肿瘤相关巨噬细胞上调miR-221-3p可能参与了前列腺癌的恶性转移

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)上调miR-221-3p可能参与促进前列腺癌(PCa)恶性转移的作用机制。方法选择6例转移性PCa患者癌组织进行微小RNA(miRNAs)表达谱测序和差异表达miRNAs分析。分离上述转移性PCa患者癌组织中的原代TAMs。采用聚合酶链反应(qPCR)测定其中miR-221-3p的表达水平。向RAW264.7巨噬细胞转染miR-221-3p模拟物(mimic)或抑制物(inhibitor),然后与人PCa细胞系PC3细胞建立共培养体系。CCK-8法测定PC3细胞增殖能力,流式细胞术(FCM)测定细胞凋亡率,Transwell法测定细胞迁移和侵袭能力,Western blot法测定细胞上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白因子的表达水平。结果在6例转移性PCa患者的癌组织中,与淋巴结转移阴性PCa组织来源TAMs相比,淋巴结转移阳性PCa组织来源TAMs中hsa-miR-221-3p显著上调(P<0.05)。在共培养体系中,与Mimic-NC组相比,miR-221-3p mimic组PC3细胞增殖能力明显增强;迁移能力和侵袭能力明显增强;EMT相关蛋白因子表达水平明显增强(除E-Cadherin)(P均<0.05)。与Inhibitor-NC组相比,miR-221-3p inhibitor组细胞增殖能力明显降低,凋亡率明显升高;迁移能力和侵袭能力明显被抑制;EMT相关蛋白因子表达水平明显被抑制(除E-Cadherin)(P均<0.05)。结论TAMs上调miR-221-3p可能参与促进了PCa恶性转移。

miR-221-3p对胰腺癌细胞凋亡的抑制作用及机制研究

目的:研究miR-221-3p对胰腺癌细胞凋亡的抑制作用及可能机制。方法:对人胰腺癌细胞株PATU 8988T进行miR-221-3p质粒转染,设为miR-221-3p mimics组、mimics NC组、miR-221-3p inhibitor组及inhibitor NC组,以未处理的PATU8988T细胞作为空白对照(NC)组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证细胞转染效率;采用流式细胞术观察miR-221-3p对胰腺癌细胞凋亡的影响;采用Western blotting法测定各组细胞中p53、磷酸酶与张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)蛋白表达。结果:qRT-PCR结果显示,与NC组、mimics NC组及inhibitor NC组比较,miR-221-3p mimics组细胞miR-221-3p表达显著增高,miR-221-3p inhibitor组表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,与NC组、mimics NC组及inhibitor NC组比较,miR-221-3p inhibitor组细胞凋亡明显增加,miR-221-3p mimics组细胞凋亡明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blotting结果显示,mimics NC组和inhibitor NC组细胞中p53、PTEN蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),而miR-221-3p mimics组细胞中p53、PTEN蛋白表达水平较mimics NC组明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:PATU 8988T胰腺癌细胞中miR-221-3p表达上调,细胞凋亡受到抑制。miR-221-3p可能通过下调p53、PTEN蛋白表达促进胰腺癌的发生发展。

非小细胞肺癌患者miR-221、miR-630表达及与预后的关系分析

目的分析非小细胞肺癌(NSCLC)miR-221、miR-630表达及与预后的关系。方法采集198例NSCLC患者癌组织及癌旁组织标本,检测miR-221、miR-630表达,分析与病理特征关系,Kaplan-Meier法分析2年生存情况,Cox回归分析miR-221、miR-630表达与预后的关系。结果癌组织miR-221表达高于癌旁组织,miR-630表达低于癌旁组织(P<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移的NSCLC患者肿瘤组织miR-221表达高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径≥4 cm、有淋巴结转移的NSCLC患者肿瘤组织miR-630表达低于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径<4 cm、无淋巴结转移患者(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,miR-221高表达者2年生存率为55.56%,低于miR-221低表达者的79.63%;miR-630高表达者2年生存率为75.96%,高于miR-630低表达的50.00%(P<0.05)。Cox回归分析显示,TNM分期、淋巴结转移及miR-221、miR-630表达是NSCLC预后的影响因素(P<0.05)。Spearman相关分析显示,miR-221与miR-630表达呈负相关性(P<0.05)。结论NSCLC患者miR-221表达升高,miR-630表达降低,且与TNM分期、淋巴结转移和预后相关,可作为NSCLC患者潜在预后评估的标记物。

中心性肥胖2型糖尿病189例血清微RNA-221表达与微血管并发症的关系

目的探讨中心性肥胖2型糖尿病(T2DM)病人血清微RNA-221(miR-221)表达与微血管并发症的关系。方法将2019年6月至2021年9月聊城市第二人民医院收治的中心性肥胖T2DM病人189例作为观察组,另选取181例健康体检者作为对照组,检测并比较两组的血清miR-221表达水平。根据观察组有无并发微血管并发症将其分为并发组和未并发组,采用多因素logistic回归分析微血管并发症发生的影响因素,并绘制受试者操作特征(ROC)曲线分析相关血清指标对微血管并发症发生的诊断价值。结果观察组腹围、身体质量指数和空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血尿酸(UA)均高于对照组(P<0.05),血清miR-221水平高于对照组(0.86±0.27比0.32±0.06,P<0.05);观察组微血管并发症发生率为51.32%(97/189);并发组年龄、合并高血压及高脂血症占比、病程、未按时服药占比及空腹血糖、HbA1c、hs-CRP、UA均高于未并发组(P<0.05),血清miR-221水平高于未并发组(0.91±0.25比0.81±0.16,P<0.05),且均是中心性肥胖T2DM病人出现微血管并发症的危险因素(P<0.05);血清miR-221水平诊断中心性肥胖T2DM病人微血管并发症的临界值、灵敏度、特异度、曲线下面积分别为0.83、88.66%、79.35%、0.81,其诊断价值低于HbA1c水平(P<0.05),高于hs-CRP和UA水平(P<0.05),与空腹血糖水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论血清miR-221水平在中心性肥胖T2DM病人中呈高表达,是微血管并发症发生的危险因素,且对微血管并发症发生具有重要的临床诊断价值。

十溴联苯醚暴露通过胞外囊泡装载miR-221促进三阴性乳腺癌细胞转移

目的:探讨环境污染物十溴联苯醚(BDE-209)暴露促进三阴性乳腺癌(TNBC)恶性进展的机制。方法:将TBNC细胞分为空白对照组和BDE-209暴露组。超速离心法提取胞外囊泡,分别应用扫描电子显微镜和蛋白质印迹法对提取的胞外囊泡进行鉴定,采用纳米颗粒跟踪技术检测胞外囊泡生成量,细胞划痕实验和Transwell小室实验检测与胞外囊泡共培养后TNBC细胞的迁移能力和扩散能力,定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测囊泡中的miR-221表达水平,蛋白质印迹法检测共培养后TNBC细胞中基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达水平。结果:与空白对照组比较,2.00、20.00和200.00 ng/mL BDE-209暴露可显著增加胞外囊泡的生成(均P<0.05),其中200.00 ng/mL BDE-209暴露诱导释放的胞外囊泡共培养的细胞迁移率较空白对照组提高86%,穿膜细胞数提高至1.32倍,miR-221表达水平提高至2.71倍,MMP9表达水平提高至1.62倍(均P<0.05)。转染抗miR-221抗体能降低BDE-209暴露诱导生成的胞外囊泡内miR-221表达水平,使BDE-209促进MDA-MB-231细胞迁移的能力被显著抑制。结论:BDE-209暴露可通过增加胞外囊泡的生成及装载miR-221增强TNBC细胞的迁移能力,促进TNBC细胞转移。

血清miR-212-5p、miR-221-3p与AECOPD患者TLR4/NF-κB炎症信号通路和预后的关系研究

目的探讨血清微小核糖核酸(miRNA)-212-5p(miR-212-5p)、miRNA-221-3p(miR-221-3p)与慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期(AECOPD)患者Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)炎症信号通路和预后的关系。方法选取2020年1月至2022年12月聊城市第二人民医院收治的298例COPD患者为研究对象,其中AECOPD患者175例(AECOPD组),COPD稳定期患者123例(COPD稳定期组),另纳入同期在该院体检健康者100例作为健康对照组。根据28 d预后情况,将AECOPD患者分为预后良好组和预后不良组。采用荧光定量聚合酶链反应检测血清miR-212-5p、miR-221-3p及TLR4/NF-κB信号通路相关指标的水平。采用Pearson相关分析AECOPD患者血清miR-212-5p、miR-221-3p水平与TLR4/NF-κB信号通路相关指标水平的相关性。采用多因素Logistic回归分析AECOPD患者预后不良的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-212-5p、miR-221-3p水平对AECOPD患者预后不良的预测价值。结果COPD稳定期组、AECOPD组血清TLR4 mRNA、NF-κB信使RNA(mRNA)水平高于健康对照组,血清miR-212-5p、miR-221-3p水平低于健康对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);AECOPD组血清TLR4 mRNA、NF-κB mRNA水平高于COPD稳定期组,血清miR-212-5p、miR-221-3p水平低于COPD稳定期组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访28 d,AECOPD患者中预后不良62例(预后不良组),预后良好113例(预后良好组)。预后良好组血清miR-212-5p、miR-221-3p水平高于预后不良组,而血清TLR4 mRNA、NF-κB mRNA水平低于预后不良组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,AECOPD患者血清miR-212-5p、miR-221-3p水平与TLR4 mRNA、NF-κB mRNA水平均呈负相关(P<0.05)。预后良好组血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平低于预后不良组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,IL-6、TNF-α、TLR4 mRNA和NF-κB mRNA水平升高是AECOPD患者预后不良的危险因素(P<0.05),miR-212-5p、miR-221-3p水平升高是AECOPD患者预后不良的保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-212-5p、miR-221-3p联合预测AECOPD预后不良的曲线下面积(AUC)为0.862,明显高于miR-212-5p、miR-221-3p单独预测的0.722、0.755(P<0.05)。结论AECOPD预后不良患者血清miR-212-5p、miR-221-3p水平下调可能与调节TLR4/NF-κB炎症信号通路有关,且miR-212-5p、miR-221-3p联合检测对AECOPD患者的预后不良具有较高的预测价值。

miR-221、CAR与急性心肌梗死并发心力衰竭患者心功能和预后的关系

目的探讨微核糖核酸-221(miR-221)、C反应蛋白/白蛋白比值(CAR)与急性心肌梗死(AMI)并发心力衰竭(HF)患者心功能和预后的关系。方法选取2020年3月至2023年5月期间河北北方学院附属第一医院收治的AMI并发HF患者共计146例,根据Killip分级分为Ⅱ级组(n=66)、Ⅲ级组(n=48)、Ⅳ级组(n=32)。比较三组患者的miR-221及CAR水平;并以Spearman法分析miR-221、CAR表达水平与AMI并发HF患者Killip分级的相关性。以患者随访半年后患者的预后结局,分为预后良好组(n=108)与预后不良组(n=38)。以单、多因素Logistic回归分析影响AMI并发HF患者预后的危险因素;绘制受试者工作(ROC)曲线分析miR-221、CAR对于AMI并发HF患者预后的预测价值。结果Ⅱ级组的miR-221及CAR表达水平<Ⅲ级组<Ⅳ级组,差异均具有统计学意义(F=30.341、24.273,P<0.05);Spearman分析结果表明,miR-221、CAR表达水平与Killip分级呈现正相关(r=0.413、0.426,P<0.05);单因素分析结果显示,两组患者在年龄、Killip分级、高血压病史、左心射血分数(LVEF)、miR-221以及CAR表达水平上的比较差异有统计学意义(χ^(2)=4.897、40.842、7.432、14.128、3.460,P<0.05);多因素Logistic回归分析进一步证实,Killip分级为Ⅲ~Ⅳ级、miR-221、CAR表达水平的升高均为影响AMI并发HF患者预后情况的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,miR-221、CAR以及二者联合检测曲线下面积为0.811、0.794、0.869(P<0.05)。结论miR-221、CAR表达水平可能与AMI并发HF患者心功能有关,且二者联合检测对患者预后具备较高的预测价值。

miR-221-3p和miR-486-5p的表达与输卵管性不孕症患者腹腔镜术后生殖预后的相关性分析

目的探讨miR-221-3p和miR-486-5p的表达与输卵管性不孕症患者腹腔镜术后生殖预后的相关性。方法选取2019年10月至2021年9月就诊于沧州市人民医院的100例输卵管性不孕患者作为研究对象,根据腹腔镜术后1年内是否妊娠分为妊娠组(n=66)和未妊娠组(n=34)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测患者血清miR-221-3p和miR-486-5p的水平并进行分析,采用化学免疫发光法检测血清卵泡刺激素(FSH)、催乳素(PRL)和黄体生成素(LH)水平。收集并比较两组患者临床特征,采用Pearson相关性分析患者妊娠情况与血清miR-221-3p和miR-486-5p表达的相关性,采用Logistic回归分析输卵管性不孕症妊娠情况的影响因素。结果妊娠组患者血清miR-221-3p和miR-486-5p表达水平显著高于未妊娠组患者(P<0.05),FSH和LH水平均显著低于未妊娠组(P<0.05)。两组患者盆腔炎病史、子宫输卵管造影(HSG)检查、盆腔粘连和盆腔积液指标比较,差异具有统计学意义(P<0.05);患者术后未妊娠与miR-221-3p、miR-486-5p水平均呈负相关(r=-0.675、-0.585,P<0.05);miR-221-3p及miR-486-5p的表达、FSH、LH、HSG检查、盆腔粘连和盆腔炎病史为患者妊娠情况的影响因素(P<0.05)。结论miR-221-3p和miR-486-5p的表达与输卵管性不孕症患者腹腔镜术后未妊娠呈负相关,对判断患者预后情况具有一定的临床意义。

不同病理类型及分期甲状腺癌组织中miR-197、miR-221和miR-222的表达及其临床意义

目的:观察不同病理类型及分期甲状腺癌组织中miR-197、miR-221和miR-222的表达,并分析其在甲状腺癌诊断中的意义。方法:回顾性分析2020年01月至2022年12月我院92例甲状腺癌患者临床资料,患者均进行甲状腺癌组织、癌旁组织病理检查,采用定量逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)测定miR-197、miR-221和miR-222表达水平,对比不同病理类型、分期等病理特征的甲状腺癌患者miR-197、miR-221和miR-222表达状况,并分析其在甲状腺癌诊断中的意义。结果:甲状腺癌组织中miR-197、miR-221、miR-222表达高于癌旁组织(t=14.696、14.004、15.351,P<0.05);淋巴结转移、未分化癌、Ⅲ-Ⅳ期的甲状腺癌患者miR-197、miR-221、miR-222表达分别高于未发生淋巴结转移、乳头状癌/髓样癌/滤泡癌、Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌患者(P<0.05)。经Logistic回归分析,结果显示,miR-197、miR-221、miR-222高表达是甲状腺癌患者发生淋巴结转移、发生未分化癌及是Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌的危险因素(OR>1,P<0.05)。结论:不同病理类型及分期甲状腺癌组织中miR-197、miR-221和miR-222的表达存在差异,三者将有助于判断甲状腺癌是否淋巴结转移、不同病理类型及临床分期。

血清Netrin-1、FGF22、miR-221水平与抑郁症患者认知功能损害的相关性分析

目的:分析血清神经轴突导向因子-1(Netrin-1)、成纤维细胞生长因子22(FGF22)、miR-221水平与抑郁症患者认知功能损害的相关性。方法:选取某院2021年6月—2023年7月收治的120例抑郁症患者为研究组,另选取同期120例健康体检者为对照组。采用智力状态检查量表(MMSE)评估患者认知功能,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD-24)评估患者抑郁程度;比较2组及不同认知状态患者入院时血清Netrin-1、FGF22、miR-221水平,另比较不同抑郁程度患者血清各指标水平及MMSE评分,并分析其相关性,ROC分析入院时血清Netrin-1、FGF22、miR-221联合检测对抑郁症患者认知功能障碍的诊断价值。结果:研究组血清Netrin-1、FGF22水平[(274.56±14.56)pg/mL、(157.46±21.47)ng/mL]低于对照组[(437.93±13.71)pg/mL、(217.56±20.66)ng/mL],血清miR-221水平(3.67±1.26)高于对照组(1.06±1.39),差异均有统计学意义(P<0.05);认知障碍患者血清Netrin-1、FGF22水平[(177.46±37.16)pg/mL、(131.71±21.47)ng/mL]低于认知正常患者[(330.78±36.44)pg/mL、(172.37±19.56)ng/mL],血清miR-221水平(4.14±1.14)高于认知正常患者(3.24±1.26),差异均有统计学意义(P<0.05);轻度抑郁患者血清Netrin-1、FGF22水平及MMSE评分均高于中度及重度抑郁患者,血清miR-221水平均低于中度及重度抑郁患者,差异均有统计学意义(P<0.05);血清Netrin-1、FGF22与MMSE评分呈正相关(r=0.694、0.677,P值均<0.001),miR-221与MMSE评分呈负相关(r=-0.715,P<0.001),差异有统计学意义(P<0.05);入院时血清Netrin-1、FGF22、miR-221水平诊断抑郁症患者发生认知功能障碍的AUC分别为0.749、0.814、0.766,三者联合检测AUC为0.926。结论:在抑郁症认知功能损害患者中血清Netrin-1、FGF22水平升高,miR-221水平降低,均与认知功能障碍密切相关,三者联合检测对抑郁症患者认知功能障碍具有较高的诊断价值。

血清miR-221在慢性心力衰竭中的表达及与心肌重塑、心功能的关系

目的 探讨血清miR-221在慢性心力衰竭中的表达水平及与心肌重塑、心功能的关系与临床意义。方法 选取聊城市第四人民医院2020年3月—2022年2月收治的110例慢性心力衰竭患者作为研究对象。按照纽约心脏病协会(New York Heart Association,NYHA)分级标准将该组患者分为Ⅰ~Ⅱ级组(n=38)、Ⅲ级组(n=35)及Ⅳ级组(n=37),全部患者均接受了彩色多普勒超声检查诊断,同时选择来聊城市第四人民医院进行彩色多普勒超声检查的30名健康人作为对照组。同时测量血清mi R-221的表达水平,对比不同心功能分级下慢性心力衰竭患者血清miR-221的表达水平以及心功能指标的差异性,之后采用Pearson相关性分析探讨血清miR-221表达水平与心功能指标的相关性。结果 Ⅳ级组血清miR-221表达水平为(3.29±0.59),高于Ⅲ级组的(2.31±0.10)、Ⅰ~Ⅱ级组的(1.12±0.09)及对照组的(0.54±0.21),Ⅲ级组血清miR-221表达水平高于Ⅰ~Ⅱ级组及对照组,Ⅰ~Ⅱ级组血清miR-221表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。Ⅳ级组左室舒张末内径(left ventricular enddiastolicdiameter,L V E D D)、左心房内径(left atrial diameter,LAP)、左心室后壁厚度(left ventricular posterior wall thickness,LVPW)、左室质量指数(left ventricular mass index,LVMI)高于Ⅲ级组、Ⅰ~Ⅱ级组及对照组,左室重构指数(left ventricular remodeling index,LVRI)、心排出量(cardiac output,CO)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)低于Ⅲ级组、Ⅰ~Ⅱ级组及对照组;Ⅲ级组LEVDD、LAP、LVPW、LVMI高于Ⅰ~Ⅱ级组及对照组,LVRI、CO、LVEF值低于Ⅰ~Ⅱ级组及对照组;Ⅰ~Ⅱ级组LEVDD、LAP、LVPW、LVMI高于对照组,LVRI、CO、LVEF低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。Pearson相关性分析显示,血清miR-221与LVEDD、LAP、LVPW、LVRI分别呈正相关性,与LVRI、CO及LVEF呈负相关性(P <0.05)。结论血清miR-221在慢性心力衰竭中具有较高的表达水平,且这种表达水平的升高与心肌重构以及心脏功能之间具有密切的相关性。

PD患者治疗期间血清miRNA-124、miRNA-221与非运动症状的相关性分析

目的探讨帕金森病(PD)患者外周血miR-124、miR-224在不同治疗时期的表达水平,并分析其与非运动症状的相关性,为临床PD患者非运动症状监测和治疗提供潜在干预靶点。方法选择2020年1月至2022年3月PD患者106例,分别于患者治疗前、治疗4、8、12周时,对患者血清miR-124、miR-221水平进行检测,并采用非运动症状评价量表(NMSS)对患者的非运动症状进行评估。采用统计学方法检验分析血清miR-124、miR-221与帕金森患者NMSS评分的相关性。结果治疗期间,患者血清miR-124逐渐上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-221表达水平及NMSS评分均逐渐下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清miR-124与患者NMSS评分均呈负相关(r=-0.346,P<0.001);miR-221与患者NMSS评分呈正相关(r=0.409,P<0.001);线性回归分析显示,PD患者血清miR-124和miR-221表达水平是其非运动症状的影响因素(P<0.05)。结论PD患者血清miR-124和miR-221表达水平与非运动症状严重程度密切相关,临床上可考虑通过监测或干预血清miR-124和miR-221表达水平,缓解PD患者非运动症状,进而改善患者预后。

超声引导下细针穿刺细胞学检查结合miR-221、miR-222表达对甲状腺结节性质的鉴别效能

目的探讨超声引导下细针穿刺细胞学检查(US-FNAB)结合微小RNA-221(miR-221)、微小RNA-222(miR-222)表达对甲状腺结节性质的鉴别效能。方法选择2020年3月—2023年2月在本院拟行手术治疗的136例甲状腺结节患者作为研究对象,所有患者术前均行US-FNAB及miR-221、miR-222检测。以术后病理学诊断结果作为金标准将患者分为恶性组和非恶性组,比较两组患者miR-221、miR-222表达,并分析US-FNAB、miR-221、miR-222单项及联合对甲状腺结节性质的鉴别效能。结果136例甲状腺结节患者术后病理结果显示55例为非恶性,81例为恶性;136例甲状腺结节患者经US-FNAB诊断非恶性67例(经术后病理结果证实有50例为非恶性),恶性69例(经术后病理结果证实有64例为恶性);恶性组miR-221、miR-222表达均高于非恶性组(P<0.05);US-FNAB+miR-221+miR-222鉴别甲状腺结节性质的敏感度、特异度、曲线下面积(AUC)分别为95.59%、87.27%、0.940,三项联合鉴别的敏感度均高于单项指标鉴别(P<0.05),与US-FNAB+miR-221或miR-222鉴别比较,差异均无统计学意义(P>0.05);三项联合鉴别的特异度与单项指标、US-FNAB+miR-221或miR-222鉴别比较,差异均无统计学意义(P>0.05);三项联合鉴别的AUC均高于单项指标、US-FNAB+miR-221或miR-222鉴别。结论US-FNAB结合miR-221、miR-222鉴别甲状腺结节性质能够减少漏诊率、误诊率,提高鉴别效能。

非小细胞肺癌组织miRNA-221表达及其与预后的关系研究

背景与目的 microRNAs是肿瘤的重要调控因子,其中miRNA-221的表达与多种肿瘤相关,本研究旨在探讨miRNA-221在非小细胞肺癌组织中的表达及其与预后的关系。方法分析江苏省肿瘤医院2005年11月-2007年1月期间行手术治疗的117例非小细胞肺癌患者的临床资料。采用实时定量逆转录聚合酶链反应检测上述病例肺癌标本中miRNA-221的水平;应用χ2检验分析miRNA-221表达水平与各临床病理参数的关系;采用Kaplan-Meier方法分析miRNA-221表达与非小细胞肺癌生存期(overall survival,OS)之间的关系;采用Cox风险比例模型分析各个协变量的联合效应。以P<0.05认为差异有统计学意义。结果 miRNA-221的表达量与患者年龄相关,与患者性别(χ2=0.070,P=0.791)、病理类型(χ2=0.414,P=0.520)、p-TNM分期(χ2=0.068,P=0.794)及吸烟史(χ2=0.206,P=0.650)无明显关系;生存分析显示miRNA-221高表达组患者生存期显著低于低表达组(P<0.001)。Cox风险比例模型分析显示miRNA-221表达可作为非小细胞肺癌患者预后不良的标志。结论 miRNA-221的高表达提示非小细胞肺癌患者预后较差,是潜在的肺癌预后预测分子标志物。

miR-221对小鼠乳腺上皮细胞增殖和泌乳功能的影响

MicroRNA(miRNA)是一类大约22个核苷酸的非编码RNA.miR-221能通过调控受体表达,引发肿瘤形成、细胞增殖和组织器官发育.本文应用脂质体转染技术,改变miR-221在小鼠乳腺上皮细胞和组织中的表达量.采用HPLC、Western印迹、电镜技术等观察miR-221对小鼠乳腺上皮细胞和乳腺组织的影响.结果表明,miR-221沉寂后,细胞增殖能力增强(P<0.01),β酪蛋白表达增加(P>0.05),生长激素受体(GHR)表达增强(P<0.01),泌乳期乳腺组织中上皮细胞数量增加(P<0.05),小鼠泌乳量增加(P<0.05).结果提示,miR-221可能通过抑制靶蛋白GHR表达,进而抑制乳腺上皮细胞增殖和泌乳.

特异性miR-221抑制剂对结直肠癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨miR-221在结直肠癌细胞中的表达状况及特异性miR-221抑制剂对癌细胞增殖和凋亡的影响。方法应用实时荧光定量PCR(real-time Q-PCR)检测四种人结肠癌细胞系HT-29、Lovo、SW-480、Caco2中miRNA-221表达状况,并以人脐静脉内皮细胞HUVEC作为正常对照;设计并合成miR-221、anti-miR-221(微小RNA抑制剂)寡核苷酸,以脂质体转染Caco2细胞系,以Real-time Q-PCR再次检测转染后细胞中miR-221表达状况,并通过噻唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪观察细胞的增殖和凋亡状态。结果与正常细胞相比,4种人结肠癌细胞系中miR-221表达均显著增高,差异具有统计学意义(P<0.01);癌细胞转染anti-miR-221后,G0/G1期细胞比例明显增加,而S期细胞比例显著下降,并可见细胞凋亡的发生(P<0.01)。结论 miR-221特异性抑制剂可通过抑制细胞增殖同时诱导凋亡而抑制结直肠癌细胞生长,提示miR-221作为结直肠癌生物治疗有效靶点有进一步研究价值。

MicroRNA-221通过抑制CDKN1C/p57表达促进结肠癌细胞增殖

目的探讨microRNA-221(MIR221)对结肠癌细胞中CDKN1C/p57表达调控及细胞增殖的影响。方法常规培养人结肠癌Caco2细胞系,预先给予或不给予CDKN1C/p57干扰性小RNA(anti-p57-siRNA)处理,再以脂质体分别转染MIR221前体(pre-MIR221)或MIR221特异性抑制剂(anti-MIR221)寡核苷酸,应用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)检测Caco2细胞中MIR221表达状况,运用半定量RT-PCR及Western-blot分析CDKN1C/p57 mRNA及蛋白表达状况,并通过噻唑蓝(MTT)比色法观察细胞的增殖状态;构建pGL3-p57荧光素酶报告载体并与pre-MIR221或anti-MIR221共转染Caco2细胞,检测转染细胞中荧光素酶活性变化。结果 Caco2细胞转染pre-MIR221后,CDKN1C/p57蛋白表达水平下降,细胞增殖显著(P<0.01);而anti-MIR221可上调CDKN1C/p57蛋白表达继而抑制细胞增殖,且此种抑制作用可被anti-p57-siRNA逆转,说明此种抑制效应确由CDKN1C/p57所介导;在转染重组有CDKN1C/p57基因3'-UTR片段的荧光素酶报告载体的Caco2细胞中,共转染pre-MIR221后荧光素酶活性下降,而共转染anti-MIR221后荧光素酶活性增高,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 MIR221可通过与CDKN1C/p57 mRNA 3'-UTR区域结合使结肠癌细胞中CDKN1C/p57蛋白表达下降而促进肿瘤增殖;anti-MIR221则可通过上调CDKN1C/p57蛋白表达继而抑制细胞增殖而发挥抗瘤效应。

乳腺癌组织中Bmi-1、miR-221-3P的表达及意义

目的观察乳腺癌组织中Bmi1、miR-221-3p的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR法检测81例份乳腺癌患者癌组织及癌旁组织中的Bmi1、miR-221-3p相对表达。分析癌组织中Bmi1、miR-221-3p表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果乳腺癌组织、癌旁组织中Bmi1的相对表达量分别为24. 23±1. 23、1. 04±0. 12,二者相比,P <0. 05;乳腺癌组织、癌旁组织中miR-221-3p的相对表达量分别为0. 43±0. 02、1. 06±0. 23,二者相比,P <0. 05。两种组织中Bmi1与miR-221-3p表达呈负相关(r=-0. 597,P <0. 01)。乳腺癌组织中Bmi1和miR-221-3p表达与肿瘤结节数、肿瘤局部浸润、淋巴结转移及临床分期有关(P均<0. 05)。乳腺癌组织中Bmi1高表达者5年总生存率为61. 54%(24/39)、低表达者为90. 48%(38/42),二者相比,P <0. 01。miR-221-3p高表达者5年总生存率为86. 75%(37/43)、低表达者为57. 89%(22/38),二者相比,P <0. 01。结论乳腺癌组织中miRNA-221-3p表达下调,Bmi1表达上调;乳腺癌组织中miRNA-221-3p低表达和Bmi1高表达预示患者肿瘤结节较多且处于较高临床分期、淋巴结转移可能性较大,并伴有局部浸润,预后较差。

应用实时荧光定量PCR检测结直肠癌与癌旁组织中miRNA-221的差异表达状况

目的分析结直肠癌与毗邻癌旁组织中miRNA-221差异表达状况。方法常规抽提30例结直肠癌及对照癌旁组织中总RNA,应用实时荧光定量PCR方法检测标本中miRNA-221的表达状况。结果与癌旁组织相比,结直肠癌组织中miRNA-221表达明显上调(P<0.01)。结论实时荧光定量PCR是一种较精确的miRNA定量检测方法;miRNA-221可能通过转录后基因沉默机制促进结直肠癌的发生发展。

难治性癫痫患者神经调节蛋白1、microRNA-221-3p表达与认知功能的关系

目的探讨难治性癫痫患者血清神经调节蛋白1(NRG1)、microRNA-221-3p(miR-221-3p)表达水平与认知功能障碍(CD)的关系。方法选取64例难治性癫痫患者(难治性癫痫组)和58例抗癫痫药物控制良好患者(药物控制良好组)作为研究对象,另选取同期本院70例健康体检者纳入对照组。采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估难治性癫痫患者的认知功能受损程度,并根据MoCA总分将难治性癫痫患者分为CD组40例和非CD组24例。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-221-3p水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清NRG1水平,并采用Pearson相关性分析探讨miR-221-3p、NRG1水平与MoCA总分的相关性,采用多因素Logistic回归分析探讨难治性癫痫患者发生CD的影响因素。结果难治性癫痫组血清miR-221-3p、NRG1水平高于对照组、药物控制良好组,差异有统计学意义(P<0.05);CD组血清miR-221-3p、NRG1水平高于非CD组,MoCA总分、空间与执行能力评分、语言评分、延迟记忆评分、计算力与定向评分低于非CD组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,难治性癫痫CD患者血清miR-221-3p、NRG1水平均与MoCA总分呈负相关(P<0.05)。Logistic回归分析显示,NRG1、miR-221-3p均为难治性癫痫患者发生CD的影响因素(P<0.05)。结论难治性癫痫合并CD患者血清miR-221-3p、NRG1水平较高,且miR-221-3p、NRG1均与难治性癫痫患者CD进程密切相关。