3-脱氧葡萄糖醛酮代谢产物——3-脱氧果糖的HPLC检测方法初步建立

建立了3-脱氧果糖(3-DF)初步检测的高效液相色谱(HPLC)方法。先使用气相色谱―质谱联用(GC-MS)对合成的3-DF标样进行鉴定。再采用C18反相色谱柱,流动相为乙腈-水(10%∶90%~90%∶10%)梯度洗脱60min,紫外检测波长352nm,应用2,4-二硝基苯肼柱前衍生法,以薄层色谱―高效液相色谱联用(TLC-HPLC)对3-DF衍生物峰进行定位,并完善衍生条件,进行方法学考察。结果表明:合成样品为3-DF;衍生条件以衍生液中1∶3添加乙酸乙酯效果最佳;3-DF衍生物峰出峰时间为15.972 min,呈尖峰,分离度良好,线性范围为0.5~8 mg/mL,方法精密度RSD为2.4%,重复性RSD为4.4%,稳定性RSD为2.4%。本检测方法稳定、可靠,可初步用于3-DF定性及相对定量。

二乙烯三胺五乙酸-2-脱氧葡萄糖影响己糖激酶磷酸化反应的研究

目的探讨二乙烯三胺五乙酸-2-脱氧葡萄糖(diethylenetriaminepentaacetic acid-2-de-oxy-D-glucose,DTPA-DG)与2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-d-glucose,DG)对己糖激酶磷酸化代谢途径的作用及细胞摄取99m锝-二乙三胺五醋酸-氨基葡萄糖(99mTc-diethylenetriaminepentaacetic acid-2-deoxy-D-glu-cose,99mTc-DTPA-DG)的机制。方法己糖激酶(hexokinase,HK)磷酸化实验分为4组,用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测0.5、1.0、2.0和2.5h的三磷酸腺苷(adenosine triphos-phate,ATP)、二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)含量;己糖激酶抑制实验分为3组,用6-磷酸葡萄糖脱氢酶偶联比色法检测红细胞中DTPA-DG与DG的HK活性。结果4组己糖激酶磷酸化实验不同药物浓度、不同时间反应消耗的ATP和生成的ADP比较差异有显著性(P<0.05),而底物浓度为100μl、反应时间为2h的反应进行最彻底。3组己糖激酶抑制实验不同药物浓度测得的HK活性差异有显著性(P<0.05),底物浓度为100μL时HK活性最高。结论DTPA-DG与DG能发生己糖激酶磷酸化,99mTc-DTPA-DG通过己糖激酶磷酸化途径进入细胞,可作为葡萄糖代谢类似显像剂。

3-脱氧葡萄糖醛酮及其代谢酶与糖尿病的关系

3-脱氧葡萄糖醛酮(3-Deoxyglucosone,3-DG)是一种高反应性毒性2-羰基醛化合物。近来研究表明,3-DG在糖尿病及其并发症病人中显著升高。目前机制尚不明确,但是3-DG与糖代谢紊乱相关,并且3-DG可能通过本身的生物毒性及生成晚期糖基化终产物来促进糖尿病并发症的发生发展。血浆3-DG水平的升高除了跟生成有关,还可能跟其代谢能力相关。文章从3-DG及代谢酶和糖尿病及其并发症的关系方面作一综述。

3-脱氧葡萄糖醛酮(3-DG)的合成和结构分析

3-脱氧葡萄糖醛酮(3-DG)的制备,是通过将D-葡萄糖溶液与苯甲酰肼和对甲苯胺混合物加热反应,获得3-脱氧葡萄糖醛酮双苯腙,再利用苯甲醛分解3-脱氧葡萄糖醛酮双苯腙,从而得到3-脱氧葡萄糖醛酮:分子式为C6H10O5,分子量161,熔点69～71℃,状态为淡黄色或白色粉末结晶.本文还提出了3-脱氧葡萄糖醛酮(3-DG)的合成机理,对反应机理进行了分析,并利用紫外光谱仪、红外光谱仪、质谱仪、核磁共振仪和蒸发光散射光谱分析鉴定产物的结构.

胶质母细胞瘤^(18)F-脱氧葡萄糖PET/CT影像学表现

目的 18F-脱氧葡萄糖(fluorodexoxy glucose,FDG)PET/CT显像已被广泛地应用于恶性肿瘤的诊断,并且认为可以在术前有效地预测胶质瘤的病理分级。但目前对多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)18F-FDG PET/CT表现的认识十分有限。文中研究PET/CT对GBM的诊断价值。方法 9例经病理证实的GBM患者(男7例,女2例)行18F-FDG PET/CT检查,所有9例患者均为初诊。结果 9例患者共10处病灶,其中右侧额叶4例,右侧颞叶3例,左侧顶叶2例,左侧枕叶1例。肿瘤为单发或多发病灶,常位于脑白质内,边界不清晰,大小不等,周围可见明显水肿。18F-FDG PET/CT显像示病灶呈等低密度灶,大多数对18F-FDG摄取明显上升。结论 GBM的18F-FDG PET/CT表现有一定特点,熟悉其影像特点有助于对本病作出正确的诊断。

2-脱氧葡萄糖通过降低有氧糖酵解增强白血病K562/ADM耐药细胞对阿霉素的敏感性

目的研究2-脱氧葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,2-DG)通过抑制糖代谢增强白血病K562/ADM多药耐药细胞对阿霉素(adriamycin,ADM)敏感性的作用及机制。方法以白血病K562/ADM及其亲本K562细胞为靶细胞模型,MTT法检测细胞增殖活性,葡萄糖、乳酸、己糖激酶测试盒分析葡萄糖消耗量、乳酸生成量和己糖激酶(hexokinase,HK)活性。Western blot法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)表达和磷酸化(p-m TOR)以及葡萄糖转运体-4(glucose transporter-4,GLUT-4)的表达。结果与亲本K562细胞相比,白血病K562/ADM耐药细胞HK活性、GLUT-4表达水平和有氧糖酵解能力增强。2-DG能够明显抑制K562/ADM及K562细胞的HK活性、葡萄糖消耗量和乳酸生成量,呈时间-浓度依赖性地抑制白血病细胞的增殖活性。低剂量2-DG和ADM可诱导K562/ADM细胞mT OR高表达及磷酸化水平增高,但2-DG与ADM联合则可有效对抗ADM诱导的K562/ADM细胞mT OR高表达和磷酸化,并可降低GLUT-4的表达,提高K562/ADM细胞对阿霉素的敏感性。结论 2-DG通过竞争性抑制HK活性和抵抗ADM诱发的代偿性mT OR活化,降低GLUT-4表达,有效阻断有氧糖酵解途径而降低K562/ADM耐药细胞的增殖活性、增强其对化疗药物的敏感性。

^(18)氟-脱氧葡萄糖和^(11)碳-乙酸PET/CT显像在原发性肝癌及肝脏肿瘤样病变诊断中的初步研究

目的探讨18氟-脱氧葡萄糖(18 F-fluorodexyoxyglucose,18F-FDG)和11碳-乙酸(11 C-acetate,11 C-ACT)PET/CT显像在原发性肝癌及肝脏肿瘤样病变诊断中的作用。方法回顾性分析9例患者资料,其中男性7例,女性2例,平均年龄70.2岁,所有患者均为肝内单发病灶。治疗前均先行18 F-FDG PET/CT,后行11 C-ACT PET/CT检查,两次检查间隔时间不超过1周。其中有7例肝细胞肝癌(hepatocelluar carcinoma,HCC)、1例胆管细胞癌(cholangiocarcinoma,CCC)、1例肝内感染性病灶,均经病理学或临床随访证实。结果 7例HCC患者18 F-FDG PET/CT显像均为阴性,11 C-ACT PET/CT显像有6例为阳性。18F-FDG PET/CT和11 C-ACT PET/CT显像均未发现1例高分化胆管细胞癌。对于1例肝内炎性病灶,18F-FDG PET/CT显像为阳性,而11 C-ACT PET/CT显像为阴性。结论①11 C-ACT PET/CT显像可以用来探测那些呈18 F-FDG等或低摄取的HCC病灶;②对于高分化的CCC,18 F-FDG PET/CT显像有可能会表现为假阴性结果;③11 C-ACT PET/CT显像可以用来诊断肝内感染性病灶。

双探头符合线路^(18)氟-脱氧葡萄糖单光子计算机断层显像术诊断非小细胞肺癌淋巴结转移的初步研究

目的初步探讨^(18)氟-脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)双探头符合线路(DHC)单光子计算机断层显像术(SPECT)显像与CT同机图像融合对非小细胞肺癌(NSCLC)淋巴结转移分期的诊断价值。方法44例确诊为NSCLC患者1个月内均行^(18)F-FDG DHC-SPECT/CT显像及胸部增强螺旋CT检查,2周内完成外科手术和病理学检查。^(18)F-FDG DHC-SPECT/CT显像经过全能量X线衰减校正,并采用有序子集最大期望值法(COSEM)迭代重建后,将同机CT图像与符合线路图像(正电子发射断层显像术,PET)进行图像融合,获得横断面、矢状面、冠状面三维断层图像。再采用视觉分析法和利用感兴趣区(ROI)技术的半定量分析计算病变淋巴结(L)与周围纵隔组织(N)的摄取比值R(L/N)。将^(18)F-FDG DHC-SPECT/CT显像及胸部增强螺旋CT检查对肺癌淋巴结转移分期的诊断结果均与病理结果进行比较。结果以摄取比值R≥1．5为判断标准,诊断肺癌淋巴结转移的灵敏度为75．0%(15/20例)、特异度为91．7%(22/24例)、准确率为84．1%(37/44例)、阳性和阴性预测值分别为88．2%(15/17例)和81．5%(22/27例)。15例^(18)F-FDG显像为阳性的转移淋巴结的ROI分析最大摄取比值为9．4,最小为1．6。结论^(18)F-FDG DHC-SPECT/CT显像对肺癌的纵隔淋巴结、锁骨上淋巴结转移分期诊断具有较高的灵敏度、特异度和准确率,可为临床制定治疗方案、观察疗效和疾病分期提供重要的临床依据。

Bacillus subtilis fmbj与2-脱氧葡萄糖协同作用对Rhizopus stolonifer的生物防治效果

【目的】通过添加佐剂2-脱氧葡萄糖(2-DOG)的方法提高拮抗细菌枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis fmbj)菌株的生防效果。【方法】分别在PDA平板和水蜜桃上测定2-DOG对拮抗菌B.subtilis fmbj和病原菌桃软腐病菌葡枝根霉(Rhizopus stolonifer)生长的影响及B.subtilis fmbj与不同浓度2-DOG协同作用对R.stolonifer的防治效果。【结果】平板试验表明,2-DOG浓度仅为0.3 mg.mL-1时,可完全抑制R.stolonifer的生长;而2-DOG高达20 mg.mL-1,B.subtilis fmbj依然存活,表现出对2-DOG有较高的耐受性。桃上接种试验发现,单独使用浓度为3.9×108 CFU/mL B.subtilis fmbj时,桃果实发病率为30%;4 mg.mL-1 2-DOG单独使用时桃果实发病率为35%;而当4 mg.mL-1 2-DOG和3.9×107 CFU/mL B.subtilis fmbj配合使用时,可完全抑制果实的腐败。【结论】拮抗菌B.subtilis fmbj和2-DOG协同作用比单独使用对桃果实软腐病的防治效果明显,该研究结果为桃果实采后病害控制和保藏提供了有效的方法与途径。

2-脱氧葡萄糖在抗肿瘤领域的研究进展

2-脱氧葡萄糖(2-Deoxyglucose,2-DG)被证明对多种肿瘤细胞有抑制作用其作为可能的抗肿瘤药物的研究已有近半个世纪一系列的研究显示2-脱氧葡萄糖有较复杂的抗肿瘤机制。除了对糖酵解的抑制,降低细胞内ATP,抑制生长以外,它还抑制寡糖链来干扰肿瘤的糖基化,引起细胞内的未折叠蛋白反应和凋亡,或影响糖基化来抑制相关转录因子。在单独使用时,可激活某些肿瘤的凋亡通路和因子,造成细胞凋亡,尚可影响氧化还原反应,抑制肿瘤生长。联合使用时,它被证实在体外对放化疗有增敏作用,还可减少化疗药物造成的机体损伤动物实验和部分Ⅰ期临床研究,证实2-脱氧葡萄糖具有代谢快、不良反应小的特点但国内对2-脱氧葡萄糖的相关研究以及重视程度尚不足本文回顾了2-脱氧葡萄糖的抗肿瘤机制和研究现状。

2-脱氧葡萄糖对内质网应激介导的宫内窘迫胎鼠脑损伤的保护机制的研究

目的探讨2-脱氧葡萄糖(2-deoxyglucose,2-DG)对内质网应激介导的宫内窘迫胎鼠脑损伤的保护机制。方法制备胎鼠宫内窘迫模型;实验动物随机分为正常组、缺血再灌注组、假手术组及治疗组;取胎鼠脑组织行TUNEL染色,分析神经元凋亡情况;免疫组化法检测海马回CA1区GRP78及caspase-9,-12蛋白的表达;并观察2-DG对上数指标的影响。结果缺血再灌注组再灌注3hTUNEL阳性细胞数目明显增多;至再灌注24h阳性神经元数量达最大值。治疗组海马回CA1区典型TUNEL阳性神经元数量与缺血再灌注组各相应时间点比较明显减少(P<0.05)。缺血再灌注组GRP78,caspase-9,-12蛋白表达高于正常及假手术组。GRP78于再灌注3h达峰值,6h内无明显变化,以后随时间的延迟逐渐下降;caspase-12在3h内表达急剧上升,以后趋势变缓,至12h达高峰;caspase-9则于3h内无明显变化,之后迅速增加,至12h达到最大值。治疗组海马回CA1区神经元GRP78蛋白表达均显著高于缺血再灌注组,而神经元凋亡数量及caspase9,-12蛋白表达显著低于缺血再灌注组(P<0.01)。结论宫内窘迫所致的胎鼠脑组织缺血缺氧启动了内质网应激,内质网相关性死亡途经是胎鼠神经元损伤的又一机制;2-DG通过上调内质网分子伴侣GRP78的表达而对胎鼠缺血缺氧性脑损伤有明确的保护作用。

^(18)氟-脱氧葡萄糖PET/CT显像在原发性肝细胞癌中的应用研究

目的:评价18氟-脱氧葡萄糖(18FDG)PET/CT在原发性肝细胞癌中的应用价值。材料和方法:28例患者被分成3组。第一组为未经相关治疗的HCC组,共13例;第二组为肝脏良性病变组,共9例;第三组为HCC治疗后疗效观察组,共6例。18FDGPET/CT影像学表现结合手术病理及临床随访,计算18FDGPET/CT对HCC诊断的敏感性,并分析标准摄取值(suv)的影响因素。结果:第一组患者Ⅰ型表现7例,Ⅱ型表现5例,Ⅲ型表现1例;第二组患者Ⅰ型表现0例,Ⅱ型表现4例,Ⅲ型表现5例;18FDGPET/CT对HCC诊断的灵敏度为:53.8%,其suv值的大小和肿瘤的生物学行为有关。第三组患者Ⅰ型表现5例,Ⅱ型表现0例,Ⅲ型表现1例,其suv值的大小与肿瘤残留有关。结论:18FDGPET/CT显像在HCC生物学特性评估及HCC治疗后疗效监测方面有明显优势。

^(18)氟-脱氧葡萄糖合成失败原因分析

目的18氟-脱氧葡萄糖(18F-fluorodexoxy glucose,18F-FDG)是最常用的正电子药物。对影响18F-FDG合成因素的报道尚不多。文中分析影响18F-FDG合成的因素,以期提高18F-FDG的合成效率和成功率。方法统计2009年1月至2010年12月合成18F-FDG失败次数,总结分析失败的原因。结果共合成18F-FDG 1257次,成功1228次,平均合成效率为60.5%,成功率为97.7%。未能合成出18F-FDG及合成效率不足40%的情况合计29次,占2.3%。其中18F离子未淋洗至反应管4次;传18F离子管路2位4通阀无法完全闭合,废水进入K222瓶中2次;加热器故障7次;合成时试剂加入错误6次;厂家配套试剂盒中K222含量偏低8次;试剂保存不当,导致三氟甘露糖纯度减低2次。失败原因主要与设备的稳定性、温度、试剂等因素有关。结论注重设备的日常维护及保养、规范的技术操作、严谨的工作态度和工作人员的全面培训可提高药物合成的效率及成功率。

3-脱氧葡萄糖醛酮测定方法的建立及其在临床样本中的初步运用

目的:建立3-脱氧葡萄糖醛酮(3-DG)高效液相色谱定量分析方法并初步运用于临床样本。方法:应用2,3-二氨基萘柱前衍生,采用C_(18)色谱柱,流动相为50 mmol·L^(-1) Na2·HPO_4·12H_2O-NaH_2PO_4·2H_2O缓冲液(pH 7.4)-甲醇-乙腈(7.0:0.5:2.5),检测波长为E_x/E_m=271/503 nm。结果:3-DG峰呈尖峰,分离度良好;在12.5～250μg·L^(-1)范围内成线性关系(r= 0.998 9);精密度RSD为1.79%,日内稳定性RSD为1.60%,日间稳定性RSD为3.70%;平均加样回收率为97.22%,RSD为4.58%。正常人血清中3-DG的含量为(73.5±13.1)μg·L^(-1),(n=6),糖尿病患者血清中3-DG含量均值为(305.9±89.1)μg·L^(-1),(n=6)。结论:该检测方法稳定、可靠,并应用于临床,可初步定量测定人血清中的3-DG含量。

甲状腺良性病变的^(18)氟-脱氧葡萄糖PET/CT表现探讨

目的探讨甲状腺良性病变的18氟-脱氧葡萄糖(18 F-fluorodexyoxyglucose,18F-FDG)PET/CT表现,以提高对该病变PET/CT影像的认识。方法回顾性分析经手术病理明确诊断的24例甲状腺良性病变的18 F-FDG PET/CT影像学资料,包括结节性甲状腺肿13例、甲状腺腺瘤10例、甲状腺局限性增生2例、桥本氏甲状腺炎4例、慢性甲状腺炎1例、亚急性甲状腺炎1例,其中10例患者甲状腺存在两个或多个病变。结果结节性甲状腺肿的异常PET/CT征象包括①甲状腺低密度结节或密度弥漫性减低;②甲状腺肿大;③钙化;④甲状腺局灶性或弥漫性FDG代谢增高。13例结节性甲状腺肿4例未见PET/CT异常征象,仅2例FDG代谢增高(局灶性、弥漫性)。甲状腺腺瘤的PET/CT异常征象包括①甲状腺低密度或略低密度结节;②囊变;③钙化;④甲状腺局灶性FDG代谢增高。10例甲状腺腺瘤仅2例局灶性FDG代谢增高。甲状腺局限性增生的PET/CT异常征象包括①甲状腺低密度结节;②甲状腺局灶性FDG代谢增高。2例甲状腺局限性增生1例局灶性FDG代谢增高。桥本氏甲状腺炎的PET/CT异常征象包括①甲状腺密度弥漫性减低;②甲状腺肿大;③甲状腺弥漫性FDG代谢增高。4例桥本氏甲状腺炎2例弥漫性FDG代谢增高。亚急性甲状腺炎和慢性甲状腺炎的PET/CT异常征象包括①甲状腺片状低密度灶;②甲状腺局灶性或弥漫性FDG代谢增高。结论甲状腺良性病变可出现FDG摄取增高,但在结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤、甲状腺局限性增生出现比例低,而在桥本氏甲状腺炎等炎性病变比例相对较高;甲状腺弥漫性FDG摄取多提示良性病变,而局灶性FDG摄取需作进一步的鉴别。

Maillard反应体系中亚硫酸根对2-氨基-2-脱氧葡萄糖降解的影响

以果糖与铵盐在Maillard初级反应阶段产生的一种典型的海恩氏(Heyns)重排产物——2-氨基-2-脱氧葡萄糖为初始美拉德反应物,分别加入不同量的亚硫酸钠,在110℃下反应0.5、1.0、2.0、3.0和4.0h;通过紫外-可见分光光度法分析了亚硫酸根对体系褐变程度的影响,通过高效液相色谱和阴离子交换色谱分别了亚硫酸根对体系中丙酮醛及2-氨基-2-脱氧葡萄糖等还原糖含量的影响.结果表明:亚硫酸根可显著抑制反应体系的褐变,促进裂解产物丙酮醛的产生;亚硫酸根对2-氨基-2-脱氧葡萄糖的降解没有抑制作用;体系中少量亚硫酸根的存在有利于葡萄糖的生成,过量亚硫酸根可促进体系中葡萄糖的消耗;亚硫酸根对体系中果糖含量的影响规律与对葡萄糖的基本一致.

2-脱氧葡萄糖抗性高产木聚糖酶突变株的选育

以黑曲霉An54-2-1为出发菌株,通过多种方式进行诱变处理,在以木聚糖为唯一碳源的选择培养基上,选育得到2-脱氧葡萄糖(2-DG)抗性突变株——5Hu-4菌株。5Hu-4菌株在以啤酒糟为主要原料的基质上,30℃培养64h￣68h,酶活力达6925.997U/g,比出发菌株提高了47.87%。

2-脱氧葡萄糖对人多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖的影响

目的探讨2-脱氧葡萄糖(2-DG)对常染色体显性多囊肾病(ADPKD)囊肿衬里上皮细胞WT9-12增殖的影响及其可能的作用机制。方法将体外培养的细胞分为对照组、不同浓度2-DG处理组(5、10、20、40 mmol/L)。用CCK-8法筛选不同浓度2-DG处理多囊肾上皮细胞不同时间(12、24、36、48 h)后,抑制细胞增殖活力的最适浓度和最适时间。采用Ed U核酸标记技术和Western blot检测2-DG最适浓度处理多囊肾上皮细胞48 h后细胞的增殖抑制情况及代谢相关磷酸化-AMPKα(P-AMPKα)及增殖相关m TOR信号通路分子磷酸化-m TOR、p70S6K、4E-BP1(P-m TOR、P-p70S6K、P-4E-BP1)的水平变化;流式细胞术及Caspase-3试剂盒检测不同浓度2-DG处理多囊肾上皮细胞48 h后细胞的凋亡率。结果与对照组比较,2-DG可明显抑制多囊肾上皮细胞的增殖,且呈浓度和时间的依赖性(P<0.05);细胞代谢相关分子P-AMPKα的水平明显升高(P<0.05),增殖相关m TOR信号通路分子P-m TOR、P-p70S6K、P-4E-BP1的活性明显抑制(P<0.05);与对照组比较,各浓度2-DG处理组的多囊肾上皮细胞早期凋亡率均明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 2-DG可能通过调控AMPK-mTOR信号通路,促进细胞凋亡,共同抑制多囊肾上皮细胞增殖。

^(18)氟-脱氧葡萄糖和^(99m)Tc-MIBI双核素心肌显像检测存活心肌

目的 应用介入治疗术后室壁运动及整体收缩功能的变化评估18氟 脱氧葡萄糖 (18F FDG)和99mTc MIBI双核素心肌断层显像 (DISA)对判断存活心肌的价值。方法 选择心肌梗死患者 30例 ,进行DISA及心脏超声检查 ,核素显像不匹配者定为存活心肌 ,然后进行经皮冠状动脉腔内成形术 (PTCA)及支架术 ,术后3～ 4个月重复心脏超声检查 ,术后≥ 2个相邻室壁运动不良节段 (RWMA)运动改善定为存活心肌 ,并进行整体收缩功能评价。结果 DISA显示 ,存活心肌者室壁运动异常节段 94 .3% (83/ 88例 )于PTCA术后运动改善 ;坏死心肌者室壁运动异常节段仅 14 .5 % (12 / 83例 )于PTCA术后运动改善 ,而且PTCA术后心脏整体收缩功能明显改善。结论 DISA检查对诊断存活心肌具有较高的临床价值 。