月桂酸甘油二酯和豆蔻酸甘油二酯的固定化脂肪酶R IM-03催化合成及纯化

为促进固定化脂肪酶R IM-03在合成甘油二酯(DAG)中的应用,采用固定化脂肪酶RIM-03催化月桂酸/豆蔻酸和甘油酯化合成甘油二酯,并采用分子蒸馏对其进行纯化。对酯化反应和分子蒸馏的工艺条件进行了优化,并考察了纯化产物的理化性质。结果表明:固定化脂肪酶R IM-03催化甘油和月桂酸/豆蔻酸合成甘油二酯的最优条件为底物(脂肪酸与甘油)物质的量比2∶1、反应温度60℃、反应时间6h、酶添加量6%(以底物质量计),在此条件下月桂酸甘油二酯和豆蔻酸甘油二酯粗产物中甘油二酯含量分别为43.87%和30.00%,甘油三酯(TAG)含量分别为8.71%和6.87%,催化剂可重复利用至少10次;月桂酸甘油二酯粗产物纯化的最优条件为一级分子蒸馏温度170℃、二级分子蒸馏温度180℃,豆蔻酸甘油二酯粗产物纯化的最优条件为一级分子蒸馏温度170℃、二级分子蒸馏温度190℃,在最优条件下纯化月桂酸甘油二酯和豆蔻酸甘油二酯中甘油二酯含量分别达81.29%和80.08%,1,3-甘油二酯含量分别为53.16%和54.27%,DAG/(DAG+TAG)约为80%;纯化月桂酸甘油二酯和豆蔻酸甘油二酯的滑动熔点分别为48.9℃和57.0℃,在30~40℃区间的固体脂肪含量呈陡然下降趋势,在两者复配的体系中,当豆蔻酸甘油二酯占60%以上时,相容性理想。综上,固定化脂肪酶RIM-03具有在甘油二酯合成中应用的潜力,DAG/(DAG+TAG)可作为关键控制指标,异酸甘油二酯复配可改变产物的熔化性质。

吴门RMK-03^(TM)黏膜抑菌喷剂联合枸地氯雷他定治疗变应性鼻炎患者临床研究

目的观察吴门RMK-03^(TM)黏膜抑菌喷剂联合枸地氯雷他定治疗变应性鼻炎(AR)的临床疗效。方法收集60例于2022年11月~2023年11月至苏州市中医医院耳鼻喉科就诊的AR患者,随机分为两组,每组30例。对照组给予枸地氯雷他定口服,治疗组在对照组基础上给予吴门RMK-03^(TM)黏膜抑菌喷剂喷鼻,根据两组患者就诊当天和用药2周后的症状(喷嚏、流涕、鼻塞、鼻痒)和体征(鼻甲肿大程度),记录症状积分与体征积分,并进行统计学分析。结果治疗2周,两组症状积分与体征积分的组内比较均有统计学意义(P<0.05),组间比较症状积分无统计学意义(P>0.05),体征积分有统计学意义(P<0.05),且治疗组体征积分低于对照组。说明治疗后两组患者的AR症状与体征均有改善,且治疗组鼻甲肿大改善程度优于对照组。结论吴门RMK-03^(TM)黏膜抑菌喷剂联合枸地氯雷他定治疗AR临床效果好,且鼻甲肿大改善程度优于枸地氯雷他定。

一种新的源自赤的强血管生成抑制剂福安泰-03的分离和鉴定

从赤软骨和去皮的软组织中分离并鉴定了一种新的强血管生成抑制剂福安泰-03(Fuantai-03,FAT-03).利用组织匀浆、盐析、离子交换层析、疏水层析和反向层析等方法进行分离和纯化.鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验检测FAT-03对血管生成的影响.SDS-PAGE分析揭示,FAT-03为单一银染条带,分子量大约为43000.层析洗脱实验证实,这一分子量蛋白质具有强抗血管生成活性.FAT-03的纯度进一步因其独特的N末端氨基酸序列(PFGNTHNKWKLNYSAEQEFP)而肯定.每日20、40和80μgFAT-03给药组(每胚给药3d)对血管生成的抑制率分别为23.6%、33.1%和50.8%.本研究首次证实,赤产生上述强血管生成抑制剂.

福安泰-03对肿瘤血管生成的抑制作用

目的研究从赤魟组织中分离到的福安泰-03(Fuan-tai-03,FAT-03)对肿瘤血管生成的影响。方法鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)法检测FAT-03对人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)诱导的CAM血管生成的影响;免疫组化法检查FAT-03对裸小鼠Lewis肺癌组织微血管密度(MVD)和血管生成因子表达的影响。结果FAT-03抑制CNE-2Z细胞诱导的CAM血管生成,当其用量为20、40、80、160μg/胚/d×5时,其抑制率分别为22.3%、34.3%、43.3%、46.2%。FAT-03降低小鼠Lewis肺癌组织的MVD,FAT-03组平均微血管数为9.1±1.5(对照组为18.2±3.2,P<0.05)。免疫组化检测结果显示,FAT-03明显下调小鼠Lewis肺癌组织血管内皮细胞生长因子(VEGF),碱性成纤维细胞因子(bFGF)和血小板衍生生长因子(PDGF)的表达。结论FAT-03有抗肿瘤血管生成作用,其作用与它的下调VEGF、bFGF和PDGF的表达密切相关。

小鼠乳腺癌细胞系Ca761-03的建立及其生物学特性研究

目的:建立体外培养的小鼠乳腺癌细胞系,明确其生物学特性。方法:利用乳腺癌移植瘤组织,进行体外原代培养,并对其纯化和反复传代,进行生长曲线,倍增时间,软琼脂集落形成,细胞周期,染色体众数,免疫组织化学染色及体内成瘤率,转移率等鉴定。结果:建立了一个小鼠乳腺癌细胞系,命名为Ca761-03。其生长迅速,呈贴壁生长。倍增时间为25.98h;平均软琼脂克隆形成率为5.39%;G1期31.8%,S期57.3%,G2+M期10.9%;CK染色为阳性,ER,PR均为阴性;体内移植成瘤率100%,肺转移率100%,未见淋巴结转移。结论:成功建立了小鼠乳腺癌细胞系,并对其生物学特性进行了较系统的观察与研究。

福安泰-03对高转移人卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭能力的影响

应用噻唑蓝法检测从赤魟中分离到的福安泰-03(Fuantai-03,FAT-03)对高转移人卵巢癌细胞HO-8910PM生长的影响;人工重组基底膜检测FAT-03对细胞侵袭能力的影响;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测FAT-03对HO-8910PM细胞分泌MMP-9能力的影响。结果显示,FAT-03(20.0、40.0、60.0μg/ml)作用HO-8910PM细胞24h,对细胞生长的抑制率小于10%,对细胞与纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)和Matrigel粘附的抑制率分别为15.1%、28.0%(P<0.05)、54.1%(P<0.01)和14.7%、34.3%(P<0.05)、40.5%(P<0.01),对细胞迁移的抑制率分别为16.4%、33.8%(P<0.05)和42.6%(P<0.01)。此外,FAT-03显著减少HO8910-PM细胞分泌MMP-9的量,并降低其活性。这些实验事实提示FAT-03能明显抑制HO-8910PM细胞的侵袭能力。

水生栖热菌FL-03海藻糖合酶的分离纯化及特性研究

将从水生栖热菌FL-03中获得的海藻糖合酶粗酶液经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose CL-6B离子交换层析、Sephaeryl S-200HR凝胶过滤层析后，纯化68．48倍，产率为18．4％。研究表明：该酶分子量约为101kD，最适反应温度为60℃，最适pH为7．0，在40～80℃、pH 6.0～9．0范围内具有较高的反应活性和稳定性。Fe^3＋对该酶具有一定的激活作用，Cu^2＋、Tris、Zn^2＋对该酶具有较强的抑制作用。该酶具有高度的底物特异性，只能专一地将麦芽糖转化为海藻糖。在40℃、48h条件下，麦芽糖转化为海藻糖的转化率最大可达到79％。

重组福安泰-03抑制人脐静脉血管内皮细胞的迁移和增殖

研究重组福安泰-03(recombinant Fuantai-03,rFAT-03)对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)迁移和增殖的影响.聚碳酸酯膜小室趋化运动模型(transwell model)检测rFAT-03对HUVECs迁移能力的影响;MTT法检测rFAT-03对HUVECs和多种人癌细胞生长的影响;荧光显微镜观察rFAT-03作用下HUVECs的形态变化;膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(annexin V-fluorescein isothiocyanate,annexinV-FITC)双染检测rFAT-03对HUVECs早期凋亡的影响;流式细胞术分析rFAT-03对HUVECs周期及凋亡的影响;Western印迹检查rFAT-03对HUVECs血管内皮细胞生长因子(VEGF)、Bax和Bcl-2表达的影响.结果显示,rFAT-03明显抑制HUVECs细胞的迁移和增殖,其抑制效果与剂量和作用时间相关.0.20mg/mL恩度(endostar),0.10、0.20mg/mLrFAT-03作用HUVECs24h,对细胞迁移的抑制率分别为32.0%、32.6%、57.1%(P<0.01).0.20mg/mL恩度,0.05、0.10、0.20mg/mLrFAT-03作用HUVECs72h,其对细胞生长的抑制率分别为40.9%、63.7%、69.3%、87.0%.但rFAT-03对多种人癌细胞株的生长却无明显影响.rFAT-03处理HUVECs24h,细胞的早期凋亡率增加(P<0.05).rFAT-03阻滞HUVECs于G0/G1期,并呈现典型的凋亡峰.终浓度为0.05、0.10、0.20mg/mLrFAT-03作用于HUVECs24h,G0/G1期细胞指数分别为63.4%、67.5%和75.7%(对照组为62.1%),凋亡指数分别为4.2%、8.5%和10.3%.rFAT-03下调HUVECs的VEGF和抑调亡基因Bcl-2的表达,上调促凋亡基因Bax的表达,其效果与剂量相关.结果提示,rFAT-03明显抑制HUVECs细胞的迁移和增殖,诱导其凋亡,它的这些作用与其下调VEGF、Bcl-2表达,上调Bax表达密切相关.

离子交换层析纯化重组福安泰-03功能域的工艺条件研究

对阴离子交换树脂HiTrap DEAE Sepharose FF纯化重组福安泰-03功能域(rFAT-03)的合适条件进行了研究。通过试验,确定了柱层析的最佳操作条件,即在上样缓冲液为0.1mol/L Tris-HCl、洗脱缓冲液为1mol/L NaCl+0.1mol/L Tris-HCl、pH为8.8的条件下,利用HiTrap DEAE SepharoseFF琼脂糖凝胶吸附柱,先用洗脱缓冲液从30%到60%洗脱3个柱床体积,再用洗脱缓冲液从60%到100%洗脱2个柱床体积。在此试验条件下,rFAT-03得率为35.97%,最终纯化的rFAT-03达电泳纯,纯度为99.5%。

红串红球菌USTB-03对4,6-二甲基二苯并噻吩的脱硫研究

分离出1株能够对4,6-二甲基二苯并噻吩(4,6-DMDBT)进行高效脱硫的微生物菌种,经中国科学院微生物研究所鉴定为红串红球菌USTB-03。研究结果表明,与甘油和乙醇相比,葡萄糖是促进红串红球菌USTB-03生长和提高其脱硫比活性的最好碳源,最高脱硫比活性可达298.1mmol4,6-DMDBT/(kg·h)。在初始pH从4.0到9.0范围内,pH7.0可以使红串红球菌USTB-03保持最大的脱硫比活性。进一步研究显示,红串红球菌USTB-03对4,6-DMDBT脱硫后的最终代谢产物是3,3-二甲基-2-羟基联苯(2-HDMBP),只有C-S键被切断,而C-C键未受到破坏。该脱硫途径类似于二苯并噻吩(DBT)特异性脱硫的途径。

干酪乳杆菌LC-03的培养条件优化研究

本研究通过单因子优化试验和正交试验对干酪乳杆菌LC-03培养条件和培养基成分进行初步优化。结果表明,干酪乳杆菌LC-03属于兼性厌氧菌,最佳培养基成分为:蛋白胨12g,酵母提取物6g,牛肉膏6g,葡萄糖18g,乙酸钠5g,柠檬酸铵2.15g,Tween801mL,MgSO4.7H2O0.58g,MnSO4.4H2O0.05g,K2HPO42g,水1000mL;最佳培养条件:温度为35℃,培养基起始pH为6.5,接种量为1.0%,培养时间为24h;优化培养后D610nm值达到1.832,活菌数达到3.22×1010CFU/mL。

ZHT-03质谱计扫描控制与数据采集处理系统

通过对ZHT-03质谱计电测电路的改进,利用数据采集卡及应用软件,实现了加速电压的连续扫描控制与数据采集处理。分析过程、即时数据、图谱、测试状态动态显示并自动完成结果计算与数据存储,精密度和准确度由改造前的0.5%、1.5%提高到0.149%、0.27%以上,极大地提高了ZHT-03质谱计的性能和自动化程度。

致病疫霉拮抗菌LH-03的抗菌物质分析及其防病作用

为了明确对致病疫霉(Phytophthora infestans)菌丝生长有显著抑制作用的梨黑斑病菌(Al-ternaria alternata)LH-03发酵液中的抗菌物质,通过硫酸铵和乙醇的交互沉淀、蛋白酶K和酚-氯仿变性处理以及SDS-PAGE电泳分析抗菌物质的基本性质,并在马铃薯块茎切片上测试防病效果.结果显示,抗菌物质为蛋白质类物质,其分子质量大小约为40ku,粗蛋白与发酵液原液相比,抑菌活性略有下降,其最适抑菌质量浓度为3.5mg/mL,抑菌率为72%,在马铃薯块茎切片上对致病疫霉侵染的保护率可达95%以上.表明LH-03产生的蛋白类抗菌物质对马铃薯晚疫病具有较大的防病潜力.

烷基化原料预加氢催化剂LY-DB^(iso)-03和PDB-02

C4烷基化汽油具有高辛烷值、低硫、低烯烃的特点,是理想的汽油调和组分。C4烷基化原料预加氢装置是烷基化工艺的关键单元,其主要作用是脱除原料中的微量杂质丁二烯,并要求单烯烃基本不损失。中国石油兰州化工研究中心成功开发的烷基化原料预加氢催化剂以Pd为活性组分,具有加氢活性、选择性高、加氢稳定性好的特点。LY-DB^(iso)-03催化剂适用于两段床加氢工艺,丁二烯加氢率超过99%,1—丁烯异构化为2—丁烯的异构化率80%以上,丁烯收率99%以上;PDB-02催化剂适用于单段床加氢工艺,加氢产品中丁二烯含量≤50μg/g,单烯烃收率≥100%。

JSY2000-03型数字程控交换机话单分拣与存储的实现

文章从JSY2000-03交换机话单分析着手,设置了该交换机的即时话单存储方式,分析了话单的详细格式,设计了话单存储数据库,通过编码实现了话单分拣、话单存储和条件查询等操作,完善了该型交换机话单记录及话务量统计功能。

福安肽-03的分离纯化及其一级结构解析

通过盐析、离子交换、凝胶过滤和疏水层析等分离纯化,同步进行抗血管生成和抗肿瘤生长检测,从赤魟(Dasyatis akajei)组织获得强抗血管生成成分福安肽-03(Fuantai-03,FAT-03)的纯品(纯度>95%);使用Edman降解法测定FAT-03 N-末端氨基酸组成和序列,RACE系统技术解析FAT-03的一级结构。结果表明:FAT-03明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成和BALB/c裸小鼠Lewis肺癌的生长及肝转移,且其效果与剂量相关。FAT-03分子的一级结构即其氨基酸组成和序列已被确定。

反季节盆栽98-03杏生长发育规律研究

试验以98-03杏为研究对象,以凯特和骆驼黄为对照,研究其在温室内春提早盆栽条件的生长发育状况。结果表明:盆栽98-03生长趋势缓和,能够及时停止生长,不会在果实迅速膨大期争夺养分,利于果实后期正常发育;98-03果实发育期为70 d,早熟,果实生长呈双"S"曲线型,存在硬核期,是适合盆栽的良好品种。

优质红绿茶兼用新品种79-03选育研究报告

７９ ０３ 是湖南省茶叶研究所 ７０ 年代从广西横县南山大叶种子实生苗中分离选育的茶树新品种，通过苗圃选拔、品比试验、生产示范和省级区试，表明具有成园快、产量高、制红绿茶品质优、抗逆性强。

农用抗生素XBP-03-A的分离及结构鉴定

对链霉菌(Streptomyces spp.)XBP-03的发酵液进行树脂脱色、有机溶剂沉淀、硅胶柱层析分离、高效液相色谱精制,得到具有抗菌活性的单体化合物XBP-03-A,经UV、MS、1H-NMR、13C-NMR等手段鉴定,确定其为谷氏菌素(Gougerotin)。

QDB-03型Co-Mo耐硫变换催化剂运行总结

简要介绍QDB-03型耐硫变换催化剂的理化性能、装填及升温硫化,并重点分析QDB-03型催化剂的运行情况,以及日常操作中的注意事项。