MiR-28-5p靶向DOK4对口腔鳞状细胞癌细胞增殖的影响

目的探讨微小RNA(miR)-28-5p通过靶向酪氨酸激酶下游蛋白4(DOK4)对口腔鳞状细胞癌细胞增殖的调控作用。方法下载癌症基因组图谱(TCGA)口腔癌数据库,分析miR-28-5p、DOK4与口腔鳞状细胞癌临床表型的关系;转染miR-28-5p模拟物(mimics)、miR-28-5p抑制剂(inhibitor)及对照物(NC)、pcDNA3.1-DOK4及空载体(Vector)、DOK4干扰序列(siDOK4)。CCK-8法和克隆集落形成实验检测口腔鳞状细胞癌的细胞增殖能力;检测各组细胞的抗氧化能力和细胞活性氧(ROS)含量;双荧光素酶报告基因实验验证miR-28-5p与DOK4的靶向关系;观察DOK4过表达对细胞增殖和口腔鳞状细胞癌裸鼠移植瘤生长的影响。结果生物信息学分析显示,相较于癌旁口腔组织,miR-28-5p在口腔鳞状细胞癌组织中表达上调,DOK4 mRNA下调(P<0.05);临床分期Ⅳ期、M 1期、G 3~G 4分级患者miR-28-5p水平高于临床分期Ⅰ~Ⅲ期、M 0期、G 1~G 2分级者(P<0.05);临床分期Ⅳ期、N 1期、G_(3)~G_(4)分级患者DOK4 mRNA水平低于临床分期Ⅰ~Ⅲ期、N 0期、G_(1)~G_(2)分级者(P<0.05);DOK4高表达组无进展生存期和总生存期均高于DOK4低表达组(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-28-5p inhibitor组miR-28-5p水平、细胞活性和集落形成数降低(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-28-5p mimics组DOK4 mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);与Vector组比较,DOK4过表达组细胞和移植瘤组织中DOK4 mRNA和蛋白表达升高,细胞活性、集落形成数、肿瘤体积及重量降低(P<0.05);与miR-28-5p inhibitor组比较,miR-28-5p inhibitor+siDOK4组的DOK4 mRNA和蛋白表达水平降低,细胞增殖活性、集落形成数、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH/NADP+)、谷胱甘肽/氧化性谷胱甘肽(GSH/GSSG)升高,ROS含量降低(P<0.05)。结论miR-28-5p在口腔鳞状细胞癌中表达上调,通过靶向抑制DOK4表达,降低ROS水平,促进细胞增殖。

乙型肝炎相关性肝癌患者T淋巴细胞、白介素-28B及高尔基体蛋白73的表达及临床意义

目的:分析乙型肝炎相关性肝癌患者T淋巴细胞、白介素-28B (IL-28B)及高尔基体蛋白73 (GP73)的表达及临床意义。方法:选取2018年10月—2021年10月商丘市第一人民医院收治的119例乙型肝炎相关性肝癌患者作为观察组,选取同期体检的112例健康人群作为对照组。比较两组研究对象血清IL-28B、GP73及T淋巴细胞水平,分析IL-28B、GP73、T淋巴细胞与病理特征及预后的关系。结果:观察组血清IL-28B、GP73及CD8^(+)表达水平均高于对照组,CD3^(+)、CD4^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)均低于对照组,差异有统计学意义(t=148.380、13.155、9.827、9.939、16.367、11.453,P<0.05)。不同年龄、性别、肿瘤直径的乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝癌患者血清中IL-28B、GP73水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化、有血管浸润者血清中IL-28B、GP73水平高于无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、中/高分化、无血管浸润者,差异有统计学意义(P<0.05)。HBV相关性肝癌患者血清中CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)在不同年龄、性别、肿瘤直径中比较,差异无统计学意义(P>0.05),CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)水平在不同淋巴结转移情况、TNM分期、分化程度及血管浸润中比较,差异无统计学意义(P>0.05)。死亡者血清GP73、IL-28B水平均高于生存者,CD4^(+)/CD8^(+)指标低于生存者,差异有统计学意义(t=16.629、2.082、9.267,P<0.05)。结论:乙型肝炎相关性肝癌患者血清IL-28B、GP73及CD8^(+)表达水平明显升高,CD3^(+)、CD4^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)指标下降,IL-28B、GP73及CD4^(+)/CD8^(+)水平与相关病理特征、预后具有密切的联系。

miR-28-5p靶向BECN1对OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程的调控作用

目的探讨miR-28-5p靶向BECN1在OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程中的作用及机制。方法通过TUNEL荧光染色、Western blot实验明确miR-28-5p及姜黄素在OCI-LY7细胞凋亡及自噬过程的作用,经在线预测并进一步通过双荧光素酶报告基因检测明确miR-28-5p和BECN1的靶向关系。结果TUNEL染色和caspase-3蛋白水平检测:与对照组比较,姜黄素明显增加凋亡细胞百分比并表达裂解蛋白caspase-3(P<0.05)。相比姜黄素单独作用,细胞凋亡被miR-28-5p显著减弱抑制(P<0.05)。与对照组比较,姜黄素组beclin1和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值显著降低、P62蛋白表达明显升高(P<0.05);与姜黄素组比较,姜黄素+miR-28-5p抑制剂组beclin1表达和LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显升高、P62蛋白表达明显降低(P<0.05)。通过在线数据库预测:miR-28-5p与BECN1存在靶向的关系;双荧光素酶报告基因实验显示:与阴性对照组比较,miR-28-5p模拟物显著降低BECN1-wt组的荧光素酶活性,但miR-28-5p模拟物不影响BECN1-mut组的荧光素酶活性。结论miR-28-5p介导姜黄素促OCI-LY7细胞凋亡作用。BECN1是miR-28-5p的靶基因,姜黄素诱导miR-28-5p过表达可直接靶向BECN1抑制自噬过程。

尾巨桉DH32-28组培再生过程中激素浓度筛选与转基因愈伤组织获得

探索尾巨桉良种无性系DH32-28的组培再生体系,进而建立稳定的遗传转化系统,以期为进一步获得转基因桉树再生植株,以及开展桉树基因功能及分子育种研究提供参考。以DH32-28组培苗叶片和茎段为外植体,通过筛选植物生长调节剂噻苯隆(TDZ)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、1-萘乙酸(NAA)以及吲哚丁酸(IBA)的合适浓度,进行外植体愈伤组织诱导、不定芽分化和生根诱导;通过测定愈伤组织诱导阶段以及生根诱导阶段组培材料对卡那霉素的耐受力,确定卡那霉素的临界筛选浓度,用于农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化实验。结果表明:以MS为基本培养基,0.025 mg·L^(-1) TDZ+0.15 mg·L^(-1) NAA、0.05 mg·L^(-1) TDZ+0.15 mg·L^(-1) NAA的激素配比分别最适于DH32-28叶片和茎段的愈伤诱导,愈伤诱导率均为98.3%。将诱导出的叶片和茎段愈伤组织转移到含有0.5 mg·L^(-1) 6-BA+0.1 mg·L^(-1) NAA的不定芽分化培养基中,不定芽分化率分别为44.4%和96.7%。以1/2MS为基本培养基,添加0.5 mg·L^(-1)IBA对DH32-28再生芽的不定根诱导率最高,不定根诱导率为72.8%。愈伤组织和不定芽诱导阶段的卡那霉素最适筛选浓度为5 mg·L^(-1),生根阶段最适浓度为20 mg·L^(-1)。本研究成功建立了尾巨桉无性系DH32-28高效的再生体系,并采用农杆菌介导的遗传转化方法将红色荧光蛋白报告基因DsRed2导入到DH32-28茎段受体材料,获得了表达DsRed2的转基因愈伤组织。

miR-28-5p通过抑制FSP1介导的铁死亡逆转肺腺癌细胞顺铂耐药的机制

目的 研究miR-28-5p对顺铂(DDP)耐药的A549肺腺癌细胞系(A549/DDP)的影响,并探讨其作用机制是否与铁死亡抑制蛋白1(FSP1)介导的铁死亡有关。方法 选择A549肺腺癌细胞和A549/DDP细胞作为研究对象。采用RT-qPCR法检测细胞中miR-28-5p的表达水平。通过CCK-8法和集落形成实验测定细胞增殖。miR-28-5p的靶基因通过荧光素酶报告基因和蛋白质印迹分析进行鉴定和验证。使用miR-28-5p模拟物或FSP1过表达质粒转染A549/DDP,评估细胞增殖情况,并采用透射电子显微镜评估线粒体形态,以及试剂盒测定细胞活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平。建立了基于细胞系的异种移植模型,在体内评估miR-28-5p对肿瘤生长的影响。结果 与A549细胞相比,A549/DDP细胞中miR-28-5p的表达水平降低(P<0.001)。与A549细胞比较,A549/DDP细胞的细胞活力(F=49.542,P<0.001)和集落形成能力(t=4.412,P<0.01)增加。与miR-NC组相比,miR-28-5p组A549/DDP细胞的细胞活力(t=4.612,P<0.01)和集落数(t=4.503,P<0.01)均降低。在pGL3-FSP1 3′UTR-WT载体存在情况下,用miR-28-5p模拟物转染的细胞中荧光素酶活性降低(P<0.01)。此外,过表达miR-28-5p细胞中FSP1的表达水平被抑制。与载体+miR-28-5p组相比,FSP1+miR-28-5p组细胞活力、集落形成、细胞线粒体长度、GSH增加(P<0.01)且细胞凋亡、ROS产生、MDA形成降低(P<0.05)。体内实验显示,与miR-NC+DDP组相比,miR-28-5p+DDP组裸鼠体内形成的肿瘤大小和质量减少(P<0.05),并且Ki-67和FSP1蛋白表达降低(P<0.05)。结论 miR-28-5p逆转肺腺癌细胞顺铂的耐药机制可能与抑制FSP1介导的铁死亡有关。

溃疡性结肠炎患者血清白细胞介素-28B水平与临床特征的相关性

目的:探讨白细胞介素(IL-)28B与溃疡性结肠炎(UC)的相关性。方法:选取UC患者68例,住院期间使用5-氨基水杨酸(5-ASA)规律治疗。选取60例健康人作为对照组。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测UC患者治疗前治疗后及60例健康对照血清IL-28B水平。收集UC患者各项临床资料,统计上述各项指标与血清IL-28B水平的相关性。结果:UC患者与健康人的IL-28B的表达水平不同,并且疾病的活动程度、核周型抗中性粒细胞胞质抗体(pANCA)阳性对IL-28B血清表达水平有影响。5-ASA能够减轻患者的炎性反应,病情好转后的UC患者IL-28B表达水平升高。结论:UC与IL-28B的表达水平有一定相关性,并且疾病的活动程度、pANCA的阳性对IL-28B血清表达水平有影响。5-ASA能减轻患者的炎性反应,病情好转后的患者IL-28B表达水平升高,预测IL-28B可以在UC的病程中起到保护作用。

血清miR-28-5p、HMGB1表达与多发性骨髓瘤患者病理特征及预后的关系

目的探讨血清miR-28-5p、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达与多发性骨髓瘤(MM)患者病理特征及预后的关系。方法选取2018年1月至2019年6月于河南省南阳市中心医院就诊的MM患者124例为病例组,选取同期健康志愿者50名为对照组,分析两组血清miR-28-5p、HMGB1表达水平与患者病理特征及其预后的关系。结果与对照组比较,病例组血清miR-28-5p表达水平降低、血清HMGB1水平升高,差异有统计学意义(t=30.327、16.269,P均<0.05);不同D-S分期、ISS分期患者随着分期越晚血清miR-28-5p表达水平降低,差异有统计学意义(F=19.541、22.173,P均<0.05);不同ISS分期患者随着分期越晚血清HMGB1水平越高,差异有统计学意义(F=6.891,P<0.05);存活患者miR-28-5p水平高于死亡患者、HMGB1水平低于死亡患者,差异有统计学意义(t=4.416、2.546,P<0.05)。高表达水平miR-28-5p、低水平HMGB1的累计生存率更高,差异有统计学意义(χ^(2)=16.930、12.417,P均<0.05)。结论MM患者血清miR-28-5p表达水平降低、HMGB1表达水平升高,两项指标均与患者预后有关,或可作为MM患者预后评价的血清生物学指标。

基于MCP-1/CCR2通路研究miR-28-5p对老龄自发性高血压大鼠的干预作用

目的研究基于单核细胞趋化蛋白(MCP)-1/CC趋化因子受体(CCR)2通路微小核糖核酸-28-5p(miR-28-5p)对老龄自发性高血压大鼠的干预作用。方法选取SPF级雄性Wistar大鼠6只设为正常组,自发性高血压大鼠18只分为模型组、对照组、miR-28-5p组各6只,miR-28-5p水平检测采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)法,检测肺功能相关指标,采用酶联免疫法检测炎症因子白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平,Western印迹检测MCP-1及CCR2通路相关蛋白表达。结果与正常组相比,模型组、对照组、miR-28-5p组miR-28-5p表达及左室收缩压(LVSP)水平明显较高,左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)水平明显较低(P<0.05);与模型组相比,对照组、miR-28-5p组miR-28-5p表达及LVEDP水平明显较低,LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax水平明显较高(P<0.05);与对照组相比,miR-28-5p组miR-28-5p表达及LVEDP水平明显较低,LVSP、+dp/dtmax、-dp/dtmax水平明显较高(P<0.05)。与正常组相比,模型组、对照组、miR-28-5p组IL-1、IL-6、TNF-α水平及MCP-1、CCR2水平明显较高(P<0.05);与模型组相比,对照组、miR-28-5p组IL-1、IL-6、TNF-α水平及MCP-1、CCR2水平明显较低(P<0.05);与对照组相比,miR-28-5p组IL-1、IL-6、TNF-α水平及MCP-1、CCR2水平明显较低(P<0.05)。结论miR-28-5p可通过调控MCP-1、CCR2通路蛋白水平改善老龄自发性高血压大鼠的心功能,干预抑制炎性反应。

活性天然产物19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷快速富集

19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷是一种重要的天然来源的三萜类成分,具有良好的抗神经炎症、抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)活性,是一种潜在的抗阿尔茨海默病(AD)的先导药物,具有深入研究价值。介绍了一种在金樱子果实中快速富集19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的新方法,并研究其与潜在抗AD活性靶点的分子对接。以94 g金樱子果实粉末中提取该化合物为例,通过自制减压真空色谱装置,利用少量流动相,快速便捷地得到19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷0.172 5 g。此外,该化合物与靶蛋白结合能为-24.7 kJ·mol^(-1)。结果表明:19α-羟基亚细亚酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷具有潜在的抗AD活性,提取的方法具有样品耗损低、操作方便、快速稳定、得率高等优点,在一定程度上为环境保护做出了贡献。

基于治疗干预评分系统-28的管理模式在重症病房护士中的应用效果分析

目的:分析基于治疗干预评分系统-28的管理模式在重症病房护士中的应用效果分析。方法:通过便利抽样法,选取2021年5月—2022年7月医院重症病房40名护士为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和研究组,每组20人。对照组实施常规管理模式,研究组实施基于治疗干预评分系统-28的管理模式,比较两组护士护理质量、工作压力、应对方式。结果:基于治疗干预评分系统-28的管理模式实施后,研究组护士技术操作和服务态度得分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组护士管理及人际、病人护理、时间分配与工作量、工作环境及仪器设备、护理专业及工作得分及中国护士工作压力源量表总分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组护士面对得分均高于对照组,回避及屈服得分均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:基于治疗干预评分系统-28的管理模式可明显减轻重症病房护士工作压力,提升护理质量,改善护士应对方式,护理管理效果满意,值得临床重视。

卵巢癌组织hsa-miR-28表达及其临床意义

目的:探讨卵巢癌组织内含子型微小核糖核酸-28(hsa-miR-28)表达及其与临床病理特征及根治术后复发的关系。方法:选取2017年3月至2019年3月宝鸡市中心医院收治的行根治术治疗的138例卵巢癌患者作为卵巢癌组,选取同期行腹腔镜治疗的120例卵巢良性病变患者作为对照组,检测两组患者切除卵巢组织的hsa-miR-28表达水平,并比较卵巢癌不同病理特征患者卵巢组织hsa-miR-28表达水平。随访3年,记录卵巢癌根治术后复发情况,比较复发和未复发患者hsa-miR-28表达水平,并采用Cox回归分析卵巢癌根治术后复发的影响因素。结果:卵巢癌组卵巢组织hsa-miR-28表达水平低于对照组(2.24±0.62 vs.4.12±0.73,P<0.001);低分化、FIGO分期Ⅲ期卵巢癌患者hsa-miR-28表达水平低于高/中分化、FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期患者(1.72±0.31 vs.2.70±0.54、1.79±0.34 vs.2.53±0.66,P<0.05)。随访3年期间138例卵巢癌患者有49例复发,复发率为35.51%,复发组低分化、FIGO分期Ⅲ期占比均高于未复发组(P<0.05),复发组术后化疗患者占比及hsa-miR-28表达水平低于未复发组(P<0.05);Cox分析结果显示,hsa-miR-28低表达、低分化、FIGO分期Ⅲ期均是卵巢癌根治术后复发的危险因素,术后化疗是其保护因素(P<0.05)。结论:hsa-miR-28在卵巢癌组织中呈低表达,且与卵巢癌临床病理特征及根治术后复发密切相关,检测hsa-miR-28表达水平对于评估卵巢癌病情进展及预后可能具有潜在的临床价值。

TEOS-28和TEOS-40及其配比对SiO_(2)气凝胶结构和性能的影响研究

分别以TEOS-28和TEOS-40为硅源,通过酸碱两步法,经乙醇超临界干燥制备透明SiO_(2)气凝胶。对SiO_(2)气凝胶进行微观形貌、比表面积、导热系数、可见光透射率表征,探究TEOS-28和TEOS-40及其配比对SiO_(2)气凝胶结构及性能的影响。研究表明,相同配比条件TEOS-40作为硅源制备的SiO_(2)气凝胶性能更佳。TEOS-40为硅源的条件下,随着去离子水含量的增加,凝胶时间呈先降低后升高的趋势,可见光透射率呈逐渐降低趋势,导热系数呈先降低后升高的趋势。随着乙醇含量的增加,凝胶时间呈逐渐增加趋势,可见光透射率呈先增大后减小的趋势,导热系数则逐渐降低。

白细胞介素-28和白细胞介素-29的研究进展

白细胞介素 2 8(IL 2 8A、IL 2 8B)和白细胞介素 2 9(IL 2 9)是一组由病毒或双链RNA诱导的多种细胞产生的新型白细胞介素 ,它们能结合一种由IL 1 0Rβ和IL 2 8Rα组成的异二聚体型Ⅱ类细胞因子受体 ,通过Jak STAT信号通路而发挥其抗病毒或其他防御功能。作者就IL 2 8与IL 2 9的分子结构、编码蛋白、受体与生物学活性等作一综述。

日本血吸虫未成熟虫卵26-28kDa抗原的分离与纯化

本文采用超凝胶AcA柱层析方法和SDS-PAGE结合凝胶洗脱方法等,分离纯化了日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)26-28kDa组分.SDS-PAGE、免疫印迹分析(EITB)和银染色等证明,采用该方法分离纯化的26-28kDa抗原纯度高,有较强的免疫活性,并证明该抗原组分在SIEA中含量丰富.纯化的SIEA26-28kDa可作为抗日本血吸虫生殖产卵和抗卵胚发育侯选抗原,用于抗病保护性免疫的研究.

微杆菌3-28对萘、菲、蒽、芘的降解

研究了以多环芳烃为唯一碳源富集培养的微杆菌3-28对不同多环芳烃化合物(Polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)及混合PAHs的降解能力,以及在无机基础培养基中生长时PAHs浓度与一些主要环境因子如pH值、盐度、温度对细菌降解PAHs的影响.结果表明,微杆菌3-28对萘、菲、蒽和芘均有较高的降解能力,112h后萘与菲完全降解,而蒽和芘28d的降解率分别为97.54%、90.2%.初始底物浓度会影响细菌生长速率,底物浓度过高不利于细菌生长.相同培养时间下多底物培养液中的菌群浓度明显高于单底物系统.微杆菌3-28能够在pH6.0～9.0、盐度10～30g/kg,温度40～55℃的环境下生存,并保持较高的降解能力.

乙肝后肝硬化中医证型与IL-6、IL-28B及TNF-α表达的相关性研究

目的探讨乙肝后肝硬化中医辨证分型与血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-28B(IL-28B)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的关系。方法选择112例乙肝后肝硬化患者为研究对象,对患者进行中医辨证分型,并采用ELISA法检测患者血清IL-6、IL-28B及TNF-α水平,分析各指标水平与乙肝后肝硬化中医证型的关系。结果乙肝后肝硬化中医证型以肝气郁结证所占比例最高(43.8%),其次依次为瘀血阻络证(18.8%)、湿热蕴结证(11.6%)、水湿内阻证(10.7%)、脾肾阳虚证(8.0%)、肝肾阴虚证(7.1%)。肝肾阴虚证患者血清IL-6、TNF-α水平明显高于其他证型(P均<0.05),脾肾阳虚证患者血清IL-28B水平明显高于其他证型(P均<0.05)。结论乙肝后肝硬化中医证型与血清IL-6、IL-28B、TNF-α之间存在一定联系,值得进一步研究。

miR-28-3p通过抑制BIN1表达促进三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞的恶性生物学行为

目的:探讨miR-28-3p在三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)组织和细胞系中的表达及其对MDA-MB-468细胞恶性生物学行为的影响。方法:收集2013年1月至2014年1月河北医科大学第四医院乳腺中心手术切除的、经病理证实的83例女性TNBC患者的癌组织和癌旁组织标本,以及TNBC细胞系MDA-MB-468、HCC-1937、MDA-MB-231、MDA-MB-436、MDA-MB-453和人正常乳腺上皮细胞MCF10A,用qPCR检测组织和细胞系中miR-28-3p的表达水平并分析其表达与患者临床病理特征的相关性。用miR-28-3p抑制剂转染MDA-MB-468细胞后,用CCK-8、流式细胞术、细胞划痕和Transwell实验分别检测miR-28-3p抑制剂对MDA-MB-468细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的影响,用Western blotting检测MDA-MB-468细胞中桥接整合因子1(bridging integrator-1,BIN1)蛋白的表达水平。通过生物信息学工具预测miR-28-3p的靶基因BIN1,用双荧光素酶报告基因实验验证miR-28-3p对BIN1的调控作用。结果:TNBC组织及细胞系中miR-28-3p表达水平显著高于癌旁组织及MCF10A细胞(均P<0.01);83例TNBC组织中共有56例(67.47%)高表达miR-28-3p,其高表达与患者的Ki-67表达水平、肿瘤大小和TNM分期密切相关(均P<0.05或P<0.01)。与miR-NC组比较,miR-28-3p抑制剂组MDA-MB-468细胞增殖、侵袭和迁移能力降低,凋亡率升高(均P<0.05或P<0.01)。双荧光素酶报告基因和实验证实BIN1是miR-28-3p的靶基因,miR-28-3p抑制剂可上调MDA-MB-468细胞中BIN1蛋白的表达(P<0.05)。结论:miR-28-3p在TNBC组织及细胞中呈高表达状态,mi R-28-3p抑制剂上调BIN1表达进而抑制MDA-MB-468细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进其凋亡。

胃癌MKN-28肿瘤细胞系SP细胞亚群初步分析

目的:分析胃癌细胞株MKN-28中是否包含肿瘤干细胞相关的SP(side population)细胞亚群.方法:采用免疫荧光方法检测干细胞标记ABcG2在胃癌细胞株MKN-28的表达;制备MKN-28细胞悬液,经Hoechst33342染色,流式细胞仪分析SP亚群.结果:ABCG2在胃癌细胞系MKN-28中有少量表达,ABCG2阳性细胞约占1.7%.SP亚群占MKN-28细胞的0.25%,维拉帕米阻断后减少为0.05%.结论:人胃癌细胞株MKN-28中存在SP细胞亚群,提示胃癌干细胞的存在.

不同施肥处理对新无性系076-28杂交杨苗木生长影响的研究

[目的]研究不同施肥处理对扦插苗生长的影响,为提高干旱区扦插苗的质量和加快苗木的培养提供参考。[方法]用完全随机设计方法对林区076-28杂交杨进行了复合肥5种不同施肥量的施肥试验。[结果]不同施肥量处理对076-28杂交杨1、2年生扦插苗的苗高和地径生长有显著的影响。在100g/株的施肥处理时,对苗木生长的影响最大,1、2年生扦插苗的苗高生长都达到最大值,与对照相比都达到极显著差异。[结论]复合肥对1、2年生扦插苗苗高生长都有显著影响,仅对2年生扦插苗地径生长影响显著。

重组鼠IL-28的原核表达、纯化及多克隆抗体的制备

目的：获取重组鼠IL-28（m IL-28）纯化蛋白,制备多克隆抗体。方法：用PCR技术扩增鼠IL-28成熟蛋白的编码序列,克隆入原核表达载体pET-30,构建融合表达载体pET-30 a-m IL-28,转化大肠埃希菌BL21（DE3）,以IPTG诱导表达IL-28融合蛋白,经镍柱亲和层析纯化,然后免疫6-8周龄鸡,制备多克隆抗体,采用ELISA检测抗体效价。结果：成功构建了表达载体pET-30 a-m IL-28,DNA序列测定结果与预期结果一致。在37℃培养条件下,IPTG诱导表达的IL-28融合蛋白进行SDS-PAGE电泳分析,发现其与融合蛋白的理论计算值一致,免疫鸡后收获抗血清,ELISA显示抗体效价具有高度特异性。结论：获得了重组鼠IL-28纯化蛋白,制备了鼠IL-28多克隆抗体,为进一步深入研究IL-28的生物活性及其应用打下基础。