细胞作用的研究,有助于明确呼吸道过敏性疾病的发病机制。本文就PI3K/Akt信号通路在呼吸道过敏性疾病中嗜酸性粒细胞的作用研究进展进行综述,以期对临床治疗呼吸道过敏性疾病提供理论参考。

精-甘-天冬-丝氨酸四肽对肝星状细胞整合素信号及凋亡的影响

目的探讨精-甘-天冬-丝氨酸(RGDS)四肽对经纤维连接蛋白刺激的肝星状细胞(HSC)凋亡的影响及整合素信号通路在其中的作用. 方法应用体外HSC培养技术,采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法测定HSC增殖;膜联蛋白(Annexin-V)/碘化丙啶(PI)双标记流式细胞术及透射电镜等方法测定HSC凋亡;采用甲苯胺蓝染色方法测定细胞黏附率;分别应用western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定粘着斑激酶(FAK)蛋白及其mRNA的表达. 结果 25、50、100μg/ml浓度RGDS四肽剂量、时间依赖性抑制HSC增殖并诱导HSC凋亡,凋亡率分别为9.49%、27.67%、31.59%,坏死率分别为3.47%、5.38%、9.10%,与纤维连接蛋白组(凋亡率3.44%,坏死率2.39%)比较差异有显著性,F＝8.02,P＜0.05;RGDS四肽25、50、100μg/ml组的黏附抑制率分别是8.82%、29.41%、45.49%,与纤维连接蛋白组比较,RGDS四肽不同浓度组的黏附抑制率明显升高,差异有显著性,F＝20.58,P＜0.01;RGDS四肽组FAK及其mRNA表达下调. 结论 RGDS四肽剂量和时间依赖性诱导HSC凋亡;RGDS四肽诱导凋亡的效应与其抗黏附作用以及抑制整合素信号通路下游信号分子FAK蛋白、mRNA表达有关.

细胞外信号调节激酶在精-甘-天冬-丝氨酸四肽诱导肝星状细胞凋亡中的作用

目的 探讨细胞外信号调节激酶 (ERK)在精 甘 天冬 丝氨酸 (RGDS)四肽诱导肝星状细胞 (HSC)凋亡中的作用。方法 将培养的HSC细胞分为 6组 :①空白对照组 ,②纤维连接蛋白 (FN)组 ,③FN +RGDS(2 5mg/L)组 ,④FN +RGDs(5 0mg/L)组 ,⑤FN +RGDS(10 0mg/L)组 ,⑥FN +精 甘 谷 丝氨酸 (RGES ,10 0mgL)组。采用3 H 胸腺嘧啶核苷 (3 H TdR)掺入法测定HSC增生 ;透射电镜和末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记 (TUNEL)方法测定HSC凋亡 ;甲苯胺兰染色法测定细胞粘附率 ;分别应用Western印迹和逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术测定ERK蛋白及其mRNA表达。结果 ① 2 5、5 0、10 0mg/L浓度的RGDS四肽呈剂量依赖性抑制HSC增生并诱导HSC凋亡 (P <0 .0 5 )。②RGDS四肽作用于HSC 2h ,HSC粘附率下降 (P <0 .0 1)。③在RGDS四肽干预组 ,HSC的ERK及其mRNA表达下调。结论 RGDS四肽可抑制HSCs增生并诱导其凋亡 ;RGDS四肽诱导HSCs凋亡的效应与其抗粘附作用、抑制ERK蛋白和ERK1mRNA表达有关。

N-乙酰基-L-脯氨酸-N-糖基修饰的丝氨酸二肽酯的合成与结构解析

以L-脯氨酸和L-丝氨酸为原料,1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC.HCl)为缩合剂,将C端和N端分别通过烯丙基和Fmoc保护的L-丝氨酸与乙酰基保护的L-脯氨酸缩合得到N-乙酰基-L-脯氨酸-Fmoc-L-丝氨酸烯丙酯二肽酯。脱去Fmoc保护后,再与2,3,4-O-三乙酰基-6-O-三氟甲磺酰基-α-D-甲基吡喃葡萄糖苷作用,得到N-乙酰基-L-脯氨酸-N-6-(2,3,4-O-三乙酰基-α-D-甲基吡喃葡萄糖苷)-L-丝氨酸烯丙酯二肽酯,通过核磁共振氢谱、高分辨质谱对其结构进行了表征。

前列腺癌中丝氨酸苏氨酸激酶-1和驱动蛋白-5蛋白表达及相关性研究

目的:检测前列腺癌中丝氨酸苏氨酸激酶-1(PIM-1)和驱动蛋白-5(Eg5)蛋白表达,探讨其表达与前列腺癌临床病理及它们之间的相关性。方法:采用免疫组化SP法检测81例前列腺癌和43例前列腺增生组织中PIM-1和Eg5蛋白表达水平,卡方检验分析PIM-1和Eg5蛋白表达阳性率与前列腺癌的临床病理特征之间的关系,采用Spearman相关分析PIM-1与Eg5蛋白在前列腺癌中的相关性。结果:PIM-1和Eg5蛋白在前列腺癌中表达增高,明显高于前列腺增生,差异有统计学意义(P<0.05),PIM-1和Eg5蛋白表达阳性率与Gleason评分、临床分期、术前PSA和5年生化复发有关(P<0.05);与患者年龄无关(P>0.05)。PIM-1和Eg5蛋白表达阳性率高的生化复发率高于PIM-1和Eg5蛋白表达阳性率低的患者(P<0.05),相关性分析显示,前列腺癌中PIM-1和Eg5蛋白呈正相关(r=0.825,P<0.05)。结论:PIM-1和Eg5基因可能与前列腺癌演化和进展有关,二者联合检测有望提高对前列腺癌的预测能力。

聚偏氟乙烯-丝氨酸血液灌流对感染性休克猪氧代谢的影响

目的:研究应用聚偏氟乙烯(polyvinylidene difluoride,PVDF)-丝氨酸(serine,Ser)吸附膜血液灌流对感染性休克氧代谢的影响。方法:雄性家猪16头,给予内毒素(lipopolysaccharides,LPS)1μg.kg-.1h-1静脉泵入4 h复制感染性休克模型。随机分为实验组(E组),应用PVDF-Ser吸附膜进行血液灌流2 h;对照组(C组),应用空白灌流器进行血液灌流2 h。于基础期、注射内毒素后和血液灌流后分别测定中心静脉血氧饱和度(central venous oxygen saturation,ScvO2)、氧输送(oxygen delivery,DO2)、氧消耗(oxygenconsumption,VO2)、氧摄取率(oxygen extraction ratio,O2ER)、血乳酸(lactation,LACT)和胃粘膜内pH(intramucosal pH,pHi)。结果:血液灌流后E组ScvO2明显高于C组(68±1.7%vs 62±3.1%,P=0.006);VO2、O2ER和LACT显著低于C组,分别为(204±28.1 mL.min-1.m-2vs 249±30.7 mL.min-1.m-2,p=0.017)、(33±3.3%vs 39±5.0%,P=0.031)和(3.1±1.0 mmol/L vs 5.4±1.7mmol/L,P=0.022);E组的pHi较C组显著改善(7.29±0.09 vs 7.22±0.06,P=0.004)。结论:应用PVDF-Ser吸附膜进行血液灌流,可以有效减少感染性休克的氧耗、纠正组织氧债和低灌注,改善机体氧代谢异常。

精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸-丝氨酸肽对人Tenon囊成纤维细胞的贴壁抑制试验观察

目的 :研究精氨酸 甘氨酸 天门冬氨酸 丝氨酸 (Arg Gly Asp Ser ,RGDS)肽对人Tenon囊成纤维细胞与纤维连接蛋白 (FN)粘附、增殖的影响。方法 :在传代培养的人Tenon囊成纤维细胞中加入不同终浓度的RGDS(1、0 1、0 0 1g/L) ,用未贴壁细胞记数法及MTT法测定RGDS肽对人Tenon囊成纤维细胞粘附、增殖的影响。结果 :RGDS肽能抑制成纤维细胞在FN上的粘附 ,呈浓度效应特点 ,能抑制成纤维细胞的增殖 ,呈浓度及时间效应特点。结论 :在细胞水平上证实RGDS肽可阻止人Tenon囊成纤维细胞对FN的粘附和增殖 ,具有避免青光眼滤过术后瘢痕化形成的应用前景。

产L-丝氨酸谷氨酸棒杆菌的代谢工程改造和代谢流分析

作为胞内一碳单位的主要来源,L-丝氨酸对维持菌体生理代谢具有不可替代的作用,导致其难于实现以糖质为原料的直接发酵法生产.本研究采用系统代谢工程策略,构建了基因工程菌Corynebacterium glutamicum SER-8.连续补料发酵实验显示,SER-8的比生长速率降低,L-丝氨酸的积累量在不同的生长时期呈现变化.代谢流分析证明,过表达3-磷酸甘油酸激酶使糖酵解途径和三羧酸循环增强,过表达脱敏型3-磷酸甘油酸脱氢酶加强了L-丝氨酸合成途径.敲除激活蛋白GlyR部分减弱了L-丝氨酸向甘氨酸的转化,代谢流比率仍有38.2%.实验结果表明,胞内L-丝氨酸的代谢对维持C.glutamicum的生长至关重要,而通过引入GCV裂解系统,分解过量的甘氨酸,同时增加胞内一碳单位的供应将是未来L-丝氨酸代谢工程改造的新靶点.